Способ получения пиразолопиридинового соединения или его соли

 

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения пираэолопиридинового соединения общей ф-лы: СН CH-DH CH-ty-C (0)- 1 N, где R1 фенил, R2 пиперидин, замещенн ый низшим алкилом, окси(низшим)алкилом, или его соли, обладающего диуретическим и антигипертоническим действием , что может быть использовано в медицине . Цель - создание новых более активных веществ указанного класса, Синтез ведут реакцией соответствующей кислоты или реакционноспособного производного с соединением с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли. Новые соединения малотоксичны и по активности лучше известных аналогов. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

1795971 А3 (l9) (Il) ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ с,н

СО0Н

СООН

° 1(г() СООН (21)4356049/04 (22) 14,06. 88 (46) 15.02.93. Бюл, N 6 (31) 8713908

32) 15.06.87

33) GB (71) Фудэисава Фармасъютикал Ко, Лтд (J P) (72) Еичи Сискава, Ацуси Акахане, Хирохито

Катаяма и Такафуми (У1ицунага (J P) (56) Е Р N- 0041215, кл. С 07 D 513/04, опублик. 1981. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПИРАЗОЛОПИРИДИНОВОГО СОЕДИНЕНИЯ ИЛИ ЕГО

СОЛИ (57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения пираИзобретение относится к способу получения новых азотсодержащих гетероциклических соединений, в частности, пираэолопиридина, обладающих диуретическим и антигипертоническим действием;

Целью изобретения является способ получения новых производных пиразолопиридина, проявляющих более эффективное диуретическое и антигипертоническое действие, чем известные структурные аналоги, обладающие тем же видом биологического действия.

Пример1. (si)s С 07 D 471/04 // А 61 К 31/44 (С 07 0 471/04, 221:00, 231:00) эолопи и инового ое инения общейф-лы. сн = сн-сн = сн- — = с сн=сн-с о

R<) — CR1=N,ãäåR1=фенип, =пиперндин, замещенный низшим анкином, окон(низшим)алкилом, или его соли, обладающего диуретическим и антигипертоническим действием, что может быть использовано в медицине, Цель — создание новых более активных веществ указанного класса, Синтез ведут реакцией соответствующей кислоты или реакционноспособного производного с соединением R>H с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли, Новые соединения малотоксичны и по активности лучше известных аналогов. 2 табл, 1,04 г изобутилхлорформиата по каплям при температуре -200С с перемешиванием добавляют в смесь 2,0 r 3-(2-фенилпираэо- К) ло/1,5- а/пиридин)-3-акриловой кислоты (Я (транс-изомер) с 0.766 г триэтиламина в 0

40 мл хлористого метилена и 10 мл тетрагидрофурана. После перемешивания при той же самой температуре в течение 30 мин. в смесь при температуре -20 С добавляют по каплям раствор 0,942 r 2-этилпиперидина в,3

10 мл тетрагидрофурана и всю смесь пере- (ф ) мешивают при температуре от -20 до 10 С в течение 2 ч. Далее эту смесь нагревают до комнатной температуры и выпаривают в вакууме. К остатку добавляют насыщенный раствор бикарбоната натрия и смесь дважды экстрагируют 50 мл хлороформа. Объединенные экстракты промывают 50 мл насыщенного рассола, сушат над сульфатом

1795971 магния и выпаривают в вакууме. Остаток хроматографируют на 40 г силикагеля с использованием хлороформа в качестве элюента. Фракции, содержащие целевое соединение, объединяют и выпаривают в вакууме с получением 1,30 г 1-/3-/2-фенили иразоло/1,5-е/пи ридин-3-ил/-акрилоил/2-этилпиперидина (транс-изомер) в виде маслоподобного продукта, Это соединение подвергают конверсии в полуфумарат с получением 0,96 г желтых кристаллов 1-(3-/2-фенилпиразоло/1,5-е/пиридин-3-ил/-акрилоил)-2-этилпипериди нполуфумарата (транс-изомер). Т.пл. 121122 С (из смеси н-гексана с диэтиловым эфиром).

ИК-спектр (вазелиновое масло), см

1705, 1635, 1580. 1530; 1510.

