Способ диагностики криза отторжения при аллотрансплантации почек

 

СГЮСОБ ДИАГНОСТИКИ КРИЗА ОТТОРЖЕНИЯ ПРИ АЛЛОТРАНО ПЛАНТАЦИИ ПОЧЕК путем определения содержания ферментов в моче, отличающийся тем, что, с целью повышения достоверности ранней диагностики криза отторжения, определяют активность урокиназы в моче и при снижении ее показателей в 2-3 раза диагностируют наступление криза отторжения.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (19) (И) А

3(н А 61 В О/00 .

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ HONIHTFT СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPbITHA. (21) 3473322/28-13 (22 ) 1 6.07.82 (46) 23,L1,83. Бюл. ¹ 43. (72) Н. М. Петрунь (7 1) Киевский научно-исследовательский институт заболеваний почек и мочевыводяших путей (урологии) (53) 616. 61 (088.8) (56) 1. Мостофи и др. Почки.. L972, М., "Медицина", с. 391-399, (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КРИЗА ОТТОРЖЕНИЯ ПРИ АЛЛОТРАНСПЛАНТАЦИИ ПОЧЕК путем определения содержания ферментов в моче, о т л и.ч а ю шийся тем, что, с целью повышения достоверности ранней диагностики криза отторжения, определяют активность урокиназы в моче и при снижении ее показателей в 2-3 раза диагностируют наступление криза отторжения.

О, 1 мл оксалатной плазмы, перемешивая смесь палочкой, замечают время реакции для того, чтобы определить, из какой пробирки раствор тромбина свертывает плазму через 12-15 с.

Приготовленную смесь из растворов фибриногена и тромбина вносят в равных объемах в две чашки Петри, равномерно распределяют смесь растворов фибриногена и тромбина по внутренней поверхности чашки Петри„ Затем обе чашки

Петри оставляют при комнатной температуре до образования пленки, После этого одну чашку Петри (опытную) оставляют при комнатной температуре, а вторую (контрольную) помешают на 20 мин в сушильный шкаф при 92-95 С цля превра щения плазминогена в фибриноген, а за.— тем охлаждают при комнатной температуре.

Для осуществления предлагаемого способа у больного берут 5-10 мл утренней мочи в центрифужную пробирку и центрифугируют ее при 1500 об/мин в течение 10 мин.

Надосацочную порпию мочи поцщелачивают (до рН 7,2-7,3) для нейтрализации уропепсина, так как в противном случае уропепсин переварит урокиназу,.

Подщелачивание мочи производят добав-" лением к одной доле (например, 1 мл) мочи трех долей (например, 3 мл) борат но-солевого раствора. Затем на пленку, образовавшуюся в опытной и контрольной чашках Петри из растворов фибриногена и тромбина, наносят по одной кап-. ле мочи и,;закрыв чашки стеклянной крышкой, помешают их в строго горизонтальном положении в термостат о при 37 С на одни сутки, После этого определяют диаметр зоны лизиса в обеих чашках Петри, Активность урокиназы в моче выразкают в единицах (мм в сутки), которые вычисляют по формуле:

- )

1 ° где — 3,14;

Э и 1 - наибольшие диаметры зон лизиса в перпендикулярных направлениях.

Определив площади зон лизиса в обеих чашках Петри, вычитают величину площади зоны лизиса в контрольной чашке

Петри, Полученную разность сравнивают с разностью плошадей зон лизиса при определении ВКТНВНссТН урокиназы в моче здорового человека, которая равна в среднем 250-30 мм /сут. При снижении

2,„

1 1055480

Изобретение относится к области ме-1 дицины, конкретно к ранней диагностике кризов отторжения при трансплантации почек.

Известен способ диагностики криза» г

Ф 5, отторжения при аллотрансплантации почек путем определения глицинами динтрансферазы в сыворотке крови в послеоперационном периоде и путем исследования активности гамма-глутамилтранспептид азы и лактатдегидрогеназы в моче (Q

Однако этим способом удается выявить наступление криза отторжения пере.саженной почки, как правило, в преде15 лах одних и тех же суток наступления клинического проявления реакции отторжения трансплантата.

