Способ прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге



Способ прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге
Способ прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге

 


Владельцы патента RU 2635628:

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "РОССИЙСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР РАДИОЛОГИИ И ХИРУРГИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ / ФГБУ "РНЦРХТ" Минздрава России (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно онкологии, патоморфологии, и касается способа прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге. Способ включает получение парафинового блока из биоптата опухоли, полученный парафиновый блок микротомируют, полученный срез окрашивают, сканируют и сопоставляют его с парафиновым блоком, из которого затем выделяют опухолевую ткань, после чего ее депарафинизируют, гидротируют, ферментативно разрушают в ней оболочку клеток до получения суспензии клеточных ядер, суспензию окрашивают флюорестентным красителем и проводят ДНК цитометрию. Если количество анеуплоидных ядер в полученной суспензии меньше или равно 21%, прогнозируют благоприятное течение опухолевого процесса, выше 21% - неблагоприятное. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге за счет использования в способе ДНК цитометрии прецизионно выделенной опухоли из парафинового блока. 2 пр., 2 ил.

 

Изобретение относится к медицине, а именно онкологии, патоморфологии, и может найти применение при оценке степени пролиферации клеток с целью прогнозирования течения заболевания.

Злокачественные опухоли головного мозга остаются одной из самых сложных проблем в современной онкологии. Первичные опухоли головного мозга составляют около 2% от всех выявленных случаев злокачественных новообразований. В детской онкологии они занимают второе место после лейкозов и являются наиболее распространенной формой опухолевого заболевания. По данным национального института рака США, абсолютное количество новых случаев заболевания увеличилось с 16500 в 2005 году до 23130 в 2013 году, из них опухоли глиального ряда - глиомы составляют около 80% всех злокачественных опухолей центральной нервной системы (ЦНС), из них около 40% составляют глиобластомы. По данным МНИОИ им. П.А. Герцена, в России ежегодный прирост заболеваемости опухолями головного мозга составляет 4,2%.

На настоящий момент нет сомнения в том, что применение клинических характеристик нейроонкологического заболевания в виде распространенности процесса, гистологического строения опухоли, молекулярного профиля поверхностных антигенов является недостаточным для предсказания прогноза течения заболевания и возможной эффективности назначенной терапии. Прогресс в понимании молекулярной биологии клетки, механизмах контроля клеточного деления и апоптоза, путей передачи сигнала от рецепторов в ядро привели к сознанию новых схем индивидуализации в терапии.

При современном подходе к выбору индивидуальной программы лечения больных злокачественными глиомами и прогнозирования течения заболевания наиболее перспективным является исследование молекулярно-биологических маркеров опухолевой ткани.

Пролиферативная активность является одной из основных морфологических характеристик прогрессирования и позволяет спрогнозировать эффективность лечения, развитие рецидивов, а также метастазирование по центральной нервной системе.

Одним из фундаментальных процессов в биологии является клеточный цикл - период существования клетки от момента ее образования путем деления материнской клетки до собственного деления или гибели. Все клетки организма, за исключением половых, имеют диплоидный набор хромосом и делению клеток предшествует их репликация.

Прохождение всего клеточного цикла следует по упорядоченной схеме, гарантирующей, что репликация ДНК происходит только один раз в ходе клеточного цикла и предшествует расщеплению хромосом, которое, в свою очередь, предшествует цитокинезу. На протяжении всего клеточного цикла встроенные механизмы в виде контрольных точек гарантируют полную и правильную передачу генетической информации дочерним клеткам. Обнаружение невосстановимых генетических повреждений на этих контрольных точках приводит к активации апоптоза или запрограммированной гибели клеток. Клетки, не имеющие эффективных контрольных точек, отражают геномную нестабильность, дефектную репликацию ДНК или аномальное разделение.

Количественная оценка содержания ДНК в клетке определяется методом проточной цитометрии, которая является широко известной и применяется как в онкологии, так и в фундаментальных биологических исследованиях. Вследствие протекающих жизненных процессов в клетке содержание ДНК в норме не является постоянным и зависит от фазы клеточного цикла клетки.

При патологии количество ДНК в неделящейся клетке может быть как нормальным - диплоидным, так иметь девиантные изменения - анеуплоидию в виде уменьшения - гипоплоидии или в сторону увеличения - гиперплоидии. Кратное увеличение количества ДНК гиперплоидия в виде триплоидии и тетраплоидии наиболее часто характерна при опухолевом росте. При регистрации количества ДНК учитывается не только плоидность, но и ее количество в делящихся клетках. Это обусловлено тем, что при патологии вероятнее всего присутствие в одном исследовании популяций нормальных - диплоидных и патологических анеуплоидных клеток.

