Способ определения индивидуальной чувствительности к альфа- адреноблокаторам при артериальной гипертензии

 

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано при лечении и вторичной профилактике артериальных гипертензий. Цель изобретения - повышение терапевтического эффекта. Поставленная цель достигается тем, что у пациента берут кровь из вены, добавляют в нее 3%-ный раствор этйлендиеминтетраэцетата (ЭДТА), трижды центрифугируют , полученный осадок тромбоцитов суспендируют в 2,7%-ном растворе ЭДТА, суспензию инкубируют в растворе адреналина с концентрацией 1 М при 37°С в течение 15 мин, центрифугируют, в осадке определяют концентрацию общих липидов и циклического гуанозинмонофосфата (цГМФ) и при повышении концентрации цгМФ и общих липидов елее чем на 10% по сравнению с контролем, не содержащим адреналин, и снижении концентрации общих ляпидов более чем на 10% от контрольного уровня определяют чувствительность к альфа-адреноблокаторам. Предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет точно

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5k) 5 G 01 Й 3,>/.

ГОСУДАРСТВЕН.ЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

Р РГчмцк,„ Ф1 ь . j,, f, 4 „ 1О г у

"— — -., ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ф%

ОЮ

° ю ъФ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4672837/14 (22) 03.04.89

1 (46) 07.09.91. Бюл. М 33 (71) Ростовский медицинский инсти гу (72) Б.Я.Зонис, Н.И.Голубенкова, ЭД.Бровкович, Т.В.Ткаченко и П.М, Борщев

{53) 61 6.005.4(088.8) (56) Зонис Б.Я. Типы адреноэависимости при артериальных гипертензиях и методы их диагностики. — Тезисы И! Всероссийского съезда кардиологов. Свеодловск, 1985, с.358. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУ-.

АЛЬНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ " АЛЬФА-АДРЕНОБЛОКАТОРАМ ПРИ АРТЕРИАЛЬНОЙ

ГИПЕРТЕНЗИИ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано flpk лечении и вторичной профилактике артериальных гипертензий. Цель изобретения — повышение терапевтического эффекта. Поставленная цель достигается тем, что у пациента берут кровь из вены, Изобретение относится к медицине, в частности, к кардиологии, и может быть применено при лечении и вторичной профилактике артериальных гипертензий.

Цель изобретения — повышение тера- . певтического эффекта.

Способ осуществляют следующим образом.

12,0 мл веноэной крови, взятой у больного артериальной гипертензией в силиконированные пробирки, стабилизируют 3,0 мл Зф>-ного раствора этилендиаминтетраацетат (ЭДТА). Обогащенную тромбоцитами плазму получают центрифугированием кро„„5U, 1675778 A l добавляют в нее 3 -ный раствор зтйлендиаминтетргацетата (ЗДТА), трижды центрифугируют, полученный осадок тромбоцитов суспендируют в 2,7$-ном растворе ЭДТА, суспензию инкубируют в растворе адреналнна с концентрацией 1 10 M при 37 C в

-4 течение 15 мин, центрифугируют, в осадке определяют концентрацию общих липидов и циклического гуаноэинмонофосфата (цГМФ) и при повышении концентрации цГМго и общих липидов более чем на 10 по сравнению с контролем, не содержащим

l адреналин., и снижении концентрации общих липидов более чем íà 10$ от контрольного уровня определяют чувствительность к альфа-адреноблокаторам. Предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет точно (95 случае) определять индивидуальную чувствительность к альфа-адреноблокато. рам, в результате чего повышается результативность лечения больных артериальной гипертензией. ви при 1000 об/мин в течение 20 мин, затем 4 отобранную верхнюю фазу центрифугируют еще 5-6 мин при 1500 об/мин для осажде- QQ ния примеси лейкоцитов. Чистую фракцию тромбоцитов получают иэ обогащенной тромбоцитами плазмы, центрифугируя ее 30 мин при 3000 об/мин. Полученный осадок клеток ресуспендируют в 4 — б мл 2,7 -ного раствора ЭДТ для снятия агрегации, чтобы количество клеток в суспенэии было не менее 1 10 /мл.

B четыре пробирки (2 контрольные и 2 опытные) вносят по 0,4 мл полученной суспензии тромбоцитов. В контрольные добав1 6 75-(78

Ц > — Цо . 100

Цф ляют по 0,2 мл физиологического раствора, в опытные — по 0,2 мл рас.-вора адреналина (как адреностим) лятора) в конечной концентрации 1 10 М и инкубируют в термостате при 37 С в течение 15 мин.

Определение концентрации общих липидов.

Первую серию пробиоок (контроль л опыт) центрифугируют при 3000 об/мин для получения осадка тромбоцитов, После удаления надосадочной жидкости к осадку клеток добавляют пс 0,3 мл концентрироВанной серной кислОты, нагpeeeioT на кипящей водяной бане в течение 15 мин, затем охлаждают, добавлякп по 3,0 мл фосфорноВанилинОВОГО реактива, встряхивают и сставляют в темном месте в течение 40 мин, Экстинцию раствора определяют на спектрофотометре СФ-46 пои длине волны 530 нм против холостоЙ пробы, 0,3 п кОнцентрированной серной кислоты и 3,0 мл фосфорнованилинового реактива, Расче количества липидов производят по калиброВОчной кр»ВОЙ. Степень изменения roIIIIeI<трации общих липидов рассчитывают по формуле — " — " 100,), К где Кф — концентрация л лпидов в контрольной пробе (фон);

Ко — концентрация липидов в опытной пробе (после стимуля ции), Определение циклических нуклеотиДОВ

