Способ определения кардиотропной активности веществ

 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Целью является повышение точности способа. Цель достигается тем, что готовят гистологические препараты сердца, далее на них определяют наличие ядер кардиомиоцитов с двойным лучепреломлением. Затем рассчитывают процентное отношение этих ядер к общему их содержанию на препарате. При снижении процентного содержания ядер с двойным лучепреломлением по отношению к норме определяют отсутствие кардиотропной активности у вещества, а при увеличении указанных ядер по отношению к норме определяют выраженную кардиотропную активность у вещества. Способ позволяет испытывать вещества на наличие кардиотропного действия у химических агентов.

СОЮЗ СОБЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (!9) О!) Al

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ll0 изОБРетениям и ОТКРьпиям

ПРИ ПННТ СССР (21) 4221327/28-14 (22) 01.04.87 (46) 07.03.90. Бюп. Р 9 (71) Научно-производственное объединение "Биолар", Латвийский научноисследовательский институт кардиологии и Рижский медицинский институт (72) Э.А.Пуле, В.Д.Микажан, А.А.Ауце, И.И.Брод, М.Я.Мелзобс и А.П.Скутелис (53) 616-,0.89.9 (088.8) (56) Непомнящих Л.М. Патологическая анатомия и ультраструктура сердца.

Новосибирск: Наука, 1981, с. 84-108. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРДИОТРОПНОИ

АКТИВНОСТИ ВЕЩЕСТВА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Целью

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Для тестирования веществ на предполагаемый лечебный эффект животным вводят вещества, вызывающие экспериментальный инфаркт в дозе 3 мг/кг и через 30 мин вводят испытуемое вещество на кардиотропную активность.

Введение повторяли три раза через 24 ч. Крысам контрольной группы вводят физиологический раствор

Через 48 ч после введения исследуемого вещества животных декантируют и извлекают сердечно-легочный (51)5 G 01 N 1/28, А 61 В 10/00

2 является повьш|ение точности способа.

Цель достигается тем, что готовят гистологические препараты сердца, далее на них определяют наличие ядер кардиомиоцитов с двойным лучепреломлением. Затем рассчитывают процентное отношение этих ядер к общему их содержанию на препарате. При снижении процентного содержания ядер с двойным лучепреломлением по отношению к норме определяют отсутствие. кардиотропной активности у вещества, а при увеличении указанньх ядер по отношению к норме определяют выраженную кардиотропную активность у вещества.

Способ позволяет испытывать вещества на наличие кардиотропного действия у химических агентов ° комплекс, который помещают,,в 10X ный раствор нейтрального формалина на 48 ч ° Далее участки сердца обез= воживают в спиртах возрастающих концентраций, помещают в хлороформ, смесь хлороформа с парафином и в частный парафин. Затем готовят срезы и окрашивают 0,1Х-ным толуидиновым синим на буфере макильвейна при рН 4,2.

Срезы мккроскопируют в поляризационном микроскопе. В миокарде определяют ядра с двойным лучепреломлением, а активность исследуемого вещества оценивают по процентному отношению ядер с двойным лучепреломлением к общему содержанию ядер на

1 репарате ° В каждом срезе исследуют десять полей зрения.

1548695

Формула изобретения

Способ определения. кардиотропной активности вещества путем воздействия исследуемого соединения на организм с последующим исследованием препарата миокарда, о т л и ч а юшийся тем, что, с .целью повышения точности способа, исследование проводят в поляризованном свете, при этом в миокарде определяют ядра с двойным лучепреломлением, а активность вещества оценивают по процентному отношению ядер с двойным луче- преломлением к общему содержаниЮ ядер на препарате.

Составитель Л.Стебаева

Редактор В.Данко Техред Л. Сердюкова Корректор Л.Бескид

Заказ 137 Тираж 508 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Пример 1. Крысам вводят 3 раза физиологический раствор. В группе 6 крыс. Иэ сердца после фиксации в 107.-ном растворе нейтраль5 ного формалина на уровне желудочков вырезан тотальный — поперечный фрагмент миокарда толщиной 3-4 мм. Вырезанный фрагмент залит в парафин„

Из..парафиновых блоков на микротоме сделаны серийные срезы толщиной

5-6 мкм.

После окраски в каждом срезе с

1 помощью поляризационного микроскопа ( при увеличении 500 просматривается

10 полей зрений.

В каждом поле зрения подсчитывается общее количество ядер кардиомиоцитов и количество светящихся ядер с двойным лучепреломлением - аниэотр опных.

Подсчитывают процент светящихся ядер с двойным лучепреломлением. Полученные результаты: процентное содержание ядер с двойным лучепрелом- 25 лением по группе животных 2, 17. (от

1,6 до 2,67. по каждому отдельному животному).

Пример 2. Крысам вводят и..;. следуемый препарат. В качестве пре1 парата используют адреналин. Адре налин вводят однократно н дозе 3 мг/кг подкожно. Для исследования миокарда животньм забивают через 48 ч после введения препарата. Подготовку и ис- . следование проводят аналогично при,,меру 1.

Полученные результаты: среднее ,процентное содержание ядер с. двойным лучепреломлением по группе жинотных равно О. Следовательно, снижение процента содержания ядер, обладающих эффектом двойного лучепреломления, позволяет подтвердить отсутствие тропного действия у адреналина (выражен кардиотоксический эффект).

Пример 3. Крысам, н дозе

50 мп/кг однократно внутрь нводят инозин (рибоксин). Животных забивают через 48 ч после внедения пре- парата. При просчете ядер с двойным лучепреломлением выявлено, что их процент по отношению ко всем ядрам на препарате равен 43,67.. Следовательно, данное вещество обладает выраженной кардиотропной активностью.

Способ позволяет более точно (до

907) выявить кардиотропную активность у испытуемого вещества. Может быть использован при изыскании активных в этом направлении фармакологических средств.