ЯМР-спектр (DMCO-бв) д, м.д.): 0,77 (ЗН, т, 7,0 гц), 1,30 — 1,83 (8Н, м.), 6,66 (1 Н, с.), 6,83 (1H, д., 16.0 гц), 7,00 — 7,83 (8Н, м.), 8,07 (1Н, д.. 9,0 гц), 8,77 (1H. д., 7,0 гц), Данные элементного анализа для

С2з Н25йзО 0,5С4Н404, Вычислено: С 71.92: Н 6,52; N 10,06.

Найдено: С 72,01; Н 6,60; N 10,03.

П ример2.

CH=CH-COOH

При охлаждении льдом 1,79 r хлористого тионила по каплям добавляют в перемешиваемую смесь 2,0 г 3-(2-фенилпиразоло/1,5-е/ пиридин-3-ил)-акриловой кислоты (транс-изомер) с 4 каплям N,N-диметилформамида в 10 мл хлористого метилена.

После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч растворитель выпаривают в вакууме, получая производное хлорангидрида кислоты, С другой стороны, при охлаждении льдом и 6,80 r бис-(триметилсилил)-ацетамида по каплям добавляют 6,48 /R/-2- (2-оксиэтил)-пиперидина. Смесь нагревают до комнатной температуры в течение 20 мин при перемешивании.

Затем в смесь добавляют 1,53 r триэтиламина и 40 мл хлористого метилена. В эту смесь далее при охлаждении льдом добавляют вышеуказанное производное хлорангидрида кислоты и всю массу перемешивают гри комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель упаривают в вакууме и в смесь добавляют 10 мл 1н раствора соляной киглоты и 10 мл этилацетата.

И.a

/2S/-1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-а/пи

40 ридин-3-ил)-акрилоил/-2-(2- оксиэтил)-пиперидин/транс-изомер), т.пл. 98 — 99,5 С. (а)р =. -41,20 (с — 1,0, 95 -ный этанол).

ИК-спектр(хлороформ), см : 3330, 1635, 45 1570, 1520.

ЯМР-спектр (СОС!з) д, м.д.: 1,17 — 2,20 (8Н, м.), 2,67 — 4,00 (4Н, м.), 2,73 (1Н, с), 4,675,10 (1 Н, м.), 6,70 (1 Н, д., 16,0 гц), 6,89 (1H, т., 7;0 гц), 7,25 — 7,87 (7Н, м.), 8,00 (1Н, д., 16,0 гц), 8,57 (1 Н, д., 7,0 гц), Данные элементного анализа для

С2ЗН25М302:

Вычислено; С 73,58; Н 6,71; N 11.18.

Найдено: С 73.68; Н 6,81: N 11,21, Масс-спектр: 375 (M j, Пример 4. СО!,!

ОН (Г )

Полученную смесь перемешивают в течение 30 минут, а затем добавляют 12 мл 1Н раствора окиси натрия и экстрагируют 60 мл хлористого метилена. Экстракт сушат над

5 сульфатом магния и упаривают растворитель. Остаток хроматографируют на 40 r силикагеля с использованием смеси хлористого метилена с этилацетатом в соотношении 5:1. Фракции, содержащие целе10 вое соединение, объединяют и упаривают в вакууме, с получением 1,83 r (2R)-1-/3-(2-фенил пиразоло/1,5-а/пиридин-3-ил)-акрило ил/2-/2-оксиэтил/- пиперидина (транс-изомер), т.пл 145 — 146,5 С, 15 (а)„ =+ 39,61 (c — 1,04, 95 -ный эта нол).

ИК-спектр (вазелиновое масло), см:

-1.

3350,.1640, 1575, 1520 см 1.

ЯМР-спектр (СОС!з) д, м.д.: 1,23-2,20

20 (8Н, м), 2,63 — 3,90 (4Н, м.), 4,00 — 4,40 (1Н, м), 4,67 — 5,10 (1Н, м.), 6,63 (1H, д.. 16,0 гц), 8,50 (1 Н, т., 7,0 гц), 7,77 (7Н, м,), 7,92 (1 Н, д., 16,0 гц), 8,47 (1Н, д., 7,0 гц).

Данные элементного анализа для

25 C23H25N302:

Вычислено: С 73,58; Н 6,71; N 11,19.

