Устройство для количественного детектирования в плоскостной хроматографии

 

ОП ИСАНИЕ

И ЗОБРЕТЕ Н ИЯ

К АВТОРСКОМУ: СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советск на

Сощнаннстнчесннк республик

<и1987516 (61) дополнительное к авт. свнд-ву (22) Заявлено 23. 07. 81 (21) 3320161/23" 2g с присоединением занакн,яв (23) Приоритет

Опубликовано 07.01-83. Бюллетень 4% 1 а

Дата опубликовании описания 0g 01,83 (512 < т

601 1 31/08

Гееудауатваавй каиитвт

CCCP (5Зу ЙК 543.544 (088.8) ю делан изавретвиий

) и вткрытий (72) Авторы изобретения

Н.С. Трипольская и Л.И. Брут

) Всесоюзный научно" исследовательскии vityт".фармация (71) Заявитель (S4 ) УСТРОЙСТВО ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО

: ДЕТЕКТИРОВАНИЯ В ПЛОСКОСТНОЙ

ХРОИАТОГРАФИИ

Изобретение относится к плоскостной жидкостной хроматографии и может быть использовано для количественной оценки результатов разделения и.yn" равления процессом.

Известно несколько принципиальных систем для количественного детектирования в плоскостной хроматографий: оптические системы сканирования, ядер" но-физические детекторы, электро-химические. Наиболее универсальными яв" 1о ляются электро-химические методы де,тектирования. Однако ввиду отсутствия .промышленно выпускаемых приборов и технических решений, выполненных на уровне современных требований, элект- 15 рохимические методы детектирования в плоскостной .хроматографии не получили должного распространения;

Известно детектирующее устройство в плоскостной хроматографии, включающее рабочий электрод, электрод сравнения, счетный электрод, держатель электродов, систему прокладок, при2 чем электроды, установленные в корпусе детектора, соединены с преобразующей сигнал электронной схемой и через нее - с вторичными регистрирующими приборами (1 ).

К недостатком этой системы относятся нарушение целостности слоя сорбента, необратимая потеря вещества в хо" де детектирования, необходимость пред" варительно какими-либо методами локвлизировать хроматографическую зону.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности является детектор для плоскостной хроматографии, в основу которого положен принцип кондуктометрии. Устройство включает электроды, электронный блок детектора преобразо" вания сигнала и регистрирующий блок(2 ).

Однако с помощью известного устройства нельзя проводить электро"химическое сканирование плоскостной хроматографии, невозможно следить за ходом процесса разделения при движении элюата, а также невозможно количественно

987516 4 детектировать хроматограммы, на которых проводилось параллельное разделе" ние нескольких образцов.

Целью изобретения является расширение аналитических возможностей уст«

5 ройства.

Поставленная цель достигается тем, что в устройстве, включающем электро" ды, электронный блок детектора преоб" разования сигнала и регистрирующий

° блок, дополнительно введен блок про- граммного управления, один из weктро-, дов выполнен плоским, площадью, равной площади участка разделения,,второй электрод установлен с возможностью пе. ремещения и выполнен в виде системы телескопических коаксиальных патрубков, каждый из которых изолирован от всех остальных и является автономным электродом, причем подвижный электрод снабжен блоком прецизионного регу" лирования положения электрода в целом и блоком регулирования взаимного поло" жения коаксиальных патрубков, оба бло" ка функционально связаны с блоком про. граммного управления, который функци онально связан с блоком детектора преобразования сигнала.

Причем патрубки телескопической системы электродов выполнены в виде сегментов, каждый из которых может быть использован как отдельный элект" род.

На фиг. 1 изображена блок-схема предлагаемого устройства; на фиг. 2подвижный электрод, продольный разрез;З на фиг. 3 и 4 - то же, поперечный разрез; на фиг. 5 и 6 - схема электрохимического сканирования.

Устройство включает плоский электрод l, площадь которого равна площади

40 участка разделения, установленный с возможностью перемещения над поверхностью хроматограммы (тонкого слоя сор" бента, бумаги, геля и т.д. ) электрод 2 соединенный с регулятором 3 положения 45 подвижного электрода 2 и с блоком регулирования 4 взаимного положения те" лескопических патрубков 5 подвижного электрода. Блоки 3 и 4 связаны функционально с блоком 6 программного управ- о ления, который, в свою очередь, связан с блоком 7 детектора. Блок 7 детектора функционально связан с регист.рирующей системой 8. Подвижный электрод 2 состоит из телескопических пат- рубков 5, установленных с возможнос» тью перемещения друг относительно друга на изоляторах 9. Каждый из патрубков автономно соединен с блоком 7 детектора. В предпочтительном варианте каждый из патрубков 5 составлен из автономных сегментов 10, выступающих в роли самостоятельных электродов.

Устройство работает следующим образом.

Для определения размеров и местоположения хроматографической зоны на траектории движения пробы перемещают подвижный электрод до появления сигнала детектора. Затем последовательно меняя коаксиальные патрубки 5 полу" чают точное распределение концентраций вещества в хроматографической зоне вдоль поверхности сорбента. Точный контур зоны по направлению различных осей определяют, используя сегменты " электроды 10 (Фиг. 5 ). .Для выяснения распределения зоны по толщине слоя проводят измерение сопротивления участков хроматографической системы между коаксиальными патрубками 5 подвижного электрода 2 и плоским электродом 1 (фиг. 6).

