5-анилиноимидазопиридины и способы их применения
Изобретение относится к имидазопиридинам формулы I
и к их фармацевтически приемлемым солям, где Z1 представляет собой CR1; R1 представляет собой Н; R1' представляет собой Н; Z2 представляет собой CR2; Z3 представляет собой CR3 или N; R2 и R3 независимо выбирают из Н, галогена; R4 представляет собой Н; Y представляет собой W-C(O)-; W представляет собой или
, R5 представляет собой Н; X1 выбирают из R11' и -OR11'; каждый R11' независимо представляет собой Н, С1-С12алкил, С2-С8алкенил; X4 представляет собой
, R6 представляет собой Н, галоген, циклопропил или -(CR19R20)n-SR16; R6' представляет собой Н, галоген; р представляет собой 0, 1, 2 или 3; n представляет собой 0, 1 или 2; где каждый указанный ал кил в R11' независимо замещен одной или двумя группами, независимо выбранными из галогена, -(CR19R20)nOR16 и R21; каждый R16 независимо представляет собой Н, С1-С12алкил; R19 и R20 независимо выбирают из Н, C1-С12алкила; R21 представляет собой циклопропил. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, для лечения гиперпролиферативного нарушения, на основе указанных соединений. 3 н. и 7 з.п. ф-лы.
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По настоящей заявке испрашивается приоритет на основании предварительной заявки США № 61/015129, поданной 19 декабря 2007, и предварительной заявки США № 61/054014, поданной 16 мая 2008, содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки во всей своей полноте.
ОБЛАСТЬ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к имидазопиридинам, которые обладают противораковой активностью, и более конкретно к имидазопиридинам, которые ингибируют активность MEK киназы. Настоящее изобретение также относится к способам применения указанных соединений для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток млекопитающих или соответствующих патологических состояний.
ПРЕДПОСЫЛКИ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
В поисках понимания того, как Ras передают сигналы внеклеточного роста, выяснилось, что путь MAP (митоген-активированный белок) киназы (MAPK) представляет собой критический путь между связанными с мембранами Ras и ядрами. Путь MAPK включает каскад актов фосфорилирования, в которых участвуют три ключевые киназы, а именно Raf, MEK (MAP киназа киназа) и ERK (MAP киназа). Активные GTP-связанные Ras приводят к активации и непрямому фосфорилированию Raf киназы.
Затем Raf фосфорилирует MEK1 и 2 на двух сериновых остатках (S218 и S222 для MEK1 и S222 и S226 для MEK2) (Ahn et al., Methods in Enzymology 2001, 332, 417-431). Затем активированная MEK фосфорилирует свои единственно известные субстраты, MAP киназы, ERK1 и 2. ERK фосфорилирование за счет MEK происходит по Y204 и T202 для ERK1 и по Y185 и T183 для ERK2 (Ahn et al., Methods in Enzymology 2001, 332, 417-431). Фосфорилированная ERK димеризуется и затем перемещается в ядра, где она накапливается (Khokhlatchev et al., Cell 1998, 93, 605-615). В ядрах ERK участвует в ряде важных клеточных функций, включая, но ими не ограничиваясь, ядерный транспорт, трансдукцию сигналов, репарацию ДНК, сборку и транслокацию нуклеосом и процессинг и трансляцию мРНК (Ahn et al., Molecular Cell 2000, 6, 1343-1354). Вообще, обработка клеток факторами роста приводит к активации ERK1 и 2, результатом чего является пролиферация и, в некоторых случаях, дифференциация (Lewis et al., Adv. Cancer Res. 1998, 74, 49-139).
Существуют серьезные доказательства того, что генетические мутации в протеинкиназах и/или сверхэкспрессия протеинкиназ участвуют в каскаде реакций MAP киназы, со временем приводящих к неконтролируемой клеточной пролиферации и в конечном счете к образованию опухоли, к пролиферативным заболеваниям. Например, некоторые виды рака содержат мутации, которые приводят к непрерывной активации указанного каскада реакций, связанного с постоянным продуцированием факторов роста. Другие мутации могут привести к дефектам в дезактивации активированного GTP-связанного Ras комплекса, что вновь приводит к активации каскада реакций MAP киназы. Мутированные, онкогенные формы Ras обнаруживаются в 50% случаев рака толстой кишки и более чем в 90% случаев рака поджелудочной железы, также как при многих других типах раковых заболеваний (Kohl et al., Science 1993, 260, 1834-1837). В последнее время мутации bRaf были идентифицированы более чем в 60% случаев злокачественных меланом (Davies, H. et al., Nature 2002, 417, 949-954). Указанные мутации в bRaf приводят к конститутивно активному каскаду реакций MAP киназы. Исследования образцов первичных опухолей и клеточных линий также демонстрируют конститутивный или сверхактивный каскад реакций MAP киназы при раковых заболеваниях поджелудочной железы, толстой кишки, легких, яичников и почек (Hoshino, R. et al., Oncogene 1999, 18, 813-822).
MEK проявили себя как привлекательная терапевтическая мишень в каскаде реакций MAP киназы. MEK, в прямом направлении от Ras и Raf, является высоко специфичной при фосфорилировании MAP киназы; действительно, единственными известными субстратами для фосфорилирования MEK являются MAP киназы, ERK1 и 2. В некоторых исследованиях было показано, что ингибирование MEK предоставляет потенциальные терапевтические преимущества. Например, было показано, что малые молекулы ингибиторов MEK ингибируют рост человеческих опухолей у голых мышей с ксенотрансплантатами (Sebolt-Leopold et al., Nature-Medicine 1999, 5 (7), 810-816; Trachet et al., AACR Apr. 6-10, 2002, Poster #5426; Tecle, H. IBC 2.sup.nd International Conference of Protein Kinases, Sep. 9-10, 2002), блокируют статическую аллодинию у животных (WO 01/05390 published Jan. 25, 2001) и ингибируют рост клеток при острой миелоидной лейкемии (Milella et al., J. Clin. Invest. 2001, 108 (6), 851-859).
Обсуждались также некоторые малые молекулы MEK ингибиторов, например, в WO 02/06213, WO 03/077855 и WO 03/077914. Поэтому все еще существует необходимость в создании ингибиторов MEK в качестве эффективных и безопасных терапевтических средств лечения различных пролиферативных болезненных состояний, таких как состояния, связанные с гиперактивностью MEK, так же как заболеваний, модулируемых каскадом реакций MEK.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение в целом относится к имидазопиридинам формулы I (и/или к их сольватам, гидратам и/или солям), обладающим противораковой и/или противовоспалительной активностью, и более конкретно активностью ингибирования MEK киназы. Некоторые гиперпролиферативные и воспалительные нарушения характеризуются модуляцией функции MEK киназы, например, за счет мутаций или сверхэкспрессии белков. Соответственно, соединения настоящего изобретения и их композиции можно использовать для лечения гиперпролиферативных нарушений, таких как раковые заболевания или воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит.
и его соли, где
Z1 представляет собой CR1 или N;
R1 представляет собой H, C1-C3алкил, галоген, CF3, CHF2, CN, ORA или NRARA;
R1' представляет собой H, C1-C3алкил, галоген, CF3, CHF2, CN, ORA или NRARA;
где каждый RA независимо представляет собой Н или C1-C3алкил;
Z2 представляет собой CR2 или N;
Z3 представляет собой CR3 или N; при условии, что только один из Z1, Z2 и Z3 может одновременно представлять собой N;
R2 и R3 независимо выбирают из H, галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, -(CR14R15)nC(=Y')R11, -(CR14R15)nC(=Y')OR11, -(CR14R15)nC(=Y')NR11R12, -(CR14R15)nNR11R12, -(CR14R15)nOR11, -(CR14R15)nSR11, -(CR14R15)nNR12C(=Y')R11, -(CR14R15)nNR12C(=Y')OR11, -(CR14R15)nNR13C(=Y')NR11R12, -(CR14R15)nNR12SO2R11, -(CR14R15)nOC(=Y')R11, -(CR14R15)nOC(=Y')OR11, -(CR14R15)nOC(=Y')NR11R12, -(CR14R15)nOS(O)2(OR11), -(CR14R15)nOP(=Y')(OR11)(OR12), -(CR14R15)nOP(OR11)(OR12), -(CR14R15)nS(O)R11, -(CR14R15)nS(O)2R11, -(CR14R15)nS(O)2NR11R12, -(CR14R15)nS(O)(OR11), -(CR14R15)nS(O)2(OR11), -(CR14R15)nSC(=Y')R11, -(CR14R15)nSC(=Y')OR11, -(CR14R15)nSC(=Y')NR11R12, C1-C12алкила, C2-C8алкенила, C2-C8алкинила, карбоциклила, гетероциклила, арила и гетероарила;
R4 представляет собой H, C1-C6алкил или C3-C4карбоциклил;
Y представляет собой W-C(O)- или W';
W представляет собой 
или 
;
R5 представляет собой H или C1-C12алкил;
X1 выбирают из R11' и -OR11'; если X1 представляет собой R11', X1 необязательно взятый вместе с R5 и атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членное насыщенное или ненасыщенное кольцо, содержащее 0-2 дополнительные гетероатома, выбранные из O, S и N, где указанное кольцо необязательно замещено одной или более из групп, выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, оксо, -(CR19R20)nC(=Y')R16, -(CR19R20)nC(=Y')OR16, -(CR19R20)nC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)n-SR16, -(CR19R20)nNR16C(=Y')R17, -(CR19R20)nNR16C(=Y')OR17, -(CR19R20)nNR18C(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR17SO2R16, -(CR19R20)nOC(=Y')R16, -(CR19R20)nOC(=Y')OR16, -(CR19R20)nOC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nOS(O)2(OR16), -(CR19R20)nOP(=Y')(OR16)(OR17), -(CR19R20)nOP(OR16)(OR17), -(CR19R20)nS(O)R16, -(CR19R20)nS(O)2R16, -(CR19R20)nS(O)2NR16R17, -(CR19R20)nS(O)(OR16), -(CR19R20)nS(O)2(OR16), -(CR19R20)nSC(=Y')R16, -(CR19R20)nSC(=Y')OR16, -(CR19R20)nSC(=Y')NR16R17 и R21;
каждый R11' независимо представляет собой Н, C1-C12алкил, C2-C8алкенил, C2-C8алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил;
R11, R12 и R13 независимо представляют собой H, C1-C12алкил, C2-C8алкенил, C2-C8алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил,
или R11 и R12 вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют 3-8-членное насыщенное, ненасыщенное или ароматическое кольцо, содержащее 0-2 гетероатома, выбранные из O, S и N, где указанное кольцо необязательно замещено одной или более из групп, выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, C1-C6алкил, -OH, -SH, -O(C1-C6алкил), -S(C1-C6алкил), -NH2, -NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)2, -SO2(C1-C6алкил), -CO2H, -CO2(C1-C6алкил), -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6алкил), -C(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)(C1-C6алкил), -NHC(O)(C1-C6алкил), -NHSO2(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)SO2(C1-C6алкил), -SO2NH2, -SO2NH(C1-C6алкил), -SO2N(C1-C6алкил)2, -OC(O)NH2, -OC(O)NH(C1-C6алкил), -OC(O)N(C1-C6алкил)2, -OC(O)O(C1-C6алкил), -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)C(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)O(C1-C6алкил) и -N(C1-C6алкил)C(O)O(C1-C6алкил);
R14 и R15 независимо выбирают из H, C1-C12алкила, арила, карбоциклила, гетероциклила и гетероарила;
W' представляет собой
где 
представляет собой
каждый X2 независимо представляет собой O, S или NR9;
каждый R7 независимо выбирают из H, галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, -(CR14R15)nC(=Y')R11, -(CR14R15)nC(=Y')OR11, -(CR14R15)nC(=Y')NR11R12, -(CR14R15)nNR11R12, -(CR14R15)nOR11, -(CR14R15)nSR11, -(CR14R15)nNR12C(=Y')R11, -(CR14R15)nNR12C(=Y')OR11, -(CR14R15)nNR13C(=Y')NR11R12, -(CR14R15)nNR12SO2R11, -(CR14R15)nOC(=Y')R11, -(CR14R15)nOC(=Y')OR11, -(CR14R15)nOC(=Y')NR11R12, -(CR14R15)nOS(O)2(OR11), -(CR14R15)nOP(=Y')(OR11)(OR12), -(CR14R15)nOP(OR11)(OR12), -(CR14R15)nS(O)R11, -(CR14R15)nS(O)2R11, -(CR14R15)nS(O)2NR11R12, -(CR14R15)nS(O)(OR11), -(CR14R15)nS(O)2(OR11), -(CR14R15)nSC(=Y')R11, -(CR14R15)nSC(=Y')OR11, -(CR14R15)nSC(=Y')NR11R12, C1-C12алкила, C2-C8алкенила, C2-C8алкинила, карбоциклила, гетероциклила, арила и гетероарила;
каждый R8 независимо выбирают из C1-C12алкила, арила, карбоциклила, гетероциклила и гетероарила;
R9 выбирают из H, -(CR14R15)nC(=Y')R11, -(CR14R15)nC(=Y')OR11, -(CR14R15)nC(=Y')NR11R12, -(CR14R15)qNR11R12, -(CR14R15)qOR11, -(CR14R15)qSR11, -(CR14R15)qNR12C(=Y')R11, -(CR14R15)qNR12C(=Y')OR11, -(CR14R15)qNR13C(=Y')NR11R12, -(CR14R15)qNR12SO2R11, -(CR14R15)qOC(=Y')R11, -(CR14R15)qOC(=Y')OR11, -(CR14R15)qOC(=Y')NR11R12, -(CR14R15)qOS(O)2(OR11), -(CR14R15)qOP(=Y')(OR11)(OR12), -(CR14R15)qOP(OR11)(OR12), -(CR14R15)nS(O)R11, -(CR14R15)nS(O)2R11, -(CR14R15)nS(O)2NR11R12, C1-C12алкила, C2-C8алкенила, C2-C8алкинила, карбоциклила, гетероциклила, арила и гетероарила;
R10 представляет собой H, C1-C6алкил или C3-C4карбоциклил;
X4 представляет собой
R6 представляет собой H, галоген, C1-C6алкил, C2-C8алкенил, C2-C8алкинил, карбоциклил, гетероарил, гетероциклил, -OCF3, -NO2, -Si(C1-C6алкил)3, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16 или -(CR19R20)n-SR16;
R6' представляет собой H, галоген, C1-C6алкил, карбоциклил, CF3, -OCF3, -NO2, -Si(C1-C6алкил)3, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)n-SR16, C2-C8алкенил, C2-C8алкинил, гетероциклил, арил или гетероарил;
p представляет собой 0, 1, 2 или 3;
n представляет собой 0, 1, 2 или 3;
q представляет собой 2 или 3;
где каждый указанный алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил в R1, R2, R3, R4, R5, R6, R6', R7, R8, R9, R10, R11, R11', R12, R13, R14, R15 и RA независимо необязательно замещен одной или более из групп, независимо выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, оксо, -Si(C1-C6алкил)3, -(CR19R20)nC(=Y')R16, -(CR19R20)nC(=Y')OR16, -(CR19R20)nC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)nSR16, -(CR19R20)nNR16C(=Y')R17, -(CR19R20)nNR16C(=Y')OR17, -(CR19R20)nNR18C(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR17SO2R16, -(CR19R20)nOC(=Y')R16, -(CR19R20)nOC(=Y')OR16, -(CR19R20)nOC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nOS(O)2(OR16), -(CR19R20)nOP(=Y')(OR16)(OR17), -(CR19R20)nOP(OR16)(OR17), -(CR19R20)nS(O)R16, -(CR19R20)nS(O)2R16, -(CR19R20)nS(O)2NR16R17, -(CR19R20)nS(O)(OR16), -(CR19R20)nS(O)2(OR16), -(CR19R20)nSC(=Y')R16, -(CR19R20)nSC(=Y')OR16, -(CR19R20)nSC(=Y')NR16R17 и R21;
каждый R16, R17 и R18 независимо представляет собой H, C1-C12алкил, C2-C8алкенил, C2-C8алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил, где указанный алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил необязательно замещен одной или более из групп, выбранных из галогена, CN, -OCF3, CF3, -NO2, C1-C6алкила, -OH, -SH, -O(C1-C6алкил), -S(C1-C6алкил), -NH2, -NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)2, -SO2(C1-C6алкил), -CO2H, -CO2(C1-C6алкил), -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6алкил), -C(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)(C1-C6алкил), -NHC(O)(C1-C6алкил), -NHSO2(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)SO2(C1-C6алкил), -SO2NH2, -SO2NH(C1-C6алкил), -SO2N(C1-C6алкил)2, -OC(O)NH2, -OC(O)NH(C1-C6алкил), -OC(O)N(C1-C6алкил)2, -OC(O)O(C1-C6алкил), -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)C(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)O(C1-C6алкил) и -N(C1-C6алкил)C(O)O(C1-C6алкил);
или R16 и R17 вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют 3-8-членное насыщенное, ненасыщенное или ароматическое кольцо, содержащее 0-2 гетероатома, выбранные из O, S и N, где указанное кольцо необязательно замещено одной или более из групп, выбранных из галогена, CN, -OCF3, CF3, -NO2, C1-C6алкила, -OH, -SH, -O(C1-C6алкил), -S(C1-C6алкил), -NH2, -NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)2, -SO2(C1-C6алкил), -CO2H, -CO2(C1-C6алкил), -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6алкил), -C(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)(C1-C6алкил), -NHC(O)(C1-C6алкил), -NHSO2(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)SO2(C1-C6алкил), -SO2NH2, -SO2NH(C1-C6алкил), -SO2N(C1-C6алкил)2, -OC(O)NH2, -OC(O)NH(C1-C6алкил), -OC(O)N(C1-C6алкил)2, -OC(O)O(C1-C6алкил), -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)C(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)O(C1-C6алкил) и -N(C1-C6алкил)C(O)O(C1-C6алкил);
R19 и R20 независимо выбирают из H, C1-C12алкила, -(CH2)n-арила, -(CH2)n-карбоциклила, -(CH2)n-гетероциклила и -(CH2)n-гетероарила;
R21 представляет собой C1-C12алкил, C2-C8алкенил, C2-C8алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил или гетероарил, где каждый член из R21 необязательно замещен одной или более из групп, выбранных из галогена, оксо, CN, -OCF3, CF3, -NO2, C1-C6алкила, -OH, -SH, -O(C1-C6алкил), -S(C1-C6алкил), -NH2, -NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)2, -SO2(C1-C6алкил), -CO2H, -CO2(C1-C6алкил), -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6алкил), -C(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)(C1-C6алкил), -NHC(O)(C1-C6алкил), -NHSO2(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)SO2(C1-C6алкил), -SO2NH2, -SO2NH(C1-C6алкил), -SO2N(C1-C6алкил)2, -OC(O)NH2, -OC(O)NH(C1-C6алкил), -OC(O)N(C1-C6алкил)2, -OC(O)O(C1-C6алкил), -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -N(C1-C6алкил)C(O)NH(C1-C6алкил), -N(C1-C6алкил)C(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)NH(C1-C6алкил), -NHC(O)N(C1-C6алкил)2, -NHC(O)O(C1-C6алкил) и -N(C1-C6алкил)C(O)O(C1-C6алкил);
каждый Y' независимо представляет собой O, NR22 или S; и
R22 представляет собой H или C1-C12алкил.
