Способ определения биологического возраста трупа при повторной кровопотере

Авторы патента:

G01N33/68 - с использованием протеинов, пептидов или аминокислот

Владельцы патента RU 2535044:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к судебной медицине, а именно к судебно-медицинской экспертизе, и предназначено для определения биологического возраста трупа при повторной кровопотере. Для осуществления способа в сосочковом слое дермы неповрежденной кожи определяют экспрессию следующих иммуногистохимических маркеров на 1 мкм²: elastin, fibrillin, amyloid Р, vitronectin, fibulin-5. При величине elastin менее 11,0%, величине fibrillin менее 6,0%, величине amyloid Р менее 0,2%, величине vitronectin менее 0,1%, величине fibulin-5 более 57,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет. При величине elastin 43,0-64,0%, величине fibrillin 23,0-47,0%, величине amyloid Р 3,5-7,8%, величине vitronectin 4,6-6,8%, величине fibulin-5 0,5-4,7% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет. При величине elastin менее 3,0%, величине fibrillin менее 1,5%, величине amyloid Р более 27,0%, величине vitronectin более 12,0%, величине fibulin-5 менее 0,1% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет. Изобретение позволяет определять биологический возраст человека и более объективно решать задачи, поставленные перед судебно-медицинским экспертом следственными органами. 1 пр.

Изобретение относится к судебной медицине, в частности к судебно-медицинской экспертизе.

На сегодняшний день не выявлены объективные признаки определения возраста человека при повторной кровопотере, являющейся причиной хронической постгеморрагической анемии.

Известен способ определения возраста человека по степени стирания зубов верхней челюсти (Герасимов М.Г. Восстановление лица по черепу. - М., 1955).

Недостатки: невозможность использования способа при повторной кровопотере и хронической постгеморрагической анемии, а также других видах анемии вследствие выраженных изменений дентина, пульпы и тканей перидонта (Benoist Н.М., Seek Diallo А., Diop S. Et all. // Dakar Med. - 2008. - Vol.53. - №2. - P.91-98; Hatipoglu M.G., Cagirankaya L.B., et all. // Eur J Dent. - 2012. - Vol.6. - №1. - P.95-100).

Известен способ определения возраста человека по степени заращения швов черепа (Самищенко С.С. Судебная медицина: Учебник для юридических вузов. OCR Палек, 1998 г.).

Недостатки: невозможность использования способа при повторной кровопотере, хронической постгеморрагической анемии, заболеваниях костно-суставной системы и нарушении обмена кальция, когда нарушается процесс заращения швов черепа (Reimann F., Gökmen М., Inceman S. // Blut. - 1968. - Vol.17. - №4. - P.214-226; Rutten E.P., Franssen F.M., Spruit M.A., Wouters E.F. // COPD. 2012 Dec 28 [Epub ahead of print]).

Известен способ определения возраста человека по показателям функционального состояния кожи (Александрова И.И. Нестеров М.А. // Избранные вопросы судебной медицины и экспертной практики. - Хабаровск, 1998. - №1. - С.58-59).

Недостатки: результаты определения возраста с использованием данного способа недостаточно точны и зависят от социальных условий и биологических особенностей (условий жизни и питания, наследственности, перенесенных заболеваний, физических нагрузок, профессии); данный способ возможен только на неповрежденной коже.

Задачей изобретения является способ определения биологического возраста трупа при повторной кровопотере.

Поставленная задача решается способом, заключающимся в том, что в сосочковом слое дермы неповрежденной кожи определяют экспрессию следующих иммуногистохимических маркеров на 1 мкм: elastin, fibrillin, amyloid Р, vitronectin, fibulin-5; и при величине elastin менее 11,0%, величине fibrillin менее 6,0%, величине amyloid Р менее 0,2%, величине vitronectin менее 0,1%, величине fibulin-5 более 57,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет; при величине elastin 43,0-64,0%, величине fibrillin 23,0-47,0%, величине amyloid Р 3,5-7,8%, величине vitronectin 4,6-6,8%, величине fibulin-5 0,5-4,7% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет; при величине elastin менее 3,0%, величине fibrillin менее 1,5%, величине amyloid Р более 27,0%, величине vitronectin более 12,0%, величине fibulin-5 менее 0,1% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет.