Известно, что с помощью проточной-ДНК цитометрии с высокой степенью достоверности можно определить плоидность опухоли и оценить ее клеточную структуру и распределение ее по фазам клеточного цикла. Диплоидные (с нормальным содержанием ДНК) солидные опухоли отличаются более благоприятным прогнозом, чем анеуплоидные (с более высоким содержанием ДНК). Опухоли с высоким содержанием клеток в фазе синтеза клеточного цикла, как правило, характеризуются быстрым ростом и высокой метастатической активностью.

Известен метод проточной ДНК цитометрии, описанный при раках различных локализаций [Медицинская наука и образование Урала. - 2011. - №2. - С.89-91., Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. - 2006. - Т. 17, №1. - С. 29-36.], он позволяет определить плоидность патологических клеток, оценить их количество, отдельно посчитать анеуплоидные клетки в опухоли и распределить их по фазам клеточного цикла с определением индекса пролиферации. Данный метод проточной ДНК цитометрии разработан для исследования асцитной жидкости при опухоли яичников и не пригоден для исследования биоптата головного мозга у больных с опухолями ЦНС.

В качестве прототипа нами взята работа, опубликованная в J. Neurooncol. - 2005. - Т. 71. - №2. - Р. 85-89, в которой был проведен количественный анализ ДНК из биоптата глиальных опухолей. Оценивалась плоидность клеток биоптата у 64 больных с подтвержденным диагнозом - астроцитарная опухоль и была установлена прямая корреляция со степенью анаплазии. В данной работе не было получено достоверных корреляционных зависимостей выживаемости больных и плоидности клеток биоптата глиальных опухолей. На наш взгляд, это вызвано тем, что для исследования использовался весь парафиновый блок, содержащий в себе не только опухолевую, но и соединительную ткань, участки кровеносных сосудов и зоны некроза, что в свою очередь дает диагностический "шум" и меняет статистические показатели, не позволяя сделать точное заключение о прогнозе течения заболевания.

Технический результат настоящего изобретения состоит в повышении точности прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге за счет использования в способе ДНК цитометрии прецизионно выделенной опухоли из парафинового блока.

Этот результат достигается тем, что в известном способе прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге с получением парафинового блока из биоптата опухоли, согласно изобретению полученный парафиновый блок микротомируют, полученный срез окрашивают, сканируют и сопоставляют его с парафиновым блоком, из которого затем выделяют опухолевую ткань, после чего ее депарафинизируют, гидротируют, ферментативно разрушают в ней оболочку клеток до получения суспензии клеточных ядер, суспензию окрашивают флюорестентным красителем и проводят ДНК цитометрию и, если количество анеуплоидных клеточных ядер в полученной суспензии меньше или равно 21%, прогнозируют благоприятное течение опухолевого процесса, выше 21% - неблагоприятное.

Микротомирование парафинового блока, окрашивание его и сканирование полученного гистологического среза позволяет проанализировать его, выявить зону опухоли и выделить ее без участков некроза, сосудов и соединительнотканных компонентов («панч»).

Депарафинизация «панча», его гидратация и ферментативное удаление из него клеточных оболочек позволяет получить суспензию из клеточных ядер опухоли, а последующее окрашивание флюорестентным красителем обеспечивает возможность проведения ДНК цитометрии с оценкой распределения ядер по клеточному циклу.

Наш вывод о благоприятном или неблагоприятном течениях опухолевого процесса по данным ДНК цитометрии суспензии клеточных ядер сделан нами на основе предварительно проведенного анализа результатов ДНК цитометрии суспензии клеточных ядер у 30 больных с прослеженной фактической выживаемостью. На основе проведения статистического анализа анеуплоидии было выявлено, что показатель содержания анеуплоидных клеточных ядер в 21% и меньше соответствовал благоприятному течению опухолевого процесса, а выше 21% - неблагоприятному.

Для лучшего понимания сущности предлагаемого способа приводим алгоритм выполняемых действий.

