Способ определения кодеина


 


Владельцы патента RU 2523408:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский федеральный университет" (СФУ) (RU)
Краевое государственное бюджетное учреждение здравоохранения "Красноярское краевое бюро судебно-медицинской экспертизы" (ККБСМЭ) (RU)

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано для обнаружения и количественного определения кодеина в различных объектах, в частности в лекарственных препаратах. Способ определения кодеина включает разделение компонентов смеси методом тонкослойной хроматографии с выделением хроматографической зоны кодеина реактивом Драгендорфа, при этом количественное определение кодеина проводят в области его проявленной зоны непосредственно в твердой фазе путем измерения коэффициента диффузного отражения при длине волны 520 нм. Изобретение обеспечивает сокращение времени обнаружения и количественного определения кодеина, уменьшение трудоемкости процесса, уменьшение вероятности потерь целевого компонента. 2 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано для обнаружения и количественного определения кодеина в различных объектах, в частности в лекарственных препаратах.

В настоящее время известны и широко используются спектрофотометрические методы для определения кодеина в лекарственных препаратах. Большинство этих методов предполагает предварительное разделение компонентов смеси экстракцией или тонкослойной хроматографией (ТСХ). Все это затрудняет проведение анализа, усложняет и удлиняет его. Кроме того, проведение экстракции часто связано с использованием токсичных органических растворителей.

Так, известен способ экстракционно-фотометрического определения 0,01 - 0,1 мг/мл кодеина [Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. - Киев: Высшая школа, 1989. 447 с.]. Способ основан на реакции кодеина с тропеолином 00, продуктом которой является окрашенный ионный ассоциат, экстрагирующийся хлороформом.

К недостаткам этого способа можно отнести необходимость проведения многократной экстракции, а также использование токсичных органических растворителей (хлороформа и метилового спирта).

Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является способ спектрофотометрического определения не более 1 мг/мл кодеина [Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. - Киев: Высшая школа, 1989. 447 с.], заключающийся в предварительном разделении компонентов смеси методом ТСХ, элюировании с хроматографической пластины зоны, содержащей кодеин, фильтровании полученного раствора и последующем измерении его оптической плотности при длине волны 285 нм.

К недостаткам данного способа можно отнести затраты времени, связанные со стадиями элюирования и фильтрования, дополнительный расход реагентов и материалов, а также потери целевого компонента.

Техническим результатом, на достижение которого направлено предлагаемое изобретение, является сокращение времени обнаружения и количественного определения кодеина, уменьшение трудоемкости процесса, уменьшение вероятности потерь целевого компонента.

Технический результат достигается тем, что в способе определения кодеина, включающем разделение компонентов смеси методом тонкослойной хроматографии с выделением хроматографической зоны кодеина реактивом Драгендорфа, новым является то, что количественное определение кодеина проводят в области его проявленной зоны непосредственно в твердой фазе путем измерения коэффициента диффузного отражения при длине волны 520 нм.

Указанные отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «новизна». Признаки, отличающие заявляемый способ от прототипа, не выявлены в других технических решениях при изучении данной и смежных областей химии и, следовательно, обеспечивают заявляемому решению соответствие критерию «изобретательный уровень».

Сущность способа заключается в том, что проводят предварительное разделение компонентов смеси методом тонкослойной хроматографии с выделением хроматографической зоны кодеина с характерной для этого алкалоида оранжевой окраской (Rf=0,23±0,02). Далее измеряют коэффициент диффузного отражения (R) в области проявленной зоны кодеина непосредственно в твердой фазе при длине волны 520 нм на спектрофотометре «Пульсар» по отношению к образцу сравнения - фон пластинки.

Коэффициент диффузного отражения пересчитывают в функцию Гуревича-Кубелки-Мунка по уравнению:

ΔF(R)=[(1-R)2/2R]-[(1-R0)2/2R0],

где R и R0 - коэффициенты диффузного отражения прореагировавшего образца и фона соответственно.

