Способ получения циннолинкарбоксамидов или их фармацевтически приемлемых солей

 

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения циннолинкарбоксамидов общей ф-лы CH=CH-CH=CH-C=C-C(OH)=CK-N=N, где K-C(O)-NR<SB POS="POST">1</SB>R<SB POS="POST">2</SB>

R<SB POS="POST">1</SB>-H или C<SB POS="POST">1</SB> - C<SB POS="POST">4</SB>-алкил

R<SB POS="POST">2</SB>-фенил, пиридил, не-, или моно-, или дизамещенный C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкилом, или их фармацевтически приемлемых солей, обладающих иммуномоделирующей активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией циннолинкарбоновой кислоты или ее активного функционального производного с амином ф-лы NHR<SB POS="POST">1</SB>R<SB POS="POST">2</SB>, с последующим выделением в свободном виде или в виде соли целевого продукта. Новые вещества можно использовать для лечения острых и хронических инфекционных заболеваний как бактериального, так и вирусного происхождения, а также при лечении неопластических заболеваний у животных. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

„.Я0„„1563592

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4355119/23-04 (22) 01.02,88 (31) 8702288 (32) 02.02,87 (33) GB (46) 07.05.90. Бюл. VP- 17 (71) Фармиталиа Карло Эрба С.п.А (IT) (72) Джанфедерико Дория, Анна Мария

Изетта, Марио Феррари и Доменико

Трицио (1Т) (53) 547.852.7.07(088.8) (56) ЕР М - 0205272, кл. С 07 D 237/28, опублик. 17,12.85, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЦИННОЛИНКАРБОКСАМИДОВ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИEMJlEMbE СОЛЕЙ (57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения циннолинкарбоксамидов общей ф-лы

СН=СН-СН=СН-С=С вЂ (ОН)=СК-N N, где

Изобретение относится к способу получения новых производных циннолинкарбоксамидов или их фармацевтически приемлемых солей, обладающих иммуномоделирующим действием.

Цель изобретения — способ получения новых производных циннолинкарбоксамидов, по иммуностимулирующей активности превосходящих структурные аналоги, обладающих той же активностью.

Пример 1. 4-окси-Циннолин-3карбоновую кислоту (4 r) подвергают взаимодействию с SOC1 (33 r) при температуре обратного флегмообразования 2 ч. После охлаждения реакционная (Я)5 С 07 D 237/28//А 61 К 31/50

К вЂ” C(0)-NR„R; R„- Н или С„-С -алкил; R — фенил, пиридил, Не —, или моно-, или дизамещенный С, -С -алкилом, или их фармацевтически приемлемых солей., обладающих иммуномоделирующей активностью, что может быть использовано в медицине. Цель — создание новых более активных веществ указанного класса, Синтез ведут реакцией циннолинкарбоновой кислоты или ее активного функционального производного с амином ф-лы NHR,R, с последующим выделением в свободйом виде или в виде соли целевого продукта. Новые вещества можно использовать для лечения острых и хронических инфекционных заболеваний как бактериального, так и вирусного происхождения, а также при лечении неопластических заболеваний у животных. I табл. месь выпаривается досуха в вакууме, затем остаток (4-оксициннолин-3-карбонил-хлорид) суспензируют в дихлорэтане (700 мл) и подвергают взаимодействию с 3-аминопиридином (3,95 r) при перемешивании при комнатной температуре 2 ч. Осадок фильтруют и промывают дихлорэтаном и затем водой до нейтрального состояния. Полученный продукт очищают на колонке с

Si0< с использованием в качестве элюента смеси хлороформ:метанол:уксусная кислота в соотношении 95:5:1. После промывки кипящим метанолом получают

2,6 г чистого 4-окси-N-(3-пиридил)ценнолин-3-карбоксамида, т.пл. 326328 С.

1563592

НуР-спектр (диметилсульфоксид, d ),Р м.д.. 3,3 (м) (7К, С 4 и

l С-б пиридиловые протоны и фенильные протоны); 8,87 (д.) (1Н, пиридиловый протон)," 11,95 (широкий с.) (1H

CQNH- ) °

Аналогичным образом, получают следующие соединения: 4-окси-N-фенилциннолин-3-карбоксамид, т.пл. 335- 10 о

337 С; 4-окси-Ы-метил-Н-фенил-циннолин-3-карбоксамид, т.пл, 264-266 С;

4-окси-N-(4-метил-фенил)-циннолин-3о карбоксамид, т. пл. 335-337 С; 4-окси-М-(2,6-диметил-фенил)-циннолин-3карбоксамид, т.пл. 360-365 С (с разл., Пример 2. Сложный метиловый эфир 4-окси-циннолин-3-карбоновой кислоты (6 г) подвергают взаимодействию с 2-аминопиридином (16,6 г, поэтапный ввод) в полифосфорной кислоте 300 г (160 г НЗРО,1 и 140 г

P О ) при 150 С и одновременном перемешивании в течение 10 ч. После охлаждения раствора ледяной водой и 2$ нейтрализации 50Х-ным NaOH осадок фильтруют и промывают водой, После кристаллизации из диметилформамида получают 4,9 г 4-окси-И-(2-пиридил)— циннолин-3-карбоксамида, т,пл. 341343 С.

