Способ количественного определения дигидрокверцетина

 

Сущность изобретенияпробу обрабатывают в водно-ацетоновой среде металлическим магнием сначала в присутствии уксусной кислоты, затем добавляют соляную кислоту при объемном отношении к уксусной не менее 2:1 с последующим фотометрированием полученного раствора 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (51) 5

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4897718/04 (22) 29.12.90 (46) 07.10.92. Бюл. ¹ 37 (71) Центральный научно-исследовательский и проектный институт лесохимической промышленности (72) Т.П, Табачкова и Н.M. Бородина (56) 1. Экстрактивные вещества айаг!х

Danurtca. Количественное содержание кверцетина и дигидрокверцетина. Н.А.Тюкавкина, К.И.Лаптева, В,А. Ларина и др.—

Химия природных соединений, 1967, № 5, с.

289-301.

2. Запрометов М.Н. Основы биохимии фенольных соединений. М„Высшая школа, 1974, с. 216.

Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способам количественного определения дигидрокверцетина, и может быть использовано в производстве переработки сибирской лиственницы при анализе предгидролизата и продуктов его переработки, Известен способ определения дигидрокверцетина, основанный на образовании комплексного соединения с хлористым алюминием (1), и способ спектрофотометрического определения по максимуму собственного поглощения. Максимум поглощения комплекса,,образующегося по реакции с хлористым алюминием, лежит в

УФ-области (290 — 365 нм}.

Это создает определенные трудности в использовании этого способа для осуществления контроля за производством дигидрокверцетина и качеством полупродуктов и готовой продукции в заводских условиях, (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА (57) Сущность изобретения — пробу обрабатывают в водно-ацетоновой среда металлическим магнием сначала в присутствии уксусной кислоты, затем добавляют соляную кислоту при объемном отношении к уксусной не менее 2:1 с последующим фотометрированием полученного раствора, 4 табл. так как для выполнения анализа требуется специальная аппаратура, обеспечивающая анализ в УФ-области, Наиболее близким по технической сущности является способ определения дигидрокверцетина с uerioльзованйем" реакции восстановления металлическим магнием в присутствии соляной кислоты.в водной или спиртовой среде (2)(прототип).

Эту реакцию используют для качественного обнаружения флавоноидов. Для количественного определения дигидрокварцетина способ по реакции с металлическим магнием не применяется и в литературе не описан, При использовании этого способа в количественном анализе наблюдается низкая точность анализа, При анализе предгидролизата (и продуктов его переработки) по этому способу окраска получаемого соединения неустойчива. Это приводит к

1767401 неточным результатам определения дигидрокверцетина в анализируемых объектах.

Цель изобретения — повышение точности и чувствительности определения. Цель достигается тем, что в предлагаемом спосо- 5 бе определения дигидрокверцетина обработку анализируемой пробы металлическим магнием ведут в водно-ацетоновой среде, снабжала в присутствии уксусной кислоты при нагревании, затем добавляют соляную 10 кислоту в объемном соотношении к уксусной не менее 2:1.

Проведение реакции в две стадии (использованиее более слабой восстанавливающей системы для проведения реакции 15 восстановления металлическим магнием) обеспечивает стабильность окраски. Точ- ность анализа при этом значительно повышается.

При использовании водно-ацетоновой 20 среды в качестве растворителя при проведении реакции с металлическим магнием в

3 раза повышается чувствительность реакции.

Отличительными признаками предлага- 25 емого способа являются обработка пробы металлическим магнием сначала в присутствии уксусной кислоты, а затем — соляной, взятой в объемном отношении к уксусной не менее 2:1, и проведение реакции в водно- 30 ацетоновой среде.

Объемное соотношение соляной кислоты к уксусной ограничено тем, что при уменьшении соляной кислоты окрашенное соединение неустойчиво, окраска быстро 35 исчезает. Анализ становится невозможным, Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Определение дигидрокверцетина в предгидролизате. 40

Отбирают 1,0 см пробы, помещают в коуглодоннчю колбу вместимостью 50 — 100 см и разбавляют до 2,0 см дистиллированной водой. Затем приливают 2 см ацетона, добавляют 0,2 r Mg-стружки и колбу присо- 45 единяют к обратному холодильнику. Затем через холодильник приливают 2 см ледяной уксусной кислоты, колбу погружают в предварительно нагретую до 80 — 90 С водяную баню и оставляют на 30 мин. По исте- 50 чении указанного времени колбу отсоединяют от холодильника и к содержимому в колбе приливают4см концентрированной соляной кислоты (объемное соотношение HCI к уксусной 2:1). Раствор 55 перемешивают и количественно переносят в пробирку вместимостью 20 см, ополаскивая колбу 5 см ацетона и дистиллированной водой до метки. Раствор в пробирке перемешивают и фотометрируют на ФЭКе в кювете с толщиной поглощающего слоя I =

=1,0 см при длине волны il - =530 нм относительно контрольного опыта. Для приготовления контрольного опыта предгидролизат в количестве, соответствующем основному опыту, помещают в пробирку и разбавляют водой до метки без добавления реактивов, Массовое содержание дигидрокверцетина, определяемое по калибровочному графику, составило 1,156 мг/см .

