Способ жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента и устройство для его осуществления



Способ жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента и устройство для его осуществления

 


Владельцы патента RU 2483303:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Ордена Трудового Красного Знамени Институт нефтехимического синтеза им. А.В.Топчиева Российской академии наук (ИНХС РАН) (RU)

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано при анализе смесей органических и неорганических веществ в различных научных и практических областях медицины, биологии, химии, пищевой промышленности, охране окружающей среды и других отраслях народного хозяйства для анализа смесей органических и неорганических веществ методом тонкослойной хроматографии. Предложен способ, при котором разделение пробы на отдельные компоненты происходит в капиллярной колонке с сорбентом под действием восходящего потока жидкой подвижной фазы, расход которой регулируют побудителем расхода с вакуумным насосом на выходе колонки, а исследуемую пробу дозируют в поток элюента на входе в колонку. Предложено также устройство, содержащее капиллярную колонку, заполненную сорбентом, и дозатор для ввода пробы в поток элюента на входе в колонку. Техническим результатом изобретения является повышение эффективности разделения, точности результатов анализа и уменьшение времени анализа. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл.

 

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано при анализе смесей органических и неорганических веществ методом тонкослойной хроматографии в различных научных и практических областях медицины, биологии, химии, пищевой промышленности, охране окружающей среды и других отраслях народного хозяйства.

Известны различные способы и устройства для анализа химических веществ методом тонкослойной хроматографии, включающие нанесение анализируемой пробы на тонкослойные пластины, содержащие плоский (планарный) слой сорбента, которые затем устанавливают в специальные проявительные камеры для контакта с жидкой подвижной фазой, за счет восходящего потока которой по слою сорбента происходит разделение исходной пробы на отдельные зоны, а количественную интерпретацию полученных хроматографических данных на слое сорбента осуществляют с помощью УФ сканирующих детекторов (денситометров) (Красиков В.Д. Основы планарной хроматографии. - СПб.: Химиздат, 2005. - 232 с.).

Недостатками известных способов и устройств для их осуществления являются низкая воспроизводимость и достоверность результатов качественного и количественного анализа, связанная с влиянием степени насыщения хроматографической камеры парами подвижной фазой и влиянием параметров окружающей среды, включая влажность воздуха и наличие в нем примесей, способных изменять сорбционные характеристики сорбентов.

Известен также способ капиллярной жидкостной хроматографии с использованием видеоденстометрии (Берёзкин В.Г., Онучак Л.А., Евтюгина Е.Н. Капиллярный вариант хроматографии М.С. Цвета с использованием видеоденстометрии как метода детектирования // Докл. АН., 2008. Т.421 №2 - C.1-3).

Однако в известном способе отсутствует возможность как дозирования исследуемой пробы непосредственно в поток элюента на входе в капиллярную колонку, так и изменения скорости хроматографического разделения компонентов пробы на слое сорбента.

Наиболее близким к заявленному изобретению по совокупности существенных признаков и достигаемому результату является способ хроматографического разделения смесей веществ в закрытом тонком слое сорбента, состоящий в нанесении разделяемых образцов на свободный от полимерного покрытия сорбционный слой, подаче на сорбционный слой элюента с последующим продвижением фронта элюента вдоль сорбционного слоя, причем после достижения фронтом элюента слоя сорбента, находящегося под полимерным покрытием, обеспечивают понижение давления в сорбционном слое перед фронтом элюента вплоть до момента достижения фронтом длины пробега, необходимой для разделения анализируемой смеси веществ.

Наиболее близким к заявленному изобретению по совокупности существенных признаков и достигаемому результату является устройство для хроматографического разделения смесей веществ в закрытом тонком слое сорбента, содержащее тонкослойную хроматографическую пластину с закрытым тонким слоем сорбента, часть сорбционного слоя, свободную от полимерного покрытия, емкость с элюентом, из которой подают элюент на сорбционный слой, а также побудитель расхода элюента с вакуумным насосом (SU 1457592, G01N 30/90, 27.02.95).

Однако в известном способе и устройстве для его осуществления не обеспечивается достаточная эффективность разделения хроматографических зон на слое сорбента и точность результатов анализа.

Задачей, на решение которой направлено настоящее изобретение, является повышение эффективности разделения и точности результатов измерения, а также уменьшение времени анализа.

Указанная задача решается за счет того, что в способе жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента, который включает разделение пробы на хроматографические зоны отдельных компонентов в всходящем потоке жидкого элюента под действием капиллярных сил, изменение скорости движения элюента по слою сорбента путем понижения давления в сорбционном слое перед фронтом элюента и количественное определение содержания разделенных на сорбенте компонентов с использованием видеоденситометрического детектора хроматографических зон на слое сорбента в УФ или видимом свете, хроматографическое разделение проводят на сорбенте, помещенном в капиллярную колонку, а исследуемую пробу дозируют в поток элюента на входе в колонку.