У пациента проводят забор опухолевого материала с последующим изготовлением из него парафинового блока, который микротомируют и полученный срез окрашивают гемотоксилином-эозином. Окрашенный срез сканируют (Фиг. 1), выявляют зоны опухоли без участков некроза, сосудов и соединительнотканных компонентов (1). Сопоставляют полученное изображение с парафиновым блоком (Фиг. 2) с выделением зоны интереса - «панча». «Панч» депарафинизируют, гидротируют, клеточные оболочки в нем разрушают трипсином до получения суспензии клеточных ядер, которую окрашивают пропидий иодидом и проводят ДНК цитометрию. При содержании в суспензии анеуплоидных ядер в количестве 21% и менее прогнозируют благоприятное течение опухолевого процесса, а более 21% - неблагоприятное.

Сущность способа поясняется клиническим примером.

Пример 1

Больной Б., 60 лет, история болезни №1858/13. Поступил в клинику РНЦРХТ 20.05.2013 года с диагнозом: Глиобластома правой теменно-височной области, состояние после костно-пластической трепанации черепа от 25.03.2013.

Из анамнеза: заболел в марте 2013 года, когда возникли и стали нарастать головные боли гипертензионного характера. По МРТ от 25.03.2013 было выявлено объемное образование правой теменно-височной области. Был госпитализирован в НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе, 25.03.2013 выполнена костно-пластической трепанации черепа, субтотальное удаление опухоли. Затем из полученного биопсийного материала был изготовлен парафиновый блок для гистологического исследования и больной направлен в ФГБУ РНЦРХТ для диагностики и лечения.

При поступлении: был подтвержден ранее установленный диагноз.

Полученный парафиновый блок был микротомирован, после чего срез окрасили гемотоксилином-эозином. Полученный таким образом из опухоли микропрепарат отсканировали и выявили зону опухоли без участков некроза, сосудов и соединительнотканных компонентов. Затем сопоставили полученное изображение и парафиновый блок с последующим выделением «панча». «Панч» депарафинизировали, гидротировали, с помощи фермента трипсина произвели удаление клеточных оболочек. Полученные в виде суспензии клеточные ядра окрасили пропидий иодидом и провели ДНК цитометрию. По ДНК цитометрии была выявлена группа анеуплоидных ядер - 30%, что соответствует неблагоприятному прогнозу. В связи с этим больной подлежит немедленному химиолучевому лечению.

23.05.2013 была начата комбинированная лучевая терапия (изоэффективная суммарная доза излучения 60 Гр) с одновременной химиотерапией препаратами нитрозомочевины (Картмустин 150 мг, Винкристин 3 мг). Лечение перенес удовлетворительно.

14.06.2013 выписан в удовлетворительном состоянии под наблюдение районного онколога с явкой в ФГБУ РНЦРХТ через 1 месяц на контрольное обследование.

15.07.2013 больной госпитализирован на поддерживающий курс химиотерапию. Состояние средней степени тяжести. Проведен курс (2 дня) химиотерапии (Картмустин 200 мг, Винкристин 1 мг).

18.07.2013 больной был выписан. Состояние его оставалось стабильным.

21.08.2013 родственники сообщили, что больной скончался. Фактическая выживаемость со дня операционного вмешательства составила - 149 дней.

Пример 2

Больной Б., 66 лет, история болезни №2997/13. Поступил в клинику РНЦРХТ 16.09.2013 года с диагнозом: Глиобластома левой височной области, состояние после косто-пластической трепанации черепа от 28.08.2013.

Из анамнеза: заболел остро, когда на фоне общего благополучия возникла моторная афазия, с подозрением на инсульт был госпитализирован. По MPT от 18.08.2013 выявлено объемное образование левой височной доли с геморрагическим пропитыванием.

28.08.2013 была выполнена операция - костно-пластическая трепанация черепа субтотальное удаление опухоли. Затем из полученного биопсийного материала был изготовлен парафиновый блок для гистологического исследования.

Больной направлен в ФГБУ РНЦРХТ для специфического лечения.

При поступлении: был подтвержден ранее установленный диагноз. Полученный парафиновый блок был микротомирован, после чего срез окрасили гемотоксилином-эозином. Полученный таким образом из опухоли микропрепарат отсканировали и выявили зону опухоли без участков некроза, сосудов и соединительнотканных компонентов. Затем сопоставили полученное изображение и парафиновый блок с последующим выделением «панча». «Панч» депарафинизировали, гидротировали, с помощию фермента трипсина произвели удаление клеточных оболочек. Полученные в виде суспензии клеточные ядра окрасили пропидий иодидом и провели ДНК цитометрию. По ДНК цитометрии была выявлена группа анеуплоидных ядер - 17%, что соответствовала благоприятному прогнозу.