Настоящее изобретение включает композицию (например, фармацевтическую композицию), включающую соединение формулы I (и/или его сольваты, гидраты и/или соли) и носитель (фармацевтически приемлемый носитель). Настоящее изобретение также включает композицию (например, фармацевтическую композицию), включающую соединение формулы I (и/или его сольваты, гидраты и/или соли) и носитель (фармацевтически приемлемый носитель), дополнительно включающую второе химиотерапевтическое и/или второе противовоспалительное средство. Композиции настоящего изобретения можно использовать для ингибирования аномального клеточного роста или лечения гиперпролиферативного нарушения у млекопитающего (например, у человека). Композиции настоящего изобретения также можно использовать для лечения воспалительных заболеваний у млекопитающих (например, у человека).
Настоящее изобретение включает способ ингибирования аномального клеточного роста или лечения гиперпролиферативного нарушения у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и солей) или его композиции, отдельно или в сочетании со вторым химиотерапевтическим средством.
Настоящее изобретение включает способ лечения воспалительного заболевания у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и солей) или его композиции, отдельно или в сочетании со вторым противовоспалительным средством.
Настоящее изобретение включает способ применения соединений настоящего изобретения для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток, организмов млекопитающих или связанных с этим патологических состояний.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ
Далее приводится подробное описание некоторых предпочтительных вариантов настоящего изобретения, примеры которых проиллюстрированы с использованием сопровождающих структур и формул. Хотя настоящее изобретение будет раскрыто в связи с перечисленными вариантами, следует понимать, что они никоим образом не ограничивают настоящее изобретение указанными вариантами. Напротив, настоящее изобретение включает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем настоящего изобретения, который определен формулой изобретения. Специалистам будут очевидны многие способы и материалы, аналогичные или эквивалентные раскрытым в настоящем описании, которые можно использовать в практике настоящего изобретения. Настоящее изобретение никоим образом не ограничено раскрытыми здесь способами и материалами. В случае если один или более из включенных литературных источников, патентов и аналогичных материалов отличается или противоречит указанному описанию, включая, но ими не ограничиваясь, определения терминов, использование терминов, описание методик, или т.п., то рассматриваемое описание имеет предпочтение.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Термин "алкил" в том смысле, как здесь использован, относится к насыщенному линейному или с разветвленной цепочкой одновалентному углеводородному радикалу, содержащему от одного до двенадцати атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но ими не ограничиваются, метил (Me, -CH3), этил (Et, -CH2CH3), 1-пропил (n-Pr, н-пропил, -CH2CH2CH3), 2-пропил (i-Pr, изопропил, -CH(CH3)2), 1-бутил (n-Bu, н-бутил, -CH2CH2CH2CH3), 2-метил-1-пропил (i-Bu, изобутил, -CH2CH(CH3)2), 2-бутил (s-Bu, втор-бутил, -CH(CH3)CH2CH3), 2-метил-2-пропил (t-Bu, трет-бутил, -C(CH3)3), 1-пентил (н-пентил, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-пентил (-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-пентил (-CH(CH2CH3)2), 2-метил-2-бутил (-C(CH3)2CH2CH3), 3-метил-2-бутил (-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-метил-1-бутил (-CH2CH2CH(CH3)2), 2-метил-1-бутил (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-гексил (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-гексил (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-гексил (-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-метил-2-пентил (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-метил-2-пентил (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-метил-2-пентил (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-метил-3-пентил (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-метил-3-пентил (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-диметил-2-бутил (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-диметил-2-бутил (-CH(CH3)C(CH3)3), 1-гептил, 1-октил и т.п.
Термин "алкенил" относится к линейному или с разветвленной цепочкой одновалентному углеводородному радикалу, состоящему из двух-двенадцати атомов углерода, с по меньшей мере одним сайтом ненасыщенности, т.е. углерод-углеродной, sp2 двойной связью, где указанный алкенильный радикал включает радикалы, обладающие "цис" и "транс" ориентациями, или альтернативно, "E" и "Z" ориентациями. Примеры включают, но ими не ограничиваются, этиленил или винил (-CH=CH2), аллил (-CH2CH=CH2) и т.п.
Термин "алкинил" относится к линейному или разветвленному одновалентному углеводородному радикалу, состоящему из двух-двенадцати атомов углерода, с по меньшей мере одним сайтом ненасыщенности, т.е. углерод-углеродной, sp тройной связью. Примеры включают, но ими не ограничиваются, этинил (-C≡CH), пропинил (пропаргил, -CH2C≡CH) и т.п.
Термины "карбоцикл", "карбоциклил", "карбоциклическое кольцо" и "циклоалкил" относятся к одновалентному неароматическому, насыщенному или частично ненасыщенному кольцу, содержащему от 3 до 12 атомов углерода в случае моноциклического кольца или от 7 до 12 атомов углерода в случае бициклического кольца. Бициклические карбоциклы, содержащие от 7 до 12 атомов, могут представлять собой, например, бицикло[4.5], [5.5], [5.6] или [6.6] систему, и бициклические карбоциклы, содержащие 9 или 10 кольцевых атомов, могут представлять собой бицикло[5,6] или [6,6] систему или могут быть мостиковыми системами, такими как бицикло[2.2.1]гептан, бицикло[2.2.2]октан и бицикло[3.2.2]нонан. Примеры моноциклических карбоциклов включают, но ими не ограничиваются, циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, циклогексил, 1-циклогекс-1-енил, 1-циклогекс-2-енил, 1-циклогекс-3-енил, циклогексадиенил, циклогептил, циклооктил, циклононил, циклодецил, циклоундецил, циклододецил и т.п.
Термин "арил" означает одновалентный ароматический углеводородный радикал, содержащий 6-18 атомов углерода, полученный в результате удаления одного атома водорода от одного атома углерода исходной ароматической кольцевой системы. Некоторые арильные группы обозначены в примерах структур как "Ar". Арил включает бициклические радикалы, включающие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим или гетероциклическим кольцом. Типичные арильные группы включают, но ими не ограничиваются, радикалы, полученные из бензола (фенила), замещенных бензолов, нафталина, антрацена, инденила, инданила, 1,2-дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила и т.п.
Термины "гетероцикл", "гетероциклил" и "гетероциклическое кольцо" здесь используют взаимозаменяемо, и они относятся к насыщенному или частично ненасыщенному (т.е. содержащему одну или более из двойных и/или тройных связей в кольце) карбоциклическому радикалу, содержащему от 3 до 18 кольцевых атомов, в котором, по меньшей мере, один кольцевой атом представляет собой гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы, причем остальные кольцевые атомы представляют собой C, где один или более из кольцевых атомов необязательно замещены независимо одним или более из заместителей, раскрытых далее. Гетероцикл может быть моноциклом, содержащим от 3 до 7 кольцевых членов (от 2 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N, O, P и S), или бициклом, содержащим от 7 до 10 кольцевых членов (от 4 до 9 атомов углерода и от 1 до 6 гетероатомов, выбранных из N, O, P и S), например: бицикло[4.5], [5.5], [5.6] или [6.6] системой. Гетероциклы раскрыты в Paquette, Leo A.; "Principles of Modern Heterocyclic Chemistry" (W.A. Benjamin, New York, 1968), в частности, в главах 1, 3, 4, 6, 7 и 9; "The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs" (John Wiley & Sons, New York, 1950 to present), в частности в томах 13, 14, 16, 19 и 28; и J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566. Термин "гетероциклил" также включает радикалы, где гетероциклические радикалы конденсированы с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим или гетероциклическим кольцом. Примеры гетероциклических колец включают, но ими не ограничиваются, пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидропиранил, дигидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидинил, морфолинил, тиоморфолинил, тиооксанил, пиперазинил, гомопиперазинил, азетидинил, оксэтанил, тиэтанил, гомопиперидинил, оксэпанил, тиэпанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2H-пиранил, 4H-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинилимидазолинил, имидазолидинил, 3-азабицикло[3.1.0]гексанил, 3-азабицикло[4.1.0]гептанил и азабицикло[2.2.2]гексанил. Спирофрагменты также включены в объем указанного определения. Примеры гетероциклических групп, где кольцевые атомы замещены оксо (=O) фрагментами, представляют собой пиримидинонил и 1,1-диоксотиоморфолинил.
Термин "гетероарил" относится к одновалентному ароматическому радикалу, состоящему из 5- или 6-членных колец, и включает конденсированные кольцевые системы (по меньшей мере, одна из которых является ароматической), состоящие из 5-18 атомов, содержащие один или более из гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Примерами гетероарильных групп являются пиридинил (включая, например, 2-гидроксипиридинил), имидазолил, имидазопиридинил, пиримидинил (включая, например, 4-гидроксипиримидинил), пиразолил, триазолил, пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, пиридазинил, триазинил, изоиндолил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридинил.
Указанные гетероциклические или гетероарильные группы могут быть присоединены через углерод (углеродсвязанные) или азот (азотсвязанные), где это возможно. Так, например (но не для ограничения), связанные через углерод гетероциклы или гетероарилы могут быть связаны в положениях 2, 3, 4, 5 или 6 пиридина, в положениях 3, 4, 5 или 6 пиридазина, в положениях 2, 4, 5 или 6 пиримидина, в положениях 2, 3, 5 или 6 пиразина, в положениях 2, 3, 4 или 5 фурана, тетрагидрофурана, тиофурана, тиофена, пиррола или тетрагидропиррола, в положениях 2, 4 или 5 оксазола, имидазола или тиазола, в положениях 3, 4 или 5 изоксазола, пиразола или изотиазола, в положениях 2 или 3 азиридина, в положениях 2, 3 или 4 азетидина, в положениях 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 хинолина или в положениях 1, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 изохинолина.
Так, например (но не для ограничения), связанные через азот гетероциклы или гетероарилы могут быть связаны в положении 1 азиридина, азетидина, пиррола, пирролдидина, 2-пирролина, 3-пирролина, имидазола, имидазолидина, 2-имидазолина, 3-имидазолина, пиразола, пиразолина, 2-пиразолина, 3-пиразолина, пиперидина, пиперазина, индола, индолина, 1H-индазола, в положении 2 изоиндола или изоиндолина, в положении 4 морфолина и в положении 9 карбазола или β-карболина.
Термин “галоген” относится к F, Cl, Br или I. Гетероатомы, присутствующие в гетероарилах или гетероциклилах, включают их окисленные формы, такие как N+ → O-, S(O) и S(O)2.
Термины "лечить" и "лечение" относятся как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам, когда у субъекта предотвращают или снижают (уменьшают) нежелательные физиологические нарушения или заболевания, такие как развитие или метастазирование рака. Для целей настоящего изобретения благоприятные или желательные клинические результаты включают, но ими не ограничиваются, облегчение симптомов, уменьшение степени заболевания, стабилизацию (т.е. отсутствие ухудшения) состояния болезни, задержку или замедление прогрессирования заболевания, облегчение или временное облегчение болезненного состояния и ремиссию (как частичную, так и полную), независимо от того, заметны они или не заметны. Термин "лечение" может также означать пролонгирование выживания по сравнению с ожидаемым сроком выживания в отсутствие лечения. Нуждающиеся в лечении субъекты включают тех, у которых уже наблюдается болезненное состояние или нарушение, так же как и тех, которые предрасположены к таким болезненным состояниям или нарушениям, или тех, в отношении которых необходима профилактика указанных болезненных состояний или нарушений.
Фраза "терапевтически эффективное количество" означает такое количество соединения настоящего изобретения, которое (i) лечит или осуществляет профилактику конкретного заболевания, состояния или нарушения, (ii) ослабляет, улучшает или исключает один или более из симптомов конкретного заболевания, состояния или нарушения, или (iii) предотвращает или замедляет возникновение одного или более из симптомов, описанных здесь конкретных заболеваний, состояний или нарушений. В случае рака терапевтически эффективное количество лекарства может уменьшить количество раковых клеток; уменьшить размер опухоли; ингибировать (т.е. замедлить до некоторой степени и предпочтительно остановить) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать (т.е. замедлить до некоторой степени и предпочтительно остановить) метастазирование опухоли; ингибировать до некоторой степени рост опухоли; и/или уменьшить до некоторой степени один или более из симптомов, связанных с раком. Что касается степени, до которой указанное лекарственное средство может предотвратить рост и/или уничтожить существующие раковые клетки, эта степень может быть цитостатической и/или цитотоксической. Для терапии рака эффективность можно измерить, например, оценив время прогрессирования заболевания (TTP) и/или определяя степень реакции (RR).