Вторую серию пробирок (контроль и опыт) центрифугируют О мин при 3000 об/мин для получения осадка клеток. Надосадочную жидкость cr-»eaioT, к осадку тромбОЦитов добавляют 10;4-ныЙ раствор трихлоруксусной кислоты, составляют в течение 10 мин при+4"С, цзнтрифугируют .,О мин при 3000 об/мин для осаждения лиз рованных мембран, в надосадочную жидкость, содержащую экстракт циклических нуклеотидов, сливают в пластиковые пробирки и замораживают при -18 C. Определение циклическсго гуанозинмонофосфата (цГМФ) проводят радиоиммунологическим методом, используют радиоиммунные набоpbl. Степень изменения конЦентраЦИИ Циклических нуклеотидов эассчитывают по фОРМУЛО где Цф — концентрация циклических нуклеотидов в контрольной пробе (фон);

Ц вЂ” концентрация ЦН после стимуляции.

v pt

25 3Q

По изменению концентрации общих липидов и приросту ЦГ5АФ более чем на 10ф, от исходного уровня определяют показания к назначению альфа-адреноблокаторов при артериальных гипертенэиях. и:I и м е р 1. Больной С., 63 лет. В течение 1 7 EieT страдаеT rипертонической болезнью1I стадии c,"м,еeд rленно прогрессирующим течением. При биохимическом исследовании в тромбоцитах больно о выявлена следуюгдая динамика адреноэависимых

ПРОЦОССОВ, Фон После стимуляции

Общие липиды мкг/10 кл 20,8 24,8 (+19 $) цГМФ, nM/103 4,57 5,64 (+23%)

Однократный прием пирроксана В дозе

0.03 г подтверждает наличие альфа-адреноэависимости артериальной гипертензии„ так как приводит к значительному снижению артериального давления (184/94—

144/86 мм рт.ст,), Курсовое лечение пирроксаном в дозе 0,09 г/сут привело к существенному снижению артериального давления в течение 2 недель (до 146/82 мм рт.ст,), что подтверждает наличие у больнога индивидуальной чувствительности к альфа-адре: облокаторам, Пример 2, Больной С., 48 лет, в течение 8 лет лечится по поводу хронического циелонефрита с гипертензивным синдромом. Артериальная гипертенэия развилась в течение последних pex лет, Уедикаментоэная проба с пирроксаном выявила у больного альфа-адренозависимость артериальной гипертензии (до пробы—

170/100, после пробы 140/100 мм рт.ст., 187,), Назначение пирроксана по 0,09 г/сут оказалась неэффективным. Биохимическое исследование крови выявило незначительную активацию адреноэависимых процессов под влиянием адреналина:

Фон После стимуляции

Общие липиды, мкг/108 кл 82,2 74,2 (-9%) цГМФ, пМ/10 кл 8, ;3 7,81 (+4 )

Незначительное снижение концентрации лип»дав (-9,4) и увеличение концентрации ЦГМФ (4,) свидетельствуют об отсутствии альфа-адреноэависимости артериальной гипертенэии. Назначение обэидана в дозе 120 мг/сут привело к стойкому сниже-;ив артериального давления (до I40/96 мм рт.ст.), что подтверждает полученные данные о незаинтересованности альфа-адренорецепторов у конкретного больного, а также св.лдетельствует о возможности ложноположительного результата при проведении пирроксановой пробы.

1675778

Составитель И. Иванова

Редактор M. Бланар . Техред M.Mîðiåíòàë Корректор О. Кундрик

Заказ 2998 Тираж 389 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101

Клинические испытания на 42 больных показали, что у 28 больных АГ отмечается прирост концентрации общих липидов в среднем на 297ь от 49,4 + 5,4 мкг/10 кл до

63,5 + 6,8 мкг/10 кл после стимуляции ад- 5 реналином (р<0,01 по Вилкоксону). У 12 больных отмечается снижение концентрации общих липидов также в среднем на

20 от 44,5 ++ 9,4 до 31,5+ 6.6 мкг/10 кл (p< 0,01). Динамика изменения концентра- 10 ции цпт1Ф у 5ольнин ДГ состееиле е среднем 30: от 10,5 + 1.1 — фон до 13,6 + 1,5 пМ/10 ял после стимуляции (р<0,05).

Клиническое обследование и лечение

40 больных с выявленной повышенной чув- 15 ствительностью альфа-адренорецепторов в

987ь случаев (39 из 40) показало эффективность использования в терапии препаратов, обладающих альфа-блокирующим эффектом. У этих больных исходный уровень АД 20 до лечения составил 184,9/112,7 6- 4,6/2,7

we рт.ст., через 2 недели лечения альфаблокатором пирроксаном (или празозином)

АД снизилось до 164,1/99,4 3,9/2,1 мм рт.ст. 25

Предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет точно (95 случаев) определять индивидуальную чувствительно ть к альфа-адреноблокаторам, в результате чего повышается результативность лечения больных артериальной гипертензией.

Формула изобретения

Способ определения индивидуальной чувствительности к альфа-адреноблокаторам п<ри артериальной гипертензии путем клинического исследования пациента, о тл и ч а ю щ и A с я тем, что, с целью повышения терапевтической эффективности, у пациента берут кровь иэ вены, добавляютт в нее 37-ный раствор этилендиаминтетраацетата (ЗДТА), трижды центрифугируют, полувоенный осадок тромбоцитов суспендируют s 2,7ь-нам растворе ЭДТА, суспензию инкубируют в растворе адреналина с концентрацией 1 10 М при 37 С в течение 15 ми, цзнтрифугируют, в осадке определяют концентрацию общих липидов и циклическо. о гуанозинмонофосфата (цГМФ) и при повышении концентрации цГМФ и общих липидов более чем на 10 по сравнению с контролем, не содержащим адреналин, и снижении концентрации общих липидов более чем на 10 от контрольного уровня определяют чувствительность к альфа-адреноблакаторам.