Способ осуществляют гистологическим исследованием тканей по (Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Микроскопическая техника. М. - Медицина. - 1996 г. - С.4-50, 339-445) следующим образом:

1. Исследуют участки неповрежденной кожи семи областей тела: шеи, груди, спины, ягодицы, передневнутренней поверхности бедра, передней поверхности предплечья и подошвенной поверхности стопы. На шее кусочек кожи вырезают с передней ее поверхности, на 0,5 см ниже проекции нижнего края щитовидного хряща, на груди - по срединной линии на уровне 4-го межреберья, на спине - в межлопаточной области, в проекции остистых отростков 4-5 грудных позвонков по срединной линии, на ягодице - с центральной ее части, на бедре - в области передневнутренней его поверхности на границе верхней и средней трети, на предплечье - на передней его поверхности на середине расстояния между проекцией локтевого и лучезапястного суставов, на подошвенной поверхности стопы - в области свода стопы на середине расстояния между проекцией головок плюсневых костей и пяточного бугра.

2. Кусочки фиксируют в 10% нейтральном забуференном формалине в течение 24 часов.

3. Материал промывают в проточной воде в течение 30 минут, а затем подвергается обезвоживанию и заливке в парафин по следующей схеме: спирт 60,0% - 2 часа, спирт 70,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт + ксилол (1:1) - 2 часа, ксилол + парафин (1:1) - 2 часа, парафин I 56° - 2 часа, парафин II 56° - 1 час.

4. Кусочки заливают в парафиновые блоки.

5. На ротационном микротоме изготавливают гистологические срезы толщиной 4-6 микрон.

6. Срезы подвергают депарафинизации и антигенной демаскировке в 0,1 М цитратном буфере pH 6,0 в течение 30 минут (Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина. - Казань: Титул, 2004).

7. Осуществляют обработку срезов следующими первичными антителами: monoclonal mouse а Hu elastin Clone ВА-4 (фирма Santa cruz); polyclonal rabbit a Hu fibrillin-1 Clone H-109 (фирма Santa cruz); monoclonal mouse a Hu Amyloid P Clone 318-6-11 (фирма Santa cruz); polyclonal rabbit a Hu vitronectin Clone H-202 (фирма Santa cruz); polyclonal rabbit a Hu fibulin-5 Clone H-60 (фирма Santa cruz) (Петров С.В., Райхлин H.T., см. выше).

8. Срезы обрабатывают реагентами системы визуализации En Vision + System-HRP (DAV), code K4010 (фирма Dako) (Петров С.В., Райхлин Н.Т., см. выше).

10. Полученные данные обрабатывают статистически по методу Стъюдента-Фишера с 95%-ным уровнем статистической достоверности с определением средней арифметической М, средней ошибки средней арифметической т, средней ошибки относительных величин m_p и коэффициента достоверности разности t. Также статистическую обработку производят с использованием таблиц сопряженности, критерия χ² и метода множественных сравнений с поправкой Бонферрони (Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. - М., Практика, 1998. - 459 с.).

С помощью данных методов изучались ткани кожи, полученные при судебно-медицинском исследовании 50 трупов (26 лиц мужского пола и 24 лица женского пола) в возрасте от 5 до 85 лет, не имеющих повреждений и патологических изменений кожи, при наличии признаков повторной кровопотери и хронической постгеморрагической анемии.

Проведенный статистический анализ установил, что иимуногистохимические маркеры elastin, fibrillin, amyloid Р, vitronectin, fibulin-5 можно использовать для определения биологического возраста человека при наличии признаков повторной кровопотери и хронической постгеморрагической анемии.

Способ определения биологического возраста трупа по фрагментам неповрежденной кожи апробирован на кафедре судебной медицины Первого Московского Государственного медицинского университета им. И.М. Сеченова и имеет большое практическое значение.

Пример.

Согласно акту судебно-медицинского исследования на месте происшествия был обнаружен труп мужчины с ожоговой травмой лица и колото-резаной раной в области правого плеча. Повреждение кожи лица затрудняло определение возраста трупа пострадавшего. Следственные органы интересовали следующие вопросы: 1. Могло ли ранение в области правого плеча привести к смерти? 2. Биологический возраст трупа.

