Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента


 


Владельцы патента RU 2527676:

Кочурова Екатерина Владимировна (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости. Способ включает исследование ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител, с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости, в качестве биомаркера выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера ММП 8 в ротовой жидкости группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл, и при содержании ММП 8 в количестве 611,32-792,00 нг/мл диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента, а при содержании ММП 8 в количестве 496,86-570,33 нг/мл диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента, также определяют количественное содержание матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера ММП 9 группы клинического контроля принимают уровень 108,14-180,47 нг/мл, и при содержании ММП9 в количестве 326,43-458,23 нг/мл диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента, а при содержании ММП 9 в количестве 782,13-906,60 нг/мл диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. Способ обеспечивает значительное повышение точности, чувствительности дифференциальной экспресс-диагностики, достижение высокой вероятности выявления процессов доброкачественных и злокачественных новообразований в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, а также значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента и может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.

Известен способ прогнозирования и диагностики плоскоклеточного рака головы и шеи по содержанию матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в плазме крови пациента, включающий исследования плазмы венозной крови, при этом сыворотку крови забирали стандартным способом у больных плоскоклеточным раком головы и шеи после постановки диагноза до начала лечебных процедур. Сыворотку хранили при температуре -50°С не более 10 месяцев и размораживали не более 1 раза для иммуноферментного определения содержания матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа на ИФА-анализаторе (см. Клишо Е.В. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при плоскоклеточном раке головы и шеи, автореферат диссертации д.м.н., Томск, 2011 г., с.43).

Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностики новообразований околоушной слюнной железы в день обращения пациента,

- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований околоушной слюнной железы,

- недостаточность вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований околоушной слюнной железы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,

- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала,

- возможность инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала,

- сложность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Задачей изобретения является создание способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента.

Техническим результатом является достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований околоушной слюнной железы, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований околоушной слюнной железы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Технический результат достигается тем, что предложен способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для качественных экспресс-исследований новообразований околоушной слюнной железы, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 611,32-792,00 нг/мл, то диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 496,86-570,33 нг/мл, то диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют ее количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,14-180,47 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 326,43-458,23 нг/мл, то диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 782,13-906,60 нг/мл, то диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С. При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента, дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы. Выполняют забор ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 611,32-792,00 нг/мл, то диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 496,86-570,33 нг/мл, то диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,14-180,47 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 326,43-458,23 нг/мл, то диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 782,13-906,60 нг/мл, то диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента.

Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:

- отсутствие выполнения забора венозной крови у пациента для качественных экспресс исследований новообразований околоушной слюнной железы,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 23,85-39,65 нг/мл отсутствие новообразования околоушной слюнной железы у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 611,32-792,00 нг/мл аденомы околоушной слюнной железы пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 496,86-570,33 нг/мл рака околоушной слюнной железы пациента,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 108,14-180,47 нг/мл отсутствие новообразования околоушной слюнной железы у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 326,43-458,23 нг/мл аденомы околоушной слюнной железы пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 782,13-906,60 нг/мл рака околоушной слюнной железы пациента,

- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента тактики его лечения,

- выполнение при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед проведением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С,

- дополнительное осуществление в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента контрольного определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Экспериментальные исследования предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований околоушной слюнной железы, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований околоушной слюнной железы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей). Кроме того, предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента обеспечил при практическом использовании значительное повышение качества жизни пациентов.

Реализация предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациент Г., 54 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование околоушной слюнной железы слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 662,00 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 362,70 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали аденому левой околоушной слюнной железы. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: резекция околоушной слюнной железы.

Пример 2. Пациентка С., 84 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование околоушной слюнной железы справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. При этом в связи с преклонным возрастом пациентки возникла необходимость кратковременного хранения ее ротовой жидкости, поэтому перед выполнением анализа ее центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирали поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещали в пробирку «salicaps» и сразу замораживали в морозильной камере при температуре минус 80°С. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 792,00 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 432,90 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали аденому околоушной слюнной железы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено хирургическое лечение: резекция околоушной слюнной железы.

Пример 3. Пациент Д., 49 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование околоушной слюнной железы слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 693,20 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 397,50 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали аденому левой околоушной слюнной железы. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: резекция околоушной слюнной железы.

Пример 4. Пациентка В., 55 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование околоушной слюнной железы слева».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 523, 50 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 886,90 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак левой околоушной слюнной железы. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациентке было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 1-м этапе, лимфодиссекция шеи на стороне поражения с резекцией околоушной слюнной железы на 2-м этапе.