Концентрацию кодеина определяют по градуировочному графику, построенному в координатах ΔF(R)-С, где С - концентрация кодеина в растворе (мкг/мл).

Заявляемый способ осуществляется следующим образом.

Извлечение кодеина из лекарственного препарата проводят по известной методике (Швайкова М.Д. Токсикологическая химия. - М: Медицина, 1975, 376 с.). Далее сухой остаток растворяют в 20 мл этанола. Полученный раствор 0,2 мл наносят на линию старта хроматографической пластинки. Правее на расстоянии 2 см на линию старта наносят каплю раствора «свидетеля» (стандартный раствор кодеина в этаноле, 1000 мкг/мл). Нанесенные на пластинку пробы растворов подсушивают на воздухе, а затем пластинку переносят в камеру для хроматографирования, насыщенную парами растворителей (ацетон-хлороформ-аммиак в соотношении 24:12:1). После продвижения фронта растворов на 10 см выше линии старта пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и опрыскивают реактивом Драгендорфа (кислотный раствор иодвисмутата калия). В области проявленной зоны кодеина непосредственно в твердой фазе измеряют коэффициент диффузного отражения (R) при длине волны 520 нм, пересчитывают в функцию Гуревича-Кубелки-Мунка, количество кодеина находят по градуировочному графику.

Для построения градуировочного графика из исходного раствора кодеина в этаноле (1000 мкг/мл) путем разбавления готовят рабочие растворы следующих концентраций: 25, 50, 100, 250, 500, 750 мкг/мл. На хроматографические пластинки наносят по 0,2 мл полученных рабочих растворов, повторяют вышеописанные операции ТСХ и измеряют соответствующие значения R и R0. Предел обнаружения кодеина, рассчитанный по 3S-критерию, составил 9 мкг/мл (n=5, Р=0,95). Градуировочный график линеен до 1000 мкг кодеина на 1 мл раствора.

Оценку правильности результатов определения кодеина проводят методом «введено-найдено». С этой целью готовят модельные растворы кодеина с концентрациями 40, 200, 400, 600, 800 мкг/мл растворением точных навесок кодеина фосфата в этаноле.

Результаты определения кодеина в модельных растворах приведены в табл.1, в лекарственных препаратах в табл.1, где С - концентрация кодеина (мкг/мл), S - стандартное отклонение, Sr - относительное стандартное отклонение, δ - доверительный интервал.

Таблица 1 - Результаты количественного определения кодеина в модельных растворах (n=5, Р=0,95)
Концентрация кодеина (С±δ), мкг/мл S Sr
Введено Найдено
40 42±3 2,5 0,06
200 193±12 9,7 0,05
400 412±20 16,5 0,04
600 590±22 17,7 0,03
800 808±20 16,2 0,02

Относительное стандартное отклонение в пределах линейного участка градуировочного графика не превышает 0,06 (6%).

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Обнаружение и количественное определение кодеина в лекарственном препарате «Пенталгин Плюс» (ОАО «Фармстандарт-Лексредства», г.Курск, Россия).

Таблетку лекарственного препарата тщательно измельчают в фарфоровой чашке, переносят в делительную воронку на 100 мл, растворяют в 10 мл 0,01н НСl и экстрагируют диэтиловым эфиром трижды порциями по 10, 5, 5 мл в течение 15 мин. Экстракт, так называемое «кислое извлечение» из лекарственного препарата, содержит фенобарбитал, напроксен, а также часть кофеина.

Водный остаток подщелачивают 25%-ным раствором аммиака до рН 10 и экстрагируют 5 мл хлороформа в течение 15 мин. Органическую фазу фильтруют через бумажные фильтры (красная лента) и выпаривают досуха при комнатной температуре. Экстракт, так называемое «щелочное извлечение», содержит кодеин, парацетамол, метамизол натрия, а также оставшуюся часть кофеина.