Эта задача решается также за счет того, что в устройстве для жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента, содержащем емкость с жидким элюентом, побудитель расхода элюента с вакуумным насосом и видеоденситометрический детектор хромотографических зон компонентов, разделенных на слое сорбента в УФ или видимом свете, причем устройство содержит специальный дозатор для ввода пробы в поток элюента на входе в колонку, а для герметизации сорбента используют капиллярную колонку, выполненную, в виде трубки с внутренним диаметром 0,05-2,0 мм из материала, практически не поглощающего УФ-излучение и видимый свет, например плавленого SiO2.

При решении поставленной задачи создается технический результат, заключающийся в уменьшении диффузионного размытия хроматографических зон сорбатов на слое сорбента, повышении точности (правильности и прецизионности) измерения и уменьшении времени анализа.

Этот результат достигается за счет проведения хроматографического разделения на сорбенте, помещенном в капиллярную колонку, выполненную из плавленого кварца (SiO2) или стекла, что обеспечивает получение как визуальной хроматограммы на слое сорбента, так и распечатанной с помощью сканирующего видеоденситометрического детектора. При этом размывание хроматографических зон сорбатов происходит только в одном направлении (по направлению движения жидкого элюента в капиллярной колонке), что значительно увеличивает эффективность хроматографического разделения и точность результатов анализа.

Уменьшение времени анализа достигается за счет использования побудителя расхода элюента в виде вакуумного насоса на выходе капиллярной колонки.

Кроме того, при решении поставленной задачи повышается прецизионность измерения (сходимость в условиях повторяемости) за счет уменьшения влияния состава газовой фазы на хромотографические характеристики сорбента (влажность, содержание примесей и др.) путем использования вакуумного побудителя расхода элюента и дозирования исследуемой пробы в поток жидкого элюента на входе в колонку.

Это позволяет сделать вывод, что заявляемые изобретения связаны между собой единым изобретательским смыслом.

Пример конкретного выполнения способа и устройство для его осуществления

На фиг.1 схематически изображено устройство для жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента.

Устройство содержит капиллярную колонку с сорбентом 1, емкость 2 с жидким элюентом, вакуумный насос (побудитель расхода элюента) 3 на выходе колонки, дозатор 4 для ввода исследуемой пробы в поток элюента на входе в колонку.

Предлагаемое устройство работает следующим образом.

Дозатор 4 погружают в емкость 2 с жидким элюентом. После того как фронт элюента под действием капиллярных сил достигнет слоя сорбента на входе колонки, микрошприцем вводят в дозатор 4 исследуемую пробу, которая хроматографируется в потоке элюента при воздействии вакуумного насоса 3, создающего разряжение перед движущимся фронтом элюента.

После завершения процесса хроматографирования (элюент поднялся по слою сорбента на требуемую высоту) капиллярную колонку 1 переносят в видеоденситометрический детектор для получения хроматограммы с пиками анализируемых компонентов для оценки эффективности и точности измерения хроматографических величин.

Экспериментальная оценка выполнения предлагаемого и известного способов жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента проводилась на сорбенте Sorbfil ПТСХ-АФ-А-УФ с диаметром зерна dp=5-7 мкм.

Объектами исследования были красители (бриллиантовый зеленый, родамин С, эритрозин) и витамин В12. Для разделения красителей использовали жидкий элюент ацетонитрил и хлороформ в соотношении 1:1. Для хроматографирования водорастворимых витаминов в качестве элюента использовали ацетонитрил - 1%-ный водный раствор H2SO4 состава 4:1 по объему.

Распечатку хроматограммы на слое сорбента получали с использованием видеоденситометрического детектора «Сорбфил» производства ЗАО «Сорбполимер», г.Краснодар.

Из полученных хроматограмм (выборка из n≥5 анализов) рассчитывали следующие хроматографические характеристики сорбатов:

1. Число теоретических тарелок, N

где li - расстояние, пройденное сорбатом от начала анализа до максимума пика, - ширина хроматографического пика у основания.

2. Фактор задержки, Rf

где L - расстояние, пройденное элюентом от начала анализа.

3. Разрешение двух пиков 1 и 2, Rs

4. Концентрацию анализируемых веществ, измеренную методом внутренней нормализации,

где - единичное измерение концентрации i-го компонента в выборке;

N - общее число пиков на хроматограмме.

5. Правильность измерения, δ

где Ci(ист) - истинная концентрация i-го компонента в градуировочной смеси; - измеренная концентрация.