Термины "аномальный рост клеток" и "гиперпролиферативное нарушение" используют в рассматриваемой заявке взаимозаменяемо. "Аномальный рост клеток", в том смысле, как здесь использован, если нет других указаний, относится к клеточному росту, который независим от нормальных регуляторных механизмов (например, утрата контактного ингибирования). Такой рост включает, например, аномальный рост: (1) опухолевых клеток (опухолей), которые пролиферируют за счет экспрессии мутировавшей тирозинкиназы или сверхэкспрессии рецепторной тирозинкиназы; (2) доброкачественных и злокачественных клеток других пролиферативных заболеваний, при которых происходит аберрантная активация тирозинкиназы; (3) любых опухолей, которые пролиферируют за счет рецепторной тирозинкиназы; (4) любых опухолей, которые пролиферируют за счет аберрантной активации серин/треонинкиназы; и (5) доброкачественных и злокачественных клеток других пролиферативных заболеваний, при которых происходит аберрантная активация серин/треонинкиназы.
Термины "рак" и "раковый" относятся к или описывают физиологическое состояние млекопитающих, которое типично характеризуется разрегулированным клеточным ростом. Термин "опухоль" включает одну или более из раковых клеток. Примеры разновидностей рака включают, но ими не ограничиваются, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкемию или лимфолейкоз. Более конкретные примеры разновидностей рака включают плоскоклеточный рак (например, эпителиальный плоскоклеточный рак), рак легких, включая мелкоклеточный рак легких, немелкоклеточный рак легких ("NSCLC"), аденокарциному легких и сквамозную карциному легких, рак перитонеальной полости, гепатоклеточный рак, рак желудка, включая гастроинтестинальный рак, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичников, рак мочевого пузыря, рак печени, гепатому, рак молочной железы, рак прямой кишки, ректальный рак, колоректальный рак, эндометриальную карциному или карциному матки, карциному слюнных желез, рак почек или гипернефрому, рак простаты, рак влагалища, рак щитовидной железы, карциному печени, анальную карциному, карциному полового члена, острую лейкемию, так же как рак головы/мозга и рак шеи.
Термин "химиотерапевтическое средство" обозначает соединение, которое можно использовать для лечения рака. Примеры химиотерапевтических агентов включают эрлотиниб (TARCEVA®, Genentech/OSI Pharm.), бортезомиб (VELCADE®, Millennium Pharm.), фулвестрант (FASLODEX®, AstraZeneca), сутент (SU11248, Pfizer), летрозол (FEMARA®, Novartis), иматинибмезилат (GLEEVEC®, Novartis), PTK787/ZK 222584 (Novartis), оксалиплатин (Eloxatin®, Sanofi), 5-FU (5-фторурацил), лейковорин, рапамицин (Sirolimus, RAPAMUNE®, Wyeth), лапатиниб (TYKERB®, GSK572016, Glaxo Smith Kline), лонафарниб (SCH 66336), сорафениб (BAY43-9006, Bayer Labs) и гефитиниб (IRESSA®, AstraZeneca), AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), алкилирующие агенты, такие как тиотепа и CYTOXAN® циклофосфамид; алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметиломеламин; ацетогенины (особенно буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая синтетический аналог топотекана); бриостатин; каллистатин; CC-1065 (включая его адозелезиновые, карзелезиновые и бизелезиновые синтетические аналоги); криптофицины (особенно криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги, KW-2189 и CB1-TM1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, хлорфосфамид, эстрамустин, ифосфамид, меклорентамин, гидрохлорид мехлорэтаминоксида, мелфалан, новембицин, фенэстерин, преднимустин, трофосфамид, урацил мустард; нитрозмочевины, такие как кармустин, хлорзотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энединовые антибиотики (например, калихеамицин, особенно калихеамицин gammalI и калихеамицин omegaIl (Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33:183-186); динемицин, включая динемицин A; бисфосфонаты, такие как клодронат; эсперамицин; так же как хромофор неокарциностатина и родственные хромопротеиновые энедииновые антибиотические хромофоры), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, актиномицин, карабицин, карминомицин, карцинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, ADRIAMYCIN® (доксорубицин), морфолино-доксорубицин, цианоморфолино-доксорубицин, 2-пирролино-доксорубицин и дезоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин C, микофенольную кислоту, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, порфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, дромостанолонпропионат, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; антиадреналы, такие как аминоглутетимид, митотан, трилостан; вспомогательные агенты фолиевой кислоты, такие как фролиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновую кислоту; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазикдон; элфорнитин; ацетат эллиптиния; эпотилон; этоглюцид; нитрат галлия; гидроксимочевину; лентинан; лонидайнин; мэйтансиноиды, такие как мэйтансин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лосоксантрон; подофиллиновую кислоту; 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK® полисахаридный комплекс (JHS Natural Products, Eugene, OR); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2"-трихлортриэтиламин; трихотецены (особенно T-2 токсин, верракурин A, роридин A и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-C"); циклофосфамид; тиотепа; таксоиды, например TAXOL® (паклитаксел; Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), ABRAXANE™ (Cremophor-free), сконструированные на базе альбумина наночастичные композиции паклитаксела (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Illinois), и TAXOTERE® (доксетаксел; Rhône-Poulenc Rorer, Antony, France); хлорамбуцил; GEMZAR® (гемцитабин); 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин; NAVELBINE® (винорелбин); новантрон; тенипозид; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; капецитабин (XELODA®); ибандронат; CPT-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифлорометилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиновая кислота; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любого из перечисленных соединений.
В определение "химиотерапевтическое средство" также включены (i) противогормональные агенты, действие которых состоит в регулировании или ингибировании воздействия гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены и селективные модуляторы рецепторов эстрогенов (SERM), включая, например, тамоксифен (включая NOLVADEX®; тамоксифенцитрат), ралоксифен, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон, и FARESTON® (торемифинцитрат); (ii) ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, который регулирует выработку эстрогена в надпочечниках, такие как, например, 4(5)-имидазолы, аминоглутетимид, MEGASE® (мегестролацетат), AROMASIN® (эксеместан; Pfizer), форместанин, фадрозол, RIVISOR® (ворозол), FEMARA® (летрозол; Novartis) и ARIMIDEX® (анастрозол; AstraZeneca); (iii) антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, леупролид и гозерелин; так же как троксацитабин (аналог 1,3-диоксоланнуклеозидцитозина); (iv) ингибиторы протеинкиназы; (v) ингибиторы липидной киназы; (vi) антисмысловые олигонуклеотиды, особенно те, которые ингибируют экспрессию генов в сигнальных схемах, вовлеченных в аберрантную пролиферацию клеток, такие как, например, PKC-alpha, Ralf и H-Ras; (vii) рибозимы, такие как ингибиторы экспрессии VEGF (например, ANGIOZYME®) и ингибиторы экспрессии HER2; (viii) вакцины, такие как вакцины, используемые при генной терапии, например ALLOVECTIN®, LEUVECTIN® и VAXID®; PROLEUKIN® rIL-2; ингибиторы топоизомеразы 1, такие как LURTOTECAN®; ABARELIX® rmRH; (ix) антиангиогенные агенты, такие как бевацизумаб (AVASTIN®, Genentech); и (x) фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любых из вышеперечисленных соединений. Другие антиангиогенные агенты включают ингибиторы MMP-2 (матричной металлопротеиназы 2), ингибиторы MMP-9 (матричной металлопротеиназы 9), ингибиторы COX-II (циклооксигеназы II) и ингибиторы VEGF рецепторов тирозинкиназы. Примеры таких подходящих ингибиторов матричных металлопротеиназ, которые можно использовать в сочетании с соединениями/композициями настоящего изобретения (такими как любые из соединений в заголовках примеров 5-25) раскрыты в WO 96/33172, WO 96/27583, EP 818442, EP 1004578, WO 98/07697, WO 98/03516, WO 98/34918, WO 98/34915, WO 98/33768, WO 98/30566, EP 606046, EP 931788, WO 90/05719, WO 99/52910, WO 99/52889, WO 99/29667, WO 99/07675, EP 945864, U.S. патент № 5863949, U.S. патент № 5861510, и EP 780386, причем все они включены сюда для ссылки во всей своей полноте. Примеры ингибиторов VEGF рецепторов тирозинкиназы включают 4-(4-бром-2-фторанилино)-6-метокси-7-(1-метилпиперидин-4-илметокси)хиназолин (ZD6474; пример 2 в WO 01/32651), 4-(4-фтор-2-метилиндол-5-илокси)-6-метокси-7-(3-пирролидин-1-илпропокси)хиназолин (AZD2171; пример 240 в WO 00/47212), ваталаниб (PTK787; WO 98/35985) и SU11248 (сунитиниб; WO 01/60814), и соединения, такие как те, что раскрыты в PCT публикациях № WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 и WO 98/13354.
Другие примеры химиотерапевтических средств, которые можно использовать в сочетании с соединениями настоящего изобретения (такими как любые из указанных соединений в заголовках примеров 5-25), включают ингибиторы PI3K (фосфоинозитид-3 киназы), такие, о которых сообщалось в Yaguchi et al. (2006) Jour. of the Nat. Cancer Inst. 98(8):545-556; US 7173029; US 7037915; US 6608056; US 6608053; US 6838457; US 6770641; US 6653320; US 6403588; US 2008/0242665; WO 2006/046031; WO 2006/046035; WO 2006/046040; WO 2007/042806; WO 2007/042810; WO 2004/017950; US 2004/092561; WO 2004/007491; WO 2004/006916; WO 2003/037886; US 2003/149074; WO 2003/035618; WO 2003/034997; US 2003/158212; EP 1417976; US 2004/053946; JP 2001247477; JP 08175990; JP 08176070; US 6703414; и WO 97/15658, причем все они включены сюда для ссылки в своей полноте. Конкретные примеры таких ингибиторов PI3K включают SF-1126 (PI3K ингибитор, Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235 (PI3K ингибитор, Novartis), XL-147 (PI3K ингибитор, Exelixis, Inc.) и GDC-0941 (PI3K ингибитор, Genentech, Inc.).
Термин "воспалительные заболевания" в том смысле, как использован в рассматриваемой заявке, включает, но ими не ограничивается, ревматоидный артрит, атеросклероз, застойную сердечную недостаточность, воспалительные заболевания кишечника (включая, но ими не ограничиваясь, болезнь Крона и язвенный колит), хроническое обструктивное легочное заболевание, фиброзные заболевания печени и почек, болезнь Крона, волчанку, кожные заболевания, такие как псориаз, экзема и склеродерма, остеоартрит, рассеянный склероз, астму, заболевания и нарушения, связанные с диабетическими осложнениями, фиброзную недостаточность в органах, таких как легкие, печень, почки, и воспалительные осложнения сердечно-сосудистой системы, такие как острый коронарный синдром.
Термин "противовоспалительное средство" означат соединение, которое можно использовать для лечения воспалений. Примеры противовоспалительных средств включают белковые терапевтические препараты для инъекций, такие как Enbrel®, Remicade®, Humira® и Kineret®. Другие примеры противовоспалительных средств включают нестероидные противовоспалительные агенты (NSAID), такие как ибупрофен или аспирин (который уменьшает отек и облегчает боль); модифицирующие заболевание противоревматоидные лекарственные препараты (DMARD), такие как метотрексат; 5-аминосалицилаты (сульфазалазин и не содержащие сульфамидов агенты); кортикостероиды; иммуномодуляторы, такие как 6-меркаптопутин ("6-MP"), азатиоприн ("AZA"), циклоспорины, и модификаторы биологических реакций, такие как Remicade.RTM. (инфликсимаб) и Enbrel.RTM. (этанерцепт); факторы роста фибробластов; полученные из тромбоцитов факторы роста; блокаторы ферментов, такие как Arava.RTM. (лефлуномид); и/или агенты, защищающие хрящи, такие как гиалуроновая кислота, глюкозамин и хондроитин.
Термин "пролекарство" в том смысле, как использован в настоящей заявке, относится к предшественнику или к форме производного соединения настоящего изобретения, которые способны быть ферментативно или гидролитически активированы или превращены в более активную исходную форму. См., например, Wilman, "Prodrugs in Cancer Chemotherapy" Biochemical Society Transactions, 14, pp. 375-382, 615th Meeting Belfast (1986) и Stella et al., "Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery," Directed Drug Delivery, Borchardt et al., (ed.), pp. 247-267, Humana Press (1985). Пролекарства настоящего изобретения включают, но ими не ограничиваются, содержащие сложные эфиры пролекарства, фосфатсодержащие пролекарства, тиофосфатсодержащие пролекарства, сульфатсодержащие пролекарства, пептидсодержащие пролекарства, модифицированные D-аминокислотой пролекарства, гликозилированные пролекарства, β-лактамсодержащие пролекарства, необязательно замещенные феноксиацетамидсодержащие пролекарства, необязательно замещенные фенилацетамидсодержащие пролекарства, 5-фторцитозиновые и другие 5-фторуридиновые пролекарства, которые можно превратить в более активные нецитотоксические лекарственные средства. Примеры цитотоксических лекарственных средств, которые можно превратить в пролекарственные формы для использования в настоящем изобретении, включают, но ими не ограничиваются, соединения настоящего изобретения и химиотерапевтические агенты, такие как раскрытые выше.
Термин "метаболит" обозначает продукт, полученный за счет метаболизма в организме специфического соединения или его соли. Метаболиты соединения можно идентифицировать, используя рутинные технологии, известные специалистам, и определить их активности, используя раскрытые здесь тесты. Такие продукты можно получить, например, в результате окисления, гидроксилирования, восстановления, гидролиза, амидирования, деамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п. вводимого соединения. Соответственно настоящее изобретение включает метаболиты соединений настоящего изобретения, включая соединения, полученные с использованием способа, включающего осуществление контактирования соединения настоящего изобретения с организмом млекопитающего в течение промежутка времени, достаточного для получения его метаболического продукта.
Термин "липосома" обозначает маленький пузырек, состоящий из различного типа липидов, фосфолипидов и/или поверхностно-активного агента, который можно использовать для доставки млекопитающему лекарственных средств (таких как ингибиторы MEK, раскрытые здесь, и необязательно, химиотерапевтическое средство). Компоненты липосом обычно организованы в виде двухслойного образования, аналогичного липидной структуре биологических мембран.
Термин "вкладыш в упаковку" используют относительно инструкций, которые обычно вкладывают в коммерческие упаковки терапевтических продуктов и которые содержат информацию о показаниях, способах применения, дозах, способах введения, противопоказаниях и/или предостережениях, касающихся использования таких терапевтических продуктов.
Термин "хиральный" относится к молекулам, которые не обладают свойством взаимоналожения зеркальных изображений друг друга, тогда как термин "ахиральный" относится к молекулам, которые обладают свойством взаимоналожения зеркальных изображений друг друга.
Термин "стереоизомер" относится к соединениям, которые имеют одинаковый химический состав и связи, но отличаются различной ориентацией их атомов в пространстве и которые не является взаимопревращаемыми при вращении вокруг простых связей.
Термин "диастереомер" относится к стереоизомеру с двумя или более центрами хиральности, причем такие молекулы не являются зеркальными изображениями друг друга. Диастереомеры обладают различными физическими свойствами, например точками плавления, точками кипения, спектральными характеристиками и реактивными способностями. Смеси диастереомеров можно разделить, используя аналитические методики высокого разрешения, такие как кристаллизация, электрофорез и хроматография.
Термин "энантиомеры" относится к двум стереоизомерам соединения, которые не являются взаимоналагаемыми зеркальными изображениями друг друга.
Стереохимические определения и условные обозначения, использованные в описании, соответствуют в основном S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; и Eliel, E. и Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Соединения настоящего изобретения могут содержать асимметрические или хиральные центры и поэтому существовать в различных стереоизомерных формах. Подразумевается, что все стереоизомерные формы указанных соединений настоящего изобретения, включая, но ими не ограничиваясь, диастереомеры, энантиомеры и тропизомеры, так же как и их смеси, такие как рацемические смеси, составляют часть настоящего изобретения. Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, т.е. они обладают способностью вращать плоскость плоско-поляризованного света. При описании оптически активных соединений префиксы D и L, или R и S, используют для обозначения абсолютной конфигурации молекулы относительно ее хирального центра (хиральных центров). Префиксы d и l или (+) и (-) используют для обозначения знака вращения плоско-поляризованного света указанным соединением, причем (-) или l означают, что указанное соединение является левовращающим. Символы (+) или d перед соединением означают, что оно является правовращающим. Для конкретной химической структуры указанные стереоизомеры идентичны, за исключением того, что они являются зеркальными изображениями друг друга. Конкретный стереоизомер может также называться энантиомером, и смесь таких изомеров часто называют энантиомерной смесью. Смесь энантиомеров 50:50 называют рацемической смесью или рацематом, который не проявляет стереоселективности или стереоспецифичности в химических реакциях или процессах. Термины "рацемическая смесь" и "рацемат" относятся к эквимолярной смеси двух энантиомерных образцов, лишенной оптической активности.