В качестве вариантов устройства можно привести неподвижную установку патрубков с последовательным подклю" чением их к измерительной системе .

Другим вариантом является установка на центральный патрубок контактирующее ролика, уменьшающего трение е контакта о слой сорбента и предотвращающего нарушение целостности слоя.

П р и и е р 1. Анализ таблеток

"Дивенал", содержащих дибазола

0,02 г, папаверина гидрохлорида 0,02 r, фенобарбитала 0,015 r.

Около 0,25 г (точная навеска ) порошка растертых таблеток перемешивают в мерной колбе с 20 мл этанола.

Затем доводят объем раствора до мет" ки. После оседания наполнителей наносят на линию старта хроматографичес" кой пластинки 10 мкл приготовленного раствора. Пластинку подсушивают на воздухе. Затем проявляют хроматограмму в предварительно насыщенной каме" ре в горизонтальном положении, В результате проявления на хроматограмме образуются три. зоны с величи" нами и для дибазола 0,50, для Фенобарбитала 0,73, для папаверина гидрохлорида 0,08.

После проявления хроматограмму подсушивают на воздухе до достижения сопротивления фона 30 мОм, затем закрепляют пластинку на токопроводящей панели в герметичной. камере и производят

Т а б л и ц а 1 изируемые компоненты фенобарбитал ерина хлорид

Растворитель

Этанол

Плоскостная хроматографическая система со слоем силикагеля толщиной 0,1 мм

Хрома то графические пластины

Размер пластин, мм

70 х 150 иэо-Бутанол:ледяная уксусная кислота:вода (95:5:1ОО), верхняя фаза

Подвижная фаза

0,08

Величина R

0 50

0 73

Предел определения, мкг

О, 005

0,1 0,01

Уравнение. калибровочного графика

y=5 86+6,57х y=2,16+3 94

y=3 91+3,36х х = 0,0199

Метрологические характе" ристики х =. 0,0193 х = 0,0152

Вх = 0 0002

S 0,0004

Sx= 0,ОО03

5 987516 детектирование.,Высота кривой сопро- Пример 5. Анализ таблеток тивления, вычерчиваемой самописцем, "Папазал", содержащих папаверина соответствует содержанию вещества в -, гидрохлорида 0,03 r, дибазола 0,03 r. зоне адсорбции. Методика анализа аналогична приме"

Данные анализа приведены в табл. 1.s ру 1. Данные анализа приведены s

П р и и е р 2. Анализ таблеток табл. 5.

"Никоверин", содержащих никотиновой, В примерах 1-4 используют, подвижкислоты 0,05 г, папаверина гидрохлори- ный электрод с подвижными коаксиальда 0,02 г. ными патрубками. В примере 5-,подвижМетодика анализа аналогична приме-1Е ный электрод с контактирующим ролиРу 1. Данные анализа приведены в . ком. табл. 2. Применение изобретения обеспечива"

" p " и e p :3. Анализ таблеток ет повьи ение точности детектирования

"ТеодибавеРин", содержаЩих теобромина по сравнению с известным устройством

0,15 r, папавеРина гидРохлоРида.0,02-г, Ч в 5-10 раз и воспроизводимости опре" дибазола 0,02 г. деления s 2-8 раз (в зависимости от

Методика анализа аналогична приме" конкретных разделяемых систем ру 1. Данные анализа приведены в ; Кроме того, возникает возможность табл. 3, непрерывного сканирования одномерных

Пример 4. Анализ таблеток "Ан"- W u двумерн ж хроматограмм, возникает дипал", содержащих анальгина 0.25 r возможность концентрирования эон во дибазола Р,02 r, папаверина r ppoxno всех этих аидах плоскостного разделе" рида 0,02 г фенобар итапа 6,02 r . ния, возникает возможность оптимиза-

Методика анализа аналогична приме" ции процесса в ходе разделения, а у 1. Данные анализа приведены в >? таКже повышается надежность и адекват." абл. 4. ность анализа.

987" 16

Продолжение табл.1

Анализируемые компонента

Показатели папаверина фенобарбитал гидрохлорид дибазол

Е- 0,001, К„- 0,0008 а - 0,0005

А 5,093 A - 3,46

° еее ю юю юю еюае еаее юю аеее м «е юане

П р и м е ч а н и е: у " высота кривой сопротивления, мм;

x - -содержание вещества в зоне, мкг;

Х " найдено вещества в пересчете на сред" ний вес таблетки, мкг (среднее арифметичес-. кое ); 5„ - среднеквадратичная ошибка .сред- него арифметического; < - вероятное квадратичное отклонение среднего арифметического;

А - вероятная относительная погрешность.

Т а б л и ц а 2 нализируемые компоненты

Показатели апаверина . идрохлорид никотиновая кислота

Этанол.

Растворитель

Хроматографические плас" тины.

