Московский ордена Трудового Красного Знамени институт тонкой химической технологии им, И.В. Ломоносова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛУТАМИЛСОДЕРЖЫЦИХ

ПЕПТИДОВ

Изобретение,,относится к улучшен-. ному способу получейия глутамилсодержащих пептидов, обладающих биологической активностью, Известен способ получения глута« 5 милсодержащих пептидов (1), например формулы Z-Тт р-Asp (Bu )-QCо(ъц )кн

«NH50C,: методом ак тивиров анных эфиров, заключающимся в тоМ, что аминокислотные остатки, один. из 10 которых глутаминовая кислота, эащи« щенная по $ -карбоксильной груйпе третичным бутильным остатком кон-денсируют методом активированных п-нитрофениловых эфиров, Защитную группу в дальнейшем удаляют либо на последних стадиях синтеза, либо при проведении азидной конденсации данного фрагмента с другим пептидом. Недостаток известного метода состоит в том, что для его осуществления необходимо получить соответствующее производное глутаминовой кислоты, что усложняет процесс в. целом и снижает выход целевого.про- 25 дукта, Глутамилсодержащие пептиды Boc-gPu-Bu) -gPu-Thr-Zeu-Met-дРи-Tyr-Zeu - яPu(ОМе) и Вос gtu(Bu )-gPu-Thr-Zeu-Met-gtu-Tyr-Zeu-gPu-Asn-Prp- 3p

-Zys (TPA) -Еу s (TFA) -Tyr-Ю е-Pro-gfy (ОМе), отвечающие участкам 61-, т

69 и 61-77 пептидной цепи цитохрома

С, были полученй конденсацией отдельных пептидных фрагментов описанным выше методом с выходом 64,8 и 56% соответственно (2) .

Бель изобретения вЂ” упрощение про- цесса получения глутамилсодержащих пептидов и увеличение выхода целевых продуктов.

Поставленная цель. достигается описываемым способом получения глутамилсодержащих пептидов путем конденсации глутамилсодержащих пептид- . ных, фрагментов, заключающемся в том, что проводят конденсацию пептидных фрагментов, содержащих незащищенную по f-êàðáoêñèëüíoé группе глутаминовую кислоту в присутствии пивалоилхлорида, растворителя и третичного основания.

Применение описываемого способа для синтеза нона- и гептадекапептидов, отвечающих участкам 61-69 и

61-77 белковой цепи цитохрома С, позволяет coKPBTHTh время проведения процесса эа счет исключения стадии снятия защитных групп и позволяет получить указанные продукты с более

715574

Формула изобретения

Составитель В, Волкова

Ре акта Л Емельянова Техред 3.Чужак КорреКТор Е. Папп

Заказ 9452/22 Тираж 495 Подпи сное

ПНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 коокеа *-35 payalcaaa наа. д. 4Е 5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 высоким выходом: 75 и 67%, соответственно.

Пример, Нонапептид, отвечающий участку 61-69 белковой цепи цит ахрама с ВОс -у и (Во )- g i!u- тЬ-- zev-ме1-(газ-.Тчг-Zeu- рИОМе, 41 мг ВОС u(Bvè)-gCu-OH растворяют в 3 мп сухого хлороформа, добавляют 9 мл пиридина, 10 мп (С Н,)д Ny охлаждают до 0 C и прибавляют 18 мл пивалоилхлорида. Через 15 мин добавляют раствор 70 е 8 мг НС 0 Wr - 2.ev - Met- g Qu-7 ur- ер-Q"eu-ОМе в хлороформе с 75 мл (С Н ) N. Спустя 40 мин при 20 С упаривают растворитель и образовавшийся нонапептид выделяют добавлением этилацетата. Перекристаллиэовывают из смеси ацетон-этнлацетат. Выход 75 мг (75%), М 0,4 (ТСХ на силуфоле в системе н-бутанолуксусная. кислота: вода 13:2;5), т.пл. 184185 С, L 3 + 15 2 + 0 6 (С 1 О, метанол), Аминокйслотный состав гидролизата: Net 1,0; (, О, 8, Zeu1,7," д Ь 3,9; ТЬ- 0,5, Нонапептид, полученный известным способам имеет т,пл,. 183-185 4С, с)в +. 15,8 + 0,6 (С 1,0, мета-. нол), Гептадекапептид (61- 77): ВОО - д Ю

t8U )-g"tr4 - 4"11г-хе1и-ме -gev-Tvr- Y4 v-gQu- т 1

"АьП вЂ” РгО- Zqe(TPA)- Zvg (TVA)-ТЯ"-Ж вЂ” РГО- . ф уОМе. получен аналогично из

72 мг ВОС-gA!(Bu )-дЫ-П г-Xeu-Net-öÜ-T54r -zeu-рй44-Он и 54 мг HCR Asn-Pro-zvs (тгя)- zvs(T pa) - тчг-ме вЂ” >ro-ð v Оие в количестве 60 мг .(67%),М 0,14 (в тех же условиях), т пл, 194-.

196 С, (р ) + 7,2 . + 0,7 (С 1,0, 50% метанол), Аминоки слотный состав. гидролиз ата: g5u 1,0; 3 е 0,99, Уз 1,99;Рго 2,4;

Ие1 0,93;Thr 1,12; Zeu 1,91;Т54г 2,0;

Азр 0,72; ДЖ 4,03.

Гептадекапептид, полученный по известной метоодике, имеет. т,пл, 194«196 С, (<3 в + 6,9 + 0,7 (С 1,0, 50% метанол), 10

Способ получения глутамилсодержащих пептидов путем конденсации глутамилсодержащих пептидных фрагмен.вЂ” тов, о т л и,ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения процесса,проводят конденсацию пептидных фрагментов, содержащих незащищенную по

2О f -карбоксильной группе глутаминовую кислоту в присутствии пивалоилхлорида, растворителя и третичного основания, 25 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1е (; korin, Z.éoroÆr,"stt!dies on Cv1осМог45е. Port Y. Svnthesis ot the protected Gecopeptide (sequence 57-66) of ВаЗО Кег ь veost (80 вЂ” 1- су1ос ю-orne. Ce

В4сроЮутегЭ )973, 12 693

2. Васильева Г.А, Тезисы докладов 1У Всесоюзного симпозиума по химии белков и пептидов, 5-8 сентября

З5 1977 г., геМинск, с.166 Синтез пептидных фрагментов цитохрома С млеко-питающих (прототип),