Е1елью изобретения является повышение достоверности ранней диагностики

20 криза отторжения при аллотрансплантации почек.

Указанная цель достигается тем что согласно способу диагностики криза отторжения при аллотрансплантации почек

25 путем определения содержания ферментов в моче определяют активность урокиназы в моче и при снижении ее показателей в 2-3 раза диагностируют наступление криза отторжения, Способ осуществляют следующим

ЗО образом.

Непосредственно перед началом проведения способа готовят смесь растворов фибриногена и тромбина. Для приготовления раствора фибриногена в объе- З5 ме одной чашки Петри 60 мг фибриногена растирают в ступке, затем добавляют 10 мл боратно-солевого буфера с рН 7,4,,смесь встряхивают до полного растворения фибриногена. Кроме того, 40 для одной чашки Петри готовят 0,2 мл тромбина, концентрацию которого подбирают таким образом, чтобы 0,1 мл раствора тромбина вместе с 0,1 мл .оксалатной плазмы крови здорового челс века вызывал свертывание плазмы крови в течение 12-15 с. Для приготовления оксалатной плазмы соединяют одну долю (например, 1 мл) 1,34 -ного оксалата натрия и 9 долей (например, 9 мл) цельной"крови и центрифугируют при

1500 об/мин в течение 2 мин. Затем в ряд пробирок помещают навески тромбина в возрастающих количествах (1-23-5-7 мг) и прибавлмот по одной доле 55, (например, по 1 мл) физиологического раствора. После этого из каждой пробир. ки переносят на предметное стекло по

1055480

Составитель В. Бруслк

Редактор С. Лыжова Техред С.Легеэа

Корректор А. Повх

Заказ 9185/7 Тираж 713

ВНИИПИ Государственного ком итета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж35, Раушская наб., д, 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проктная, 4 активности урокиназьr в два и болев pa- за по сравнению с исходным уровнем определяемой ежесуточно в различные сроки после операции, диагностирукл криз отторжения аллотрансплантата за 5-.6 сут, 5 до развития клинической картины отторжения .

Пример 1. Больной P., 1956 г. рождения. Клинический диагноз — хрони- f O ческий циффузный гломерулонефрит, хроническая почечная недостаточность 3-й степени. Показана трансплантация почки. До пересадки почки активность урокиназы в моче равнялась 100 мм /24 ч. !5 7

Больному P. произведена операция пересадки трупной почки. Спустя четыре дня отмечено резкое снижение активности урокиназы в моче, достигшее через

6 дней 35 мм /24 ч, а спустя еше 5 20

Я дней снижалась до О. В этот же день клинически проявился криз отторжения пересаженной почки.

Таким образом, у больного Р, за 7сут„р до клинического проявления криза отторжения трансплантата активность урокиназы мочи начала резко снижаться и за

5 сут до криза была в 3 раза ниже исходного уровня.

Пример 2. Больной С., 1943 г. рождения. Диагноз — хронический диффузный гломерулонефрит, хроническая почечная недостаточность 2-й степени.

Qo пересадки почки активность урокинезы мочи равнялась 20 мм /24 ч. Боль7 ному С. произведена трансплантация трупной почки. После этого активность урокинаэы постепенно росла и через

10 сут составила 40 мм /24 ч, через

17 сут - 110 мм /24 ч, через 24 сут120 мм /24 ч, через 32 сут—

130 мм /24 ч и удерживалась на. этом

2 уровне в течение 34 сут после операции (пересадки).

Затем было отмечено резкое снижение активности урокиназы в моче. Через

4 сут после. этого было выявлено по данным клинико-лабораторных исследований наступление криза отторжения пересаженной почки.

Таким образом, у больного С. эа

4 сут до клинического появления реакции отторжения пересаженной почки активность урокиназы мочи в 2,1 раза снизилась.

Способ позволяет с высокой степенью достоверности диагностировать криз оТ торжения почечного аллотрансплантата за 5-6 сут до клинических проявлений.