Осуществляя процесс аналогичным образом, получают следующие соединения: 4-окси-N- (4-пиридил) -циннолин3-карбоксамид т.пл. 358-360 С 4-ок9 . Э си-N- (5-метил-2-пиридил) -циинолин-3карбоксамид, т.пл. 339-341 С.

Пример 3. 4-окси-Циннолин-3карбоновую кислоту (8,8 г) растворяют в дихлорметане (600 мл)в присутствии триэтиламина (5,6 r). В этот раствор при перемешивании прикапывают этилхлорформат (6 r) разбавленный дихлорметаном (50 мл), при 0-5 С.

Смесь реагирует при данной температу- 45 ре 1 ч, затем вводят 2-метиламинопиридин (4,55 r). Реакционную смесь выдерживают при 0-5 С в течение 1 ч, затем при комнатной температуре 2 ч с одновременным перемешиванием.

Органический раствор промывают

2,5Х-ным NaHCO и водой, затем выпаривают досуха в вакууме. Остаточный продукт выпаривания очищают на колонке с БхО с использованием в качестве элюентов этилацетата, затем смеси этилацетат:метанол в соотношении 95:5. Получают 1,65 г 4-окси-Иметил-N-(Z-пиридил)-циннолин-3-карбоксамида, т.пл, 237-239 С (из этанола) .

SYP-спектр (диметилсульфоксид, d ), У, м.д.: 3,43 (с.) (ЗН, СНу);

7,0-8,3 (м,) (8Н, фенильные и пиридило вы е про тоны) .

Пример 4. Сложный метиловый эфир 4-окси-циннолин-3-карбоновой кислоты (0,6 r) подвергают взаимодействию с 2-аминопиридином (0,56 r) при перемешивании в ксилоле (120 мл) при температуре обратного флегмообразования 48 ч. В ходе данной реакции медленно отгоняется 60 мл ксилола.

После охлаждения осадок фильтруют и промывают ксилолом. Получают 0,35 r

4-окси-N-(2-пиридил) -циннолин-3— карбоксамида, т,пл. 341-343оC (из диметилформамида), Осуществляя процесс аналогичным образом, получают следующие соединения: 4-окси-N-фенил-циннолин-3-карбоксиамид, т.пл. 335-337 С; 4-окси-Н(З-пиридил)-циннолин-3-карбоксамид, т.пл. 326-327 С; 4-окси-N-(4-пиридил)-циннолин-3-карбоксамид, т.пл.

358-360 С.

Пример 5. 4-окси-N (3-Пиридил)-циннолин-3-карбоксамид растворяют путем .обработки эквивалентным количеством этилата натрия в этаноле.

Растворы выпариваются досуха и остаточный продукт выпаривания обрабатывают простым изопропиловым эфиром, затем фильтруют и в результате получают натриевую соль 4-окси-N-(3пиридил) — циннолин-3-карбоксамида, т.пл. ) 300 С. Осуществляя процесс аналогичным образом, получают следующие соединения: 4- окси-N-(2-пиридил)-циннолин-3-карбоксамид, натриевая соль, т.пл. ) 300 С и 4-окси-Nфенил-циннолин-3-карбоксамид, натриевая соль, т.пл. ) 300 С.

Биологические испытания.

Иммуномодулирующая активность соединений, полученных по предлагаемому способу доказана, например, на том факте, что эти соединения эффективны в усилении цитотоксического действия микрофагов по отношечию к опухолевым клеткам в условиях "ин витра".

