Способ диагностики наружного генитального эндометриоза


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2526823:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и представляет собой способ диагностики наружного генитального эндометриоза, включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют уровень липопротеинов высокой плотности и при величине 0,77 ммоль/л и выше диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Изобретение позволяет повысить точность и упростить процедуру диагностики наружного генитального эндометриоза. 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и найдет широкое применение для объективной диагностики наружного генитального эндометриоза (НГЭ).

Внедрение в последние 20-30 лет в практику инструментальных, эндоскопических, генетических, иммунологических методов расширило диагностические возможности при обследовании больных с эндометриозом. Частота выявления эндометриоза у больных репродуктивного возраста колеблется от 7 до 50%. Наиболее частыми недостатками в диагностике являются: нераспознование эндометриоза, ошибочное установление диагноза у некоторых онкологических и неврологических больных при отсутствии у них эндометриоза, запоздалая диагностика. «Золотым» стандартом диагностики эндометриоза являются лапароскопия и гистероскопия с последующим гистологическим исследованием биопсированных тканей. Однако частота гистологического подтверждения диагноза колеблется от 70 до 85%. Положительный результат подтверждает диагноз эндометриоза, в то время как отрицательный совершенно не исключает эндометриоидную болезнь, так как на исследование могут попасть лишь отдельные кусочки тканей, лишенные характерных морфологических признаков эндометриоза (Баскаков В.П., Цвелев Ю.В., Кира Е.Ф. Эндометриоидная болезнь. Санкт-Петербург, 2002, 448 с.). В настоящее время отсутствует надежная неинвазивная диагностика малых форм эндометриоза (Kennedy S., Bergqvist A., Chapron C., D'Hooghe Т., Dunselman G., Greb R. et al. ESHRE guideline for the diagnosis and treatment of endometriosis. Hum Reprod 2005, Vol.20, P.2698-704; Rogers P.A., D'Hooghe T.M., Fazeabas A., Garget C.E., Giudice L.C., Montgomery G.W., Rombauts L., Salamoonsen L.A., Zondervan K.T. Priorities for endometriosis research: recommendations from an international consensus workshop. Reprod Sci 2009, Vol.16, P.335-346), что приводит к увеличению промежутка времени между первым проявлением симптомов боли, бесплодия и хирургическим подтверждением диагноза (Чернуха Г.Е. Эндометриоз и хроническая тазовая боль: причины и последствия. Проблемы репродукции, 2011, №5, с.83-89; Sinaii N., Plumb К., Cotton L., Lambert A., Kennedy S., Zondervan K. et al. Differences in characteristics among 1,000 women with endometriosis based on extent of diseae. Fertil Steril 2008, Vol.89, P.538-45; Gajbhiye R., Sonawani A., Khan S., Suryawanshi A., Kadam S., Warty N., Raut V., Khole V. Выявление и оценка новых сывороточных маркеров для ранней диагностики эндометриоза. Human Reprodaction репродукция человека 2012, №2(26), р.35-45). Анализ патентной и научно-медицинской литературы позволил установить, что существующие способы диагностики НГЭ относятся в основном к инвазивным.

Ультразвуковая диагностика прочно вошла в медицинскую практику как один из объективных методов диагностики и динамического наблюдения гинекологических больных. Но трансвагинальное ультразвуковое сканирование, по данным ряда исследователей, не позволяет выявить поверхностные импланты на брюшине малого таза, крестцово-маточных связках (Адамян Л.В., Кулаков В.И., Андреева Е.Н. Эндометриозы: руководство врачей. М., Медицина, 2006, 416 с.; Ищенко А.И., Кудрина Е.А. Эндометриоз: современные аспекты. М., Медицина, 2008, 176 с.; Steinkeler J.A., WoodField C.A., Hillstrom M.M. Female Infertility: A Systematic Approach to Radiologic Imaging and Diagnosis. Radio Graphics 2009, Vol.29, N.5, P.1353-1370).

В настоящее время применяется МРТ диагностика для эндометриоидных кист яичников, эндометриоза ректовагинального пространства, но с помощью этого метода невозможно обнаружить очаги эндометриоза на тазовой брюшине (малые формы НГЭ) (Кулаков В.И., Адамян Л.В., Волобуев А.И. и соавт. Магнитнорезонансная томография в диагностике различных форм эндометриоза. Вестник рентгенологии и радиологии 2003, №4, с.45-59; Труфанов Г.Е., Панов В.О. Руководство по лучевой диагностике в гинекологии. 2008, с.200-204; Seeber В, Sammel MD, Fan X. Panel of markers can accurately predict endometriosis in a subset of patients. Fertil Steril. 2008, Vol.89, P.1073-1081; Al-Jefout M, Dezamaulds G, Cooper M, et al. Diagnosis of endometriosis by detection of nerve fibres in an endometrial biopsy: a double blind study. Hum Reprod. 2009, Vol.24; P.3019-3024).

1. Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент РФ №216487, 2001 г.) по исследованию периферической крови больного и определения спонтанной НСТ - активности нейтрофилов после их инкубации с ПАМГ-2.

Недостатком данного способа следует отнести следующее:

- активность нейтрофилов относится к тем показателям, которая может изменяться при даже незначительных воспалительных процессах;

- способ неспецифичен;

- трудновыполним.

2. Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент РФ 32291439, 2007 г.) по определению в периферической венозной крови показателя относительного содержания CD16+ моноцитов в моноцитарном гейте и при его значениях, равных или меньших 45%, диагностируют НГЭ.

Самым существенным недостатком в предложенном способе является особенно сложное его выполнение. Для определения содержания CD16+ в моноцитарном гейте фиксируются сначала три основных параметра. Это осуществляется высококвалифицированным специалистом, что снижает возможность широкого использования метода.

3. Известен диагностический тест, при котором учитывается абсолютное количество макрофагов в перитонеальной жидкости - 13·106, позволяющее диагностировать наличие эндометриоза (Oosterlynk D.J., Lacquaet F.A., Waer M. et al. Lymphokine - activated killer activity in women with endometriosis // Gyn. Obstet. Invest. - 1994. - Vol.37, #3. - P.185-190).

Недостатком вышеизложенного способа следует отнести его травматичность, так как для диагностики эндометриоза этим методом нужно получить перитонеальную жидкость, для чего проводят лапароскопию. В случае подтверждения диагноза необходимо проводить повторную лапароскопию. В то же время для подсчета абсолютного количества макрофагов в перитонеальной жидкости должен участвовать специалист высокого профессионального уровня.

4. Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент РФ №2265223, 2005 г.) по определению в периферической венозной крови относительного содержания CD45RO+ лимфоцитов и при его значении, равном 31% или менее, диагностируют наружный генитальный эндометриоз.

Недостатком данного способа является возможность его выполнения только в крупных медицинских учреждениях, оборудованных современной лабораторной аппаратурой и наличием высококвалифицированных иммуногистохимиков. Последнее ограничивает использование предложенного способа диагностики наружного генитального эндометриоза.

Основными признаками эндометриоза является пролиферативный рост, обуславливающий эндометриоидные гетеротопии. Нами выявлены значительные изменения в обмене липопротеионов (ЛПВП и ЛПНП), которые определяют процессы пролиферации, поскольку существует метаболическая взаимосвязь между липопротеинами и вазоактивными веществами, осуществляющими рост кровеносных сосудов - основного источника формирования гетеротопии. Следует отметить, что указанные изменения ЛПВП при эндометриозе обнаружены в сыворотке крови, что послужило основанием считать установленные изменения в обмене ЛПВП, обусловленные данной патологией, и являются специфическими маркерами эндометриоза.

Задача заявляемого изобретения: разработка специфического способа, позволяющего с высокой точностью диагностировать наружный генитальный эндометриоз.

Поставленная задача решается следующим образом: определяют в сыворотке крови содержание липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) и при его величине равной или выше 0,77 ммоль/л диагностируют наружный генитальный эндометриоз.

Подробное описание способа

У пациентки, имеющей в анамнезе болевой синдром и бесплодие, производят взятие 2 мл крови из локтевой вены натощак. Определяют в сыворотке крови содержание липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) иммуноферментным методом с использованием аппаратуры «Сапфир-400» (Япония) тест-наборов фирмы Randox (Германия) согласно протоколу исследования. Если содержание липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) равно или выше 0,77 ммоль/л, диагностируют наружный генитальный эндометриоз.

Работоспособность заявляемого способа подтверждена следующими клиническими примерами.

Пример 1. Больная Д-ак, 24 лет. История болезни №916/297. Поступила в гинекологическое отделение №1 РНИИАП 21.02.2011 г. Диагноз: Наружный генитальный эндометриоз IV ст. Эндометриоидная киста правого яичника. Эндометриоз левого яичника. Ретроцервикальный эндометриоз, спаечный процесс органов малого таза IV ст. Бесплодие I. 24.02.2011 г. Проведены: лапароскопия, хромогидротубация, сальпингоовариолизис, цистэктомия правого яичника, биопсия левого яичника, вапоризация очагов эндометриоза.