Найдено: С 73,98; Н 6,76; N 11,24.

Масс-спектр: 375 (М++).

В соответствии с процедурой, аналогичной вышеизложенной в примере 2, получили нижеследующие соединения (примеры

3 — 18).

ПримерЗ.

G0N

1795971

Пример 7. (2RS)-1-/3-(2-Фенил пиразоло/1,5-а/пи ридин-3-ил)-акрилоил/2-/2- оксиэтил/-пиперидин/ (транс-изомер), т.пл. 140,5—

141,50 С.

ИК-спектр (eàçåëèíoâoå масло), см: 5

3280, 1625, 1560, 1510.

ЯМР-спектр (СОС!3) д, м.д,: 1,17-2,20 (8Н, м.), 2;54 — 3,90 (5Н, м.), 4,67 — 5,10 (1Н, м.), 6,64 (1 Н, д„6,5 гц), 6,85 (1 Н, д.т ., 7,0 и 1,0 гц), 7,15-7,77 (7Н, м,), 7.92 (1Н, д., 16 5 гц), 8,47 10 (1 Н, д., 7,0 гц).

Данные элементного анализа для

С23Н25ЙЗО2:

Вычислено: С 73.58; Н 6,71; N 11,19.

Найдено: С 73,50; Н 6,56; Й 11,14. 15

Масс-спектр: 375 (M+).

Пример 5.

CON

25

1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-а/пириди н-3-ил)акрилоил/-4-/2-оксиэтил/- пипери30 дин (транс-изомер).

Температура плавления 89-93 С, ИК-спектр (вазелиновое масло), см

3400, 1640, 1590, 1530, 1510.

ЯМР-спектр (СОС13) д, м.д.: 0,93 — 2,30

35 (7Н, м.), 2,47-3,28 (2H, м.), 5,40 (2 Н, т., 6 Гц), 3,90 — 5,08 (2Н, м.), 6,70 (1Н, д., 15 Гц), 6,90 (1 Н, т,д., 7 и 1 Гц, 7,22-7,8 (6Н, м,), 8,95 (16, д., 15 Гц), 8,53 (1Н. д., 7Гц), Масс-спектр: 375 (М ).

40. Данные элементного анализа для

СгзНг5ЙзО:

Вычислено, : С 73,58; Н 6,71; N 11,19.

Найдено, : С 73,44; Н 6,70; N 10,95.

П ример10. нсн

CON

50 1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-а/пириди н-3-ил)-акрилоил/-2,2,6,6- тетраметилпиперидин (транс-изомер), Температура плавления: 158-159 С.

ИК-спектр (вазелиновое масло). см

55 1640, 1580, 1510.

ЯМР-спектр (СОС13) д, м.д.: 1.45 (12Н, с.), 1,78 (6Н, с.), 6,46 (1 Н, д., 15 Гц), 6,72 (1Н, т., 7 Гц), 7,08-7,80 (8Н, м), 8,48 (1Н, д,. 7 Гц).

Вычислено, : С 77,49; Н 7,54; N 10,84, 1-/3-(2-Фенил пиразоло/1,5-а/пириди н-3-ил)акрилоил/-2- метилпиперидин (т ра н с-изомер).

И К-спектр (хлороформ), см: 1640, 1590, 1515.

ЯМР-спектр (СОС!3) д, м.д,: 1,27 (ЗН, д., 6 гц), 1,42-1,97 (6Н. широкий), 2,80 — 3,25 (1 Н, м.), 4,00-4,85 (2 Н, м.), 6,66 (1H. д., 16 гц), 6,87 (1H, т.д., 7 гц и 1 гц), 7,21-7,83 (7Н, м.), 7,93 (1Н, д., 16 гц), 8,52 (1Н, д., 7 гц).

Данные элементного анализа для

С22 Н23ЙЗО:

Вычислено, : С 76,49; Н 6,71; 12,16.

Найдено, : С 75 48; Н 6.80: 12,06.

Масс-спектр; 345 (M ).

П римерб.

1-/3-(2-Ф енилпиразоло/1,5-а/пириди н-3-ил)акрилоил/-2- пропилпиперидин (транс-изомер).

ИК-спектр (вазелиновое масло), см:

1640, 1580, 1510.

