Транспортная среда для возбудителя туберкулеза

 

1 !

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР)

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН

K АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

I»

1 (21) 48?0743/13 (22) 20.1 090 (46) 30.12.(И Бюл. Йа 48-47 (71) Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза (72) Сафонова С.Г„Аникин ВА; Голышевская В.И. (54) ТРАНСПОРТНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУБЕРКУЛЕЗА (57) Использование: медицинская микробиология.

Сущность изобретения: питательная среда используется с целью сохранения и потенциирования (ю1 Я((и) 1839187 А1 (5Ц 5 С 12N1 20 С 12 1 04 жизнеспособности возбудителя туберкулеза при длительном хранении и транспортировке диагностического материала. Среда дополнительно содержит калий янтарнокиспый, нукпеиновую кислоту, калий гетероауксин при следую@ем количественном соотношении компонентов, г/и: натрий фосфорнокислый трехзамещенный 60,0 — 150,0; калий янтарнокислый 3,0 — 120; нукпеиновая кислота

0,002 — 0,02; калий гетероауксин 0,0001 — 0,001, вода до 1л.

1839187

Изобретение относится к медицинской микробиологии.

Преимущественная область использования — бактериологическая диагностика туберкулеза людей и сельскохозяйственных. животных, При проведении бактериологических исследований на туберкулез в условиях жаркого климата, при длительном хранении диагностического материала перед посевом и перевозке его на большие расстояния необходимо использовать специальные приемы для поддержания жизне-. способности возбудителя и угнетения нетуберкулезной микрофлоры, Характеристика аналогов. Известны среда, сконструированные целенаправленно для поддержания жизнеспособности болезнетворных микроорганизмов при необходимости хранения и транспортировки диагностического материала. Такие среды, именуемые транспортными, разработаны для анаэробов, нейссерий, псевдомонад и т.д.

Транспортные среды для поддержания жизнеспособности возбудителя туберкулеза до настоящего времени не описаны.

Известны химические соединения, используемые для консервации диагностического материала при культуральных исследованиях на туберкулез, К ним относятся глицерин, борная кислота, тринатрийфосфат. Наиболее эффективным консервирующим действием, а также способностью ингибировать нетуберкулезную микрофлору диагностического материала обладает тринатрийфосфат, Кроме того, обладая детергентными свойствами, тринатрийфосфат хорошо гомогенизирует диагностический материал, Однако раствор тринатрийфосфата, согласно методическим рекомендациям, добавляют к диагностическому материалу на срок, не превышающий 24 ч. Кроме того, установлено, что даже 24-часовая экспозиция в 10 -ном растворе тринатрийфосфата взвеси лабораторного штамма НзтВЧ приводит к гибели 1/3 микробактериальной популяции. Поэтому 10 -ный раствор тринатрийфосфата нельзя использовать для длительного хранения и транспортировки диагностического материала.

Цель изобретения — сохранение и потенцирование жизнеспособности возбудителя при длительном хранении и транспортировке диагностического материала.

Сущность изобретения и его отличительные признаки: транспортная среда представляет собой комплекс биологически активных соединений-протекторов, сбалан35 сированных в строго определенных соотношениях с раствором детергента и между собой. В качестве протекторов используются калий янтарнокислый, нуклеиновая кислота, 5 калий гетероауксин, Поставленная цель достигается тем, что среда дополнительно содержит следующие компоненты при следующих соотношениях, г/л.

Натрий фосфорнокислый трехэамещенный 60,0-150,0

Калий янтарнокислый 3,0-12,0

Нуклеиновая кислота 0,002-0,02

Калий гетероауксин 0,0001-0,001

Вода До1л

Компоненты в указанном порядке растворить в воде, среду разлить в колбы и автоклавировать при 1 атм 30 мин, Раствор хранить в холодильнике до 1 года. Транспортную среду добавить к диагностическому материалу в соотношении 2;1, флаконы хранить в холодильнике (или при комнатной температуре) до 15 дней.

При доставке материала в лабораторию его не надо дополнительно деконтаминировать. Материал центрифугировать, осадок засеять на питательные среды.

Пример 1. Компоненты соединить в следующем порядке, г/л;

Натрий фосфорнокислый трехзамещенный 60,0

Калий янтарнокислый 3,0

Нуклеиновая кислота 0,002

Калий гетероауксин 0,0001

Вода До1л

Автоклавировать при 1 атм 30 мин, Хранить в холодильнике при 2 — 5 С до 1 года, Перед посевом диагностический материал (мокроту, мочу, экссудат и т,д.) залить двой40 ным количеством (по объему) транспортной среды, Флаконы с исследуемым материалом, залитым транспортной средой, экспонировать при комнатной температуре или в холодильнике при 2-5 С до 15 дней. Непос45 редственно перед посевом дополнительную деконтаминацию не проводить. Материал центрифугировать при 2000 об/мин в течение 20 мин. Надосадочную жидкость слить.

Осадок засеять по 0,2 мл на среды культивирования: Левенштейна-Иенсена. Финна.-2, Аникина-6, Мордовского. Засеянные пробирки инкубировать при 37 «+0,5 С до появления видимого роста колоний. При отсутствии роста негативный ответ бактери55 ологического исследования выдать только по истечении 12 недель инкубации, Пример 2. Компоненты соединить в следующем порядке, г/л:

Натрий фосфорнокислый трехзамещенный

1839187

60,0 — 150,0

3,0- 12,0

0,002 - 0,02

0,0001 - 0,001

До1л

Составитель О. Шанова

Техред М.Моргентал Корректор: С. Юско

Тираж Подписное

НПО "Поиск" Роспатента

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Редактор

Заказ 3404

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Уж ород, ул.Гагарина, 101

Калий янтарнокислый 6,0

Нуклеиновая кислота 0,006

Калий гетероауксин 0,0006

Вода До1л

Описание приготовления и использования 5 см, в примере 1.

Пример 3, Компоненты соединить в следующем порядке, г/л:

Натрий фосфорнокислый трехзамещенный 150,0 10

Калий янтарнокислый 12,0

Нуклеиновая кислота 0,02

Калий гетероауксин 0,001

Вода До1л

Описание приготовления и использования 15 см. в примере 1, Предложенная среда активизирует метаболизм микобактерий туберкулеза даже

Формула изобретения

20, ТРАНСПОРТНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУБЕРКУЛЕЗА, содержащая натрий фосфорнокислый трехзамещенный и воду, отличающаяся тем, что, с целью по- 25 вышения жизнеспособности возбудителя при длительном хранении, она дополнительно содержит калий янтарнокислый, нуклеиновую кислоту, калий гетероауксин после 24-часовой экспозиции. Экспонирование в предложенной среде диагностического материала в сроки до 15 дней существенно повышает высеваемость микобактерий туберкулеза в сравнении с контролем.

Применение транспортной среды сокращает затраты времени на одну манипуляцию посева более чем вдвое, Большие преимущества дает применение предложенной среды с использованием автобаклаборатории в условиях Средней Азии и

Казахстана. При этом время пребывания в каждом населенном пункте сокращается вдвое, количество обработанных диагностических образцов увеличивается в 5-6 раз. (56) Циммер Б,Л. — Лабораторное дело, 1984, с.249 — 250. при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:

Натрий фосфорнокислый трехзамещенный

Калий янтарнокислый

Нуклеиновая кислота

Калий гетероауксин

Вода