Термины "таутомер" или "таутомерная форма" относятся к структурным изомерам с различными энергиями, которые могут взаимопревращаться за счет низкого энергетического барьера. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) осуществляют взаимопревращения за счет миграции протона, такой как процессы кето-енольной и имин-енаминной изомеризации. Валентные таутомеры включают взаимопревращения за счет реорганизации некоторых связывающих электронов.
Фраза "фармацевтически приемлемая соль" в том смысле, как здесь использована, относится к фармацевтически приемлемым органическим или неорганическим солям соединений настоящего изобретения. Примеры солей включают, но ими не ограничиваются, сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, иодид, нитрат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентисинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат “мезилат”, этансульфонат, бензолсульфонат, пара-толуолсульфонат, памоат (то есть 1,1'-метилен-бис(2-гидрокси-3-нафтоат)), соли щелочных металлов (например, натрия и калия), соли щелочноземельных металлов (например, магния) и соли аммония. Фармацевтически приемлемая соль может содержать включения других молекул, таких как ионы ацетата, ионы сукцината или другие противоионы. Указанный противоион может быть любым органическим или неорганическим фрагментом, который стабилизирует заряд на исходном соединении. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль может содержать более одного заряженного атома в своей структуре. В случаях когда несколько заряженных атомов являются частью фармацевтически приемлемой соли, такая соль может иметь несколько противоионов. Следовательно, фармацевтически приемлемая соль может содержать один или более из заряженных атомов и/или один или более из противоионов.
Если рассматриваемое соединение настоящего изобретения представляет собой основание, нужную фармацевтически приемлемую соль можно получить любым подходящим способом, известным специалистам в данной области, например обработкой свободного основания неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, метансульфоновая кислота, фосфорная кислота и т.п., или органической кислотой, такой как уксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидильная кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота, альфа-гидроксикислоты, такие как лимонная кислота или винная кислота, аминокислоты, такие как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота, ароматические кислоты, такие как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновые кислоты, такие как пара-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота или т.п.
Если рассматриваемое соединение настоящего изобретения представляет собой кислоту, нужную фармацевтически приемлемую соль можно получить любым подходящим способом, например обрабатывая свободную кислоту неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный), гидроксидом щелочного металла или гидроксидом щелочноземельного металла или т.п. Иллюстративные примеры подходящих солей включают, но ими не ограничиваются, органические соли, полученные из аминокислот, таких как глицин и аргинин, аммиака, первичных, вторичных и третичных аминов и циклических аминов, таких как пиперидин, морфолин и пиперазин, и неорганические соли, полученные с натрием, кальцием, калием, магнием, марганцем, железом, медью, цинком, алюминием и литием.
Фраза "фармацевтически приемлемые" означает, что рассматриваемое вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащимися в композиции, и/или с организмом млекопитающего, которого ими лечат.
Термин "сольват" относится к ассоциации или комплексу молекул одного или более из растворителей и соединения настоящего изобретения. Примеры растворителей, которые образуют сольваты, включают, но ими не ограничиваются, воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин. Термин "гидрат" относится к комплексу, в котором растворителем является вода.
Термин "защитная группа" относится к заместителю, который обычно используют для блокирования или защиты конкретной функциональности, во время реакции других функциональных групп указанного соединения. Например, термин "аминозащитная группа" обозначает заместитель, присоединенный к аминогруппе, который блокирует или защищает аминофункциональности в указанном соединении. Подходящие аминозащитные группы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (BOC), бензилоксикарбонил (CBZ) и 9-флуоренилметиленоксикарбонил (Fmoc). Аналогично, термин "гидроксизащитная группа" относится к заместителю гидроксигруппы, который блокирует или защищает гидроксифункциональность. Подходящие защитные группы включают группы ацетила и триалкилсилила. Термин "карбоксизащитная группа" относится к заместителю у карбоксильной группы, который блокирует или защищает карбоксифункциональность. Обычные карбоксизащитные группы включают фенилсульфонилэтил, цианоэтил, 2-(триметилсилил)этил, 2-(триметилсилил)этоксиметил, 2-(пара-толуолсульфонил)этил, 2-(пара-нитрофенилсульфенил)этил, 2-(дифенилфосфино)этил, нитроэтил и т.п. Для общего описания защитных групп и их использования см. T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991.
Термины "соединение настоящего изобретения", "соединения настоящего изобретения", "соединения формулы I", "имидазопиридины" и "имидазопиридины формулы I", если нет других указаний, включают соединения/имидазопиридины формулы I и стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, метаболиты, соли (например, фармацевтически приемлемые соли) и их пролекарственные формы.
В настоящем изобретении предложены имидазопиридины формулы I, представленной выше, которые можно использовать в качестве ингибиторов киназы, в частности можно использовать в качестве ингибиторов MEK киназы. В одном из вариантов настоящего изобретения, если R3 представляет собой -(CR14R15)nC(=O)R11, -(CR14R15)nNR11R12, -(CR14R15)nOR11, -(CR14R15)nSR11, -(CR14R15)nS(O)R11 или -(CR14R15)nS(O)2R11; n представляет собой 0; и Z1 представляет собой N, тогда указанные R11 или R12 не представляют собой арил;
если Z1 представляет собой N, тогда R3 не представляет собой CH2-арил; а все остальные переменные определены в формуле I.
В одном из вариантов настоящего изобретения соединения имеют формулу I-a или I-b; и все остальные переменные имеют значения, определенные в формуле I или определенные в раскрытом выше варианте.
В одном из вариантов настоящего изобретения R2 представляет собой H, галоген, CF3 или C1-C3алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R2 представляет собой H, метил, CF3, F, или Cl; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R2 представляет собой H, F или Cl; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения R3 представляет собой H, галоген, CF3 или C1-C3алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R3 представляет собой H, метил, CF3, F или Cl; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R3 представляет собой H, F или Cl; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения R1' представляет собой H или C1-C3алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов. В другом варианте R1' представляет собой H, и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения Z1 представляет собой CR1, и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения Z1 представляет собой N, и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения Z1 представляет собой CR1 и R1 представляет собой H или C1-C3алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов. В другом варианте R1 представляет собой H, и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов. В другом варианте R1 представляет собой метил, и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения R4 представляет собой H или C1-C6алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R4 представляет собой H или метил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов. В другом варианте настоящего изобретения R4 представляет собой H; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения R5 представляет собой H или C1-C6алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R5 представляет собой H или метил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R5 представляет собой H; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R5 представляет собой метил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения X1 представляет собой OR11'; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой OR11' где R11' представляет собой H или C1-C12алкил (например, C1-C6алкил), замещенный одной или более из групп, независимо выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, оксо, -(CR19R20)nC(=Y')R16, -(CR19R20)nC(=Y')OR16, -(CR19R20)nC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)nSR16, -(CR19R20)nNR16C(=Y')R17, -(CR19R20)nNR16C(=Y')OR17, -(CR19R20)nNR18C(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR17SO2R16, -(CR19R20)nOC(=Y')R16, -(CR19R20)nOC(=Y')OR16, -(CR19R20)nOC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nOS(O)2(OR16), -(CR19R20)nOP(=Y')(OR16)(OR17), -(CR19R20)nOP(OR16)(OR17), -(CR19R20)nS(O)R16, -(CR19R20)nS(O)2R16, -(CR19R20)nS(O)2NR16R17, -(CR19R20)nS(O)(OR16), -(CR19R20)nS(O)2(OR16), -(CR19R20)nSC(=Y')R16, -(CR19R20)nSC(=Y')OR16, -(CR19R20)nSC(=Y')NR16R17, и R21; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой OR11' где R11' представляет собой гетероциклил (например, 4-6-членный гетероциклил), необязательно замещенный одной или более из групп, независимо выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, оксо, -(CR19R20)nC(=Y')R16, -(CR19R20)nC(=Y')OR16, -(CR19R20)nC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)nSR16, -(CR19R20)nNR16C(=Y')R17, -(CR19R20)nNR16C(=Y')OR17, -(CR19R20)nNR18C(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR17SO2R16, -(CR19R20)nOC(=Y')R16, -(CR19R20)nOC(=Y')OR16, -(CR19R20)nOC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nOS(O)2(OR16), -(CR19R20)nOP(=Y')(OR16)(OR17), -(CR19R20)nOP(OR16)(OR17), -(CR19R20)nS(O)R16, -(CR19R20)nS(O)2R16, -(CR19R20)nS(O)2NR16R17, -(CR19R20)nS(O)(OR16), -(CR19R20)nS(O)2(OR16), -(CR19R20)nSC(=Y')R16, -(CR19R20)nSC(=Y')OR16, -(CR19R20)nSC(=Y')NR16R17, и R21; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой OR11', где R11' представляет собой 4-6-членный гетероциклил, содержащий 1 кольцевой атом азота, где указанный гетероциклил необязательно замещен одной или более из групп, независимо выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, оксо, -(CR19R20)nC(=Y')R16, -(CR19R20)nC(=Y')OR16, -(CR19R20)nC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)nSR16, -(CR19R20)nNR16C(=Y')R17, -(CR19R20)nNR16C(=Y')OR17, -(CR19R20)nNR18C(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR17SO2R16, -(CR19R20)nOC(=Y')R16, -(CR19R20)nOC(=Y')OR16, -(CR19R20)nOC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nOS(O)2(OR16), -(CR19R20)nOP(=Y')(OR16)(OR17), -(CR19R20)nOP(OR16)(OR17), -(CR19R20)nS(O)R16, -(CR19R20)nS(O)2R16, -(CR19R20)nS(O)2NR16R17, -(CR19R20)nS(O)(OR16), -(CR19R20)nS(O)2(OR16), -(CR19R20)nSC(=Y')R16, -(CR19R20)nSC(=Y')OR16, -(CR19R20)nSC(=Y')NR16R17, и R21; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой R11'; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой R11', где R11' представляет собой H или C1-C12алкил (например, C1-C6алкил), замещенный одной или более из групп, независимо выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, оксо, -Si(C1-C6алкил)3, -(CR19R20)nC(=Y')R16, -(CR19R20)nC(=Y')OR16, -(CR19R20)nC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)nSR16, -(CR19R20)nNR16C(=Y')R17, -(CR19R20)nNR16C(=Y')OR17, -(CR19R20)nNR18C(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR17SO2R16, -(CR19R20)nOC(=Y')R16, -(CR19R20)nOC(=Y')OR16, -(CR19R20)nOC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nOS(O)2(OR16), -(CR19R20)nOP(=Y')(OR16)(OR17), -(CR19R20)nOP(OR16)(OR17), -(CR19R20)nS(O)R16, -(CR19R20)nS(O)2R16, -(CR19R20)nS(O)2NR16R17, -(CR19R20)nS(O)(OR16), -(CR19R20)nS(O)2(OR16), -(CR19R20)nSC(=Y')R16, -(CR19R20)nSC(=Y')OR16, -(CR19R20)nSC(=Y')NR16R17, и R21; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R5 представляет собой H и X1 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X1 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R5 представляет собой метил и X1 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения X1 представляет собой R11', и X1, взятый вместе с R5 и атомом азота, к которому они присоединены, образует 4-5-членное насыщенное циклическое кольцо, содержащее 0-2 дополнительные гетероатома, выбранные из O, S и N, где указанное циклическое кольцо необязательно замещено одной или более из групп, выбранных из галогена, CN, CF3, -OCF3, -NO2, оксо, -(CR19R20)nC(=Y')R16, -(CR19R20)nC(=Y')OR16, -(CR19R20)nC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR16R17, -(CR19R20)nOR16, -(CR19R20)n-SR16, -(CR19R20)nNR16C(=Y')R17, -(CR19R20)nNR16C(=Y')OR17, -(CR19R20)nNR18C(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nNR17SO2R16, -(CR19R20)nOC(=Y')R16, -(CR19R20)nOC(=Y')OR16, -(CR19R20)nOC(=Y')NR16R17, -(CR19R20)nOS(O)2(OR16), -(CR19R20)nOP(=Y')(OR16)(OR17), -(CR19R20)nOP(OR16)(OR17), -(CR19R20)nS(O)R16, -(CR19R20)nS(O)2R16, -(CR19R20)nS(O)2NR16R17, -(CR19R20)nS(O)(OR16), -(CR19R20)nS(O)2(OR16), -(CR19R20)nSC(=Y')R16, -(CR19R20)nSC(=Y')OR16, -(CR19R20)nSC(=Y')NR16R17, и R21; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения W представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения W представляет собой -OR11', где R11' представляет собой H или C1-C12алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения W представляет собой -OR11', где R11' представляет собой H; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения W представляет собой -OR11', где R11' представляет собой C1-C6алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения W' представляет собой -NHSO2R8; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения R6 представляет собой галоген, C2-C8алкинил, карбоциклил, или -SR16; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения R6 представляет собой галоген, C2-C3алкинил, C3-карбоциклил, или -SR16, где R16 представляет собой C1-C2алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения R6' представляет собой H, галоген, или C1-C3алкил; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения p представляет собой 1 или 2; и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В одном из вариантов настоящего изобретения X4 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
В другом варианте настоящего изобретения X4 представляет собой
и все остальные переменные определены в формуле I, I-a или I-b или имеют значения, указанные в любом из раскрытых выше вариантов.
Другой вариант настоящего изобретения включает соединения, раскрытые в примерах 5-25, и представленные далее соединения
Получение соединений формулы I
Имидазопиридины формулы I получают в соответствии с раскрытыми далее схемами и примерами или известными специалистам в данной области способами. Например, соединения формулы (I), где Y = W-C(O)-, можно получить в соответствии со схемой 1.
Схема 1
Никотиновые кислоты формулы (II) можно получить из коммерческих источников или получить, используя раскрытые в литературе способы. Кислоты (II) можно подвергнуть взаимодействию с анилинами (вводя соответствующие заместители R1), в присутствии основания, такого как LiHMDS, в растворителе, таком как ТГФ, при температуре от -78°C до 25°C, получая кислоты формулы (III). Сложные эфиры никотиновой кислоты (IV) можно получить из никотиновых кислот (III), осуществляя взаимодействие с алкилирующим агентом, таким как триметилсилилдиазометан, в растворителе, таком как толуол, при температуре от 0°C до 50°C. 2-анилино-6-цианопиридины формулы (V) можно получить из 6-галогенпиридинов (IV), осуществляя взаимодействие с неорганическим цианидом, таким как цианид цинка, в присутствии катализатора переходного металла, такого как Pd(PPh3)4, в растворителе, таком как ДМФ, при температуре от 50°C до температуры кипения с обратным холодильником, или при микроволновом облучении при температуре от 70°C до 200°C. Цианопиридины (V) можно восстановить, получая 2-аминометилпиридины (VI), A = CH2, восстанавливая водородом при давлении от 1 до 5 атмосфер, в присутствии катализатора, такого как палладий-на-угле, в растворителе, таком как метанол или уксусная кислота, с добавлением или без добавления сильной кислоты, такой как концентрированная хлористоводородная кислота. Альтернативно, цианопиридины (V) можно превратить в 2-аминометилпиридины, осуществляя взаимодействие с неорганическим гидридом металла, таким как боргидрид натрия, в присутствии соли металла, такой как хлорид кобальта, в растворителе, таком как метанол, при температуре от 0°C до комнатной температуры. Альтернативно соединения формулы (VI), A = NH, можно получить из соединений формулы (IV), осуществляя взаимодействие с гидразингидратом в растворителе, таком как этанол, при температуре от 0°C до температуры кипения с обратным холодильником.