25.09.2013 в радиотерапевтическом отделении №4 ФГБУ РНЦРХТ проведена комбинированная лучевая терапия (изоэффективная суммарная доза излучения 60 Гр) с одновременной химиотерапией препаратами нитрозомочевины (Картмустин 150 мг, Винкристин 3 мг).

17.10.2013 больной выписан в удовлетворительном состоянии под наблюдение районного онколога с явкой в ФГБУ РНЦРХТ через 1 месяц на контрольное обследование.

Последующие адъювантные курсы химиотерапии (Картмустин 200 мг, Винкристин 1 мг) проводились с интервалом 1 месяц. Больной после трех курсов химиотерапии находился в удовлетворительном состоянии.

С 2014 года отмечалось общее ухудшение состояния в виде нарастания общей мозговой симптоматики. Пациент отказался от поддерживающих курсов химиотерапии.

12.07.2014 больной скончался. Фактическая выживаемость со дня операционного вмешательства составила - 474 дней.

К настоящему времени предлагаемым способом проведено прогнозирование у 20 прооперированных больных с глиобластомами головного мозга. Все больных проходили курс комбинированной химиолучевой терапии в радиологическом отделении №4 ФГБУ РНЦРХТ. У 15 больных прогноз был неблагоприятный - продолжительность жизни составила от 112 до 197 дней. У 5 больных прогноз был благоприятный - продолжительность жизни составила от 332 до 645 дней.

Предлагаемый способ впервые на основе предлагаемого прогнозирования позволяет оптимизировать тактику химиолучевого лечения.

Способ разработан в радиологическом отделении №4 ФГБУ РНЦРХТ и прошел клиническую апробацию у 20 больных с положительным результатом.

Способ прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге, включающий получение парафинового блока из биоптата опухоли, отличающийся тем, что полученный парафиновый блок микротомируют, полученный срез окрашивают, сканируют и сопоставляют его с парафиновым блоком, из которого затем выделяют опухолевую ткань, после чего ее депарафинизируют, гидротируют, ферментативно разрушают в ней оболочку клеток до получения суспензии клеточных ядер, суспензию окрашивают флюорестентным красителем и проводят ДНК цитометрию и, если количество анеуплоидных ядер в полученной суспензии меньше или равно 21%, прогнозируют благоприятное течение опухолевого процесса, выше 21% - неблагоприятное.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы. Способ по изобретению представляет собой метод по де Робертису.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для диагностики хронического панкреатита у собак в течение короткого промежутка времени, что позволяет вовремя назначить адекватное медикаментозное лечение и диетотерапию.

Изобретение относится к медицине и предназначено для ранней диагностики высокого риска поражения миокарда и резистивных сосудов у пациентов с хронической болезнью почек.

Изобретение относится к области медицины, а именно к гемостазиологии, и предназначено для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии в норме, при патологии, а также при моделировании патологии у мелких лабораторных животных на аппаратно-программном комплексе для клинико-диагностических исследований реологических свойств крови АРП-01М «Меднорд» с помощью информационно-компьютерной системы (ИКС) «Гемо-3».

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике сепсиса, вызванного грамотрицательными микроорганизмами, в отделении реанимации и интенсивной терапии.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования слабости родовой деятельности. На сроке доношенной беременности определяют показатели крови: общий белок, уровень альфа-глицерофосфатдегидрогеназы в лимфоцитах.

Изобретение относится к области медицины, в частности к неотложной медицине и травматологии. Определяют состояние пациента путем измерения параметров крови и клинических показателей.

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням, и может быть использовано для прогнозирования метаболического синдрома у больных с хронической обструктивной болезнью легких.

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для индивидуальной количественной оценки ранних проявлений неблагоприятного побочного действия кортикостероидных препаратов на иммунологические процессы в организме ребенка при терапии нефротического синдрома.

Изобретение относится к области химии, а именно к аналитической химии, электрохимии и биохимии, и предназначено для идентификации пептидов и выявления аминокислотных замен в их структурах.