Пример 5. Пациентка М., 65 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование околоушной слюнной железы справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 570,33 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 782,13 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак правой околоушной слюнной железы. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 1-м этапе, лимфодиссекция шеи на стороне поражения с резекцией околоушной слюнной железы на 2-м этапе.

Пример 6. Пациент Ф., 57 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование околоушной слюнной железы справа».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1: 100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) в количестве 526,20 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 897,50 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали аденому (доброкачественное новообразование) левой околоушной слюнной железы. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение:

предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 1-м этапе, лимфодиссекция шеи на стороне поражения с резекцией околоушной слюнной железы на 2-м этапе.

Установленные клинические диагнозы впоследствии подтвердились результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у всех пациентов биопсийного материала из очага поражения.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациентов, дополнительно осуществляли контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациентов, по результатам которых судили об эффективности выбранного лечения у пациентов.

1. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, отличающийся тем, ротовую жидкость забирают у пациента для исследований новообразований, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 611,32-792,00 нг/мл, то диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 496,86-570,33 нг/мл, то диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований околоушной слюнной железы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,14-180,47 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 326,43-458,23 нг/мл, то диагностируют аденому околоушной слюнной железы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 782,13-906,60 нг/мл, то диагностируют рак околоушной слюнной железы пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента, дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики спонтанной формы вторичной иммунной недостаточности у детей с первичным перитонитом. Способ заключается в том, что в пробе венозной крови определяют относительное содержание активированных классических моноцитов с фенотипом CD14bright CD16-HLA-DR+ от общего количества моноцитов с фенотипом CD14bright методом многоцветной проточной цитометрии и при его значении более 68,8% диагностируют спонтанную форму вторичной иммунной недостаточности.

Изобретение относится к области офтальмологии и представляет собой способ прогнозирования развития пороговой стадии ретинопатии недоношенных у детей без офтальмоскопических признаков заболевания, отличающийся тем, что на сроке по 33 неделю гестационного возраста в сыворотке крови определяют содержание фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и при уровне VEGF, равном или превышающем 1300 пг/мл, прогнозируют развитие пороговой стадии ретинопатии недоношенных.
Изобретение относится к лабораторной диагностике, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано для определения функциональной активности ионизированного кальция (ФАИ Ca2+) в сыворотке крови человека.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и представляет собой способ диагностики наружного генитального эндометриоза, включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют уровень липопротеинов высокой плотности и при величине 0,77 ммоль/л и выше диагностируют наружный генитальный эндометриоз.
Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, может быть использовано для титрования групповых антител системы АВО. Для определения титра естественных антител в каждую колонку нейтральной гелевой карты вносят 50 мкл 0,8% взвеси стандартных эритроцитов и 25 мкл одного из приготовленных разведений сыворотки крови.
Изобретение относится к области медицины, а именно к неврологии и гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики аутоиммунного поражения различных структур вегетативной нервной системы (ВИС), регулирующих моторику желудочно-кишечного тракта (ЖКТ).

Изобретение относится к медицине и описывает способ детекции поврежденных влажностью влагочувствительных реагентов, где указанные реагенты приводят в контакт с образцом, содержащим воду, и далее выявляется присутствие в образце анализируемого вещества, по его реакции с указанными влагочувствительными реагентами, причем указанный способ включает: (a) измерение отражения света при длине волны, характерной для продуктов указанной реакции указанных влагочувствительных реагентов с анализируемым веществом в двух заданных временных точках после контакта указанных реагентов с указанным образцом; (b) измерение в тех же двух заданных временных точках отражения света при длине волны, характерной для эталонного инфракрасного красителя, причем указанный краситель объединен с указанными влагочувствительными реагентами и имеет характерную длину волны, отличающуюся от длины волны, измеряемой в п.(a), по меньшей мере на 120 нм; (c) расчет соотношения показателей отражения, измеренных при длинах волн согласно пп.(a) и (b), и заключение о том, что реагенты имеют сниженную, чем ожидалось, активность и повреждены влажностью, на основании различия в указанном соотношении для указанных двух заданных временных точек.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения интерферон-γ-продуцирующих Т-лимфоцитов при хроническом лимфолейкозе. Сущность способа состоит в том, что осуществляют ингибирование внутриклеточного транспорта - брефелдином А в клеточной культуре, далее подвергают немедленной обработке флуоресцеинизотиоционат-меченными анти-СD3 антителами, затем проводят стимуляцию синтеза интерферона-γ, фиксацию, пермеабилизацию, окраску фикоэритрин-меченными анти-интерферон-γ моноклональными антителами и осуществляют цитометрию, наблюдают совпадение флуоресцентной метки СD3-маркера в клеточной культуре с таковой, определяемой на основании контролируемого метода.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования задержки внутриутробного роста плода. Для этого в венозной крови женщины на ранних сроках беременности определяют относительное содержание CD3+CD16+56+-лимфоцитов, уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R).