6. Прецизионность измерения в виде относительной случайной составляющей погрешности измерения, Sr

Хроматографическое разделение известным способом проводили на ТСХ пластине Sorbfil ПТСХ-АФ-А-УФ с диаметром зерна сорбента dp=5-7 мкм. Анализируемую пробу объемом около 2 мкл наносили на свободный от полимерного покрытия сорбционный слой. Затем ТСХ пластину устанавливали в хроматографическую камеру с элюентом. После того как фронт элюента достигает слоя до сорбента, находящегося под полимерным покрытием, которое герметизирует тонкий слой сорбента, включают побудитель расхода с вакуумным насосом. Элюент принудительно под некоторым разряжением движется по слою сорбента и происходит разделение смеси на отдельные хроматографические зоны на слое сорбента. Затем ТСХ пластину помещают в денситометр «Сорбфил» и получают распечатанную хроматограмму.

Хроматографическое разделение предлагаемым способом проводили на сорбенте, помещенном в кварцевый капилляр с внутренним с внутренним диаметром dc=0,53 мм. Длина капилляра не превышала 60 мм.

Анализируемую пробу объемом около 2 мкл дозировали в поток жидкого элюента на входе в колонку.

Результаты экспериментов представлены в таблицах 1 и 2 «Сравнительные данные экспериментальной проверки известного и предлагаемого способов».

Таблица 1
Сравнительные данные экспериментальной проверки известного и предлагаемого способов
№ п/п Разделяемые аналиты Известный способ Предлагаемый способ
Rs Rf N Rs Rf N
1 Бриллиантовый зеленый Rs(1-2) 4,1 0,08±0,01 225 Rs(1-2) 3,8 0,08±0,03 108
2 Родамин С 0,42±0,02 2100 0,48±0,03 1005
Rs(2-3) 7,4 Rs(2-3) 6,1
3 Эритрозин 0,95±0,01 3053 0,94±0,03 1461
Таблица 2
Сравнительные данные экспериментальной проверки известного и предлагаемого способов
№ п/п Сорбаты Ci(ист) мг/мл Известный способ Предлагаемый способ
мг/мл δ, % S2, % Время анализа, мин мг/мл δ, % S2, % Время анализа, мин
1 Родамин С 6,0 6,2 3,3 3,4 15,2 6 6,1 1,7 1,8 10,17
2 Витамин B12 200 185 7,5 3,5 5,96 193 3,5 3,2 3,97

Как видно из приведенных в таблицах данных в предлагаемом способе по сравнению с известным значительно увеличивается эффективность разделения. Например, для красителей число теоретических тарелок N увеличивается почти в 2 раза. Точность предлагаемого способа выше известного. Так, правильность измерения концентрации родамина С и витамина B12 увеличилась в 2 раза, а прецизионность измерения родамина С улучшилась в 1,8 раза.

Использование предлагаемого способа жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента и устройства для его осуществления позволяет:

1. Проводить определение действующих веществ в готовых лекарственных препаратах вследствие большей воспроизводимости фактора задержки Rf, экспрессности, миниатюризации хроматографической системы и простоты выполнения эксперемента.

2. Упростить эксплуатацию хроматографического устройства за счет использования дозирования пробы в поток элюента на входе в колонку.

3. Значительно уменьшить количество жидкого элюента, необходимого для анализа.

4. Улучшить метрологические характеристики хроматографического анализа.

1. Способ жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента, включающий разделение пробы на хроматографические зоны отдельных компонентов в восходящем потоке жидкого элюента под действием капиллярных сил, изменение скорости движения элюента путем понижения давления в сорбционном слое перед фронтом элюента и количественное определение содержания разделенных на сорбенте компонентов с использованием видеоденситометрического детектора хроматографических зон на слое сорбента в УФ или видимом свете, отличающийся тем, что хроматографическое разделение проводят на сорбенте, помещенном в капиллярную колонку, а исследуемую пробу наносят на сорбент путем дозирования в поток элюента на входе в колонку.

2. Устройство для жидкостной хроматографии в закрытом тонком слое сорбента, содержащее емкость с жидким элюентом, побудитель расхода элюента с вакуумным насосом и видеоденситометрический детектор хроматографических зон компонентов на слое сорбента в УФ или видимом свете, отличающееся тем, что устройство содержит дозатор для введения исследуемой пробы в поток элюента на входе в колонку, а для герметизации сорбента используют капиллярную колонку, выполненную в виде трубки с внутренним диаметром 0,05-2,0 мм из материала, практически не поглощающего УФ-излучение, например плавленый SiO2.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области анализа паров токсичных химикатов, а именно к области обеспечения безопасности персонала химически опасных объектов, личного состава Министерства Обороны, МЧС, МВД, действующего в зоне химического заражения, а также передовых и аварийно-спасательных отрядов при ликвидации последствий чрезвычайных ситуаций на химически опасных объектах.