При судебно-медицинском исследовании у пострадавшего выявлена хроническая язва тела желудка с внутрижелудочным кровотечением недельной давности, а также морфологические признаки хронической постгеморрагической анемии. Повторная кровопотеря в небольшом объеме из раны в области плеча усугубила состояние пострадавшего, что и явилось непосредственной причиной смерти. Для определения характера кровопотери были использованы способ диагностики рецидивирующей кровопотери (патент на изобретение Российской Федерации №2466391), а также способ определения длительности терминального периода при острой кровопотере (патент на изобретение Российской Федерации №2453844).

Учитывая наличие хронической постгеморрагической анемии, было невозможно использовать стандартные способы определения биологического возраста человека.

При иммуногистохимическом исследовании в сосочковом слое дермы выявлена позитивная экспрессия следующих маркеров на 1 мкм²: elastin 45,6%, fibrillin 32,4%, amyloid Р 4,1%, vitronectin 5,5%, fibulin-5 0,9%.

На основании указанных признаков был сделан вывод, что биологический возраст трупа составляет 35-45 лет (нормативные данные для этой возрастной группы составляют: elastin 43,0-64,0%, fibrillin 23,0-47,0%, amyloid Р 3,5-7,8%, vitronectin 4,6-6,8%, fibulin-5 0,5-4,7%).

Способ по изобретению позволяет определять биологический возраст человека и более объективно решать задачи, поставленные перед судебно-медицинским экспертом следственными органами.

Способ определения биологического возраста трупа при повторной кровопотере, заключающийся в том, что в сосочковом слое дермы неповрежденной кожи определяют экспрессию следующих иммуногистохимических маркеров на 1 мкм²: elastin, fibrillin, amyloid Р, vitronectin, fibulin-5; и при величине elastin менее 11,0%, величине fibrillin менее 6,0%, величине amyloid Р менее 0,2%, величине vitronectin менее 0,1%, величине fibulin-5 более 57,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет; при величине elastin 43,0-64,0%), величине fibrillin 23,0-47,0%, величине amyloid Р 3,5-7,8%, величине vitronectin 4,6-6,8%, величине fibulin-5 0,5-4,7% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет; при величине elastin менее 3,0%, величине fibrillin менее 1,5%, величине amyloid Р более 27,0%), величине vitronectin более 12,0%, величине fibulin-5 менее 0,1% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет.

Изобретение относится к судебной медицине, а именно к судебно-медицинской экспертизе, и предназначено для определения биологического возраста трупа при длительной кровопотере.

Способ прогнозирования течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом // 2535039

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогноза течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом.

Способ прогнозирования уровня гликированного гемоглобина у больных сахарным диабетом 2 типа // 2533456

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования уровня гликированного гемоглобина y индивидуумов русской национальности, больных сахарным диабетом 2 типа.

Способ прогнозирования течения и эффективности терапии сахарного диабета 2 типа // 2533286

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования течения и эффективности терапии сахарного диабета 2-го типа у индивидуумов русской национальности.

Способы разделения и характеристики микроорганизмов с помощью идентификатора // 2533252

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу характеристики микроорганизмов. Сущность способа состоит в (a) получении тестируемого образца, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы; (b) наслаивании тестируемого образца на плотностный буфер в контейнере, где указанный плотностный буфер обладает однородной плотностью от приблизительно 1,025 до приблизительно 1,120 г/мл; (c) добавлении идентификатора в указанный тестируемый образец и/или в указанный плотностный буфер; (d) центрифугировании указанного контейнера для разделения микроорганизмов от других компонентов указанного тестируемого образца и образовании осадка микроорганизмов; (e) спектроскопическом исследовании осадка и/или указанного одного или более чем одного идентификатора с получением измерений, которые характеризуют микроорганизмы, где указанные спектроскопические исследования проводят при нахождении указанного осадка в указанном контейнере; и (f) характеристике микроорганизмов в осадке на основании полученных измерений и/или присутствия или отсутствия указанного идентификатора или метаболизированной формы указанного идентификатора в осадке, где указанные микроорганизмы характеризуют по одной или более моделям классификации, выбранным из группы, состоящей из групп по Граму, клинических групп по Граму, терапевтических групп и функциональных групп.

Способ определения наследственной предрасположенности к развитию привычного невынашивания беременности // 2532367

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для определения генетической предрасположенности к привычному невынашиванию беременности (ПНБ).