В сыворотке крови пациентки определено содержание ЛПВП наборами фирмы Randox (Германия) на биохимическом анализаторе Сапфир-400 (Япония).

Содержание ЛПВП в сыворотке крови составило 0,8 ммоль/л. Согласно нашей методике полученное содержание ЛПВП в сыворотке крови позволяет диагностировать эндометриоз. Гистологическое исследование (№1837-39) подтвердило наличие у пациентки наружного генитального эндометриоза.

Пример 2. Больная П-ва, 32 лет. История болезни №324/82. Поступила в гинекологическое отделение №1 РНИИАП 26.01.2011 г. Диагноз: Бесплодие II. Гидатида левой маточной трубы. 27.01.2011 г. Проведены: лапароскопия, хромогидротубация, удаление гидатаиды левой маточной трубы. В сыворотке крови пациентки определено содержание ЛПВП. Содержание ЛПВП в сыворотке крови составило 0,76 ммоль/л. Согласно нашей методике полученный уровень ЛПВП свидетельствовал об отсутствии эндометроиза. Гистологическое исследование (№397) не подтвердило наличие у пациентки наружного генитального эндометриоза.

Пример 3. Больная И-ца, 30 лет. История болезни №4725/1562. Поступила в гинекологическое отделение №1 РНИИАП 01.08.2011 г. Диагноз: Наружный генитальный эндометриоз I ст. Бесплодие I. 03.08.2011 г. Проведены: лапароскопия, хромогидротубация, биопсия брюшины, вапоризация очагов эндометриоза, гистероскопия, диагностическое выскабливание стенок полости матки. В сыворотке крови пациентки определено содержание ЛПВП. Содержание ЛПВП в сыворотке крови составило 0,77 ммоль/л. Согласно нашей методике содержание ЛПВП в сыворотке крови свидетельствует о наличии эндометриоза. Гистологическое исследование (№10213) подтвердило наличие у пациентки эндометриоза.

По заявленному способу обследовано 96 пациенток, среди которых у 74 уровень ЛПВП был равным 0,77 ммоль/л (11) и выше (63). При этом у 74 пациенток имело место гистологическое подтверждение эндометриоза, а у 22 - его отсутствие.

Вышеизложенное подтверждает диагностическую ценность заявляемого метода.

Таким образом, заявляемый способ более эффективен по сравнению с известными и обладает рядом преимуществ:

1. Метод специфичен. Обладает высокой точностью, малотравматичен. В 100% случаев был диагностирован наружный генитальный эндометриоз.

2. Исключает необходимость многократного проведения исследования.

3. Клиническое применение способа позволяет своевременно диагностировать наружный генитальный эндометриоз.

4. Метод клинически эффективен и может быть рекомендован к использованию в гинекологической практике.

Способ диагностики наружного генитального эндометриоза, включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови биохимическим методом определяют содержание липопротеинов высокой плотности и при величине 0,77 ммоль/л и выше диагностируют наружный генитальный эндометриоз.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, может быть использовано для титрования групповых антител системы АВО. Для определения титра естественных антител в каждую колонку нейтральной гелевой карты вносят 50 мкл 0,8% взвеси стандартных эритроцитов и 25 мкл одного из приготовленных разведений сыворотки крови.
Изобретение относится к области медицины, а именно к неврологии и гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики аутоиммунного поражения различных структур вегетативной нервной системы (ВИС), регулирующих моторику желудочно-кишечного тракта (ЖКТ).

Изобретение относится к медицине и описывает способ детекции поврежденных влажностью влагочувствительных реагентов, где указанные реагенты приводят в контакт с образцом, содержащим воду, и далее выявляется присутствие в образце анализируемого вещества, по его реакции с указанными влагочувствительными реагентами, причем указанный способ включает: (a) измерение отражения света при длине волны, характерной для продуктов указанной реакции указанных влагочувствительных реагентов с анализируемым веществом в двух заданных временных точках после контакта указанных реагентов с указанным образцом; (b) измерение в тех же двух заданных временных точках отражения света при длине волны, характерной для эталонного инфракрасного красителя, причем указанный краситель объединен с указанными влагочувствительными реагентами и имеет характерную длину волны, отличающуюся от длины волны, измеряемой в п.(a), по меньшей мере на 120 нм; (c) расчет соотношения показателей отражения, измеренных при длинах волн согласно пп.(a) и (b), и заключение о том, что реагенты имеют сниженную, чем ожидалось, активность и повреждены влажностью, на основании различия в указанном соотношении для указанных двух заданных временных точек.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения интерферон-γ-продуцирующих Т-лимфоцитов при хроническом лимфолейкозе. Сущность способа состоит в том, что осуществляют ингибирование внутриклеточного транспорта - брефелдином А в клеточной культуре, далее подвергают немедленной обработке флуоресцеинизотиоционат-меченными анти-СD3 антителами, затем проводят стимуляцию синтеза интерферона-γ, фиксацию, пермеабилизацию, окраску фикоэритрин-меченными анти-интерферон-γ моноклональными антителами и осуществляют цитометрию, наблюдают совпадение флуоресцентной метки СD3-маркера в клеточной культуре с таковой, определяемой на основании контролируемого метода.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования задержки внутриутробного роста плода. Для этого в венозной крови женщины на ранних сроках беременности определяют относительное содержание CD3+CD16+56+-лимфоцитов, уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R).

