Штамм гриба тriсноdеrма lignоruм для производства триходермина

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, может быть использовано для производства биопрепарата триходермина против фитопатогенных грибов и представляет собой новый штамм для получения триходермина. Целью изобретения является получение нового более продуктивного штамма, обладающего более широким спектром действия. Штамм Trichoderma lignorum T13-82 депонирован в коллекции ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии, код № 37. Штамм обладает антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным грибам Alternaria Brassicae (Berk) Sace, Alternaria radicina M.D. et E.Botrytis cinerea Pers. Зона ингибирования на 3-4 сутки соответственно равна 46,3-47,3-52,5 мм, грибы вида Fusarium oxysporum Schl, Fusarium moniliforme scheld полностью подавляет, а зона ингибирования Bacillus subtilis на 7-8 сутки равна 14,3 мм. Урожай огурцов повышается примерно на 29% по сравнению с контролем, 3 табл. Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 . А 01 N 63/04, С 12 N 1/14

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 4

О

Ql

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4602970/13 (22) 22.08.88 (46) 07,03,92. Бюл. № 9 (71) Белорусский научно-исследовательский институт защиты растений (72) С.В.Бадяй и И,Т.Король (53) 632:576.8 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

N 1208615, кл. А 01 N 63/00, 1984.

Авторское свидетельство СССР

¹ 11339900882288, кл. А 01 N 63/04, 1986. (54) ШТАММ ГРИБА TRICHODERMA

LIGNORUМ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ТРИХОДЕРМИНА (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности, может быть использовано для производства биопрепарата триходермина против фитопатогенных грибов и представляет собой новый

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для производства биопрепарата триходермина, который применяется против фитопатогенных грибов и представляет собой новый штамм для получения триходермина.

Целью изобретения является получение нового более продуктивного штамма гриба, обладающего более широким спектром действия, Штамм Trichoderma lignorum 7-13-82 получен из штамма Trichoderma lignorum

ТК-13 путем многократных пассажей через почву с последующим отбором колоний по признаку антибиотической, ферментатив„„5U 1717052 А1 штамм для получения триходермина. Целью изобретения является получение нового более продуктивного штамма, обладающего более широким спектром действия. Штамм

Trichoderma lignorum T13-82 депонирован в коллекции ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии, код М 37. Штамм обладает антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным грибам Alternaria

Brasslcae (Berk) Sace, Alternaria radicina

M.D. et E, Botrytis cinerea Pers. Зона ингибирования на 3 — 4 сутки соответственно равна

46,3-47,3 — 52,5 мм, грибы вида Fusarium

oxysporum Schi, Fusarium moniliforme

scheld полностью подавляет, а зона ингибирования Bacillus subtilis на 7-8 сутки равна

14,3 мм, Урожай огурцов повышается примерно на 29% по сравнению с контролем, 3 табл. ной активностей и продуктивности при выращивании на твердых средах. Штамм хранится в коллекции Белорусского научноисследовательского института защиты растений за № 9. Депонирован в коллекции

ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии под N. 37.

Штамм имеет следующую характеристику.

Морфолого-культуральные признаки.

При выращивании штамма при 26 С на среде Чапека колония распростертая зеленого цвета. Дерновники довольно крупные, вначале белые, на 3 — 4-е сутки зеленые. Обратная сторона колонии бесцветная.

1717052

На среде сусло-агаре (рН 5,0-6,0). Колония распростертая темно-зеленого цвета, Дерновники крупные, вначале белые, на 34-е сутки зеленые, позднее темно-зеленые, бархатистые. Обратная сторона колонии имеет светло-зеленый цвет.

Конидиеносцы в виде боковых ответвлений гиф воздушного мицелия (77,0х2,5 мк). Фиалиды бутыловидные, расположены мутовками по 2-3 или одиночно (6,4х1,4 мк).

Конидии верхушечные, овальные (3,1х2,6 мк) собраны в сферические головки, Физиолого-биохимические признаки.

Штамм растет при температуре 4-30 С, рН среды 3,2-7,2, оптимальная температура

24-26 С, рН 5,5 — 65.

Отношение к источнику углерода.

Хорошо усваивает глюкозу, сахарозу, ксилозу, лактозу. Удовлетворительно — сорбит и дульцит. Соли органическйх кислот (щавелевокислый натрий и лимоннокислый натрий) оказывают ингибирующее влияние на рост гриба в культуре.

Отношение к источнику азота.

Хорошо усваивает пептон, аспарагин, а также аминокислоты Д-лейцин, Д-валин, фосфорно-кислый аммоний, сернокислый аммоний, хлористый аммоний, удовлетворительно — азотнокислый натрий и азотнокислый калий.