Соединения (VII) можно получить из соединений (VI), осуществляя взаимодействие с ангидридом, таким как уксусный ангидрид или смешанный ангидрид, такой как муравьино-уксусный ангидрид, в растворителе, таком как тетрагидрофуран, при температуре от 0°C до температуры кипения с обратным холодильником. Соединения формулы (VIII) можно получить из соединений формулы (VII), осуществляя взаимодействие хлорирующим агентом, таким как оксихлорид фосфора, в растворителе, таком как толуол, при температуре от 25°C до температуры кипения с обратным холодильником. Альтернативно, соединения формулы (VIII) можно получить из соединений формулы (VII), осуществляя взаимодействие с кислотой, такой как муравьиная кислота, чистая или в растворителе, таком как диоксан, при температуре от 50°C до температуры кипения с обратным холодильником. Соединения формулы (IX) можно получить из соединений формулы (VIII), осуществляя взаимодействие с основанием, таким как гидроксид натрия, в растворителе, таком как этанол или метанол, при температуре от комнатной температуры вплоть до температуры кипения с обратным холодильником.
Соединения формулы (IX) можно подвергнуть взаимодействию с функционализированным гидроксиламином формулы (XII) (коммерчески доступен или можно получить в соответствии со схемами 5, 6 и 7) или амином и подходящим сшивающим агентом, таким как O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний гексафторфосфат, гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида или N,N'-дициклогексилкарбодиимид, в присутствии N-гидрокси-1,2,3-бензотриазола, в присутствии подходящего основания, такого как диизопропилэтиламин или триэтиламин в инертном растворителе, таком как тетрагидрофуран, N,N-диметилформамид или дихлорметан, при температуре около комнатной, получая соединения формулы (X). Соединения формулы (X) можно получить непосредственно из соединений формулы (VIII), осуществляя взаимодействие с амином или гидроксиламином DNHR в присутствии кислоты Льюиса, такой как триметилалюминий, в растворителе, таком как DCM, при температуре от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником. Альтернативно, соединения формулы (X) можно получить из соединений формулы (VIII) путем обработки функционализированным гидроксиламином в присутствии основания, такого как литийбис(триметилсилил)амид, в растворителе, таком как ТГФ, при температуре от -78°C до 25°C.
Кроме того, соединения формулы (I), где Y представляет собой W-C(O)-, можно получить в соответствии со схемой 2.
Схема 2
Соединения формулы (XV) можно получить из коммерческих источников или получить, используя раскрытые в литературе способы. Соединения формулы (XVI) можно получить из соединений формулы (XV), осуществляя взаимодействие с галогенирующим агентом, таким как сукцинимид или 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, в присутствии катализатора, такого как AIBN или пероксид бензоила, в растворителе, таком как дихлорэтан или четыреххлористый углерод, используя активацию светом или нагревая при температуре от комнатной до температуры кипения с обратным холодильником. Альтернативно, соединения формулы (XVI) могут быть получены из соединений формулы (XV) в две стадии, вначале образуя N-оксид пиридина, используя окисляющий агент, такой как 3-хлорпероксибензойная кислота, в растворителе, таком как DCM, при температуре около комнатной. Промежуточные N-оксиды можно превратить в галогенметилпиридины формулы (XVI), осуществляя взаимодействие с хлорирующим агентом, таким как оксихлорид фосфора. Соединения формулы (XVII) можно получить из соединений формулы (XVI), осуществляя взаимодействие с защищенной формой аммиака, такой как фталимид калия или диформилимид натрия, в растворителе, таком как DMF, при температуре от -5°C до 50°C. Если R'"= H и R""= C(=O)H, соединения формулы (XVII) можно превратить в сложные эфиры формиламиноникотиновой кислоты формулы (XVIII) путем обработки кислотой, такой как муравьиная кислота или хлористоводородная кислота, в растворителе, таком как метанол, при температуре от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником. Соединения формулы (XVIII) можно циклизовать до имидазопиридинов формулы (XIX), осуществляя взаимодействие с оксигалогенидом фосфора, таким как оксихлорид фосфора, в растворителе, таком как толуол, при температуре от 50°C до температуры кипения с обратным холодильником. Альтернативно, циклизацию можно осуществить, используя кислоту, такую как муравьиная кислота или уксусная кислота, чистая, при температуре от 25°C до температуры кипения с обратным холодильником. Сложные эфиры имидазопиридин-5-анилино формулы (XX) можно получить из галогенидов формулы (XIX), осуществляя взаимодействие с анилином (вводя соответствующие заместители R1), в присутствии основания, такого как литийбис(триметилсилил)амид, в растворителе, таком как ТГФ, при температуре от -78°C до комнатной температуры. Альтернативно, соединения формулы (XX) можно получить из соединений формулы (XIX), осуществляя взаимодействие с анилином (вводя соответствующие заместители R1), в присутствии катализатора, такого как трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0), основания, такого как фосфат калия, лиганда, такого как 2-дициклогексилфосфино-2',6'-(диизопропокси)бифенил, в подходящем растворителе, таком как толуол, при температуре от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником растворителя, или при микроволновом облучении при температуре от 70°C до 150°C. Кислоты формулы (XXI) можно получить из сложных эфиров формулы (XX), используя способы, раскрытые для превращения соединений формулы (VIII) в соединения формулы (IX) на схеме 1. Альтернативно, кислоты формулы (XXI) можно получить из соединений формулы (XIX), вначале осуществляя омыление, используя способы, раскрытые для превращения соединений формулы (VIII) в соединения формулы (IX), с последующей обработкой анилином (включая соответствующие заместители Rl), в присутствии основания, такого как литий(бистриметилсилил)амид, в растворителе, таком как ТГФ, при температуре от -78°C до комнатной температуры.
Анилиновые кислоты формулы (XXI) можно превратить в соединения формулы (X), используя способы, раскрытые для превращения соединений формулы (IX) в соединения формулы (X) на схеме 1. Кроме того, сложные эфиры формулы (XX) можно превратить в соединения формулы (X), используя способы, раскрытые для превращения соединений формулы (VIII) в соединения формулы (X) на схеме 1.
Соединения формулы (XVI) и (XVII) можно получить в соответствии со схемой 3.
Схема 3
Соединения формулы (XXIII) можно получить из соединений формулы (XXII). Соединения формулы (XXII) вначале этерифицируют за счет образования хлорида бис-кислоты, используя оксалилхлорид с каталитическим ДМФ, в растворителе, таком как DCM, при температуре около комнатной, затем гасят спиртом, таким как метанол. Полученное бис-сложноэфирное промежуточное соединение можно затем окислить до соединения формулы (XXIII), осуществляя взаимодействие с окисляющим агентом, таким как метахлорпероксибензойная кислота, в растворителе, таком как DCM, при температуре от 0°C до комнатной температуры. Соединения формулы (XXV) можно получить из соединений формулы (XXIV) путем восстановления металлгидридом, таким как боргидрид натрия, в присутствии добавки, такой как хлорид кальция, в растворителе, таком как этанол, при температуре от 0°C до комнатной температуры. Соединения формулы (XXV) можно превратить в соединения формулы (XXVI), где R = Cl путем галогенирования, используя сульфонилхлорид, такой как тионилхлорид, в растворителе, таком как дихлорметан, при температуре от -5°C до комнатной температуры. Соединения формулы (XXVI), где R= N3, можно получить из соединений формулы (XXV), осуществляя взаимодействие с азидом, таким как дифенилфосфорилазид, в присутствии диазокарбоксилата, такого как диизопропилазодикарбоксилат, в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как ТГФ, при температуре около комнатной температуры. Соединения формулы (XXVI), где R = N3, можно превратить в соединения формулы (XXVI), где R = NH2, путем обработки восстанавливающим агентом, таким как трифенилфосфин, в растворителе, таком как ТГФ, при температуре от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником.
Соединения формулы (I), в которых Y = R8SO2NH-, можно получить в соответствии со схемой 4.
Схема 4
Соединения формулы (XXVII) можно получить из соединений формулы (IX) путем обработки дифенилфосфорилазидом в растворителе, таком как толуол, в присутствии основания, такого как триэтиламин. Соединения формулы (XXVIII) можно получить из соединений формулы (XXVII) путем обработки основанием, таким как гидрид натрия, в растворителе, таком как ДМФ, осуществляя затем реакцию с сульфонилхлоридом (соответствующим образом замещенным). Соединения формулы (XXIX) можно получить из соединений формулы (XXVIII), удаляя защитные группы, используя основание, такое как гидроксид натрия, в растворителе, таком как ДМФ, при температуре от 50°C до 150°C.
Гидроксиламины формулы (XII) можно получить, используя способы, раскрытые в литературе, или способ синтеза, представленный на схеме 5.
Схема 5
Первичные или вторичные спирты общей формулы (XXXVII) можно получить, используя способы, раскрытые в литературе. Спирты можно подвергнуть взаимодействию с N-гидроксифталимидом, используя фосфин и связывающий агент, такой как диэтилазодикарбоксилат, до получения соединений общей формулы (XXXVIII). У соединения общей формулы (XXXVIII) можно удалить защитные группы, используя гидразин, метилгидразин, или кислоту, такую как хлористоводородная кислота, или основание, такое как водный аммиак, получая гидроксиламины общей формулы (XII-a).
Соединения формулы (XII-a) можно далее модифицировать, используя восстановительное аминирование альдегидами или кетонами, используя восстанавливающий агент, такой как триацетоксиборгидрид натрия, цианоборгидрид натрия или боран-пиридин, в растворителе, таком как дихлорэтан, при температуре от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником, получая гидроксиламины общей формулы (XII-b). Кроме того, соединения формулы (XII-a) можно далее модифицировать путем алкилирования алкилгалогенидом в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как дихлорметан, получая гидроксиламины общей формулы (XII-b).
Альтернативно, гидроксиламины формулы (XII-a) можно получить в соответствии со схемой 6.
Схема 6
Алкилгалогениды формулы (XL) можно подвергнуть взаимодействию с N-гидроксифталимидом в присутствии основания, такого как карбонат калия, в растворителе, таком как диметилсульфоксид, при температуре от 10°C до 50°C. Соединения формулы (XLI) можно превратить в соединения формулы (XII), используя способы, раскрытые для превращения соединений формулы (XXXVIII) в соединения формулы (XII) на схеме 5.
Альтернативно, соединения формулы (XII-a) можно получить в соответствии со схемой 7.
Схема 7
Соединения формулы (XLII) можно подвергнуть взаимодействию с N-гидроксифталимидом в присутствии каталитического количества основания, такого как DIPEA, и сокатализатора, такого как тетрабутиламмонийбромид, в растворителе, таком как толуол, при температуре от 50°C до температуры кипения с обратным холодильником. Соединения формулы (XLIII) можно превратить в соединения формулы (XII), используя способы, раскрытые для превращения соединений формулы (XXXVIII) в соединения формулы (XII) на схеме 5.
Анилины общей формулы (XXXI), используемые в раскрытых выше реакциях перекрестного сочетания, можно получить, используя раскрытые в литературе способы или в соответствии со схемой 8.
Схема 8
Замещенный 1-хлор-4-нитробензол можно подвергнуть взаимодействию с металлическим R"'MXn, таким как циклопропилбороновая кислота или гексаметилдисилазан, в растворителе, таком как ксилол, используя катализатор, такой как тетракис(трифенилфосфин)палладий, при температуре от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником, получая соединения формулы (XXX). Нитрогруппу можно восстановить, используя раскрытые в литературе способы, такие как осуществление реакции в атмосфере водорода при давлении от 1 до 5 атмосфер, в присутствии катализатора, такого как палладий-на-угле, и в растворителе, таком как этанол или этилацетат, при комнатной температуре, получая соединения формулы (XXXI).
Альтернативно, анилины формулы (LV) можно получить в соответствии со схемой 9.
Схема 9
4-Бром- или йоданилины формулы (LIV) можно подвергнуть взаимодействию с по меньшей мере 2 эквивалентами сильного металлоорганического основания, такого как н-бутиллитий, в растворителе, таком как ТГФ, при температуре от -100°C до -20°C с последующим гашением промежуточных ариллитиевых соединений электрофилом, таким как триметилсилилхлорид, до получения соединений формулы (LV).
Должно быть понятно, что в тех случаях, когда существуют соответствующие функциональные группы, можно получить производные соединений формулы (I) или можно далее получить производные любых промежуточных соединений, используемых при их получении, используя один или более из стандартных способов синтеза, используя реакции замещения, окисления, восстановления или расщепления. Конкретные схемы введения заместителей включают обычные методики алкилирования, арилирования, гетероарилирования, ацилирования, сульфонилирования, галогенирования, нитрования, формилирования и сочетания.
Например, группы арилбромида или арилхлорида можно превратить в арилиодиды, используя реакцию Финкельштейна, используя источник иодида, такой как иодид натрия, катализатор, такой как иодид меди, и лиганд, такой как транс-N,N'-диметил-1,2-циклогександиамин, в растворителе, таком как 1,4-диоксан, и нагревая полученную реакционную смесь при температуре кипения с обратным холодильником. Арилтриалкилсиланы можно превратить в арилиодиды, обрабатывая силан источником иодида, таким как монохлорид йода, в растворителе, таком как дихлорметан, с кислотой Льюиса, такой как тетрафторборат серебра, или без нее, при температуре от -40°C до температуры кипения с обратным холодильником.
В другом примере группы первичного амина (-NH2) можно алкилировать с помощью процесса восстановительного алкилирования, используя альдегид или кетон и боргидрид, например триацетоксиборгидрид натрия или цианоборгидрид натрия, в растворителе, таком как галогенированный углеводород, например 1,2-дихлорэтан, или спирт, такой как этанол, и при необходимости в присутствии кислоты, такой как уксусная кислота, при температуре окружающей среды. Группы вторичного амина (-NH-) можно алкилировать аналогичным способом, используя альдегид.
В следующем примере группы первичного амина или вторичного амина можно превратить в амидные группы (-NHCOR' или -NRCOR') путем ацилирования. Ацилирование можно осуществить, используя реакцию с соответствующим хлорангидридом в присутствии основания, такого как триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, или осуществляя реакцию с соответствующей карбоновой кислотой в присутствии подходящего связывающего агента, такого как HATU (O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфат), в подходящем растворителе, таком как дихлорметан. Аналогично, группы амина можно превратить в сульфонамидные группы (-NHSO2R' или -NR''SO2R'), осуществляя реакцию с соответствующим сульфонилхлоридом в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан. Группы первичного или вторичного амина можно превратить в группы мочевины (-NHCONR'R'' или -NRCONR'R''), осуществляя реакцию с соответствующим изоцианатом в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан.
Амин (-NH2) можно получить путем восстановления нитрогруппы (-NO2), например, каталитическим гидрированием, используя, например, водород, в присутствии металлического катализатора, например палладия, на такой подложке, как уголь, в растворителе, таком как этилацетат или спирт, например метанол. Альтернативно, указанную трансформацию можно осуществить с помощью химического восстановления, используя, например, металл, например олово или железо, в присутствии кислоты, такой как хлористоводородная кислота.
В следующем примере группы амина (-CH2NH2) можно получить путем восстановления нитрилов (-CN), например, путем каталитического гидрирования, используя, например, водород в присутствии металлического катализатора, например палладия, на такой подложке, как уголь или никель Ренея, в растворителе, таком как простой эфир, например циклический простой эфир, такой как тетрагидрофуран, при температуре от -78°C до температуры кипения с обратным холодильником растворителя.
В следующем примере группы амина (-NH2) можно получить из групп карбоновой кислоты (-CO2H), используя превращение в соответствующий ацилазид (-CON3), перегруппировку Куртиса и гидролиз полученного изоцианата (-N=C=O).
Альдегидные группы (-CHO) можно превратить в группы амина (-CH2NR'R'') путем восстановительного аминирования, используя амин и боргидрид, например триацетоксиборгидрид натрия или цианоборгидрид натрия, в растворителе, таком как галогенированный углеводород, например дихлорметан, или спирт, такой как этанол, при необходимости в присутствии кислоты, такой как уксусная кислота, при температуре окружающей среды.