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования течения и исходов бактериальных гнойных менингитов (БГМ) различной этиологии у детей.
Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и описывает способ прогнозирования послеоперационной регенерации у пациентов с ложными суставами длинных трубчатых костей, включающий исследования венозной крови пациента, анализ результатов ее исследования с выдачей прогноза послеоперационной регенерации по выбранным показателям, в плазме крови пациента определяют уровень содержания диеновых конъюгатов (ДК) и двойных связей (ДС) в липидах плазмы крови, количество липидов в плазме крови пациента, количество белка «острой фазы» - церулоплазмина, а также определяют процентное содержание высоко стойких эритроцитов в крови пациента, оценивают интегральные показатели изменения состояния молекулярно-биологических процессов в системе равновесия перекисного окисления липидов (ПОЛ) плазмы крови пациента и ее антиоксидантной защиты (АОЗ), при этом критерием возникновения дисбаланса в системе «ПОЛ-АОЗ» плазмы крови пациента выбирают в качестве интегрального показателя произведение содержания диеновых конъюгатов (ДК) и двойных связей (ДС) в липидах плазмы крови пациента, затем в случае, если измеренный показатель содержания двойных связей (ДС) составляет (29,6-37)10-7 М/мг липидов, измеренный показатель содержания диеновых конъюгатов (ДК) составляет (2,34-2,76)10-1 условных единиц, вычисленный по результатам измерений интегральный показатель в виде произведения ДС×ДК составляет (69,3-102,1)10-8 условных единиц, количество липидов в плазме крови пациента составляет 6,2-8,6 мг/мл, количество белка «острой фазы» - церулоплазмина в плазме крови пациента составляет 29,6-36,8 условных единиц, а процентное содержание высоко стойких эритроцитов в популяции эритроцитов в плазме крови пациента составляет (14,3-17,3)%, то прогнозируют прохождение процессов, сопровождающихся нарушением структуры мембран эритроцитов с проявлением замедленной консолидации поврежденного элемента опорно-двигательного аппарата с образованием не осложненного воспалительными процессами ложного сустава, а в случае, если измеренный показатель содержания двойных связей (ДС) составляет (41,6-49,4)10-7 М/мг липидов, измеренный показатель содержания диеновых конъюгатов (ДК) составляет (3,16-3,54)10-1 условных единиц, вычисленный по результатам измерений интегральный показатель в виде произведения ДС×ДК составляет (131,5-174,9)10-8 условных единиц, количество липидов в плазме крови пациента составляет 2,6-5,8 мг/мл, количество белка «острой фазы» - церулоплазмина в плазме крови пациента составляет 41,6-49,4 условных единиц, а процентное содержание высоко стойких эритроцитов в популяции эритроцитов в плазме крови пациента составляет (4,6-6,0)%, то прогнозируют прохождение процесса нарушения структуры мембран эритроцитов с проявлением замедленной консолидации поврежденного элемента опорно-двигательного аппарата с образованием отягощенного нагноением осложненного ложного сустава.

Изобретение относится к медицине, в частности к области медицинской диагностики, и описывает способ диагностики туберкулеза путем проведения иммуноцитогистохимического исследования и выявления экспрессии антигена микобактерии туберкулеза.

Изобретение относится к способу ранней детекции мышечных дегенеративных заболеваний и к способу прогнозирования и/или определения терапевтической эффективности терапевтического средства и/или способа терапии заболеваний посредством измерения тетранор-PGDM (11,15-диоксо-9α-гидрокси-2,3,4,5-тетранорпростан-1,20-диовой кислоты) в образце мочи субъекта и сравнения его содержания относительно образца, выделенного у здорового индивидуума.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения биологического возраста у беременных женщин. Сущность способа состоит в том, что используют данные общего и биохимического анализов крови, показателей коагулограммы крови, массы тела, окружности живота (ОЖ) по формуле для I, II, III триместра беременности, затем определяют должный биологический возраст по формуле для I, II, III триместра беременности.
Изобретение относится к медицине. Способ прогнозирования риска возникновения переломов заключается в том, что выделяют ДНК из лейкоцитов периферической венозной крови, методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией, генотипируют 3 полиморфных варианта -1997G>T (g.3011T>G, rs1107946), -1663IndelT (g.3344_3345delTT, rs2412298) и +1245G>T (c.104-441G>T (rs1800012), расположенных в регуляторном регионе гена COLIA1.