«Щелочное извлечение» из лекарственного препарата используют для количественного определения содержания кодеина. Для этого сухой остаток растворяют в 20 мл этанола. Полученный раствор 0,2 мл наносят на линию старта хроматографической пластинки. Правее на расстоянии 2 см на линию старта наносят каплю раствора «свидетеля» (стандартный раствор кодеина в этаноле, 1000 мкг/мл). Нанесенные на пластинку пробы растворов подсушивают на воздухе, а затем пластинку переносят в камеру для хроматографирования, насыщенную парами растворителей (ацетон-хлороформ-аммиак в соотношении 24:12:1). После продвижения фронта растворов на 10 см выше линии старта пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и опрыскивают реактивом Драгендорфа (кислотный раствор иодвисмутата калия). В области проявленной зоны кодеина непосредственно в твердой фазе измеряют коэффициент диффузного отражения (R) при длине волны 520 нм, пересчитывают в функцию Гуревича - Кубелки - Мунка, количество кодеина находят по градуировочному графику.

Пример 2. Обнаружение и количественное определение кодеина в лекарственном препарате «Пенталгин Н» (ОАО «Фармстандарт-Лексредства», г.Курск, Россия) проводится по описанному в примере 1 способу.

Пример 3. Обнаружение и количественное определение кодеина в лекарственном препарате «Седальгин-Нео» («Балканфарма-Дупница АД», г.Дупница, Болгария) проводится по описанному в примере 1 способу.

Результаты количественного определения кодеина в лекарственных препаратах приведены в табл.2.

Таблица 2 - Результаты количественного определения кодеина* в лекарственных препаратах (n=5, P=0,95)
Наименование препарата Концентрация кодеина (С±δ), мкг/мл S Sr
Расчетные рецептурные данные Найдено
Пенталгин Плюс 400 386±24 19,3 0,05
Пенталгин Н 400 417±26 20,9 0,05
Седальгин-Нео 500 512±25 20,5 0,04

∗в пересчете на кодеина фосфат

Приведенные примеры подтверждают пригодность предлагаемого способа количественного определения кодеина в интервале концентраций до 1000 мкг кодеина на 1 мл раствора. Предел обнаружения по предлагаемому способу составляет 9 мкг/мл.

Таким образом, в результате использования заявляемого технического решения существенно сокращается время определения кодеина без ухудшения других метрологических характеристик, уменьшается трудоемкость процесса. Кроме того, уменьшается вероятность потерь целевого компонента, имеющих место в прототипе при элюировании с хроматографической пластины зоны, содержащей кодеин, и фильтровании полученного раствора.

Способ определения кодеина, включающий разделение компонентов смеси методом тонкослойной хроматографии с выделением хроматографической зоны кодеина реактивом Драгендорфа, отличающийся тем, что количественное определение кодеина проводят в области его проявленной зоны непосредственно в твердой фазе путем измерения коэффициента диффузного отражения при длине волны 520 нм.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой средство для вовлечения мезенхимальной стволовой клетки костного мозга в периферическую кровь из костного мозга, которое вводят в кровеносный сосуд или мышцу и которое содержит любой из компонентов: (a) белок HMGB1; (b) клетка, которая секретирует белок HMGB1; (c) вектор, в который встроена ДНК, кодирующая белок HMGB1; (d) белок HMGB2; (e) клетка, которая секретирует белок HMGB2; (f) вектор, в который встроена ДНК, кодирующая белок HMGB2; (g) белок HMGB3; (h) клетка, которая секретирует белок HMGB3; и (i) вектор, в который встроена ДНК, кодирующая белок HMGB3.

