Изобретение относится к микробио- логической промышленности и касается получения нового вида штамма, который может найти применение при биологической очистке промышленных сточных вод ряда производств .микробиологической, коксохимической и медицинской промышленности от пиридина.

Известен штамм Nocardia sp.Ь-1, использующий пиридин в качестве источника углерода и азота Г13.

Однако этот штамм характеризуется ростом при более низких концентрациях пиридина (до 0,1 об.Ъ), а также отсутствием данных об использовании штаммом других токсичных соединений.

Известен штамм Corynebacterium

sp., утилизирующий пиридин 21 .

Однако и этот штамм характеризуется ростом штамма на более низких концентрациях пиридина (до

0,15 об.Ъ), потребностью штамма в дополнительном источнике азота, а также отсутствием данных об использовании штаммом других токсичных соединений.

Штамм Nocardia sp.KN-2 может испольэовать пиридин в качестве еди- . нственного источника углерода и азота в концентрации до 0,2 об.Ъ. Кроме этого, штамм Nocardia sp. KN-2 утилиэирует следующие соединения, встречающиеся наряду с пиридином в промышленных сточных водах: фенол, м-крезол, бенэойная кислота, 3-оксибензойная кислота, и-аминобензойная кислота, 3-фенилпропионовая кислота (в концентрации 0,1-0,4Ъ).

Штамм Nocardia sp. КМ-2 выделен из почвы с территории коксохимического предприятия.

Штамм имеет следующую характеристику.

Морфологические и культуральные признаки.

Клетки грам положительные, неподвижные, бесспоровые, кислотовариабельные, подвергающиеся морфологическому изменению во время роста: мицелий, состоящий из длинных нитей (1-1,5к6-10 мкм) фрагментиру25 ется до коротких палочек (1-1 5л2Р

3 мкм) 24-30 ч роста культуры на твердой агаризованной среде.

На мясо-пептонном агаре колонии округлые, 1-3 мм, матовые, розовые, гладкие, выпуклые, однородные, пастообразной консистенции, края

943281 формула изобретения

I 1

Составитель М.Ларина

Редактор Н.Киштулинец Техред Ж. Кастелевич КорректорИ.Муска

Заказ 5037/34 Тираж 505,. Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, .4 ровные. При старении цвет колоний меняется в розово-красный, структура становится мелкозернистой. .На мясо-пептонном бульоне вЂ” ро зовая, сухая, сплошная пленка, небольшой осадок.

Физиолого-биохимические признаки.

Строгий азроб. Оптимальная температура роста 28-ЗООС. Максимальная температура роста 45 С Оптимум 10 рН 6, 5-7, 2. Рост не ингибируется .I6,5% NaCQ. Каталазоположителен и оксидаэоотрицателен. В дополнительных факторах роста не нуждается.

Образует кислоты во время роста на 15 глюкозе, фруктоэе, галактозе, арабинозе, кснлоэе, сахарозе, мальто-. зе, манните, сорбите, дульците и глицерине. Не ассимилирует лактоэу, рафинозу и рамноэу. 20

Образует аммиак и сероводород.

Не образует ацетилметилкарбинол и индол. Нитраты восстанавливает в нитриты. Желатину не разжижает, крахмал и каэеин не гидролизует. 25

Лакмусовое молоко не свертывает.

Нуклеотидный состав ДНК,(мол.%ГЦ)

71,4.

Пример. Штамм Nocardia sp.

Kt4-2 выращивают на синтетической сре- 30 де следующего состава, г/л:

Ыа,1НРО+ 4,26

КН РО4 . 2 65

МАМБО, х 7Hq Q 0,2

MnSO4х 7Н10 0,002

FeSO4 х 7Н10 0,01

СаСЕ 0,02

Вода дистиллированная до 1 л, где в качестве источника углерода и азота используют пиридин, вносимый в концентрации 0,1-0,2 об.%. рН среды

7,0-7,2. Культивирование проводят при 28-30 С на качалке 200 об/мин

2-3 сут s зависимости-от исходной концентрации пиридина. Инокулят выращивают при тех же условиях и вносят в среду s концентрации 5-10 об.% °

Полноту потребления пиридина определяли с .помощью хроматографии хлороформенного экстракта культуральной жидкости после осаждения биомассы на хромато-масс-спектрометре и спектрофотометрнчески на спектрофотометре СФ-203 °

Предлагаемый штамм является более эффективным, чем известные, так как способен утилизировать пиридин в качестве единственного источника углерода и азота в концентрации до 0,2% (против 0,1-0,15% у известных штаммов) и одновременно ряд токсичных соединений, встречающихся в сточных водах коксохимического производства, предприятий микробиологической и медицинской промышленности.

Штамм Nocardia sp. КМ-2 (депонирован в Музее культур микроорганизмов института ВНИИгенетика, коллекционный номер ЦЧПМ 8-552), используемый для очистки промышленных сточных вод от пиридина.

Источники инФормации, принятые во внимание при экспертизе

1. G.Ê.Watson, R.Â.Cain. Nicrobia0 metabofism of the Pyridine

Ring. Л1е В1осЬеа1сай,уоцгпаР. 1975, vo8. 146, Р 1, 151-172

2. О.P Shukfa, S.Н.Kaut ° A.Constitutive Pyridine Degrading Systemin

Corynebacterium sp. The. Endian

ЮоцгшаЮ of Biochemistryand Biophysics.

1974, чоС 11, 201-207.