Группа изобретений относится к области биотехнологии и касается способа получения белков, выделенных при лизисе клеток Vero, включающего следующие стадии: культивирование и сбор клеток Vero; разрушение и лизис клеток Vero; очистку выделенных при лизисе клеток Vero белков путем гидрофобной хроматографии на фенилсефарозе 6FF, эксклюзивную хроматографию на сефарозе, элюцию, концентрирование, выделенные белки представляют собой смесь белков с молекулярными массами 11 кДа, 17-34 кДа, 55 кДа и 72-170 кДа.
Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для персонифицированного прогнозирования эффективности терапии хронического гепатита С пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином.

Изобретение относится к медицине и касается способа выделения спермаспецифического ингибитора трипсина человека из семенной плазмы, заключающегося в том, что выделение проводят сочетая преципитацию сульфатом аммония и аффинную хроматографию на иммобилизованном лектине бодяги речной.

Изобретение относится к медицине. Сущность способа оценки детоксикационной функции организма у работающих в условиях химического комплекса включает определение активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы в лизатах эритроцитов, глутатионредуктазы в эритроцитах, рассчитывают показатель детоксикационной функции организма (ПD) по формуле.

Изобретение относится к способу ранней детекции мышечных дегенеративных заболеваний и к способу прогнозирования и/или определения терапевтической эффективности терапевтического средства и/или способа терапии заболеваний посредством измерения тетранор-PGDM (11,15-диоксо-9α-гидрокси-2,3,4,5-тетранорпростан-1,20-диовой кислоты) в образце мочи субъекта и сравнения его содержания относительно образца, выделенного у здорового индивидуума.

Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ идентификации соединения, пригодного для лечения гингивита, включающий: взаимодействие первого гингивального образца, полученного от млекопитающего, страдающего от гингивита, с исследуемым соединением; взаимодействие второго гингивального образца из ротовой полости млекопитающего с положительным контролем - соединением, подавляющим экспрессию одной или более матриксных металлопротеиназ (галогенированный дифениловый эфир); измерение степени, с которой экспрессия одной или более матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью исследуемого соединения; измерение степени, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью положительного контроля; и сравнение степени, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью исследуемого соединения, со степенью, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью положительного контроля; в котором исследуемое соединение, которое подавляет экспрессию одной или более из матриксных металлопротеиназ в равной или большей степени, чем положительный контроль, является соединением, пригодным для лечения гингивита; где одна или более матриксных металлопротеиназ, для которых измеряют экспрессию, включают, по меньшей мере, ММР-9 и ММР-13.

Изобретение относиться к области микробиологии. Сущность способа обнаружения и идентификации микроорганизма на твердой и полутвердой среде состоит в том, что осуществляют a) сканирование твердой или полутвердой ростовой среды, о которой известно, что она содержит или может содержать одну или более чем одну колонию микроорганизма, для локализации любых колоний, присутствующих на среде; b) непосредственное исследование на указанной ростовой среде одной или более чем одной колонии, локализованной на стадии (а) с диаметром возбуждающего пучка менее чем приблизительно 1000 мкм, с получением измерений собственной флуоресценции (СФ), характеристических для микроорганизма в колонии; c) идентификацию микроорганизма в колонии на основании измерений СФ, где микроорганизмы характеризуют на уровне семейства, рода, вида или на уровне штамма.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для выявления высокого риска развития нарушения толерантности к глюкозе у больных стабильной стенокардией напряжения на фоне приёма бета-адреноблокаторов (ББ) без дополнительных вазодилатирующих свойств.

Изобретение относится к медицине, касается способа оценки токсической опасности антихолинэстеразных соединений (АнХЭС). Суть заявляемого способа заключается в определении антихолинэстеразного эффекта растворов исследуемых АнХЭС на препарат холинэстеразы - фермент пропионилхолинэстераза мозговой ткани кальмара (ПХЭ), а именно в оценке процента угнетения активности ПХЭ в растворах малой - 0,04 Е/мл и высокой - 4 Е/мл концентрации.
Наверх