N-(4,6-дихлорциннабарил)-бис-d-глюкозамин, обладающий противоопухолевой активностью

 

N-(Ц,6-Диxлopциннaбapил)-биc- D-глюкозамин, формулы:сн^онСНоОНно^jr\H,oH H/TO^H.OHClс ^елобладающий противоопухолевой активностью.55ОбИзобретение относится к новому соединению - аналогу приролного антибиотика актиномицина D-N-('i,6- Лихлорциннабарил)-бис-Г)-глюкозамину формулы Iн.онCHjOHCHjOHобладающему противоопухолевой активностью.К настоящему времени описано боль-, шое число аналогов актиномицина, например бис-аминокислоты и их эфи-ры. • ""f^ •Среди этих соединений пока не. обнаружено соединений с практически ценными свойствами.Известен аналог природного актиномицина - актиноцил-бис (У-диметиламинопропил)амин, обладаю1чий проти- ' воопухолевой активностью.00ее ее

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

Я / 5 РЕСПУБЛИК сн,он

Н,OH

СН20Н

Q0

©4 Р

СН,ОН

H,0Н

Н,0Н

H NH

СО

Н Щ1

СО

О 0

Сl

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

llO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPblTHAM

ПРИ ГННТ СССР (21) 2589164/04 (22) 10.03.78 (46) 23 ° 04.92. Бюл. Н 15 (71) Ленинградский технологический институт им. Ленсовета и Онкологический научный центр АИ11 СССР (72) О.Ф. Гинзбург, Е.Н. Глибин, M,А. Кривцова, 3.П. СоФьина, С.С. Цымбалова и H.Ï. Яворская (53) 547,459 (ОРР.8) (56) Патент Великобритании N В07687, кл. 2(2) С, 1969.

Авторское свидетельство СССР

4" 2550692/04, кл. С 0! С 119/00, заявлена 07.12.77. (54) И- (4,6-ДИХЛОРЦИННАБАРИЛ) "БИСD-ГЛ10КО3АМИН, ОБЛАДА10ЩИИ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВ110СТ610 (57) N-(4,6-Дихлорциннабарил)-бисD глюкозамин, формулы:

Изобретение относится к новому соединению - аналогу природного антибиотика актиномицина D-N-(4,6дихлорциннабарил)-бис-D-глюкозамину формулы

СЦ,ОЦ (51)5 .С 07 H 5/06//A 61 К 31/70 обладающий противоопухолево" активностью обладающему противоопухолевой активностью, К настоящему времени описано боль. шое число аналогов актиномицина, например бис-аминокислоты и их эфиPbl

Среди этих соединений пока не.обнаружено соединений с практически ценными свойствами.

Известен аналог природного актино,мицина - актиноцил-бис (2I-диметиламинопропил)амин, обладающий противоопухолевой активностью. . 6Р1Р39

11елью и зобр ет ения я вляет ся ра сширение ассортимента биологическиактивных соединений, N- (4,6-Дихлорциннабарил) -бис-Dглюкозамин Формулы I получают .окислением и-хиноном N-(2-амино-3-окси4-хлорбензоил)-D-глюкозамина в спир товом растворе. Последний получают каталитическим гидрированием нитропроизводного, синтезированного из

?-амино-2-дезокси-D-глюкозамина и

2-нитро-3-окси-4-хлорбензойной кислоты.

Пример. К-(2-Нитро-3-окси4-хлорбен зоил) -Р-глюкозамин, К раствору 0, 5 r 2-нитро" 3-окси4-хлорбензойной кислоты в 5 мл ди" оксана добавляют раствор 0,473 r дициклогексилкарбодиимида в 3 мл диоксана. При этом выделяется дициклогексилмочевина и полиэфир с элементарным звеном 1

0,49 г хлоргидрата D-глюкпзамина растворяют в 2 мл воды, добавляют

1,1 г триэтиламина и в полученный раствор вносят суспензию активированного полиэфира..Реакционную. смесь перемешивают, 3 ч при комнатной температуре и оставляют на ночь. Робавляют 20 мл воды и отфильтровывают дициклогексилмочевину. Фильтрат упаривают s вакууме досуха. Остаток сушат добавлением и отгонкой в вакууме абсолютного спирта и бензола.