0С-Abufol ien kieselgei (Herck) Размер пластин, мм

50 х 150

Подвижная фаза н-Бутанол : вода 1:1, верхняя фаза

0,21

Величина R

0 57

Предел опреде" ления, мкг

0,02

Уравнение ка" либровочного графика у - -4,56+4,12х у = "0,42+7,21х х 0,0202

Ьх = 0,0003 х 0,0514

5х 0,0006

Е - 0,001

А 2,99ь

Метрологические характеристики „ = 0,0008

А = 3,483 юе еф»

987" 16

Таблица 3

«««««««««

«Ь«

Анализируемые компоненты

Показатели дибазол фенобарбитал апаверина. идрохлорид

Растворитель

Хроматографи- Плоскостная хроматографическая система со слоем силикаческие плас- геля толщиной О,1 мм тины

Размер пластин, мм

70 х 150

Подвижная фаза 153-ный раствор уксусной кислоты

Величина RF 0,19 0,32

0,54

Предел определения,.мкг 0,05

0,01

0»5

= 0,151 х = 0,01Р2 х

x=0,0210

S 0 0002 Sх - 0 002

Е = 0,0006 K, = 0,005

A = 3,44

А = 2,963

««««

Таблица 4

Анализируемые компоненты нобарбитал дибазол папаверина гидрохлорид анальгин

«ф ««««««« «ва««

803-ный этанол

РастворительХроматогра" фические пластины DC Alufol ien Ктeselgel (Herck) Размер пластин, мм

70 х .150

Подвижная фаза изо-Бутанол: 25 3 раствор аммиака:вода (l00:1:100), верхняя фаза

Величина к 0,12.i 0,83 0,35 .0,61

Уравнение ка" либровочного графика

Метрологические характеристики

Смесь соляная кислота (конц.) : этанол (1:8) у = -5,37+7,61х. у = -4,25+8,73х у = 4,19+1,35х

Sõ=О 0003 = о,оою7

3,263

987516

Продолжение абл.

Анализируемые компоненты

Показатели дибазол анальгин

0,005

Предел опре деления,мкг 0,5 у = 9,46+6,16х у = 7,95+2,04х

Иетрологичес" x=0,253 кие характеристики З,;=0,003 х 0,0193

A=3,35З

Таблица 5

Анализируемые компоненты

Показатели дибазол папаверина гидрохлорид

Растворитель

ХлороФорм

Плоскостная хроматографическая система со слоем силикагеля толщиной 0,1 мм

Размер пластин, мм

40 х90 н-Бутанол:ледяная уксусная кислота: вода (95:5:100 ), верхняя Фаза

Подвижная фаза

0,62

0,26

Величина Й

Предел определения

0,005

0,01

y=-4,36+8,11х

0,0310

Ец= 0,001

A = 4,323

4,30

Уравнение калибровочного графика р =0,006

A=,2,503

Хроматогра"

Фические плас" тины

Уравнение калибровочного граФика

Метрологичес-. кие характеристики

5 =0,0003

К,„ = 0,0006

3х= 0 0005

Ka =. 0,001 папаверина . Фенобарбитал гидрохлорид

0,005 0,1 у=-0,89+6,23х у=12,72+4,8lx х = 0,0196 х =- 0,0197

Sx=0,0002 . 5» =0,0004

Е = 0,0006 Е =0,0009

А=2 95/, А=4,524

15,21+5,39х

0,0300

0,0005

13 9875

Формула изобретения

1. Устройство для количественного детектирования в плоскостной хромато.графии, включающее электроды, элект" ронный блок детектора преобразования сигнала и регистрирующий блок, о тл и ч а ю щ е е с я тем, что, с целью расширения его аналитических воз" можностей, дополнительно введен блок 10 программного управления, один из электродов выполнен плоским, площадью равной площади участка разделения, второй электрод установлен с возможностью перемещения и выполнен в виде t$ системы телескопических коаксиальных патрубков, каждый из которых изолирован от всех остальных и является автономным электродом, причем подвижный электрод снабжен блоком прецизи- щ онного регулирования положения элект16 14 рода в целом и блоком регулирования взаимного положения коаксиальных пат" рубков, оба указанных блока функционально связаны с блоком программного управления, который функционально связан с блоком детектора преобразованИя сигнала.

2. Устройство по и. 1, о т л ич а ю щ е е с:я тем, что патрубки телескопической системы подвижного электрода выполнены в виде отдельных, изолированных друг от друга сегментов, каждый из которых является самостоятельным электродом.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент СВА Р 3669864, кл. 23"230, 12.04. 1968.

2. Выложенная заявка ФРГ .И 2141936, кл. Q 01 и 31/08, 06.09.71.

987516

47 1

-1+

// ,(/ б (/

/, / Ъг. Х

Составитель А. Тевлин

Редактор H. Лжуган Техреду С.Мигунова Корректор В. Прохненко

Заказ 102 /32 .Тираж 871 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Иосква Ж"35 Раушская-ыа6. д. 4/5 юе ююеа ю юее еееюевмев аюаеаВю ее «ю юю Савююаю 3 у 46 5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,