Способ определения фузариотоксиновв зерне злаковых культур

 

"о т Ол а о ..@, ОП ИСАН

ИЗОБРЕТЕН Ия

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61 ) Доя ол н ительное к а вт. с вид-ву— (22) Заявлено 09.11.78 (2) ) 2684247/18 -13 с присоединением заявки М— (5l)M. Кд. а 01 И 33/10

Гооударстоаииый комитет

СССР во лолам изобратеиий и открытий (28) П риоритет—

Опубликовано 23 01 81 Бюллетень Ле 3 (53) Уй К 664.64. .016.8.012.б (088.8) Дата опубликования описания 23,01.81 (72) Авторы изобретения

Л. Е. Олифсон, К. Г. Галковнч и Ш. М. Кеннна

Оренбургский государственный медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУЗАРИОТОКСИНОВ В ЗЕРНЕ

ЗЛАКОВЫХ КУЛЬТУР

Изобретение относится к определению качественных показателей злаковых культур, в частности к определению токсичности зерна.

Известен способ определения фузариотоксинов в зерне элаковых культур, включающий обработку навески зерна органическим растворителем и определение флоуресцирующей способности навескн (11.

При этом фузарнотоксины определяют не посредственно в липндах, выделенных из токсичного зерна, что затрудняет точность опреде. ления из-за присутствия в исследуемой час. ти навески балластных веществ.

Цель изобретенЫ вЂ” повышение точности определения.

Поставленная цель достигается тем, что из навески после обработки ее органическим растворителем удаляют микотоксин Т-2, ос. тавшуюся часть омыляют этиловым спиртом, выделяют из нее неомыленную фракцию, а флуоресцирующую способность определяют в последней на пластинках Силуфол.

При этом в качестве органического растворителя используют ацетон 70%-концентрации.

Сущность способа поясняется примером.

Из 100 г исследуемого образца путем исчерпывающей экстракции 70%-ным водным раствор». ром ацетона извлекается микотоксин Т вЂ” 2.

Для его концентрирования отгоняется иэ водного раствора ацетон и из оставшейся смеси дизтиловым и нетролейным эфиром 1:1 извлекается микотоксин Т вЂ” 2. Раствор высушивается безводным сернокнслым натрием, и после отгонки растворителей остаток пере19 растворяется в хлороформе, объем которого доводят до 5 мл.

Затем остаток мучкн, после извлечения иэ нее микотоксина Т-2, обрабатывается при

1S нагревании на кипящей водяной бане в колбе, соединенной с обратным холодильником, 100 мл этилового спирта в течение 1 ч, после чего спиртовый раствор отфильтровывается, 20 н спирт отгоняется. Остающийся смолообразный остаток перерастворяется в хлороформе, который отгоняется. Остаток подвергается, омьтлению 2-н спиртовым раствором едкого калия в течение 3 ч. Выделенные неомыляемые ве

Составитель М. Выражейкина

Техред,М. Рейвес Корректор A. Гриценко

Редактор О. Малец

Тираж 919 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж -35, Раушская наб,, д. 4/5

Заказ 10013/53

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 „. „ 798Я ц;зства содержат в своем софве Мсотоксин СФ-1.

Идентификация микотоксинов проводитоя методом тонкослойной хроматографии на пластинках Силуфол. Для определения микотоксина Т вЂ” 2 применяют систему растворителей:

S толуол-этилацетат-муравьиная кислота при соотношении 6: 3: 1 с последующим проявлением пластинки 20%-ной серной кислотои и прогреванием ее в сушильном шкафу при

80 С в течение 5 мин. Появление флуоресцио f0 рующего в УФ-свете (365 нм) голубоватым цветом пятна с Rf 0,24 сищетельствует о наличии в исследуемом образце микотоксина

Т вЂ” 2, Чувствительность способа 0,5 мкг в пробе.

1S

Микотоксин СФ вЂ” 1 определяется. в системе растворителей: диэтиловый эфир-петролейный эфир-уксусная кислота 50:50:2. Появление флуоресцирующего в УФ-свете (365 нм) серозеленым цветом пятна с Rf 0,17 указывает на наличие в исследуемом образце микотоксина СФ вЂ” 1. Чувствительность метода 5 мкт в пробе.

Предлагаемый способ,по сравнению с известным, является более чувствительным, так как разрушаются химические соединения продуктов жизнедеятельности других видов плесневых грибов, которые могут присутство. ф

8- 4 вать в составе липидов и мешать определению фузариотоксинов.

Формула изобретения

1. Способ определения фузариотоксинов в зерне элаковых культур, включающий обработку навески зерна органическим растворителем и определение флуоресцирующей способности навески, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения, из навески после обработки ее органическим растворителем удаляют микотоксин

Т вЂ” 2, оставшуюся часть омыляют этиловым спиртом, выделяют иэ нее неомыленную фракцию, а флуоресцирующую способность определяют в последней на пластинках Силуфол.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что в качестве органического растворителя используют ацетон 70% — концентрации.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Олифсон Л. Е. и др. Хроматографический метод определения токсичности зерна, пораженного Fusarium Sporotrichiella. — "Вопросы питания", 1975, и 2, с. 83 — 86.