Экспериментальная процедура для оценки этого действия заключается в следующем: группы мышей по 4 шт. обрабатываются путем ввода в них внутри-, брюшинно испытываемых соединений, и затем, спустя 7 дней, перитониальные

5 156 клетки собираются и высеваются на чашки в течение 2 ч при 37 С. По прошествии этого периода времени стенки промываются с целью удаления не подвергнутых связыванию клеток, затем вводятся опухолевые клетки, служащие мишенью, и инкубация. продолжается в течение 48 ч. В конце этого периода осуществляют оценку жизнеспособности клеток — мишеней колориметрическим методом и осуществляется количественная оценка при

570 нм, В таблице суммированы данные иммуностимулирующей активности некоторых соединений, отвечающих данному изобретению, получаемых согласно описанной экспериментальной прбцедуре, по отношению к опухолевым клеткам

TU5 (Eur . J. Immunol., 1982, ч. 12, р 320),совместно с данными известного соединения 4-амико-Н-фенил-циннолин-3-карбоксамид (внутренний код

FCE-К) по ЕР 205272, 3592 6

10

25 местно выращенных TU5 и обработанных эксципиентом макрофагов; О.D.3— оптическая плотность лишь от обработанных зксципиентом макрофагов, О.D.Ñ вЂ” оптическая плотность от совместно выращенных TU5 и обработанных соединением FCE макрофагов; О.D.D— оптическая плотность лишь от обработанных соединением FCE макрофагов.

Тот же самый процент ингибирования был продемонстрирован соединениями предлагаемого изобретения под кодом

FCE 24089, FCE 25008, FCE 25051, FCE

25273 и FCE 25512 в форме натриевой соли, Данные по активности, приведенные в таблице, показывают, что отдельный класс соединений в соответствии с предлагаемым способом является более активным в качестве иммуномодулирующего агента по сравнению с иввестными структурными аналогами (4 амино-3-циннолинкарбоксамидами), раскрытыми в EP 205272.

В качестве предпочтительного приЦитотоксическая акДоза внутрибрюшинно,мг/кг

Соединение тивность макрофага, Ж ингибирования

FCE 24089

FCE 25008

УСЕ 25051

FCE 25273

FCE 25512

FCE-К

71

:80

70 . 8 4

1:5

40

В таблице FCE 24089 — 4-гщ уроксиN- (2-пиридин) -циннолин-3-к арф ксамид, FCE 25008 — 4-гидрокси-N-фенил-циннолин-З-карбоксамид, FCE 25051 †4гидрокси-Б-метил-N-(2-пиридил)-циннолин-3-карбоксамид, FCE 25273 — 4гидрокси-М-(5-метил-2-пиридил)-циннолин-3-карбоксамид, FCE 25512 - 4-гидрокси-Н-(2,б-диметил-фенил)-циннолинЗ-карбоксамид, FCE-К вЂ” 4-амина-N-@eнил-циннолин-3-карбоксамид.

Цитотоксическая активность рас- . считывается как процент ингибирования роста опухолевых клеток TU5 с помощью следующей формулы: 55

% ингибирования = (О.D. А-О.D. В)- (О. С. С-О. D. D) (О. D. А-О. D. В)

О.D.À — оптическая плотность от сов мера предлагаемых соединений, обладающих иммуномодулирующим действием, можно назвать соединение 4-окси-Н(2-пиридил)-циннолин-3-карбоксамид (внутренний код FCE 24089).

Соединения, отвечаюп;ие предлагаемому изобретению, могут быть безопасно использованы в медицине.

Так, например, острая токсичность (LD«) у мьппей, вызванная 4-окси-Н-(2пиридил)-циннолин-3-карбоксамидом, определяемая (при вводе через рот) при одиночном вводе с возрастающими дозами и измеряемая на седьмой день после дня обработки, составляет более

800 мг/кг. Аналогичные данные токсичности были установлены и для других соединений, полученных предлагаемым способом. Соответственно, соединения

FCE 25008, FCE 25051, FCE 25273 и FCE

25512 имеют Щ >800 мг/кг per OS:

- Таким образом, предлагаемые соединения обладают иммуномодулирующим действием и могут использоваться, в частности, как иммуностимуляторы, например, при лечении острых и хронических инфекционных заболеваний как бактериального, так и вирусного происхождения, и при лечении неопластических заболеваний у млекопитающих животных.

1563592

Формула изобретения

Способ получения циннолинкарбоксамидов формулы

ОН

СОХ i г 1

Составитель А. Свиридова

Редактор Е.Папп Техред М.Дидык Корректор И.Пожо

Заказ !069

Тираж 324

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 или их фармацевтически приемлемых солей, где R, — водород или С„-С -алкил, R — феиил или пиридильное коль2 цо, незамещенное или замещенное одной или двумя группами С -С -алкил, отличающийся тем,что соединение формулы, где Š— карбоксигруппа или его активное функциональное производное, подвергают взаимодействию с соединением формулы

15 где R и R2 имеют укаэанные значения, с выделением целевого соединения в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой соли,