Способ прогнозирования вероятности развития рестеноза после стентирования коронарных артерий // 2532340

Изобретение относится к области медицины. Сущность способа прогнозирования вероятности развития рестеноза с учетом локализации стента в правой коронарной артерии, огибающей артерии состоит в том, что на момент стентирования осуществляют забор крови пациента и регистрируют в физических величинах значения протромбинового индекса, коэффициента атерогенности, липопротеидов очень низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, вычисляют величину стеноза S.

Способ прогнозирования характера течения репаративной регенерации после оперативного лечения механической травмы печени // 2531086

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической и экспериментальной абдоминальной хирургии и может быть использовано для оценки характера течения репаративной регенерации после оперативного лечения механической травмы печени.

Анализ тропонина i с применением магнитных меток // 2530716

Группа изобретений относится к способу измерения тропонина I в образце. Для этого предоставляют образец.

Способ диагностики тяжести остеоартроза коленного сустава // 2530631

Способ относится к области медицины, а именно к способам лабораторной диагностики в ревматологии, используется для диагностики тяжести остеоартроза коленного сустава.

Набор синтетических олигонуклеотидов для выявления видовой принадлежности аралии высокой (aralia elata (miq.) seem.) // 2535060

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности аралии высокой (Aralia elata (Miq.) Seem.). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий прямой и обратный праймеры и разрушаемый зонд. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет быстро и достоверно провести идентификацию лекарственного растения. 1 ил., 1 пр.

Набор синтетичеcких олигонуклеотидов для выявления видовой принадлежности сушеницы болотной (filaginella uliginosa (l.) opiz) // 2535063

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности сушеницы болотной (Filaginella uliginosa (L.) Opiz). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий прямой и обратный праймеры и разрушаемый зонд. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет быстро и достоверно провести идентификацию лекарственного растения. 1 ил., 1 пр.

Набор синтетических олигонуклеотидов для выявления видовой принадлежности свободноягодника колючего, элеутерококка (eleutherococcus senticocus (rupr. et maxim.) maxim.) // 2535064

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности свободноягодника колючего, элеутерококка (Eleutherococcus senticocus (Rupr. et Maxim.) Maxim.). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий прямой и обратный праймеры и разрушаемый зонд. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет быстро и достоверно провести идентификацию лекарственного растения. 1 ил., 1 пр.

Способ диагностики прогрессирующих форм рака яичников // 2536272

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и описывает способ диагностики стадий распространенного рака яичников, включающий исследование плазмы крови, где у пациентки определяют стадию заболеванию по международной гинекологической классификации (FIGO) и относят его к III или IV клинической стадии по уровню окислительной модификации белков (ОМБ) в плазме крови, причем III стадия определяется уровнем ОМБ от 4,638 до ∞, а IV стадия - уровнем ОМБ от 0 до 4,638. Использование предлагаемого изобретения обеспечивает уточнение стадий распространенного рака яичников по международной гинекологической классификации FIGO. 8 табл., 1 пр.

Способ прогнозирования дискоординации родовой деятельности // 2537241

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, предназначено для прогнозирования патологии в родах, в частности дискоординации родовой деятельности (дистоции шейки матки). Сущность способа: при доношенной беременности в начале I периода родов в сыворотке крови женщин иммуноферментным методом определяют содержание кортикотропин-рилизинг гормона, субстанции Р, нейрокининов А и В, интерлейкинов 6 и 8, релаксина и кортизола, и рассчитывают прогностическую вероятность П по формуле: П=(-0,0011229·CRH+(-0,15119·NA)+(-0,0071961·NB)+(-0,021071·IL6)+0,0032637·IL8+(-0,00085785·pF2α)+9,5773·REL+(-0,0098088·SP)+0,0058058·cort)·2,719. При уровне вероятности П больше 0,51 прогнозируют высокий риск развития дискоординации родовой деятельности и завершения родового процесса экстренным оперативным путем. Применение изобретения обеспечивает повышение точности прогнозирования дискоординации родовой деятельности, что позволит своевременно сформировать группу высокого риска, дифференцировать характер нарушения РД, тем самым выбрать адекватную тактику ведения пациентки. 2 пр.