ЯМР-спектр (СРС1з) д, м.д... 0,88-1,97 (13Н, м), 1,66-3,24 (1H,.øèðoêèé). 3,70-5,20 (2Н, широкий), 6,72 (1 Н, д„16 гц)„6,92 (1Н, т.д., 7 и 1 гц), 7,23-7,88 (7Н, м.), 8,00 (1Н, д., 16 гц), 8,60 (1 Н, д., 7 гц).

Вычислено, : С 77,18; Н 7,29; N 11,25.

С24 Н27Й30.

Найдено, : С 76,46; Н 7,19; N 11,13.

Масс-спектр: 373 (M j.

1-/3-(2-Фен илпиразоло/-1,5-а/пирид ин-3-ил)акрилоил/-2- оксиметил пиперидин (транс-изомер).

Температура плавления: от 143 до

1450 С.

ИК-спектр (вазелиновое масло) см:

3320, 1635, 1575,. 1500.

ЯМР-спектр(СОС13)д, м.д.: 1.64(6Н, широкий), 2,70-3,33 (1Н, широкий), 3,33 — 4,33 (5Н, м.), 4,33 — 4,66)1Н, широкий), 6,75(1 Н, д., 16 гц), 6,78 (1 Н, т., 6 гц); 7,13-7,86 РН, м,), 7,94 (1Н, д., 16 Гц), 8,45 (1 Н, д., 6 Гц).

Масс-спектр: 361 (M J.

Вычислено. : С 71,33; Н 6,25; N 11,34.

СггНгзйзОг 1/2Н20

Найдено,g: С 72,11; H 6,31: N 11,38;

Пример8. сомД

1795971

С25Н29ИЗО, Найдено, (,: С 77,75; Н 7,49; N 10,74.

Пример 11, 1-(3-(2-Фенилпиразоло/1,5-а/пиридин-3-ил) акрилоил/-2-этилпиперидин (цис-изомер).

ИК-спектр (пленка), см: 1630, 1600, 1520, П ример12.

1-/3-(2-Фенил пиразоло/1,5-а/пириди н-3-ил)акрилоил-3-этилпиперидин (трансизомер).

ИК-спектр (хлороформ), см: 1640, 1590.

ЯМР-спектр (CDCI3), д, м,д,: 0,90 (ЗН, т., 7,5 Гц), 1,10 — 2,10 (7Н, м.), 2,20 — 3,10 (2Н., м.), 3,70-4,20 (2Н, м.), 6,68 (1Н, д., 18 гц), 6,85 (1 Н, т., 8,0 Гц), 7,27 (1Н, т., 8,0 Гц), 7,30-7,54 (ЗН, M.), 7,54 — 7,82(ЗН, м.),7,93(1 Н, д., 18 Гц), 8,47 (1Н, д., 8 Гц), П ример13.

СОИ )-С,Н5

1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-e/ïèðèäè н-3-ил)-арилоил/-4- этилпиперидин (трансл.зомер).

ИК-спектр (хлороформ) cM: 1635, 1590, 1520.

AMP-спектр (С С!з) м,д: 0,89 (ЗН, т., 6,2

Гц), 1,03 — 1,47 (4Н, м,), 1,72 (2 Н, д., 11 Гц), 2,78 (2H, т., 13 Гц), 4,22 (2Н, широкий), 6,60 (1Н, д.. 16 Гц), 6,76 (1Н, т.д., 7 и 1 Гц), 7,06 — 7,67 (7Н, д.,), 7,82 (1 Н, д., 16 Гц), 8,39 (1 Н, д., 7 Гц).

Масс-спектр: 359 (М ).

Пример 14, 1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-е/пиридин-3-ил) акрилоил/-2-метоксиметилпиперидин (транс-изомер). сои )

ИК-спектр (вазелиновое масло). см

1640, 1590, 1%10, 1440, 1413.

Пример 15. 1-/3-(2-Фенилпиразопо/1,5-e/пиридин-3-ил) акрилоил/-2-(2-метоксиэтил)-пиперидин (транс-изомер).

ИК-спектр (вазелиновое масло), см

1635. 1590. 1510.