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности, к патологической гистологии. Способ прижизненной диагностики латентного течения инфекционной анемии цыплят включает морфологическую оценку мазков крови и пунктата костного мозга больных цыплят. В мазках крови и пунктата костного мозга выявляют вирусиндуцированные апоптозные тельца, и при наличии в поле зрения 3-5 и более апоптозных телец ставят диагноз на инфекционную анемию цыплят. Изобретение обеспечивает снижение трудоемкости способа и сроков постановки диагноза, а также позволяет диагностировать скрытое течение инфекции. 9 табл., 3 пр., 6 ил.

Группа изобретений относится к области биотехнологии, а именно к исследованию биомолекулярных взаимодействий и детектированию биомолекул с использованием поверхностного плазмонного резонанса. Описаны биологический сенсор, а также способ создания биологического сенсора с использованием тонких пленок на основе графена, оксида графена или однослойных или многослойных углеродных нанотрубок. Биологический сенсор состоит из подложки, металлической пленки, на поверхность которой нанесен промежуточный связующий слой, выполненный из тонкой пленки из графена, или тонкой пленки оксида графена, или тонкой пленки из углеродных нанотрубок. На поверхность промежуточного связующего слоя конформно и однородно адсорбирован биоспецифический слой. В качестве биоспецифического слоя может выступать слой молекул связывающего партнера анализируемого вещества или слой из комплекса биологических молекул, способных химически взаимодействовать с молекулами связывающего партнера и образовавших с ними комплекс. Также в качестве биоспецифического слоя может выступать слой гидрогеля, на который осаждены молекулы связывающего партнера и/или комплекс из молекул связывающего партнера и биологических молекул, которые могут образовывать химическую связь с молекулами связывающего партнера. Описанный способ получения биологического сенсора включает в себя стадии нанесения металлической пленки, промежуточного связующего слоя и биоспецифического слоя. Достигается высокая чувствительность биосенсора в сочетании с высокой биоспецифичностью; расширение спектра применения устройства; защита металлической пленки от воздействий внешней среды; возможность детектирования крупных биологических объектов. 2 н. и 25 з.п. ф-лы, 9 ил.
Настоящее изобретение относится к иммунологическому тесту для обнаружения и специфического определения аутоантител против антигенов семенников, которые присутствуют при воспалительных заболеваниях половой системы самцов млекопитающих, в биологическом образце самца млекопитающего, в частности для обнаружения тестикулярных аутоантител к ER-60 и/или трансферриновых аутоантител. Представленный иммунологический тест позволяет эффективно и просто определить наличие иммунологического и связанного с инфекцией бесплодия у самцов млекопитающих, в частности у людей. 2 н. и 4 з.п.ф-лы, 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической лабораторной диагностике. Предложен биологический микрочип для выявления и многопараметрического анализа противохолерных антител в сыворотке крови человека, содержащий массив дискретно нанесенных и иммобилизованных на поверхности подложки O-антигенов V. cholerae и холерного токсина, сгруппированных в отдельные зоны. Изобретение обеспечивает проведение параллельного иммунологического анализа нескольких образцов сыворотки крови человека на наличие противохолерных антител к широкому спектру антигенов возбудителя холеры с определением иммуноглобулинов класса G и M за короткое время. 2 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития гематогенных метастазов после комбинированного лечения при раке почки. Для этого в ткани опухоли определяют экспрессию NF-kB p50, HIF-1α содержание сосудистого эндотелиального фактора роста VEGF. Рассчитывают дискриминантные функции Y1, Y2 по уравнениям: Y1=-3,2+0,026·Х1+0,03·Х2-0,02·Х3+0,34·Х4+0,3·Х5; Y2=-33,3-0,01·Х1+0,11-Х2-1,2·Х3+1,57·Х4+1,8·Х5, где X1 - тотальная активность протеасом ·10-3 МЕ/мг белка; Х2 - содержание VEGF, пг/мг белка ; Х3 - экспрессия HIF-1, УЕ/мг белка в лунке; Х4 - экспрессия NF-kВ p50, УЕ/мг белка в лунке. При значениях Y1>Y2 прогнозируют отсутствие, а при Y1<Y2 - развитие гематогенных метастазов. Использование данного способа позволяет прогнозировать прогрессирование рака почки, а следовательно, назначить своевременное назначение наиболее адекватных лечебных мероприятий. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному полипептиду, который является биологической мишенью для ингибирования клетки-метанопродуцента, а также к выделенному полинуклеотиду, который кодирует этот полипептид. Раскрыты вектор экспрессии и клонирующий вектор, содержащие этот полинуклеотид, и клетки-хозяева, содержащие указанный вектор экспрессии. Описаны молекула-конъюгат или слитая молекула для ингибирования клетки-метанопродуцента, а также антитело или его функциональный фрагмент, которое связывается с вышеуказанным полипептидом. Изобретение также охватывает фармацевтическую композицию и способы ингибирования и идентификации клетки-метанопродуцента с использованием описанных молекулы-конъюгата или слитой молекулы и антитела или его фрагмента. Изобретение позволяет эффективно ингибировать клетки-метанопродуценты. 13 н. и 6 з.п. ф-лы, 9 ил., 6 пр.