Способ дифференциальной диагностики анемии у детей // 2538722

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, к лабораторной диагностике и может быть использовано для дифференциальной диагностики анемии у детей. На гематологическом анализаторе определяют показатели гемограммы и индексы красной крови, такие как: гемоглобин (НВ) и гемоглобин ретикулоцитов (Ret-He), а в сыворотке крови определяют уровень растворимого рецептора трансферрина (p-ТФР), эритропоэтина сыворотки (ЭПО), сравнивают полученные показатели с референсными интервалами. При значениях: НВ<120 г/л, p-ТФР<25 нМЕ/мл, Ret>He>29 пг, ЭПО≤21 мМЕ/мл делают вывод об анемии на фоне воспаления (АВ). При значениях: НВ<120 г/л, p-ТФР>25 нМЕ/мл, Ret-He<29 пг, ЭПО>50 мМЕ/мл делают вывод о железодефицитной анемии (ЖДА), а при промежуточных значениях, попадающих в интервалы, характеризующие ЖДА или АВ, говорят о сочетанном варианте АВ+ЖДА. Изобретение позволяет проводить дифференциальную диагностику анемического синдрома, развивающегося при различных заболеваниях в детском возрасте, а не только диагностику железодефицитной анемии, позволяет проводить адекватную оценку метаболизма железа в организме. 3 пр.

Способ оценки тяжести текущего депрессивного эпизода у больных рекуррентным депрессивным расстройством // 2540491

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для оценки тяжести течения текущего депрессивного эпизода у больных рекуррентным депрессивным расстройством. Способ осуществляют путем определения отношения GSK-3β/β-актин, расчета суммарного балла по шкале SIGH-SAD. При повышении показателя отношения GSK-3β/β-актин в мононуклеарах крови пациентов с депрессивными расстройствами выше 0,70 и значении суммы баллов по шкале SIGH-SAD выше 30 прогнозируют тяжелую степень текущего депрессивного эпизода при рекуррентном типе депрессивного расстройства. Способ позволяет на основе определения биологического показателя оценивать тяжесть депрессии, целенаправленно проводить реабилитационные психотерапевтические и фармакологические мероприятия. 1 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования риска развития хронической плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных // 2540928

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных. Осуществляют забор периферической венозной крови и выделение ДНК. Проводят анализ генов факторов коагуляции 20210G/A FII, 1691G/A FV и 10976G/A FVII. В случае выявления аллеля 10976G FVII и генотипа 10976GG FVII прогнозируют повышенный риск развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных. При наличии комбинаций генотипа 20210GG FII и аллеля 10976А FVII; аллелей 20210G FII, 10976А FVII с генотипом 1691GG FV или аллелей 20210G FII и 10976А FVII прогнозируют низкий риск развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени. Изобретение обеспечивает эффективный способ прогнозирования риска развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у женщин во время беременности или до ее наступления. 3 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ ранней диагностики вентрикуломегалии при церебральной ишемии тяжелой степени у новорожденных с внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией // 2542429

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и описывает способ ранней диагностики вентрикуломегалии при церебральной ишемии тяжелой степени у новорожденных с внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией. Способ осуществляют путем определения среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата у новорожденных, где при концентрации среднемолекулярных пептидов, равной 0,785-0,815 единиц оптической плотности, диагностируют отсутствие вентрикуломегалии, а при концентрации среднемолекулярных пептидов, равной 0,816-0,844 единиц оптической плотности, диагностируют вентрикуломегалию. Изобретение позволяет осуществить раннюю диагностику вентрикуломегалии, что позволяет своевременно осуществлять лечебно-профилактические мероприятия, направленные на снижение риска чрезмерного повышения внутричерепного давления у новорожденных при церебральной ишемии тяжелой степени, обусловленной внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией. 2 табл., 3 пр.

Биомаркер для мониторинга пациентов // 2542435

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунотерапии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения у пациента с раком. Для этого пациенту вводят иммуногенную композицию, которая содержит рекомбинантный вирусный вектор, экспрессирующий in vivo весь или часть MUC-1 антигена. При этом способ анализа включает получение биологического образца от пациента после введения указанной иммуногенной композиции и измерение уровней интерферона γ в образце. Уровни интерферона γ свыше приблизительно 4 пг/мл свидетельствуют о том, что пациент демонстрирует успешный клинический выход для лечения. Изобретение позволяет оценить клинический результат лечения рака у пациента.14 з.п. ф-лы., 3 ил., 1 пр.