Изобретение относится к медицине и описывает способ тестирования предполагаемого или известного иммуномодулирующего лекарственного средства для активации Т-клеток, который включает стадию приведения в контакт культуры мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) с предварительно определяемым количеством предполагаемого или известного иммуномодулирующего лекарственного средства in vitro и наблюдение активации Т-клеток в культуре РВМС, используя систему считывания, при контакте с предполагаемым или известным иммуномодулирующим лекарственным средством, где плотность клеток культуры РВМС во время стадии предварительного культивирования составляет по меньшей мере 2×106/мл, предпочтительно по меньшей мере 5×106/мл, более предпочтительно по меньшей мере 107/мл, или по меньшей мере 4×105/cм2, предпочтительно по меньшей мере 106/см2, наиболее предпочтительно по меньшей мере 2×106/cм2, при этом предварительную культуру РВМС культивируют в течение по меньшей мере 12 ч.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств.

Настоящее изобретение относится к аналитической химии ауксинов, в частности к способам определения индолил-уксусной кислоты в верхушках концевых приростов побегов и листьев яблони, груши, сливы, черешни, винограда и проростков пшеницы.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств.

Изобретение относится к химической и фармацевтической промышленности и может быть использовано для извлечения новокаина из водных сред с целью его дальнейшего определения.

Изобретение относится к области фармакологии и касается способов оценки их противовоспалительной активности. Способ оценки противовоспалительной активности препарата включает введение исследуемого препарата экспериментальному животному, последующую индукцию воспаления каррагенином и исследование крови экспериментального животного спустя 3 часа после индукции воспаления.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу специфического отбора высокоаффинных молекул ДНК (ДНК-аптамеров) к рекомбинантному белку-мишени. Указанный способ включает синтез единой полипептидной цепи рекомбинантного белка, содержащего в своем составе фрагмент глютатион-S-трансферазы, целевой белок-мишень, пептидную последовательность, расщепляемую летальным фактором B.

Группа изобретений относится к соединениям - модификаторам хемосенсорных рецепторов и их лигандов, имеющим структурную формулу (IIIb), их подвидам и конкретным соединениям, съедобным композициям, содержащим модификаторы хемосенсорных рецепторов и их лигандов, имеющие структурную формулу (IIIb), их подвиды и конкретные соединения, а также к способам применения вышеуказанных соединений для улучшения сладкого вкуса съедобных композиций.

Настоящее изобретение относится к биологии и медицине и описывает способ отбора анальгетических средств, который позволяет осуществлять поиск биологически активных веществ с анальгетическим действием в рядах NH-замещенных антраниловых кислот (1), ариламидов NH-замещенных антраниловых кислот (2), ариламидов N-ацил-N-алкенил(алкил)антраниловых кислот (3), амидов и гидразидов NH-ацил(галоген)антраниловых кислот (4), имеющих общий фрагмент: карбонил, фенильный радикал и вторичная или третичная аминогруппы, у которых определяют параметры электронной структуры молекул соединений и выбирают дескрипторы: энергия Хартри-Фока (ЕHF), полная тепловая энергия (EТЕРМ), заряды на атомах азота (qN), углерода (qC) и кислорода (qO), затем с помощью трехпараметровых уравнений рассчитывают анальгетическую активность (ААрасч.) и отбирают соединения, у которых теоретически рассчитанная АА равна или превосходит таковую препарата сравнения, выбранные соединения синтезируют и подтверждают расчетные данные экспериментально на лабораторных животных (ААэксп.).

Настоящее изобретение относится к области биохимии и описывает способ количественного определения классов липидов и подклассов фосфолипидов в биологических материалах, заключающийся в том, что методом тонкослойной хроматографии разделяют общие липиды на классы и фосфолипиды на подклассы, проявляют их на хроматограмме и количество определяют с использованием денситометрии, причем липиды, остающиеся на старте после разделения общих липидов на классы, сдвигают на 0,5 см выше, проявляют классы липидов и подклассы фосфолипидов на хроматограмме парами йода и рассчитывают площади пиков, соответствующие интенсивности окраски треков на хроматограмме с помощью денситометра, а количество общих фосфолипидов, других классов липидов и подклассов фосфолипидов определяют расчетным методом, выделяя линиями каждый трек отдельно и производят суммарный расчет площадей треков, берут эту цифру за 100% и определяют процент каждого класса липидов от общих липидов или каждого подкласса фосфолипидов от общих фосфолипидов, составляя пропорцию.