П р и M е р 2. Определение дигидрокверцетина в фильтрате.

Отбирают 5 см пробы и помещают в з круглодонную колбу., Приливают 2 см ацетона, добавляют 0,2 г Mg-стружки, 1 см уксусной кислоты и далее поступают, как при анализе предгидролизата. После нагревания содержимого колбы на водяной бане с обратным холодильником в колбу приливают 5 см соляной кислоты (объемное отноз шение HCI к уксусной 5:1). После фотометрирования окрашенного соединения массовое содержание дигидрокверцетина составило 0,014 мг/см .

Пример 3. Определение дигидрокверцетина в товарном продукте., Готовят раствоо пробы в ацетоне с концентрацией1 мг/см . Для анализа отбирают

0,5 см приготовленного раствора, помещаз ют в круглодонную колбу и разбавляют до 2 см ацетоном, Затем приливают 2 см дисз тиллированной воды, добавляют 0,2 г Mgстружки, колбу присоединяют к обратному холодильнику и через холодильник приливают 2 см ледяной уксусной кислоты. После з нагревания к содержимому в колбе приливают 5 см концентрированной соляной кисз лоты (объемное отношение HCI:ÑÍçÑOOH =

=2,5:1), Далее поступают, как при анализе предгидролизата. Массовое содержание дигидрокверцетина в пробе 9,42 мг/см .

В табл, 1 приведены примеры, иллюстрирующие предлагаемый способ (примеры

1-5), а также примеры проведения анализа в условиях, выходящих за йределы условий предлагаемого способа (примеры 6-8), В примерах 1, 4, 5 приведены результаты анализов предгидролизатов одной и той же пробы, полученные при различных объемных соотношениях уксусной и соляной кислот.

Точность и правильность предлагаемого способа проверена методом добавок заданных масс. В табл. 2 приведены результаты определения заданных масс со статистическими ха ра ктеристи ками.

Результаты табл. 2 свидетельствуют о том, что предлагаемый способ обладает высокой точностью, так как воспроизводимость результатов высокая (относительное

1767401

Таблица 1

Таблица 2

Степень правильности, %

Относительное ста нда ртчое отклонение, S<

Относительная ощибка определео

Найдено

ДКВ в пробе, мг

Масса ДобавлеСреднее квадратическое отклонение единичного определения Sx

Гарантируемая точность.+- (e =0,95, n=4) ДКВ в исходной пробе,мг но ДКЯ, до масггы, мг

0,265

0,260

0,394

0,526

0,165

0,160

0,174

0,226

105,3

95,0

98,0

99,6

+5,3

-5,0

-2,0

-0,4

0,279

0,247

0,386

0,521

0,014

0,016

0,0052

0,012

0,051

0,064

0,013

0,022

0,020

0,025

0,008

0,019 стандартное отклонение изменяется от

0,012 до 0,064 в диапазоне 0,15-0,50 мг

ДКВ). Предлагаемый способ обладает и достаточной правильностью, о чем свидетельствует отсутствие систематической погрешности, невысокая ошибка определения (заданные массы находятся с ошибкой, не превышающей 5,0 Д) и высокий процент выявления, то есть процентная степень правильности (найденный результат, выраженный в процентах от истинного значения) в среднем 100%.

Для доказательства достоверности получаемых результатов предлагаемый способ был сравнен с методом УФ-спектрофотометрии (по максимуму собственного поглощения и по реакции с хлористым. алюминием). Результаты сравнительных анализов приведены в табл. 3.

В табл. 4 показаны результаты, иллюстрирующие повышение чувствительности предлагаемого способа в водно-ацетоновой среде по сравнению с известным в водноспиртовой среде.

Предлагаемый способ обладает высокой точностью, не требует сложной аппаратуры, легок в исполнении и может быть использован в производственных условиях

5 для аналитического контроля за содержанием дигидрокверцетина в производстве переработки сибирской лиственницы при анализе предгидролизата и продуктов его переработки.

Формула изобретения

Способ количественного определения дигидрокверцетина путем обработки пробы металлическим магнием в присутствии

15 соляной кислоты в среде растворителя с последующим фотометрированием окрашенного соединения, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и чувствительности определения, обработку

20 металлическим магнием ведут в водно-ацетоновой среде сначала в присутствии уксусной кислоты при нагревании, затем добавляют соляную кислоту в объемном соотношении с уксусной не менее 2:1.

/) 5

1767401

Продолжение табл. 2

Таблица 3

Таблица 4

Составитель Т, Табачкова

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор И. Шмакова

Редактор Н. Хорина

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 3544 Тираж Подписное

BÍÈÈÏÈ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5