Способ получения простагландинов

 

ОП ИКАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

46173l

Союз Соеетекнк

Соцналнстнческнх

Республнн

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельствя— (22) Заявлено 12.04.74 (21) 2011151/31-16 (51) Ч.Кл, А 61k 27/00 с присоединением заявки ¹

Государственный комитет

Совета Министров СССР оо делам иэобретеиий и открытий (32) Приоритет—

Опубликовано 28.02.75, Бюллетень М 8

Дата опубликования описания 11.09.75 (53) УДК 615.45:615.3 (088.8) (72) Авторы изобретения В, Г Гандель, P. П. Евстигнеева, P. В. Бобылев, И. К. Сарычева, И. С. Ажгихин, В. М, Печенников, Г. Ш. Орлова и Н. В. Серебрянников (71) Заявители 1-й Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова и Московский ордена

Трудового Красного Знамени институт тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОСТАГЛАНДИНОВ

Изобретение относится к медицинской промышленности, а имен но к способу получения лекарственных препаратов.

Известен епособ .получения простагландинов, согласно которому к ара?эидоновой кислоте добавляют рибосомальный фермент, инкубируют в буферной системе с рН 7,4 — 8,5 в течение часа, прерывают биоси|нтез добавлением лимон ной кислоты и смесь экстрагируют петролейным эфиром.

Целью изобретения является расширение сырьевой базы.

Для этого арахиден хроматографируют в тонком слое, элюируют этиловым спиртом, обрабатывают концентрированным раствором едкого натра в этиловом спирте, подкисляют до рН 2,0, экстрагируют бензолом, бензол отгоняют, хроматографируют с последующей обработкой выделенной арахидоновой кислоты известным образом.

Способ получения простагландинов осуществляют следующим образом.

П р и м е,р. На десять хроматографических пластинок с силикагелем наносят 2,5 г арахидена, предварителы о смешанного с 1,5 in

96%-ного этилового спирта, и хроматографируют в системе хлороформ — метанол — уксусная ?кислота — вода в соотношении 90:6:1:0,75.

По окончании хроматографирования полоску с

R > 0,66 — 0,68 срезают и элюи руют этиловым

2 спиртом. Элюат испаряют под вакуумом до полного удаления этилового спирта, и получаIoT сумму эфиров арахидоновой кислоты и других полине насыщенных высших жирных кислот в количестве 135 мг, которую затем омыляют на водяной бане с обрат ныл холодильником в течение 4 час с 10 мл этилового спирта и 20 мл 5н. раствора едкого патра.

После омыления спирт отгоняют в вакууме, остаток подкисляют 2 н. раствором НС1 до рН 2,0, после чего арахидоновую кислоту дважды экстрагируют бе1 эолом. Бензол отгоняют в вакууме и получают 100 мл арахидоновой кислоты, которую включают в биосинтез, l5 проводимый в темноте или при свете красной лампе в 40 вт.

Для осуществления биосинтеза к 100 мг арахидоновой кислоты приливают 200 мл 0,2М раствора хлорида аммония, доведенного до

20 рН 8,5 добавлением водного раствора аммиака, н 200 мл рибосомального фермента, полученного из 150 г семенников баранов, очищенных от жира и посторонних тканей и измельченных в пзмсльчптелях с последу|ощипам цснтрнфугпровяппсм с 300 мл того жс буферного раствора при 4 С и 5000 об/мин в течение

15 мип. Биосинтез осуществляют аэробно, прерывают его добавлением 0,2 М водного раствора лимонной кислоты до рН 2,5, затем

30 смесь экстрагируют дважды этнловым эфиром

3 медициноиим. Эфирные вытяжки об.ьеди няют и эфир отгоняют в вакууме до полного удаления при темпврату ре не выше 35 С.

Сухой остаток растворя1от в 10 мл метанола; 0,1 мл метанольного раствора хроматографируют на пластинке с силикагелем в системс бензол —.диоксин — уксусная кислота (20:20:11.

Зону с Rf 0,62 — 0,64 элюируют метанолом для спектрофотометри и, спектрофотометрируют и определяют максимум поглощения при 278 нм.

Биологическая активность водного раствора элюата соответствует активности простагландина Е2.

461731

Предмет изобретения

Способ получения простагландинов путем ферментативного превращения ненасыщенных высших жирных кислот в буферном растворе н экстрагирова н ия петролейным эфиром, отли«а1ои1иис тем, что, с целью, расширения сырьевой базы, арахиден хроматографируют в тонком слое, элюируют этиловым спиртом, обра10 батыва1от концентрирова нным раствором едкого патра в этиловом спирте, подкисляют до рН 2,0, экст1рагируют бензолом, бензол отгоняют и проводят ферментацию 11звест ны ми прием и ми.

Составитель С. Мал отина

Г едактор Н, Спиридонова Тскрсд О. Гуменюк Корректоры T. Фисенко и

И. Поздняковская

Заказ Хо 3260 Изд. ЛЪ 1173 Тираж 559 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров, СССР по делам изобретений и открытий

Москва, )K-35, Раушская паб., д. 4/5

МОТ, Загорскпй филиал