В следующем примере альдегидные группы можно превратить в алкенильные группы (-CH=CHR'), используя реакцию Виттига или реакцию Водсворта-Эммонса (Wadsworth-Emmons), используя соответствующий фосфоран или фосфонат в стандартных условиях, известных специалистам в данной области.
Альдегидные группы можно получить путем восстановления сложноэфирных групп (таких как -CO2Et) или нитрилов (-CN), используя диизобутилалюминийгидрид в подходящем растворителе, таком как толуол. Альтернативно, альдегидные группы можно получить путем окисления спиртовых групп, используя любой подходящий окисляющий агент, известный специалистам в данной области.
Сложноэфирные группы (-CO2R') можно превратить в соответствующие кислотные группы (-CO2H), используя катализируемый кислотой гидролиз или катализируемый основанием гидролиз, в зависимости от природы R. Если R представляет собой трет-бутил, катализируемый кислотой гидролиз можно осуществить, например, путем обработки органической кислотой, такой как трифторуксусная кислота, в водном растворителе или путем обработки неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, в водном растворителе.
Группы карбоновой кислоты (-CO2H) можно превратить в амиды (CONHR' или -CONR'R''), осуществляя реакцию с соответствующим амином в присутствии подходящего связывающего агента, такого как HATU, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан.
В следующем примере можно получить гомологи карбоновых кислот по одному углероду (т.е. -CO2H до -CH2CO2H) путем превращения в соответствующий хлорангидрид (-COCl) с последующим синтезом Арндта-Эйстерта.
В следующем примере -OH группы можно получить из соответствующего сложного эфира (например, -CO2R') или альдегида (-CHO) путем восстановления, используя, например, металлгидридный комплекс, такой как литийалюминийгидрид, в диэтиловом эфире или тетрагидрофуране, или боргидрид натрия в растворителе, таком как метанол. Альтернативно, спирт можно получить путем восстановления соответствующей кислоты (-CO2H), используя, например, литийалюминийгидрид в растворителе, таком как тетрагидрофуран, или используя боран в растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Спиртовые группы можно превратить в отщепляемые группы, такие как атомы галогенов или сульфонилоксигруппы, такие как алкилсульфонилокси, например трифторметилсульфонилокси или арилсульфонилокси, например пара-толуолсульфонилоксигруппу, используя условия, известные специалистам в данной области. Например, спирт можно подвергнуть взаимодействию с тионилхлоридом в галогенированном углеводороде (например, в дихлорметане), получая соответствующий хлорид. В указанной реакции можно также использовать основание (например, триэтиламин).
В другом примере спиртовые, фенольные или амидные группы можно алкилировать, осуществляя реакцию сочетания фенола или амида со спиртом в растворителе, таком как тетрагидрофуран, в присутствии фосфина, например трифенилфосфина, и активатора, такого как диэтил-, диизопропил- или диметилазодикарбоксилат. Альтернативно, алкилирование можно осуществить путем депротонирования, используя подходящее основание, например гидрид натрия, с последующим добавлением алкилирующего агента, такого как алкилгалогенид.
Ароматические галогенсодержащие заместители в соединениях можно подвергнуть обмену галоген-металл путем обработки основанием, например литиевым основанием, таким как н-бутил- или трет-бутиллитий, необязательно при низкой температуре, например при температуре около -78°C, в растворителе, таком как тетрагидрофуран, и затем погасить электрофильным реагентом для введения нужного заместителя. Так, например, группу формила можно ввести, используя N,N-диметилформамид в качестве электрофила. Ароматические галогенсодержащие заместители можно, альтернативно, подвергнуть катализируемым металлом реакциям (например, используя палладий или медь) для введения, например, кислотных, сложноэфирных, циано, амидных, арильных, гетероарильных, алкенильных, алкинильных, тио- или аминозаместителей. Подходящие процедуры, которые можно использовать, включают те, что раскрыты Хеком, Сузуки, Стиллэ, Бухвальдом или Хартвигом.
Ароматические галогенсодержащие заместители могут также претерпевать реакцию нуклеофильного замещения с последующей реакцией с соответствующим нуклеофилом, таким как амин или спирт. Выгодно осуществлять такую реакцию при повышенной температуре под действием микроволнового излучения.
Соединения настоящего изобретения тестируют по их способности ингибировать MEK активность и активацию (первичные анализы) и по их биологическому воздействию на растущие клетки (вторичные анализы), как раскрыто далее. Указанные соединения настоящего изобретения, обладающие величиной ИК50 менее чем 5 мкМ (более предпочтительно менее чем 0,1 мкМ, наиболее предпочтительно менее чем 0,01 мкМ) в анализе MEK активности примера 1, ИК50 менее чем 5 мкМ (более предпочтительно менее чем 1 мкМ, еще более предпочтительно менее чем 0,1 мкМ, наиболее предпочтительно менее чем 0,01 мкМ) в анализе активации MEK примера 2, ЭК50 менее чем 10 мкМ (более предпочтительно менее чем 1 мкМ, еще более предпочтительно менее чем 0,5 мкМ, наиболее предпочтительно менее чем 0,1 мкМ) в клеточном пролиферативном анализе примера 3 и/или ЭК50 менее чем 10 мкМ (более предпочтительно менее чем 1 мкМ, еще более предпочтительно менее чем 0,5 мкМ, наиболее предпочтительно менее чем 0,1 мкМ) в анализе фосфорилирования ERK примера 4, можно использовать в качестве ингибиторов MEK.
Настоящее изобретение включает композицию (например, фармацевтическую композицию), включающую соединение формулы I (и/или его сольваты и/или соли) и носитель (фармацевтически приемлемый носитель). Настоящее изобретение также включает композицию (например, фармацевтическую композицию), включающую соединение формулы I (и/или его сольваты и/или соли) и носитель (фармацевтически приемлемый носитель), дополнительно включающую второе химиотерапевтическое и/или второе противовоспалительное средство, такие как раскрытые в рассматриваемом описании. Композиции настоящего изобретения можно использовать для ингибирования аномального роста клеток или лечения гиперпролиферативного нарушения у млекопитающего (например, у человека). Композиции настоящего изобретения можно также использовать для лечения воспалительных заболеваний у млекопитающего (например, у человека).
Соединения настоящего изобретения (такие как любое из соединений, указанных в заголовках примеров 5-25) и композиции можно также использовать для лечения аутоиммунного заболевания, деструктивного разрушения костей, пролиферативных нарушений, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, фиброзного заболевания или нейродегенеративного заболевания у млекопитающего (например, у человека). Примеры таких заболеваний/нарушений включают, но ими не ограничиваются, диабет и диабетические осложнения, диабетическую ретинопатию, ретинопатию недоношенных, возрастную мышечную дегенерацию, гемангиому, идиопатический пульмонарный фиброз, ринит и атопический дерматит, болезнь почек и почечную недостаточность, поликистозное заболевание почек, сердечную недостаточность с застойными явлениями, нейрофиброматоз, отторжение трансплантированных органов, кахексию, удар, септический шок, сердечную недостаточность, болезнь Альцгеймера, хроническую или невропатическую боль и вирусные инфекции, такие как HIV, вирус гепатита (B) (HBV), вирус папилломы человека (HPV), цитомегаловирус (CMV) и вирус Эпштейна-Барра (EBV). Термин "хроническая боль" для целей настоящего изобретения включает, но ими не ограничивается, идиопатическую боль и боль, связанную с хроническим алкоголизмом, дефицитом витаминов, уремией, гипотироидизмом, воспалениями, артритом, и послеоперационную боль. Невропатическая боль связана с множеством состояний, которые включают, но ими не ограничиваются, воспаление, послеоперационную боль, фантомную боль конечностей, боль при ожогах, подагру, тригеминальную невралгию, острую герпетическую и постгерпетическую боль, каузалгию, диабетическую невропатию, plexus avulsion, неврому, васкулит, вирусную инфекцию, повреждение с разможжением тканей, компрессионные поражения, повреждение тканей, ампутацию конечностей, боль при артритах и нервные поражения между периферической нервной системой и центральной нервной системой.
Соединения настоящего изобретения (такие как любое из соединений, указанных в заголовках примеров 5-25) и композиции также можно использовать для лечения панкреатита или болезни почек (включая пролиферативный гломерулонефрит и болезни почек, вызванные диабетом) у млекопитающего (например, у человека).
Соединения настоящего изобретения (такие как любое из соединений, указанных в заголовках примеров 5-25) и композиции можно также использовать для профилактики бластоцитной имплантации у млекопитающего (например, у человека).
Настоящее изобретение включает способ ингибирования аномального клеточного роста или лечения гиперпролиферативного нарушения у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и/или солей) или его композиции. Также включен в настоящее изобретение способ лечения воспалительного заболевания у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и/или солей) или его композиции.
Настоящее изобретение включает способ ингибирования аномального клеточного роста или лечения гиперпролиферативного нарушения у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и/или солей) или его композиции, в сочетании со вторым химиотерапевтическим средством, таким как те, что раскрыты в рассматриваемом описании. Настоящее изобретение также включает способ лечения воспалительного заболевания у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и/или солей) или его композиции, в сочетании со вторым противовоспалительным средством, таким как те, что раскрыты в рассматриваемом описании.
Настоящее изобретение включает способ лечения аутоиммунного заболевания, деструктивного разрушения костей, пролиферативных нарушений, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, фиброзного заболевания или нейродегенеративного заболевания у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и солей) или его композиции и необязательно дополнительно включающий введение второго терапевтического средства. Примеры таких заболеваний/нарушений включают, но ими не ограничиваются, диабет и диабетические осложнения, диабетическую ретинопатию, ретинопатию недоношенных, возрастную мышечную дегенерацию, гемангиому, идиопатический пульмонарный фиброз, ринит и атопический дерматит, болезнь почек и почечную недостаточность, поликистозное заболевание почек, сердечную недостаточность с застойными явлениями, нейрофиброматоз, отторжение трансплантированных органов, кахексию, удар, септический шок, сердечную недостаточность, болезнь Альцгеймера, хроническую или невропатическую боль и вирусные инфекции, такие как HIV, вирус гепатита (B) (HBV), вирус папилломы человека (HPV), цитомегаловирус (CMV) и вирус Эпштейна-Барра (EBV).
Настоящее изобретение включает способ лечения панкреатита или болезни почек (включая пролиферативный гломерулонефрит и вызванные диабетом заболевания почек) у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов и солей) или его композиции и необязательно включающий дополнительно введение второго терапевтического средства.
Настоящее изобретение включает способ предотвращения бластоцитной имплантации у млекопитающего (например, у человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I (и/или его сольватов или солей) или его композиции и необязательно дополнительно включающий введение второго терапевтического средства.
Настоящее изобретение включает способ применения соединения настоящего изобретения для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток или организмов млекопитающих или связанных с ними патологических состояний.
Считают также, что соединения настоящего изобретения могут сделать аномальные клетки более восприимчивыми к лечению с использованием облучения с целью уничтожения таких клеток и/или ингибирования роста таких клеток. Соответственно настоящее изобретение также относится к способу сенсибилизации аномальных клеток у млекопитающего (например, у человека) для лечения облучением, который включает введение указанному млекопитающему такого количества соединения формулы I (и/или его сольватов или солей) или его композиции, которое эффективно сенсибилизирует аномальные клетки для последующего лечения их облучением.
Введение соединений настоящего изобретения (здесь и далее "активное соединение (активные соединения)") можно осуществить любым способом, который обеспечит доставку указанных соединений в сайт их действия. Указанные способы включают пероральный, интрадуоденальный, парентеральный (включая внутривенные, подкожные, внутримышечные, внутрисосудистые инъекции или вливания), наружный, ректальный способы введения или ингаляции.
Количество вводимого активного соединения будет зависеть от подлежащего лечению субъекта, тяжести нарушения или состояния, скорости введения, предполагаемого места действия указанного соединения и выбора лечащего врача. Однако эффективная доза находится в интервале от около 0,001 до около 100 мг на кг веса тела в день, предпочтительно от около 1 до около 35 мг/кг/день, в одной дозе или в разделенных дозах. Для человека весом 70 кг такое количество составит от около 0,05 до 7 г/день, предпочтительно от около 0,05 до около 2,5 г/день. В некоторых случаях могут оказаться подходящими уровни доз выше или ниже указанных пределов, хотя в других случаях еще большие дозы можно использовать без вредного побочного эффекта, при условии, что такие большие дозы предварительно вначале разделяют на несколько небольших доз для введения в течение дня.
Активное соединение можно использовать как единственную терапию или в сочетании с одним или более из химиотерапевтических или противовоспалительных средств, например тех, что раскрыты в рассматриваемом описании. Такое совместное лечение можно обеспечить путем одновременного, последовательного или раздельного введения индивидууму компонентов лечения.
Указанная фармацевтическая композиция может быть, например, в форме, пригодной для перорального введения, такой как таблетки, капсулы, пилюли, порошки, композиции с замедленным выделением, растворы, суспензии, в форме препаратов для парентеральных инъекций в виде стерильных растворов, суспензий или эмульсий, препаратов для наружного применения в виде мазей или кремов или препаратов для ректального введения в виде суппозиториев. Фармацевтическая композиция может быть в единичных дозовых формах для однократного введения точной дозы. Фармацевтические композиции включают обычный фармацевтический носитель или эксципиент и соединение в соответствии с настоящим изобретением в качестве активного ингредиента. Кроме того, они могут включать другие медицинские или фармацевтические агенты, носители, вспомогательные вещества и т.д.
Примеры форм для парентерального введения включают растворы или суспензии активных соединений в стерильных водных растворах, например в водных растворах пропиленгликоля или декстрозы. Такие дозовые формы могут быть при желании соответствующим образом буферированы.
Подходящие фармацевтические носители включают инертные разбавители или наполнители, воду и различные органические растворители. Указанные фармацевтические композиции могут при желании содержать дополнительные ингредиенты, такие как вкусовые агенты, связующие, эксципиенты и т.д. Так, для перорального введения можно использовать таблетки, содержащие различные эксципиенты, такие как лимонная кислота, вместе с различными разрыхлителями, такими как крахмал, альгиновая кислота и некоторые комплексные силикаты и связующие агенты, такие как сахароза, желатин и акация. Для целей таблетирования часто можно использовать дополнительные смазывающие агенты, такие как стеарат магния, натрийлаурилсульфат и тальк. Твердые композиции аналогичного типа можно также использовать, заполняя ими мягкие или твердые желатиновые капсулы. Поэтому предпочтительные материалы включают лактозу или молочный сахар и высокомолекулярные полиэтиленгликоли. Если для перорального введения желательны водные суспензии или эликсиры, активное соединение в них можно скомбинировать с различными подсластителями или вкусовыми агентами, окрашивающими веществами или красителями и, при желании, эмульгирующими агентами или суспендирующими агентами вместе с разбавителями, такими как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин или их комбинации.
Способы получения различных фармацевтических композиций, содержащих конкретные количества активных соединений, известны или будут понятны специалистам в указанной области. Примеры можно найти в Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Ester, Pa., 15.sup.th Edition (1975).