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования стриктуры общего желчного протока и стеноза большого дуоденального соска у пациентов после холецистэктомии. Определяют уровень нейропептидов-дилататоров (НП-дилататоров) и при выявлении снижения уровня НП-дилататоров к 9-м суткам послеоперационного периода более чем в 1,8 раза, повышения их уровня в сроки от 1-го до 3-х месяцев после холецистэктомии более чем в 1,5 раза; при выявлении у пациентов, оперированных с КХ, осложненным МЖ, повышения уровня НП-дилататоров к 5-м суткам послеоперационного периода более чем в 1,4 раза, снижения их уровня к 30-м суткам после холецистэктомии более чем в 3 раза и повышения их уровня в период от 1-го до 3-х месяцев после операции более чем в 1,1 раза прогнозируют стриктуру ОЖП и стеноз БДС. Способ позволяет повысить достоверность прогнозирования осложнений у пациентов после холецистэктомии. 6 ил., 2 пр.
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ определения этнической принадлежности у девушек-подростков с помощью биохимических параметров крови, включающий расчет коэффициентов F1 и F2 по формулам:F1 = -7,41 - 8,96*X1 - 4,64*Х2 - 2,09*Х3 - 3,92*Х4 - 4,00*Х5 - 2,84*Х6 - 2,11*Х7 + 1,71*Х8;F2 = -6,63 + 8,47*X1 + 4,38*Х2 + 1,97*Х3 + 3,70*Х4 + 3,78*Х5 + 2,69*Х6 + 1,99*Х7 - 1,62*Х8,где X1 - уровень глюкозы, ммоль/л, Х2 - уровень альбумина, г/л, Х3 - уровень тиреотропного гормона, мЕД/мл, Х4 - уровень тироксина, нмоль/л, Х5 - уровень общего холестерола, ммоль/л, Х6 - уровень окисленного глутатиона, ммоль/л, Х7 - уровень двойных связей, усл. ед., Х8 - активность супероксиддисмутазы, усл. ед., и при значении коэффициентов F1≥F2 определяют принадлежность к тофаларскому этносу, а при значении коэффициентов F1<F2 - к восточнославянскому этносу. Проведение профилактических и лечебных мероприятий по сохранению здоровья девушек-подростков с учетом этнической принадлежности позволяет повысить их эффективность. Изобретение расширяет арсенал средств для определения этнической принадлежности. 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к применению выделенного антитела к CXCR4 в диагностике рака, что может быть использовано в медицине. В частности, раскрыты способы диагностики и/или прогнозирования онкогенного расстройства, связанного с экспрессией CXCR4, определения, является ли указанное расстройство или пациент, страдающий им восприимчивым к лечению анти-CXCR4 антителом, способы определения эффективной схемы лечения и наборы для лечения указанных заболеваний. Изобретение позволяет проводить эффективную диагностику и терапию онкогенных расстройств, характеризующихся экспрессией CXCR4. 5 н. и 13 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 7 пр.
Изобретение относится к области биохимии. Предложено биосенсорное устройство для обнаружения биологических микро- и нанообъектов, таких как бактерии и вирусы. Устройство содержит плоский пьезокерамический первый и второй элемент с плоскими электропроводящими слоями на двух противоположных сторонах каждого элемента. Причём один электропроводящий слой второго элемента присоединен к одному электропроводящему слою первого элемента, а не присоединенные друг к другу электропроводящие слои первого и второго элементов соединены с проводами для подачи или снятия электрического сигнала на устройство. На не присоединенные друг к другу электропроводящие слои первого и второго элемента также нанесен сенсорный слой. Сенсорный слой представляет собой антитела специфичные к искомому биологическому микро- или нанообъекту. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности за счёт снижения порога обнаружения биологических микро- или нанообъектов. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложены способ и система для клеточного анализа. Способ включает обеспечение группы маркированных клеток, выбор имеющей интересующее свойство клетки в группе, запись локализации клетки, направление лазерного импульса на клетку и генерирование дискретного шлейфа, введение дискретного шлейфа в индуктивно сопряженную плазму и генерирование групп соответствующих маркеру элементарных ионов, обнаружение каждой из групп элементарных ионов одновременно для каждого дискретного шлейфа с помощью массовой цитометрии и корреляцию обнаруженных элементарных ионов с интересующим свойством. Система включает опрашивающее устройство для идентификации локализации подходящей клетки, хранилище данных для записи локализации клетки, систему лазерной абляции для направления лазерного импульса на локализацию клетки и массовый цитометр для обнаружения связанного с подходящей клеткой маркера. Изобретения обеспечивают расширение области клеточного анализа по сравнению с возможностями традиционных основанных на клетке методик отображения или визуализации. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 5 ил.

