Способ получения коррозионных анатоми-ческих препаратов для электронной микро-скопии

 

Союз Советскик

Социалистическик

Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (ц834437 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 13.06.79 (21) 2777874/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (51) M. Кл з

G 01 N 1/28

Гееударстеенный камитет

Опубликовано 30.05.81. Бюллетень № 20

Дата опубликования описания 05.06.81 (53) УДК 611-018 (088.8) llo делам изобретений и еткрытий

Г

O. А. Миронов, Я. Л. Караганов, С. А1 Гусев,.-, .„...>., А. А. Миронов, С. И. Катаев и Н. С. бакулева " """""

1".

t

I 1

Ивановский государственный медицинский 4нстит г" (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОРРОЗИОННЫХ АНАТОМИЧЕСКИХ

ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЭЛЕКТРОННОИ" МИКРОСКОПИИ

Изобретение относится к медицине, а именно анатомии, и может быть использовано для изучения: рельефа стенок сосудистого русла и других полостей организма в условиях нормы и патологии.

Известен способ получения коррозионных анатомических препаратов для электронной микроскопии, включающий введение в сосудистое русло полимера с последующей его полимеризацией и коррозией сосудистых тканей (Ц.

Однако известный способ не позволяет выявить все структуры сосудистого русла и получить качественные препараты.

Цель изобретения — выявление всех структур сосудистого русла и получение качественных препаратов.

Поставленная цель достигается тем, что в способе получения коррозионных анатомических препаратов для электронной микроскопии, включающем введение в сосудистое русло полимера с последующей его полимеризацией и коррозией сосудистых тканей, перед введением полимера в сосудистое русло вводят 0,3 — 0,5%-ный раствор глютарового альдегида на 5 — 10 мин и 0,2 — 0,5%-ный раствор нитрата серебра, причем в качестве полимера используют олигоэфир метакриловой кислоты, а полимеризацию проводят при температуре от 10 до 25 С в течение от 48 до 72 ч.

5 Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

При мер . У морской. свинки под нембуталовым наркозом вскрывают брюшную полость и канюлируют брюшную аорту. Сосудистую систему животного промывают полигликоном при температуре 37 С под давлением 90 мм рт.ст. против тока крови в течение 5 мин до полной отмывки крови.

Сразу после этого животное начинают промывать 0,4%-ным раствором глютаральдеги>s да, приготовленном на 0,1 М фосфатном буфере с добавлением сахарозы и 2% декстрана таким образом, чтобы осмотичность фиксатора была в пределах 320 — 350 мосм/л, затем вводят 0,2 — 0,5%-ный раствор AgNO@.

После 3-минутной фиксации под давлением

90 мм рт.ст. указанным раствором в сосудистое русло вводят олигомер смолы ТГМ вЂ” 3 (ненасыщенный эфир метакриловой кислоты и триэтиленгликоля) с добавлением 1%

834437

Составитель С.Малю "ина

Редактор М.Ткач Техред А. Бойкас Корректор М. Шароши

Заказ 4002/62 Тираж 907 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП «Патент>, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 перекиси бензоила. Вскрытие сосуды перевязывают и животное целиком погружают в сосуд, заполненный 3O/о-ным раствором глютаральдегида на 0,1 М фосфатном буфере, и в котором с помощью холодильника поддерживают температуру 15 C. Через 48 ч у крысы удаляют легкие, погружают в 20 /оный раствор КОН при 40 С. После растворения тканей (обычно через 7 дней) полученный сосудистый слепок промывают в дистиллированной воде при 40 — 50 С и обрабатывают сначала в растворе, содержащем 3% глицина, Зв /в глютамата натрия и 2в/в сахарозы, в течение 24 ч, затем в 2%-ном растворе танниновой кислоты в течение 24 ч и наконец в 2/ -ном растворе четырехокиси осмия в течение 8 ч. После высушивания образцы исследуют под сканирующим электронным микроскопом РЭМ вЂ” 200.

Предлагаемый способ позволяет получить качественные препараты и выявить все структуры сосудистого русла.

Способ может быть использован для изучения изменений поверхности сосудов и других полостей организма при различных заболеваниях, что позволяет расширить многие патогенетические звенья этих страданий.

Формула изобретения

Способ получения коррозионных анатомических препаратов для электронной мик5 роскопии, включающий введение в сосудистое русло полимера с последующей его полимеризацией и коррозией сосудистых тканей, отличающийся тем, что, с целью выявления всех структур сосудистого русла и по10 лучения качественных препаратов, перед введением полимера в сосудистое русло вводят 0,3 — 0,5%-ный раствор глютарового альдегида на 5 — 10 мин и 0,2 — 0,5 /в-ный раствор нитрата серебра, причем в качестве полимера используют олигоэфир метакриловой кислоты, а полимеризацию проводят при температуре от 10 до 25 С в течение от 48 до

72 ч.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Nowell J. А. Panglokn J„Tylek W,S.

Scannind Electron И1сгозсору of he avian

lung.Jn: SEA/1970. Progeedinds of the third аЫша1 SEM Symposium IITRI, Chicago, Ыlinois,USA, р. 249 — 259.