Изобретение относится к области аналитической химии и предназначено для выделения монослоя вещества для целей последующего анализа свойств вещества. Способ выделения монослоя вещества включает нанесение жидкой пробы с растворенным в ней веществом на линию старта на хроматографическую пластину, содержащую слой сорбента.

Изобретение относится к области хроматографического анализа веществ и позволяет осуществить анализ органических веществ. Способ хроматографического анализа органических веществ включает растворение исследуемого органического вещества в летучем растворителе с получением раствора пробы, последующее нанесение капли раствора пробы на хроматографическую пластину со слоем сорбента, при этом в качестве растворителя выбирают вещество, не вступающее в химическое взаимодействие с пробой и сорбентом, последующий качественный и количественный анализ проявившихся колец.

Изобретение относится к тонкослойной хроматографии (TCX) и может быть использовано в аналитической химии и в физической химии. Сэндвич-камера с контрпластинкой для TCX содержит разделяющую хроматографическую пластинку с адсорбционным слоем на подложке и контрпластинку - хроматографическую пластинку с адсорбционным слоем на подложке.

Изобретение относится к тонкослойной хроматографии (ТСХ) и может быть использовано в аналитической химии. Способ разделения исследуемой смеси методом тонкослойной хроматографии включает нанесение исследуемой смеси на разделяющую хроматографическую пластинку и последующее разделение компонентов исследуемой смеси подвижной фазой в сэндвич-камере, включающей разделяющую хроматографическую пластинку и сухую контрпластинку, которая не касается подвижной фазы.

Способ и устройство могут использоваться в различных научных и практических областях медицины, биологии, химии, пищевой промышленности, охране окружающей среды и других отраслей народного хозяйства для анализа смесей органических и неорганических веществ методом тонкослойной хроматографии.

Изобретение относится к ветеринарной токсикологии и санитарии, а именно к определению остаточных количеств инсектицида в органах и тканях животных при подозрении на отравление имидаклопридом, а также в продуктах животного происхождения.

Изобретение относится к ветеринарной токсикологии и санитарии, а именно к определению остаточных количеств имидаклоприда в органах или тканях животных при подозрении на отравление инсектицидом, а также продуктах животного происхождения.

Изобретение относится к тонкослойной хроматографии (ТСХ) и может быть использовано в аналитической химии. .

Изобретение относится к способам стандартизации лекарственных препаратов, биологически активных добавок, премиксов, лекарственного растительного сырья, растительных масел, масляных экстрактов, изделий пищевой, химической и косметологической отраслей промышленности по содержанию основных жирорастворимых витаминов и может быть использовано в фармацевтической, химической, косметологической и пищевой отраслях промышленности для определения подлинности и степени чистоты жирорастворимых витаминов A, D2, E и β-каротина при совместном присутствии в одно- и многокомпонентных препаратах. Способ определения жирорастворимых витаминов A, D2, E и β-каротина при совместном присутствии включает выделение жирорастворимых витаминов из субстанции экстракцией 96%-ным этанолом, отделение спиртового экстракта витаминов с помощью делительной воронки, последовательное хроматографирование с использованием силикагелевых пластинок марки «Sorbfil» ПТСХ-П-А на полимерной подложке при участии двух элюентов с различной величиной пробега, время насыщения камеры парами элюента - 20 мин, время элюирования - 55 мин; высушивание при температуре не менее 80°C пластин в термостате в течение 3-5 мин, обработку пластины проявителем - 5%-ным спиртовым раствором кислоты фосфорномолибденовой, согласно изобретению в качестве элюентов использованы гексан:хлороформ (19:1) и гексан:хлороформ (3:1), а детектирование хроматографической зоны β-каротина проводят до обработки пластины проявителем при дневном свете. Способ обеспечивает упрощение и ускорение процесса определения жирорастворимых витаминов. 10 ил., 3 пр.
Наверх