Пример 16. 1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-а/пиридин-3-ил) акрилоил/-2-аце. токсиметилпиперидин (транс-изомер):

CON

00CCHç

5 ИК-спектр (хлороформ), см: 1740, 1640, 1590, Пример 17. 1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-а/пиридин-3-ил) акрилоил/-2-/2ацетоксиэтилд/-пиридин (транс-изомер), 10 И К-спектр (хлороформ), см: 1725, 1635, 1585, 1515.

Пример 18.

CON

СООН

2,07 г Изобутилхлорформиата при

20 температуре-20ОС с перемешиванием по каплям добавили в смесь 4,0г 3-/2-фенилпиразоло /1.5-а/-пиридин-3-ил/-акриловой кислоты (транс-изомер) с 1,53 г триэтиламина в 40 мл N,N-диметилформамида. По25 сле перемешивания.при.той же самой температуре в течение 30 мин раствор

1,88 (2R)-2-этилпиперидина в 20 мл N,N-диметилформамида по каплям добавили при температуре -20 С в указанную смесь и всю

30 смесь перемешивали при температуре от

-20 до-10 С втечение 2 ч.

Далее реакционную смесь вылили в

100 мл воды и подвергли двукратной экстракционной обработке с использовани35 ем 50 мл этилацетата. Объединенные экстракты промыли 30 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, высушили . над сульфатом магния и выпарили в вакууме.

40 Остаток подвергли хроматографической обработке на 80 г силикагеля с использованием хлороформа в качестве элюента, Фракции, которые содержали целевое соединение, объединили и выпарили в вакууме, 45 получив в виде маслоподобного продукта

3,13 r (2R)-.1-3-/2- фенилпиразоло(1,5-а)пиридин/3-ил/-акрилоил/-2-зтилпипериди на. (а)о -34,30 (с — 1,0 этанол).

50 . ИК-спектрограмма (пленка): 2930, 2860, 1635, 1585 см

ЯМР-спектрограмма (СОС!з, д ) . 0,85 (ЗН, т., 7,0 Гц), 1,43-1,90 (6Н, м.), 2,50 — 3,20 (1 Н.м.), 3,83 — 4,73 (2Н, м.), 6,70 {1Н, д., 16,0

55 Гц), 6,88 (1Н, д.т„1,5 и 7,0 Гц), 7,17 — 7,93 (7Н, м,), 7,97 (1Н, д., 16,0 Гц). 8,54 (1 Н, д.д., 1,0 и

7,0 Гц).

Масс-спектрограмма: 359 (М+).

П ример19.

1795971

НВ

1,79 г (2R)-1-(3-/2-Фенилпиразоло(1,5а)пиридин-3-ил/-акрилоил)- 2-этилпиперидина (транс-иэомер) подвергли конверсии в соль бромистоводородной кислоты обычным путем. Кристаллы перекристаллизовывали из смеси этилацетата с ацетоном, в результате чего получили 1,48 r желтых кристаллов (2Я)-1-/3-/2- фенилпиразоло/1,5-а/пиридин-3-ил/-акрилоил/-2- этилпиперидингидробромид (транс-изомер), Температура плавления 103-104 С, ИК-спектрограмма вазелиновое масло): 1630, 1600, 1500 см

ЯМР-спектрограмма (DMCO-do, д): 0,78 (3 Н, т., 7 Гц), 1,18 — 1,87 (6Н, м,), 2,70 — 3,23 (1 Н, м.), 4,00 — 3,67 (2Н, м.,). 6,91 (1Н, д.. 15 0 Гц), 7,12 (1 Н, д.т., 2,0 и 7,0 Гц), 7,33 — 8,26 (10Н, м.), 8,42 (1Н., с,). ((х)о " = -29;39 (с — 0,966, этанол).

Пример20.

Н5

2,07 г Изобутилхлорфомиата при температуре -20ОС с перемешиванием добавили по каплям в смесь 4,0 г 3-/2-фенилпиразоno(1,5-a)- пиридин-3-ил/-акриловой кислоты (транс-изомер) с 1н53 г триэтиламина в 40 мл

N,N-диметилформамида. После перемешивания при той же температуре в течение 30 мин. по каплям при температуре -20 С добавляли раствор 1,99 r (23)-2-этилпиперидина в 20 мл N,N-диметилформамида и всю смесь перемешивали при температуре от

-20 до-10 С втечение 2 ч.

