Способ определения фибринолитической активности лейкоцитов
Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии. Целью изобретения является повышение точности способа определения. Поставленная цель достигается тем, что фибриновую пленку полностью покрывают средой со взвесью клеток, инкубируют 5-6 ч и в надосадочной жидкости определяют содержание продуктов деградации фибрина иммуноферментным методом. Предлагаемый способ позволяет в 1,8-2.8 раза повысить точность определения фибринолитической активности лейкоцитов по сравнению с известным способом.
CO 33 СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (и)з G 01 и ЗЗ/48
ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4697310/14 (22) 01.06.89 (46) 07.01.92. Бюл. М 1 (71) Читинский государственный медицинский институт (72) А.B,ÑòåIlàíoâ, А.В.Краденов и Н.Н.Цыбиков (53) 612.085(088.8) (56) Подосинников И.С., Бабаченко И,В., Гурина О.fl. Метод определения фибринолитичв ской активности лейкоцитов периферической крови.— Лабораторное дело",1983,М4,с,42-45. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕЙКОЦИТОВ
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гематологии для определения функциональной активности лейкоцитов, Целью изобретения является повышение точности способа, Способ осуществляют следующим образом.
Раствор фибриногена смешивают с раствором тромбина в пластиковых емкостях, тщательно пипетируют смесь, и содержимое лунки извлекают. Свертывание оставшегося фибрина происходит в течение
20-30 с. в результате чего происходит образование тонкой фибриновой пленки. Лучше всего фибриновую пленку формировать в полистероловых плоскодонных иммунологических планшетах (96 лунок емкостью flO
0,64 см ), Планшеты выдерживают в течение
20-30 мин при комнатной температуре для стабилизации геля. Из свежей цитратной .Ж, 1704078 А1 (57) Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии. Целью изобретения является повышение точности способа определения. Поставленная цель достигается тем, что фибриновую пленку полностью покрывают средой со взвесью клеток, инкубируют 5-6 ч и в надосадочной жидкости определяют содержание продуктов деградации фибрина иммуноферментным методом. Предлагаемый способ позволяет в 1,8-2,8 раза повысить точность определения фибринолитической активности лейкоцитов по сравнению с известным способом. крови стандартными методами выделяют лейкоциты. Взвесь клеток вносят в лунки, чтобы полностью покрыть фибриновую пленку, йнкубируют в течение 5-6 ч ри в
37 С. По окончании инкУбации из каждой ленки берут пробы супернатанта и определя-;ют содержание продуктов деградации @ фибрина (ПДФ). По содержанию ПДФ судят о фибринолитической активности лейкоцитов.
Пример. Раствор фибриногена чело- Ю века (17ь, 50 мкг) смешивают с 50 мкл, раствора тромбина человека активностью 50 ЕД/мл в лунке ллоскодонног иммунологичеcког0 планшета. Поcле тщательного пипетирования смеси сод ржимое лунки извлекают. Свертывание оставшегося фибрина происходит в течение
20 с. Планшеты выдерживают в течение
30 мин при комнатной температуре для стабилизации геля. Лейкоциты получают
1704078 ской активности лейкоцитов по сравнению с известным способом в 1,8-2,8 раза.
Формула изобретения
Составитель И.Иванова
Техред M.Моргентал
Корректор С.Шевкун
Редактор 0.Хрипта
":каз 60 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5
Производственно-издательскк комбинат "Патент, г. Ужгород. ул.Гагарина. 101
f10 стандэртной методике из свежей цитратной крови осаждением зритроцитов в присутствии 37,-ного раствора декстрана
Т-500 40 мин с последующим лизисом примеси зритроцитов гипотоническим раствором хлористого аммония. Клетки помещают . в среду 199. содержащую 5 бычьего сыворотачного альбчмина. Лейковзвесь в концентрации 10 в 1 мл по 0,25 мл вносят в лунки планшета и инкубируют 5 ч при 37 С.
Забирают надосадочную жидкость, и иммуноферментным методом определяют содержание ПДФ, которое равно 2,4 мкг/мл.
Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения фибринолитичеСпособ определения фибринолитической активности лейкоцитов путем инкубации клеточной суспензии на фибриновой пленке, отл и ч а ю щи 4с ятем,что.с целью
10 повышения точности способа, фибриновую пленку полностью покрывают средой со взвесью клеток, инкубируют 5-8 ч и в надосадочной жидкости определяют содержание продуктов деградации фибрина
15 иммунноферментным методом.