Изобретение относится к медицине и касается способа диагностики инфекции M. tuberculosis complex путем внутрикожного введения препарата аллергена, способного вызывать специфическую аллергическую реакцию замедленного типа у сенсибилизированных M. tuberculosis complex реципиентов. В качестве аллергена используется препарат белка, содержащий комбинацию аминокислотных последовательностей, кодируемых генами M. tuberculosis complex из ряда EsxA, EsxB, EspK, EspJ. Изобретение обеспечивает возможность создания лекарственных средств фармакологической группы аллергенов, обладающих повышенной по сравнению с существующими аналогами специфической иммуногенностью к M.tuberculosis и близкородственным видам Mycobacterium tuberculosis complex и содержащих более широкий спектр специфических антигенных детерминант, которые отсутствуют в вакцинном штамме М. bovis BCG. 8 з.п. ф-лы, 1 пр., 2 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования рецидива инфильтративного эндометриоза малого таза. Определяют экспрессию Musashil в ядрах эпителиальных и стромальных клеток очагов эндометриоза и аутологичного эндометрия. Результаты иммуногистохимической реакции оценивают полуколичественным методом в баллах. При оценке экспрессии Musashil на 6 баллов диагностируют рецидив инфильтративного эндометриоза малого таза. Изобретение обеспечивает эффективный способ прогнозирования рецидива инфильтративного эндометриоза малого таза. 1 ил., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и описывает способ диагностики дисбиоза влагалища путем исследования вагинальной жидкости. Способ характеризуется тем, что производится смыв содержимого верхней трети влагалища физиологическим раствором и исследуется методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на состав моносахаридов и при содержании во влагалищной жидкости глюкопиранозы 0,1543-0,3850 мг/мл, D-глюкозы 0,1232-0,6818 мг/мл, D-галактопиранозы 0,0723-0,2571 мг/мл, D-маннопиранозы 0,2432-0,4186 мг/мл диагностируется дисбиоз влагалища на этапе доклинических проявлений у женщин репродуктивного возраста. Способ обеспечивает возможность ранней диагностики дисбиоза влагалища на этапе доклинических проявлений, что позволяет своевременно начать лечение, не используя токсичные медикаментозные препараты. Изобретение может быть использовано в женских консультациях и гинекологических стационарных отделениях.

Изобретение относится к области анализа материалов путем определения их физических свойств и может быть использовано в микробиологии, а также в биотехнологическом производстве. Это достигается тем, что выполняется определение значения волнового экспонента (n) для суспензии микроорганизмов в двух дисперсионных средах с различными показателями преломления, на основе полученных его значений вычисляется для данного штамма микроорганизмов в данных конкретных условиях показатель преломления бактерий (μb) и средний радиус (Rcp) микробных тел, затем, применяя асимптотическое приближение, находится коэффициент светорассеяния (Кs), с использованием которого по измеренной оптической плотности суспензии определяется концентрация микроорганизмов (N). Изобретение может быть использовано для определения концентрации микробных клеток в суспензии в микробиологических исследованиях и биотехнологическом производстве.

Изобретение относится к медицине, а именно медицинской микробиологии, акушерству, гинекологии и стоматологии. Способ исследования микробиома корня языка как прогностической модели дисбиотического состояния генитального тракта у беременных осуществляют следующим образом. Забор биоматериала с поверхности языка проводится не ранее чем через час после еды и гигиенических процедур. Делают широкий зигзагообразный мазок с поверхности всей слизистой оболочки по ширине и длине средней трети (спинки) и задней трети (корня) языка стерильным вискозным тампоном на пластиковом зонде, при этом во время забора тампон поворачивают по часовой стрелке. Делают посев на 5% кровяной агар и тем же тампоном сразу делают первичный секторный посев, выполняемый отрывистыми штрихами в пределах границ сектора, до 10-12 штрихов, на чашки Петри диаметром 100 мм, на среды Уриселект 4, маннитол-солевой агар, энтерококк-агар, Эндо и Сабуро. Первичные посевы культивируют в термостате при температуре 35°С. Учитывая, что при дисбиозе выделяется от одного до четырех видов условно-патогенных микроорганизмов и из генитального тракта, и из полости рта и что совпадение культур по титру и видам достигает 95%, результат бактериологического исследования микробиома корня языка прогнозирует дисбиоз генитального тракта беременной женщины и его тяжесть, зависящую от числа выделенных культур условных патогенов и обсемененности ими слизистых оболочек. Изобретение обеспечивает возможность опосредованной диагностики дисбиотического состояния генитоуринарного тракта у беременных женщин, отсутствие психогенных реакций, стресса у беременных на заявляемый способ; получение результата в течение 2-3 суток. 1 табл., 5 пр.
Наверх