ПРИМЕРЫ
Сокращения
| nBuLi | н-бутиллитий |
| CDCl3 | Дейтерированный хлороформ |
| CD3OD | Дейтерированный метанол |
| CH2Cl2 | Дихлорметан |
| DCM | Дихлорметан |
| DIPEA | Диизопропилэтиламин |
| ДМФ | Диметилформамид |
| ДМСО | Диметилсульфоксид |
| Dppf | 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен |
| EDCI | 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид |
| Et3N | Триэтиламин |
| Et2O | Диэтиловый эфир |
| HATU | О-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N′,N′-тетраметилуронийгексафторфосфат |
| HCl | Хлористоводородная кислота |
| Hyflo® | Диатомовая земля |
| HOBt | 1-гидроксибензотриазол |
| H2SO4 | Серная кислота |
| ICl | Монохлорид иода |
| IMS | Промышленные метилированные спирты |
| LHMDS | Литийбис(триметилсилил)амид |
| MeOH | Метанол |
| MgSO4 | Сульфат магния |
| NaHCO3 | Бикарбонат натрия |
| Na2SO4 | Сульфат натрия |
| NBS | N-бромсукцинимид |
| Pd(PPh3)4 | Тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) |
| Pd2dba3 | Трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) |
| Pd(dppf)Cl2 | [1,1′]-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(0) |
| Si-PPC | Предварительно набитый картридж для флеш-хроматографии на силикагеле: Isolute® SPE, Biotage SNAP ® или ISCO Redisep® |
| SCX-2 | Isolute ® сорбент на основе двуокиси кремния с химически связанными функциональными группами пропилсульфоновой кислоты |
| ТГФ | Тетрагидрофуран |
Общие условия экспериментов
1H ЯМР спектры записаны при комнатной температуре на спектрометре Varian Unity Inova (400 МГц) с 5-мм датчиком с тройным резонансом. Химические сдвиги выражены в миллионных долях (ppm) относительно тетраметилсилана. Были использованы следующие сокращения: br = широкий сигнал, s = синглет, d = дублет, dd = дублет дублетов, t = триплет, q = квартет, m = мультиплет.
Эксперименты по высокоэффективной жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии (ЖХМС) для определения времени удерживания (RT) и соответствующих ионных масс осуществляют, используя один из следующих способов.
Способ A: эксперименты осуществляют на масс-спектрометре Waters Micromass ZQ quadrupole, соединенном с системой жидкостной хроматографии Hewlett Packard HP1100 LC с диодным детектором в виде матрицы. В этой системе используют колонку Higgins Clipeus 5 микрон C18 100×3,0 мм и скорость потока 1 мл/мин. Исходная система растворителя состоит на 95% из воды, содержащей 0,1% муравьиной кислоты (растворитель A) и 5% ацетонитрила, содержащего 0,1% муравьиной кислоты (растворитель B) в течение первой минуты с последующим градиентом вплоть до 5% растворителя A и 95% растворителя B в течение следующих 14 минут. Конечная система растворителя поддерживается постоянной в течение следующих 5 минут.
Способ B: Эксперименты осуществляют на масс-спектрометре Waters Platform LC quadrupole, соединенном с системой жидкостной хроматографии Hewlett Packard HP1100 LC с диодным детектором в виде матрицы и 100-позиционным автоматическим пробоотборником, используя колонку Phenomenex Luna C18(2) 30×4,6 мм, при скорости потока 2 мл/мин. Исходная система растворителя состоит на 95% из воды, содержащей 0,1% муравьиной кислоты (растворитель A) и 5% ацетонитрила, содержащего 0,1% муравьиной кислоты (растворитель B) в течение первых 0,5 минут с последующим градиентом вплоть до 5% растворителя A и 95% растворителя B в течение следующих 4 минут. Конечная система растворителя поддерживается постоянной в течение следующих 0,50 минут.
Способ C: Эксперименты осуществляют на масс-спектрометре PE Sciex API 150 EX quadrupole, соединенном с системой жидкостной хроматографии Shimadzu LC-IOAD LC с диодным детектором в виде матрицы и 225-позиционным автоматическим пробоотборником, используя колонку Kromasil C18 50×4,6 мм при скорости потока 3 мл/мин. Применяют градиентную систему растворителя, начиная со 100% воды, содержащей 0,05% TFA (растворитель A) и 0% ацетонитрила, содеращего 0,0375% TFA (растворитель B), и изменяя ее до 10% растворителя A и 90% растворителя B в течение 4 минут. Конечную систему растворителя поддерживают постоянной в течение следующих 0,50 минут.
Способ D: Эксперименты осуществляют на жидкостном хроматографе - масс-спектрометре Agilent Technologies, соединенном с системой жидкостной хроматографии Agilent Technologies Series 1200 LC с диодным детектором в виде матрицы, используя колонку Zorbax 1,8 мк SB-C18 30×2,1 мм при скорости потока 1,5 мл/мин. Способ D1: Исходная система растворителя состоит на 95% воды, содержащей 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель A), и 5% ацетонитрила, содержащего 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель B), с последующим градиентным изменением системы до 5% растворителя A и 95% растворителя B в течение 1,5 минуты. Конечную систему растворителя поддерживают постоянной в течение следующей 1 минуты. Способ D2: Исходная система растворителя состоит на 95% воды, содержащей 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель A), и 5% ацетонитрила, содержащего 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель B), с последующим градиентным изменением системы до 5% растворителя A и 95% растворителя B в течение 3,0 минут. Конечную систему растворителя поддерживают постоянной в течение следующей 1 минуты.
Способ E: Эксперименты осуществляют на жидкостном хроматографе - масс-спектрометре Agilent Technologies, соединенном с системой жидкостной хроматографии Agilent Technologies Series 1200 LC с диодным детектором в виде матрицы, используя колонку Zorbax 1,8 мк SB-C18 30×2,1 мм при скорости потока 0,6 мл/мин. Способ E1: Исходная система растворителя состоит на 95% воды, содержащей 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель A), и 5% ацетонитрила, содержащего 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель B), с последующим градиентным изменением системы до 5% растворителя A и 95% растворителя B в течение 9,0 минут. Конечную систему растворителя поддерживают постоянной в течение следующей 1 минуты. Способ E2: Исходная система растворителя состоит на 95% воды, содержащей 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель A), и 5% ацетонитрила, содержащего 0,05% трифторуксусной кислоты (растворитель B), с последующим градиентным изменением системы до 5% растворителя A и 95% растворителя B в течение 20,0 минут. Конечную систему растворителя поддерживают постоянной в течение следующей 1 минуты.
Микроволновые эксперименты осуществляют, используя прибор Personal Chemistry Emrys Iniatiator™ или Optimizer™, в котором используется одномодовый резонатор и тьюнинг динамического поля, причем оба обеспечивают воспроизводимость и контроль. Имеется возможность изменять температуру в диапазоне 40-250ºC и давление вплоть до 20 бар.
ПРИМЕР 1
MEK анализ (анализ активности MEK)
Конститутивно активированные человеческие мутантные MEK1, экспрессированные в клетках насекомых, используют в качестве источника ферментативной активности в киназном анализе в конечной концентрации 15 нМ.
Указанный анализ осуществляют в течение 30 минут в присутствии 50 мкМ ATP, используя рекомбинантные GST-ERK1, полученные в E.coli в качестве субстрата. Фосфорилирование субстрата детектируют и определяют количественно, используя HTRF реагенты, поставляемые Cisbio. Указанные реагенты состоят из анти-GST антител, конъюгированных с аллофикоцианином (XL665) и анти-фосфо (Thr202/Tyr204) ERK антител, конъюгированных с европий-криптатом. Реагенты используют в конечной концентрации 4 мкг/мл и 0,84 мкг/мл соответственно. Анти-фосфо антитела распознают ERK1, двойственно фосфорилированные на Thr202 и Tyr204. Когда оба антитела связаны с ERK1 (т.е. когда субстрат фосфорилирован), перенос энергии с криптата на аллофикоцианин происходит после возбуждения на длине волны 340 нм, что приводит к возникновению флуоресценции, которая пропорциональна количеству образующегося фосфорилированного субстрата. Флуоресценцию определяют, используя многолуночный флуориметр.
Соединения разбавляют в ДМСО перед добавлением в аналитический буфер, и конечная концентрация ДМСО в указанном анализе составляет 1%.
Величину ИК50 определяют как концентрацию, при которой рассматриваемое соединение обеспечивает 50% ингибирования от контроля. Значения ИК50 рассчитывают, используя пакет программного обеспечения XLfit (версия 2.0.5).
Соединения, указанные в заголовках примеров 5-20 и 22-24, демонстрируют значения ИК50 менее чем 0,5 мкМ в анализе, описанном в примере 1. Некоторые из указанных соединений демонстрируют значения ИК50 менее чем 0,1 мкМ в анализе, описанном в примере 1. Соединения, указанные в заголовках примеров 21 и 25, демонстрируют значения ИК50 менее чем 10 мкМ в анализе, описанном в примере 1.
ПРИМЕР 2
bRaf анализ (анализ активации MEK)
Конститутивно активированные bRaf мутанты, экспрессированные в клетках насекомых, используют в качестве источника ферментативной активности.
Указанный анализ осуществляют в течение 30 минут в присутствии 200 мкМ ATP, используя рекомбинантные GST-MEK1, продуцированные в E.coli в качестве субстрата. Фосфорилирование субстрата детектируют и количественно определяют, используя HTRF и реагенты, поставляемые Cisbio. Указанные реагенты состоят из анти-GST антител, конъюгированных с аллофикоцианином (XL665), и анти-фосфо (Ser217/Ser221) MEK антител, конъюгированных с европий-криптатом. Анти-фосфо антитела распознают MEK, двойственно фосфорилированные на Ser217 и Ser221 или единично фосфорилированные на Ser217. Когда оба антитела связаны с MEK (т.е. когда субстрат фосфорилирован), перенос энергии с криптата на аллофикоцианин происходит после возбуждения на длине волны 340 нм, что приводит к возникновению флуоресценции, которая пропорциональна количеству образующегося фосфорилированного субстрата. Флуоресценцию детектируют, используя многолуночный флуориметр.
Соединения разбавляют в ДМСО перед добавлением к аналитическому буферу, и конечная концентрация ДМСО в указанном анализе составляет 1%.
Величину ИК50 определяют как концентрацию, при которой рассматриваемое соединение обеспечивает 50% ингибирования от контроля. Значения ИК50 рассчитывают, используя пакет программного обеспечения XLfit (версия 2.0.5).
ПРИМЕР 3
Анализ клеточной пролиферации
Соединения тестируют в клеточном пролиферативном анализе, используя следующие клеточные линии:
HCT116 колоректальная карцинома человека (ATCC),
A375 злокачественная меланома человека (ATCC).
Обе клеточные линии поддерживают в DMEM/F12 (1:1) среде (Gibco), дополненной 10% FCS при 37ºC во влажном инкубаторе с 5% CO2.
Клетки высевают в 96-ячеечные планшеты в количестве 2000 клеток/лунка и через 24 часа их экспонируют различным концентрациям соединений в 0,83% ДМСО. Клетки культивируют еще в течение 72 часов и в каждую лунку добавляют равные объемы CellTiter-Glo реагента (Promega). Это вызывает лизис клеток и приводит к возникновению сигнала люминесценции, который пропорционален количеству выделившегося ATP (и, следовательно, пропорционален количеству клеток в лунке), который можно детектировать, используя многолуночный люминометр.
Величину ЭК50 определяют как концентрацию, при которой рассматриваемое соединение обеспечивает 50% ингибирования от контрольного значения. Величины ИК50 рассчитывают, используя пакет программного обеспечения XLfit (версия 2.0.5).
В этом анализе соединения, указанные в заголовках примеров 5-8, 11-13 и 18-20, демонстрируют значения ЭК50 менее чем 0,5 мкМ для обеих клеточных линий. Некоторые из соединений, указанных в заголовках примеров 5-8, 11-13 и 18-20, демонстрируют значения ЭК50 менее чем 0,1 мкМ для обеих клеточных линий. Соединения, указанные в заголовках примеров 9-10 и 14-17, демонстрируют значения ЭК50 менее чем 0,8 мкМ для HCT116 клеточной линии.
ПРИМЕР 4
Анализ на базе фосфо-ERK клеток
Соединения тестируют, применяя ELISA для фосфо-ERK клеток, используя следующие клеточные линии:
HCT116 колоректальная карцинома человека (ATCC),
A375 злокачественная меланома человека (ATCC).
Обе клеточные линии поддерживают в DMEM/F12 (1:1) среде (Gibco), дополненной 10% FCS при 37°C во влажном инкубаторе с 5% CO2.
Клетки высевают в 96-ячеечные планшеты в количестве 2000 клеток/лунка и через 24 часа их экспонируют различным концентрациям соединений в 0,83% ДМСО. Клетки культивируют еще в течение 2 часов или 24 часов, фиксируют формальдегидом (конечная концентрация 2%) и проникаемым метанолом. После блокирования TBST-3% BSA фиксированные клетки инкубируют с первичным антителом (анти-фосфо ERK от кролика) в течение ночи при 4°C. Клетки инкубируют с пропидийиодидом (флуоресцентный краситель ДНК) и определение клеточных пара-ERK осуществляют, используя антикроличье вторичное антитело, конъюгированное с флуоресцентным красителем Alexa Fluor 488 dye (Molecular probes). Флуоресценцию анализируют, используя Acumen Explorer (TTP Labtech), лазерный сканирующий микропланшетный цитометр, и полученный с помощью Alexa Fluor 488 сигнал нормализуют до PI сигнала (пропорционального числу клеток).
Величину ЭК50 определяют как концентрацию, при которой величина сигнала рассматриваемого соединения соответствует половине расстояния от базовой линии до максимальной величины реакции. Величины ЭК50 рассчитывают, используя пакет программного обеспечения XLfit (версия 2.0.5).
В этом анализе соединения, указанные в заголовках примеров 5-8, 11-12 и 18-20, демонстрируют значения ЭК50 менее чем 0,02 мкМ для обеих клеточных линий. Некоторые из соединений, указанных в заголовках примеров 5-8, 11-12 и 18-20, демонстрируют значения ЭК50 менее чем 0,01 мкМ для обеих клеточных линий. Соединения, указанные в заголовках примеров 9-10 и 13-17, демонстрируют значения ЭК50 менее чем 0,05 мкМ для HCT116 клеточной линии.
СИНТЕЗ ИМИДАЗО[1,5-a]ПИРИДИНОВ
2-Фтор-4-триметилсиланилфениламин
Способ A, стадия 1: (3-Фтор-4-нитрофенил)триметилсилан
4-Хлор-2-фторнитробензол (97,2 г, 0,55 моль) растворяют в ксилолах (208 мл) и добавляют гексаметилдисилан (306 г, 2,78 моль). Аргон барботируют через смесь в течение 20 минут, затем добавляют Pd(PPh3)4 (16,2 г, 14 ммоль) и полученную смесь нагревают в непрерывном потоке аргона при 150°С в течение 1 часа. Затем баллон с аргоном закрывают и полученную смесь нагревают при 150°С в течение следующих 60 часов. После охлаждения полученную смесь разбавляют диэтиловым эфиром и фильтруют через слой диоксида кремния. Фильтровальную лепешку промывают дополнительным количеством диэтилового эфира и объединенные фильтраты концентрируют в вакууме. В результате очистки полученного остатка с помощью флеш-хроматографии (SiO2, 98:1:1 пентан:CH2Cl2:Et2O элюент) получают указанное в заголовке соединение в виде масла оранжевого цвета (76,7 г). Нечистые хроматографические фракции объединяют и концентрируют и затем осуществляют вакуумную перегонку (т. кип. l10°C, 6 мбар), получая следующую порцию указанного в заголовке соединения в виде масла оранжевого цвета (7,2 г, полный выход 83,9 г, 71%).
1H ЯМР δ (ДМСО-d6): 0,30 (9H, c), 7,56 (1H, д, J=8,02 Гц), 7,67 (1H, дд, J=11,49, 1,14 Гц), 8,10 (1H, т, J=7,66 Гц).
Способ A, стадия 2: 2-Фтор-4-триметилсиланилфениламин
Суспензию 10 вес.% палладия-на-угле (4,0 г) в IMS (25 мл) добавляют к раствору (3-фтор-4-нитрофенил)триметилсилана (62,0 г, 0,29 моль) в IMS (250 мл) и полученную реакционную смесь продувают азотом пять раз, а затем три раза водородом. Полученную реакционную смесь затем перемешивают под давлением 3 бара водородом при комнатной температуре в течение 4 часов. Полученную реакционную смесь затем снова продувают азотом перед тем, как фильтруют через слой Celite® с промывками этилацетатом. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение в виде масла светло-коричневого цвета (53,0 г, количественно).
1H ЯМР (CDCl3): 7,16-7,09 (1H, м), 7,10 (1H, д, J=7,75 Гц), 6,81 (1H, т, J=8,16 Гц), 3,78 (2H, c), 0,26 (9H, c).