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения химических соединений газохроматографическим методом, и может быть использовано в различных областях химии, фармации, медицины, контроле окружающей среды и технологических процессах в нефтегазовой, химической и пищевой промышленности и так далее.
Изобретение относится к биохимии и клинической лабораторной диагностике. .

Изобретение относится к газохроматографическим методам анализа и может быть использовано в нефтяной и газовой отраслях промышленности для количественного определения в пластовых водах различных водорастворимых индикаторов, например изопропанола.

Изобретение относится к инструментальной аналитической химии, в частности к определению стабильных изотопов в пищевых продуктах. .

Изобретение относится к области приборостроения, в частности к приборам для разделения и анализа смесей веществ методом хроматографии. .

Изобретение относится к способу оценки чистоты воздуха гермокабин летательных аппаратов, поступающего от компрессоров газотурбинных двигателей, на содержание продуктов разложения смазочных масел, включающий проведение параллельных отборов проб воздуха гермокабины путем его прокачки через патроны с сорбентом с последующим наземным газохроматографическим анализом на колонках разной селективности и полярности для идентификации компонентов-примесей.

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений (концентрирование и определение) и может быть использовано для санитарно-эпидемиологического контроля питьевых вод, воды объектов, имеющих рыбохозяйственное значение, а также степени очистки сточных вод различных химических производств.

Изобретение относится к области экологической и аналитической химии, в частности к способу определения загрязненности воды дизельным топливом

Изобретение относится к ветеринарной токсикологии и санитарии, а именно к определению остаточных количеств инсектицида в органах и тканях животных при подозрении на отравление имидаклопридом, а также в продуктах животного происхождения

Изобретение относится к атомной энергетике, а именно к тепловыделяющим элементам (ТВЭЛ) ядерных реакторов

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики патологий, связанных с заболеваниями коры надпочечников

Изобретение относится к химическим методам анализа жидкостей с использованием автоанализаторов проточного или проточно-дискретного типов, или отдельных спектрофотометров, имеющих гидравлическую систему с перистальтическим насосом, эластичными трубками и проточной кюветой

Изобретение относится к области газовой хроматографии, а именно к прокачке поверочных газовых смесей (ПГС) через какие-либо изделия, например концентраторы, используемые в дальнейшем в лабораторных комплексах для отбора и газохроматографического анализа проб воздуха из компрессора газотурбинного авиационного двигателя при его стендовых испытаниях на наличие и содержание вредных примесей
Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано для одновременного определения содержания диэтиленгликоля и метанола в природных, поверхностных, подземных, сточных и технологических водах

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть применено для детектирования паров фенола в воздушной рабочей зоне

Изобретение относится к способу исследования, обеспечивающего оценку части природного газа, добываемого из плотных газовых коллекторов, с помощью анализа изотопного состава извлеченного газа и корреляции этого изотопного состава с коэффициентом газоотдачи. Технический результат направлен на получение уточненной оценки коэффициента газоотдачи, которая основана на калиброванном соотношении между изменениями изотопного состава одного или более компонентов добытого газа и коэффициентом газоотдачи для объема, дренированного продуктивной газовой скважиной. Способ оценки коэффициента газоотдачи для объема, дренированного по меньшей мере одной продуктивной газовой скважиной, включает: калибровку изменений изотопного состава по меньшей мере одного компонента газа, добытого из газовой скважины, с ростом коэффициента газоотдачи. Взятие пробы газа, добытого из продуктивной скважины, и анализ пробы для получения изотопного состава компонента добытого газа. Использование калибровки, полученной ранее, и определенного изотопного состава для оценки коэффициента газоотдачи для объема, дренированного газовой скважиной. Использование оценки коэффициента газоотдачи и совокупного объема газа, добытого из газовой скважины, для определения объема, дренированного газовой скважиной. 8 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано при анализе органических и неорганических веществ методом тонкослойной хроматографии в различных научных и практических областях медицины, биологии, химии, пищевой и парфюмерной промышленности, охране окружающей среды и других отраслях народного хозяйства. Способ, при котором разделение пробы на отдельные компоненты происходит в капиллярной колонке с сорбентом под действием восходящего потока жидкого элюента, расход которого программируют путем экспоненциального повышения давления на входе колонки. Устройство содержит кварцевую капиллярную колонку с сорбентом, герметичную емкость с жидкой подвижной фазой, видеоденситометрический детектор, блок подготовки инертного газа, регулируемое пневмосопротивление и полую емкость, соединенную с газовым пространством герметичной емкости с жидким элюентом. Техническим результатом изобретения является стабилизация линейной скорости подъема жидкой подвижной фазы по слою сорбента и уменьшение времени анализа. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл.
Наверх