Сухой остаток обрабатывают несколько раз хлороформом, растворяют. в .10 мл метанола, полученный раствор наносят на колонку с силикагелем и элюируют смесью метанол-этилацетат (1:1). Собирают первую фракцию„ Пос. ле отгонки растворителя получают

0,5 r N-(2"нитро-3-окси-4-хлорбен зоил)-D-глюкозамина, хроматографичес ки .однородного в .системах 1-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:1) и 2-бутанол " 3J-ный аммиак (5:?) на пластинах Силуфол БЧ-254. Т,гл. ?10210,5 0 (разл., метанол-этилацетат); (<)," ?4,3 (с = 0,88, метанол).

Найдено,б: С 41,?R, Н 4,?О;

Cl 9,38.

1О

С ИН16C1N209 °

Вычислено,б: С 41,30; H 3,98;

Сl 9,40;

N-(4,6-Дихлорцинниабарил)-бис-Dглюкозамин

0,2 г N †(?-нитро-3-окси-4-хлорбензоил)-D-глюкозамина гидрируют в

20 мл метанола в присутствии никеля

Ренея. По окончании гидрирования отфильтровывают катализатор и к фильтрату быстро добавляют раствор

0,2 г и-хинона в 5 мл метанола. На следующий день реакционную массу разбавляют абсолютным эфиром и отфильтровывают 0,11 r N-(4,6-дихлорциннабарил)-бис-D-глюкозамина, который . тщательно промывают эфиром. N-(4,6Дихлорциннабарил)-бис-D-глюкозамин . хроматографически однороден в системах 1-бутанол-уксусная кислотавода (4:1:1) и 2-бутанол-3;;-ный аммиак (5:?) на пластинах Сульфол

14-254, Разлагается без плавления, by, g,g 447 нм (Q 2,1? 10

Найдено,3: С 45,47, Н 4,02;

С1 10?2, N8 21.

С б Н дВС1 1ч 40 ф

Вычислено,t:. С 45,25; Н 4,04;

Cl 10,25; N 8,12, Спектрофотометрическое титрование

N-(4,6"дихлорциннабарил)"бис-D-глюкозамина дезоксирибонуклеиновой кислотой в натрийфосфатном буфере (P 0,001) показало, что полученное соединение комплексообразует с ДНК (К = 2 10, В = 0,1).

Препарат был испытан на противоопухолевую активность в опытах на мышах-гибридах первого поколения и на мышах некоторых чистых линий с перевияаемыми опухолями и лейкозами.

Противоопухолевую активность изу чали на аденокарциноме 755, которая является одной из самых чувствительных экспериментальных моделей к актиномицину D, а также на лейкозах

L 1?10 и La.

Критерием противоопухолево" активности служил процент торможения роста солидных опухолей. Для его определения сравнивали скорости роста опухолей (по обьему) у леченных указанным препаратом мышей со скоростью роста в контрольной (нелеченной) группе.

Для лейкозов критерием активности служило сравнение продолжительности жизни мышей в опыте и в контроле.

Продол- Оценка житель- эффекность та жизни

Торможение роста опухоли после лечения, 3, на число дней

Разовая доза на число введений мг/кг . живого

Опухоль или лейкоз

Препарат

3 живот» ного веса

АК 755 100 5 34

150 5 64

59,5

32,0

N-(4,6-Лихлорциннабарил)-бис"Dглюкозамин

69,5

78,0

12,4

27 9

36,0 +

1210 ?00. 5

300" 5

400.5

17,0

АК 755 0,03 5

Актиномицин Э

L 1210 0,12 через дня

Техред М.Моргентал, Корректор С. Шекмар

Редактор Т. Иарганова

Заказ 2310 Тираж Подписное "ИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

5 6Р1ГЗ

Результаты проведенных испытаний представлены в таблице. Гибели животных от токсичности препаратов не наблюдается.

Из приведенных в таблице данных

5 видно, что 11- (4, 6-дихлорциннабарил)— бис-D-глюкозамин проявляет противоопухолевую а кти вност ь на пер еви ваемых опухолях мышей, равную активности актиномицина D. Препарат тормозит рост аденокарциномы 755 на 70 ; и увеличивает продолжительность жизни мышей с лейкозами L 1?10 на 357„ ц тиноми 1ин D тормозит рост этой опухоли на 631 (только непосредственный эффект) и увеличивает продолжительность жизни мышей с лейкозами

r. 1210 на 263, Как видно из таблицы, максимально переносимая суточная доза N-(4,6дихлорциннабарил)-бис D-глюкозамин почти в 5000 раз больше аналогичной дозы известного препарата актиномицина D, В