Реакционную смесь вылили в 100 мл воды и подвергли двукратной экстракционной обработке с использованием 50 мл этилацетэта. Объединенные экстракты промыли 30 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, высушили над сульфатом магния и выпарили в вакууме, Остаток подвергли хроматографической обработке на 80 r силикэгеля с использованием хлороформа в качестве элюента.

Фракции, содержащие целевое соединение, объединили и выпарили в вакууме, в результате чего в виде маслоподобного продукта получили (2S)-1- (3-/2-фенилпиразоло(1,5-а)пиридин-3-ил/-ак рилоил)-2-этилпи перидин (транс-изомер). (а)о26 = 34,80 (с = 1,0, этанол).

ИК-спектрограмма (пленка): 2930, 2860, 1635, 1585 см 1, ЯМ Р-спектрограмма (СО С! з, д ): 0,85

5 (ЗН, т., 7,0 Гц), 1,43 — 1,90 (6Н, м.), 2,50 — 3,20 (1Н, м.), 3,83 — 4,73 (2Н, м)). 6,70 (1 Н, д., 16,0

Гц), 6,88 1Н, д.т., 1,5 Гц и 7,0 Гц), 7,17 — 7,93 (7Н, м.), 7,97 (1Н, д„16,0 Гц), 8,54 (1Н, д„д„

1,0 и 7,0 Гц).

10 Масс-спектрограмма: 359 (M+).

Пример21. Со

-HBr.

2,11 г (2S)-1-3/-/2-Фенилпиразоло/ 1,5=

= а/пиридин-3-ил/-акрилоил/- 2-этилпиперидина.(транс-изомер) подвергали

20 конверсии обычным путем в соль бромистоводородной кислоты. Кристаллы перекристаллйзовывали из смеси этилацетата с ацетоном, в результате. чего получили 1,75 г желтых кристаллов (2S)-1-(3- 2-фенилпира25 зало(1,5-а)п иридин-3-ил/-акрилоил)-2-этилпиперидйн- гидробромида (транс-изомер).

Температура плавления. 104-105 С, ИК-спектрограмма(вазелиновое масло):

1630, 1600, 1500 см .

30 ЯМР-спектрограмма (DMCO-d(, д): 0,78 (ЗН, т., 7,0 Гц), 1,18 — 1,87 (6Н, м.), 2,70 — 3,23 (1Н, м.), 4,00 — 3,67 (2Н, м.), 6,88 (1Н, д„16,0

Гц),7,11(1Н,дт.,2 Он 70 Гц),736-8 28(106, м). 877 (1H, с), 883 (1H. д., 70 Гц).

36 (a)o =+2991(с-0926, атаноа).

Целевое соединение (I) и его соль по настоящему изобретению обладают сосударасширяющим действием и действием усиления почечного тока крови, благодаря чему

40. их можно использовать в качестве диуретиков, антигипертонических агентов и лекарств при почечной недостаточности.

Кроме того, они обладают ингибирующим действием на агрегирование кровяных пла45 стин, что позволяет их применять в качестве лекарства протйв тромбоза, К тому же они обладают кардиотоническим действием, вследствие чего их можно применять в качестве кардиотонических агентов, 50 С целью продемонстрировать такую полезность соединения (t) изобретения ниже приведены результаты нескольких фармакологических испытаний типичных примеров соединения настоящего изобре55 тения.

Испытание 1.

Сосудорасширя ющее действие: (I) Методика испытания.

1795971

Самцов крыс расы SD весом по 200-300 г умертвляют спусканием у них крови и удаляют торакальную аорту. В ванне для органов, заполненной 25 мл раствора Тирода, подвешивают спиральные полоски разме- 5 рами 2,0 х 15 мм. Эти полоски соединяют с тензометром и измеряют изометрические натяжения, Через раствор в ванне пропускают ток пузырьков смеси 95% кислорода с 5% углекислого газа, а его температуру 10 поддерживают на уровне 37 С. После доведения натяжения покоя до 0,5 г вызывают сокращение артериальных полосок с помощью раствора норэпинофрина концентрацией 3,2 х 10 M. 15

Испытываемое вещество добавляют в ванну для органов кумулятивно, В конце каждого испытания в ванну для органов добавляют раствор папаверина концентрацией 10 M с целью достижения макси- 20 мальной релаксации. (!!) Испытываемое соединение. (2 R)-1/3-/2-Фейилпиразоло/1,5-а/пир идин-3-ил/-акрилоил/2-/2- оксиэтил/-пиперидин (транс-изомер) (соединение примера 25

2). (!!!) Результаты испытания.