Изобретение относится к медицинской психологии и психиатрии, может быть использовано для прогноза развития психической дезадаптации. Задачей предлагаемого изобретения является возможность прогнозирования развития психической дезадаптации на раннем донозологическом этапе. Поставленная задача решается путем определения в периферической крови испытуемых иммунологических показателей, и при одновременном содержании В-лимфоцитов CD72+ - фенотипа 7% и менее, лимфоцитов с маркерами поздней активации HLADR 14% и менее, концентрации сывороточного IgA 1,96 г/л и менее прогнозируют формирование психодезадаптационного состояния на стадии психоадаптационного состояния. Техническим результатом является возможность прогнозировать переход психоадаптацонного состояния как раннего этапа напряжения адаптационных механизмов без признаков их истощения в психодезадаптационное состояние со снижением адаптивных возможностей индивида, наличием признаков психического истощения и вероятного предболезненного состояния. 1 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, иммунохимии, и касается диагностики вируса простого герпеса первого типа методом твердофазного иммуноферментного анализа. Изобретение представляет собой способ получения иммуносорбента для диагностики вируса простого герпеса 1 типа, включающий предварительную обработку полимерного твердофазного носителя, на который сорбируется антиген вируса герпеса 1 типа, водным 20% раствором полиэтиленгликоля (ПЭГ-20), с последующей адсорбцией на носителе в 0,2M карбонат-бикарбонатном буферном растворе с pH 9,6 лизатного высокоочищенного антигена вируса герпеса 1 типа, приготовленного из штамма вируса простого герпеса 1 типа - АТСС VR-539, отмывку, лиофильную сушку, инкубацию сорбированных антигенов с блокирующим раствором. Использование натурального лизатного высокоочищенного антигена вируса герпеса 1 типа АТСС-VR-539 позволяет значительно повысить чувствительность анализа, система блокировки на основе триса позволяет нейтрализовать нежелательные неспецифические реакции. Также использование изобретения приводит к улучшению условий сохранения активности реагентов на поверхности твердофазного носителя, уменьшению расхода реагентов. Использование полиэтиленгликоля при обработке планшета повышает специфичность и чувствительность набора. 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к неонатологии и детской неврологии, и может использоваться для прогнозирования риска развития поражения центральной нервной системы (ЦНС) у новорожденных детей с различным сроком гестации в неонатальном периоде. Сущность способа: определяют уровень васкулоэндотелиального фактора роста и нейроспецифической енолазы в сыворотке крови. Затем рассчитывают вероятность риска развития тяжелого поражения центральной нервной системы р по формуле: p=1/(1+e-F), где е - основание натурального логарифма = 2,718; F - разделяющая функция, которую рассчитывают по формуле: F=0,0235·VEGF-4,5·NSE-2,46, где VEGF - содержание васкулоэндотелиального фактора роста в сыворотке крови; NSE - содержание нейроспецифической енолазы в сыворотке крови. При p равном либо более 0,5 прогнозируют низкий риск, а при p менее 0,5 прогнозируют высокий риск развития тяжелого поражения ЦНС. Способ обеспечивает высокую чувствительность, диагностическую точность и информативность способа, дает возможность расширить область применения, в частности, для новорожденных с различным сроком гестации. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к аллергологии, иммунологии и дерматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития инфекционных осложнений при атопическом дерматите у детей. Согласно способу, во время лечения младенческой формы и детской формы атопического дерматита в стадии обострения проводят определение содержания в сыворотке крови ребенка компонента комплемента С3, интерлейкина 6 и интерлейкина 10. При содержании в сыворотке крови компонента комплемента С3 меньше 0,8 мг/мл, интерлейкина 6 больше 20,9 нг/мл и интерлейкина 10 больше 5,6 нг/мл прогнозируют развитие инфекционного осложнения атопического дерматита у ребенка. Применение изобретения обеспечивает возможность прогнозирования развития инфекционных осложнений младенческой формы и детской формы атопического дерматита в стадии обострения в период лечения. 3 пр.
Наверх