Крахмал и клетчатку гидролизует, желатину разжижает, молоко пептонизирует.

Нитраты восстанавливает в нитриты.

Антагонистические свойства.

Антагонистическую активность штамма по отношению к фитопатогенным грибам определяли на 4 -ном сусло-агаре при рН 6,0 и температуре 26 С в течение 15 дней, Штамм Т13-82 обладает антагонистической активностью по отношению к

Alternaria Brassicae (Berk) Sace„Alternaria

radicina М.0. et. E„Botrytls cinerea Pers, образуя при совместном выращивании на

3 — 4-е сутки зоны ингибирования, соответственно равные 46,3 — 47,3 — 52,5, у известного штамма Б-10 — 17;5 мм.

По отношению к Fusarium oxysperum

schl., Fusarium mon! liform scheld имеет место полное нарастание колоний триходермы на колонии фитопатогенов.

Штамм Т13-82 обладает антагонистической активностью по отношению к Bacillus

subtilis, зона ингибирования соответствует

14,3 мм, у штаммов Б-10 и М-10 отсутствует, а у штамма ТК-13 — 2,6 мм, Данную активность определяли на мясо-пептонном агаре. при 26 С втечение 7 — 8 дней.

Ферментативная (целлюлолитическая)

1 активность штамма соответствует d — /dt =

= 3,4, в то время как Б-10 — 1,5, Штамм маркерных признаков не имеет.

Штамм хранят на агаровых косяках при температуре +3-4 С.

Штамм пересевают один раз в 3 мес.

Получение биопрепарата триходермина на основе штамма Trichoderma iignorum

Т-13-82.

Для получения триходермина маточную культуру гриба выращивают в бутылях по

0,5 л на стерильных отходах ячменя трихограммного производства. Затем в пластмассовые контейнеры, содержащие простерилизованные в автоклаве отходы ячменя, вносят маточную культуру из расчета

0,1 кг на 10 кг среды (производственная культура). Производственную и маточную культуру триходермы выращивают при температуре 24-26 С и увлажнении 60 в течение 3-4 сут. Получают препарат с содержанием 36 500 млрд спор с 1 кг среды, продуктивность известных штаммов 15 200-30 400.

Препарат представляет крупно-диспер- сную массу темно-зеленого цвета, содержащую споры гриба, обрывки мицелия и остатки питательной среды.

Полученный препарат применяют либо в свежем виде, либо высушивают при 3035 С до влажности 10 . Препарат хранят в течение года при 6 — 8 С.

Использование препарата в производственных условиях.

Пример 1, Триходермин испытан в производственных условиях в борьбе с корневыми гнилями огурцов (закрытый грунт). Его вносили в почву (лунки) перед высадкой рассады на постсянное место из расчета 5 гсвежеприготовленного(сырого) препарата под одно растение. Результаты приведены в табл.1.

На основании многолетных экспериментов установлено, что прибавка урожая огурца при применении триходермина; изготовленного на основе штамма Т 13-82, составляет в сравнении со штаммом Б-10

2,9 кг/м, а в сравнении со штаммом ТК13 — 0,8 кг/м .

Пример 2. Проведены испытания предложенного штамма и дана сравнительная оценка его эффективности по отношению к известным штаммам в борьбе с болезнями огурца и томата, Результаты представлены в табл.2 и 3 соответственно, 1717052

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Составитель Т, Полянская

Техред M. Моргентал Корректор А. Осауленко

Редактор М, Циткина

Заказ 824 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Дан н ые свидетел ьствуют о том, что внесение штамма Т 13 — 82 в форме биопрепарата в почву позволяет снизить пораженность огурца корневыми гнилями на 30,4, серой гнилью на 85 и обеспечить прибавку урожая 29,3 Д (табл.2).

Применение триходермина штамма Т

13-82 в борьбе с болезнями томатов способствует снижению пораженности растений корневыми и серой гнилями соответственно на 25,0 — 40,5о (, (табл.3), В результате исследований установлено, что применение штамма Т 13-82 в форме биопрепарата эффективно не только для профилактики и защиты растений от болезней, но и как фактор, стимулирующий рост и развитие растений, 3а счет стимулирующего эффекта штамма получено дополнительно 33 ц!га огурцов, Таким образом, штамм Т 13-82 обла5 дает более широким спектром действия, т.к, обладает антагонистической активностью не только по отношению к фитопатогенным грибам, но и по отношению к

Bacillus subtilis, а также позволяет пол10 учить на 0,7 кг/м больше урожая огурцов по сравнению с триходермином на основе штамма ВКПМ-262.

Формула изобретения

Штамм гриба Trichoderma lignorum

15 ВНИСХМ М 37 для производства триходермина.