Величина И К о =- 5,3 х 10 г/мл, Испытание 2.

Действие по усилению тока почечной 30 крови„ (!) Методика испытания, Испь.тание проводят на взрослых особях собак породы гончая обоих полов весом

8-15 кг, Под анестезией с помощью 35 мг/кг 35 пентобарбитала натрия, вводимое внутрибрюшинно, трахею интубируют для искусственного дыхания; В бедренную вену вводят катетеры для подачи в организм лекарственного средства. 40

Боковым надрезом обнажают короткий сегмент левой почечной артерии и удаляют прилегающую ткань для освобождения места для установки электромагнитного датчика скорости потока. Ток почечной крови 45 измеряют соединением датчика скорости с расходомером. (!!) Испытываемое соединение.

То же самое соединение, что и использованное в испытании !. 50 (!!!) Результаты испытания, Доза (мг/кг) увеличение расхода тока почечной крови, %

0,2 кроеи

+ 19,7

Испытание 3.

Диуретическое действие. (!) Методика испытания.

Испытание проводят на крысах расы

FCL:SD в возрасте 6 недель массой 170-206

r после выдержки животных на голодном режиме в течение 18 ч, Непосредственно после перорального введения в организм испытываемого вещества, суспендированного в 0,5%-ной метилцеллюлозе (0,5% МЦ), животным через рот вводят по 20 мл/кг физиологического раствора. Крыс рассаживают по три особи в клетку для изучения метаболизма. Мочу собирают в течение 3 часов. Объем мочи измеряют мерным цилиндром, а мочевую кислоту в моче определяют с помощью прибора "Determiner

UAKit" (выпускается фирмой "Киова медекс

Ко., Лтд"). Испытания проводят нэ 3 группах животных по 3 особи в каждой.

Результаты испытания представлены в табл.1.

1-/3-(2-Метил-6-фенилимидэзо/2,1-Ь/

-1,3,4-тиадиазол-5-ил)акрилоил/-2- этилпи- . перидин (транс-изомер) (соединение примера 35 патента Е Р-0041215, кл. С 07 0 513/04, 1981), Испытание 4. Антигипертенсивная ак- тивностьть.

Метод испытания.

У самцов крыс породы "Вистар" в возрасте 11 недель удаляют одну почку под анестезией. Дезоксикортикостеронацетат (ДОСА), суспендированный в арахисовом масле, вводят подкожно в количестве 30 мг/кг 2 раза в неделю. Питьевую воду заменяют 1%-ным солевым раствором.

Для эксперимента используют животных со средним кровяным давлением 150—

200 MM ртутного столба в течение от 5 до 11 недель после операции.

Испытываемое соединение (дозировка

10 мг/кг) назначают для приема через рот ежедневно в течение 5 дней крысам, у которых кровяное давление повышено ДОСА.

Кровяное давление измеряют у бедренной артерии посредством датчика давления и регистрируют в виде электрически интегрированных значений среднего артериального давления, Результаты испытания представлены в табл.2.

Испытание 5,Ингибирование процесса агрегирования кровяных пластинок. (!) Методика испытания.

Из сонной. артерии самцов японских бе5 лых кроликов весом 2,5 — 3.0 кг собирают кровь и смешивают ее в объемном соотношении 1:10 с 3,8%-ным раствором цитрата натрия. После центрифугирования смеси при 150 g в течение 15 мин получили богатую кровяными пластинами плазму (КПП).

1795971

Способность пластин агрегироваться измеряют с помощью агрегометра (nikohklzal

NKK НЕМА TRACER модель PAT-4Л), В кювету последовательно добавляют 0,24 мл

КПП, содержащую 6,5-7,5 х 10 пласти- 5 нок/мл, и 5 мкл испытываемого раствора или смеси полиэтиленгликоля 200 с этанолом и водой в соотношении 1:1:2. Всю смесь перемешивают в течение 2 мин при температуре 37 С и для инициирования процесса 10 агрегирования добавляют 125 мкг/мл коллагена. Испытание провели с использованием КПП, полученной от 3 других кроликов. (11) Испытываемое соединение. 15

То же самое соединение, что и использованное в испытании I. (1!!) Результаты испытания.

Ингибирующее действие на процесс агрегирования пластин. 20

Величина ИК5о = 7,9 х 10 jr/мл);

Испытание 6.

Кардиотоническое действие. (1) Методика испытания.

Самцов морских свинок расы Хартли ве- 25 сом по 500-600 г умертвляют спусканием крови, после чего у каждого животного удаляют сердце. Удаляют артериальную полоску и подвешивают ее в ванне для органов, содержащей 50 мл раствора Тирода, темпе- 30 ратуру которого поддерживают на уровне

30 при аэрировании газовой смесью, содержащей 95% кислорода и 5 углекислого газа. Предсердие соединяют с датчиком натяжения с первоначальным натяжением 35

0,4 — 0,6 г. После достижения постоянной п0движности в раствор ванны добавляют лекарственный агент и в течение 30 мин наблюдают влияние на усилие сжатия и скорость пульсации. Эффективность выражают 40 в процентных величинах до и после введения лекарственного агента. Для каждой концентрации используют по 3 отдельных препарата. (! I) Испытываемое соединение. 45

То же самое соединение, что и использованное в испытании ).

50 Rz — пиперидин, .замещенный низшим алкилбм, окси(ниэшим) алкилом, низшим алканоилокси(низшим) алкилом или низшим алкокси(низшим) алкилом, или его соли, отличающийся тем, что

55 соединение формулы

СН=CH-СООН ф- где значения Rt указаны выше, СН=СН-COR2 ф% где В! — фенил;

Формула изобретения

Способ получения пиразолопиридинового соединения формулы (Ill) Результаты испытания приведены ниже, Концентрация испытываемого соединения 10 гlмл

Процентное увеличение сжимающего усилия 10,0

Процентное усиление сердечной пульсации -10,7

Испытание 7.

Антигипертоническое действие. (1) Методика испытания.

Под анестезией у крыс рамы Вистар в один надцатинедельном возрасте удаляют по одной почке. Подкожно дважды в неделю животным вводят по 30 мг/кг дезоксикартикостеронацетата (ДОСА), суспендированного в арахисовом масле, а в качестве питьевой воды дают 1 -ный солевой раствор, Для определения эксперимента используют животных со средним кровяным давлением 150-200 мм рт.ст. в течение от 5 до 13 недель после операции.

Испытываемое соединение (в дозе 3,2 мг/кг) вводят перорально ежедневно в течение 5 дней животным, страдающим от гипертонии, вызванной применением ДОСА, На бедренной артерии с помощью датчика давления измеряют кровяное давление, которое фиксируют в виде электрически интегрированных величин средне- го артериального давления, (1l) Испытываемое соединение.

1-/3-(2-Фенилпиразоло/1,5-а/пи риди н-3-ил)акрилоил/-2- этилпиперидинполуфумарат (транс-изомер) (соединение примера

1), (111) Результаты испытания.

Максимальная степень снижения кровяного давления — 327ь.

Представленные данные доказывают преимущество соединения I перед известными соединениями ЕР N 0041215, полезными в качестве средств, понижающих кровяное давление, мочегонных средств.

По категории токсичности соединение формулы I относится к низкотоксичным.

16

1795971

Таблица1.

Выделение мочи и мочевой кислоты (контрольный = 100%) (доза 10 мг/кг) * Соединение(А) Таблица2.

Антигипертенсивная активность

Испытываемое соединение по примеру

Составитель А.Свиридова

Техред M,Моргентал Корректор М.Демчик

Редактор

Заказ 441 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 или его реакционноспособное производное по карбоксильной группе, или его соль подвергают взаимодействию с соединени1

Сое инение А ем формулы В -Н, где значения R указаны выше, или его солью с выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли, Максимальное понижение кровяного давления, 30

27