Способ B, стадия 2: 2-Фтор-4-триметилсиланилфениламин
К раствору 4-бром-2-фторфениламина (114 г, 0,6 моль) в безводном ТГФ (750 мл) при -78°C добавляют 1,6M раствор nBuLi в гексанах (1500 мл, 2,4 моль) по каплям, поддерживая внутреннюю температуру ниже -60°C, в инертной атмосфере. Полученную реакционную смесь обрабатывают по каплям TMSCl (256 мл, 2,0 моль), поддерживая внутреннюю температуру ниже -60°C. Полученную реакционную смесь оставляют нагреться до 0°C в течение 1 часа и выливают в охлажденную льдом 2M HCl (примерно 1 л). Полученную смесь интенсивно перемешивают в течение 10 минут, затем органический слой выделяют и промывают водой и насыщенным раствором карбоната калия, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют, получая указанное в заголовке соединение в виде масла светло-коричневого цвета (89 г, 81%).
4-Циклопропил-2-фторфениламин
Стадия 1: 3-Фтор-4-нитрофениловый эфир трифторметансульфоновой кислоты
К раствору 3-фтор-4-нитрофенола (12,5 г, 80 ммоль) и трифторметансульфонового ангидрида (26,8 мл, 160 ммоль) в DCM (300 мл) при 0°C добавляют триэтиламин (44,6 мл, 320 ммоль) по каплям. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при 0°С в течение 2 часов, затем оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 18 часов. Реакцию гасят, добавляя воду, и полученную смесь экстрагируют DCM. Органический слой выделяют, промывают водой и затем сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0 до 40% этилацетат в циклогексане), получая указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета (12,8 г, 56% выход).
1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 8,39 (1H, т, J=8,83 Гц), 8,12 (1H, дд, J=11,09, 2,65 Гц), 7,67 (1H, ддд, J=9,20, 2,62, 1,52 Гц).
Стадия 2: 4-Циклопропил-2-фтор-1-нитробензол
Перемешиваемую суспензию 3-фтор-4-нитрофенилового эфира трифторметансульфоновой кислоты (5,6 г, 19 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (2,09 г, 23,3 ммоль) Pd(dppf)Cl2 (1,24 г, 1,5 ммоль) и 2M водного карбоната цезия (30 мл, 60 ммоль) в толуоле (20 мл) дегазируют перед тем, как нагревают при 90°C в атмосфере аргона в течение 2,5 часа. Полученную реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры перед тем, как фильтруют через слой Celite®, промывая этилацетатом. Полученный фильтрат промывают (вода, солевой раствор) и затем сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент 0-30% этилацетат в пентане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (2,79 г, 81%).
1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 8,03 (1H, т, J=8,39 Гц), 7,28 (1H, дд, J=13,19, 1,91 Гц), 7,16 (1H, дд, J=8,61, 1,90 Гц), 2,14-2,05 (1H, м), 1,21-1,05 (2H, м), 0,92-0,82 (2H, м).
Стадия 3: 4-Циклопропил-2-фторфениламин
Суспензию палладия-на-угле (200 мг, 10 вес.%) в IMS добавляют к дегазированному раствору 4-циклопропил-2-фтор-1-нитробензола (1,45 г, 8 ммоль) в IMS (50 мл), воздух откачивают, заполняют азотом, затем снова откачивают и снова заполняют водородом. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при давлении 1 атмосфера водорода при комнатной температуре в течение 24 часов перед тем, как фильтруют через слой Celite®, затем промывают этилацетатом. Полученный фильтрат концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде остатка бледно-пурпурного цвета (1,19 г, 98%).
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 6,72-6,63 (3H, м), 3,56 (2H, c), 1,83-1,75 (1H, м), 0,93-0,82 (2H, м), 0,59-0,54 (2H, м).
Метиловый эфир 2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
Стадия 1: 6-Хлор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновая кислота
К холодному (-78°C) раствору 2-фтор-4-триметилсиланилфениламина (64,7 г, 353 ммоль) в безводном ТГФ (170 мл) добавляют раствор LHMDS (555 мл, 1M в гексанах, 555 ммоль) по каплям в течение 45 минут в атмосфере азота. Через 2,5 часа при -78°C добавляют раствор 2,6-дихлорникотиновой кислоты (33,8 г, 177 ммоль) в безводном ТГФ (100 мл). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при -78°С в течение 30 минут, затем оставляют нагреваться до комнатной температуры. После 18 часов перемешивания при комнатной температуре реакцию гасят, добавляя измельченный лед, и значение pH доводят до pH 1, добавляя концентрированную HCl (примерно 90 мл). Полученный раствор экстрагируют этилацетатом и органический слой промывают водой, затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме. Полученный остаток тщательно растирают трижды последовательно с метанолом и фильтруют, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (46,7 г, 78%). ЖХ-МС (способ B): RT = 4,83 мин, M+H+ = 339.
Стадия 2: Метиловый эфир 6-хлор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты
К суспензии 6-хлор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (33,7 г, 99,5 ммоль) в дихлорметане (500 мл) при 0°C добавляют DIPEA (17,1 мл, 99,5 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают в течение 10 минут, затем ДМФ (2 мл) и оксалилхлорид (8,7 мл, 99,5 ммоль) добавляют по каплям (осторожно: бурное выделение газа). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов и затем добавляют по каплям к раствору DIPEA (17,1 мл, 99,5 ммоль) в MeOH (500 мл) при 0°C в течение 45 минут. Затем полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов перед тем, как концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем водой, затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде пены коричневого цвета, которую используют без очистки на следующей стадии (36,4 г). ЖХ-МС (способ B): RT = 5,35 минуты, M+H+ = 353.
Стадия 3: Метиловый эфир 6-циано-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты
Дегазированную суспензию метилового эфира 6-хлор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (4,8 г, 12,4 ммоль), цианида цинка (1,2 г, 10,2 ммоль) и Pd(PPh3)4 (1,6 г, 1,36 ммоль) в диметилформамиде (14 мл) подвергают микроволновому облучению при 190°С в течение 20 минут. Указанную процедуру повторяют семь раз и все полученные реакционные смеси объединяют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Водный слой выделяют и трижды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывают водой и затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (диоксид кремния, градиент от 0% до 100%, диэтиловый эфир в пентане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (18,2 г). ЖХ-МС (способ B): RT = 4,74 минут, M+H+ = 344.
Стадия 4: Метиловый эфир 6-аминометил-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты
К суспензии метилового эфира 6-циано-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (13,1 г, 38,2 ммоль) в метаноле (285 мл) добавляют хлорид кобальта(II) (18,2 г, 76,4 ммоль). Полученную реакционную смесь охлаждают до 0°C и небольшими порциями добавляют боргидрид натрия (14,5 г, 382 ммоль) за 20 минут (осторожно: бурное выделение газа). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при 0°С в течение 1 часа. Реакцию гасят, добавляя концентрированную хлористоводородную кислоту (50 мл), и полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 10 минут и при комнатной температуре в течение 45 минут. Затем добавляют диэтилентриамин (9 мл) и полученную смесь перемешивают в течение еще 15 минут. Полученную реакционную смесь фильтруют, чтобы удалить твердое белое вещество, которое промывают дихлорметаном. Полученный фильтрат концентрируют в вакууме и полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, затем водой и затем солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества коричневого цвета (13,2 г, 100%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,82 минуты, M+H+ = 348.
Стадия 5: Метиловый эфир 2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
Раствор метилового эфира 6-аминометил-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (13,2 г, 38,2 ммоль) в муравьиной кислоте (200 мл) и уксусном ангидриде (40 мл) затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и осуществляют азеотропную перегонку с толуолом. Полученный остаток растворяют в дихлорметане и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (12,7 г, 89%). ЖХ-МС (способ B): RT = 4,17 минуты, M+H+ = 376.
Метиловый эфир 5-хлоримидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1, способ A: Метиловый эфир 6-бромметил-2-хлорникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 2-хлор-6-метилникотиновой кислоты (100 г, 0,54 моль) в DCE (1,0 л) добавляют перекристаллизованный N-бромсукцинимид (124,7 г, 0,70 моль) и пероксид бензоила (13,1 г, 0,05 моль). Полученную реакционную смесь нагревают при 70°С в течение 16 часов, причем за это время реагенты растворяются, образуя темно-красный раствор. Полученную реакционную смесь разбавляют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (200 мл), при этом красный цвет раствора светлеет до желтого. Водный слой экстрагируют DCM (2×100 мл). Объединенные органические фракции промывают солевым раствором (100 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме, получая сырой продукт (<138 г, <0,54 моль) в виде масла желтого цвета, который содержит приблизительно 40% целевого продукта. 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,18 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,48 (1H, д, J=7,9 Гц), 4,51 (2H, c), 3,94 (3H, c).
Стадия 1, способ B: Альтернативный способ получения метилового эфира 6-бромметил-2-хлорникотиновой кислоты
К механически перемешиваемому раствору метилового эфира 2-хлор-6-метилникотиновой кислоты (147 г, 0,79 моль) в DCE (1,5 л) добавляют 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (181,8 г, 0,635 моль) и AIBN (6,35 г, 0,04 моль). Полученную реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 72 часов, причем за это время реагенты растворяются, образуя раствор темно-красного/коричневого цвета. Полученную реакционную смесь охлаждают и разбавляют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1 л), в результате чего красный цвет раствора светлеет до желтого. Слои разделяют и водный слой экстрагируют DCM (2×750 мл). Объединенные органические фракции промывают водой (1 л), насыщенным солевым раствором (1 л), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме. Полученное масло желтого цвета (235 г), содержащее приблизительно 46% нужного продукта, используют на следующей стадии сырым, без дополнительной очистки. 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,18 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,48 (1H, д, J=7,9 Гц), 4,51 (2H, c), 3,94 (3H, c).
Стадия 2, способ A: Метиловый эфир 2-хлор-6-диформиламинометилникотиновой кислоты
К раствору сырого метилового эфира 6-бромметил-2-хлорникотиновой кислоты (<138 г, <0,54 моль) в ДМФ (400 мл) добавляют диформамид натрия (56,3 г, 0,59 моль) и полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученная реакционная смесь быстро темнеет и наблюдается небольшое выделение тепла. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток растворяют в этилацетате (200 мл). Полученный раствор промывают водой (400 мл) и водный слой экстрагируют этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (100 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме. Полученный остаток помещают в сухом виде на диоксид кремния (150 г) и остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (SiO2 400 г, 40% этилацетат в циклогексане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (46 г, 33% за две стадии). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,46 (2H, ушир. c), 7,56 (1H, д, J=7,7 Гц), 6,66 (1H, д, J=7,9 Гц), 4,39 (2H, ушир. c), 3,36 (3H, c).
Стадия 2, способ B: Метиловый эфир 2-хлор-6-диформиламинометилникотиновой кислоты
К раствору сырого метилового эфира 6-бромметил-2-хлорникотиновой кислоты (235 г) в ДМФ (500 мл) порциями добавляют диформамид натрия (82 г, 0,878 моль), поддерживая температуру ниже 30°C, и полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов (N.B. полученная реакционная смесь быстро темнеет, и наблюдается небольшое выделение тепла). Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток растворяют в этилацетате (400 мл). Полученный раствор промывают водой (2×400 мл) и водный слой экстрагируют этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (200 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме. Полученный остаток помещают в сухом виде на диоксид кремния (200 г) и остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (SiO2 300 г, 10-30% этилацетат в циклогексане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (90,2 г, 44% за две стадии). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,46 (2H, ушир. c), 7,56 (1H, д, J=7,7 Гц), 6,66 (1H, д, J=7,9 Гц), 4,39 (2H, ушир. c), 3,36 (3H, c).
Стадия 3, способ A: Метиловый эфир 2-хлор-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 2-хлор-6-диформиламинометилникотиновой кислоты (53,0 г, 0,21 моль) в метаноле (300 мл) добавляют воду (3,72 мл, 0,21 моль) и муравьиную кислоту (15,6 мл, 0,42 моль) перед тем, как полученную реакционную смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток растворяют в этилацетате (200 мл). Полученный раствор промывают водой (200 мл) и водный слой экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (100 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде масла оранжевого цвета которое отверждается при стоянии (42,6 г, 90%). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,34 (1H, c), 8,17 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,31 (1H, д, J=7,8 Гц), 6,63 (1H, ушир. c), 4,63 (2H, д, J=5,6 Гц), 3,96 (3H, c).
Стадия 3, способ B: Метиловый эфир 2-хлор-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 2-хлор-6-диформиламинометилникотиновой кислоты (90,2 г, 0,352 моль) в метаноле (530 мл) добавляют воду (8 мл, 0,44 моль) и муравьиную кислоту (27,6 мл, 0,73 моль) перед тем, как полученную реакционную смесь нагревают при слабом кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток растворяют в этилацетате (400 мл). Полученный раствор промывают водой (400 мл) и водный слой экстрагируют этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (300 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде масла оранжевого цвета, которое отверждается при стоянии (79,78 г, 99%). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,34 (1H, c), 8,17 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,31 (1H, д, J=7,8 Гц), 6,63 (1H, ушир. c), 4,63 (2H, д, J=5,6 Гц), 3,96 (3H, c).
Стадия 4: Метиловый эфир 5-хлоримидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии метилового эфира 2-хлор-6-формиламинометилникотиновой кислоты (42,6 г, 0,19 моль) в толуоле (400 мл) добавляют оксихлорид фосфора (V) (18,2 мл, 0,20 моль) и полученную реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 1,5 часа. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и разбавляют этилацетатом (200 мл) перед тем, как обрабатывают раствором гидроксида натрия (2M), чтобы довести значение pH до приблизительно 8. Слои разделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (100 мл), сушат (MgSO4), затем добавляют активированный уголь (~5 г) и полученный раствор перемешивают в течение 5 минут, после чего фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желто-коричневого цвета (34,4 г, 88%). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,52 (1H, c), 7,57 (1H, c), 7,45 (1H, д, J=9,3 Гц), 7,25 (1H, д, J=9,1 Гц), 3,97 (3H, c).
5-(2-Фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
Стадия 1: Метиловый эфир 2-(2-фтор-4-йодофениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (10,3 г, 27,4 ммоль) в DCM (275 мл) при 0°C добавляют по каплям монохлорид йода в виде раствора в DCM (54,9 мл, 1М, 54,9 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при 0°С в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь промывают водным раствором метабисульфита натрия (100 мл, 0,5M) и водный слой дважды экстрагируют этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (50 мл), сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде смолы оранжевого цвета (11,6 г, 100%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,72 минуты, M+H+ = 430.
Стадия 2: Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии метилового эфира 2-(2-фтор-4-йодофениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (11,6 г, 27,4 ммоль) в толуоле (160 мл) добавляют оксихлорид фосфора (V) (5,1 мл, 54,8 ммоль) и полученную реакционную смесь нагревают при 95°С в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и полученный остаток выливают на лед. Полученную смесь промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (40 мл) и водный слой дважды экстрагируют этилацетатом (2×30 мл). Объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (30 мл), сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (SiO2, градиент 0-70% этилацетат в DCM), получая указанное в заголовке соединение в виде масла коричневого цвета (5,6 г, 50%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,62 минуты, M+H+ = 412.
Стадия 3: 5-(2-Фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (5,6 г, 13,6 ммоль) в IMS (50 мл) добавляют водный раствор гидроксида натрия (27,2 мл, 1M, 27,2 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивают при 65°С в течение 2 часов. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме для удаления IMS. Полученный раствор подкисляют до значения pH ~5, добавляя водный раствор хлористоводородной кислоты (1M), что вызывает образование осадка. Полученный продукт собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 45°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бежевого цвета (5,4 г, 100%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,79 минуты, M+H+ = 398.
Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты. Способ A
К раствору литийбис(триметилсилил)амида (9,98 мл, 1M раствор, 9,98 ммоль) в ТГФ (20 мл) в атмосфере азота при -70°C по каплям добавляют в течение 15 минут раствор 2-фтор-4-йодоанилина (1,01 г, 4,28 ммоль) и метилового эфира 5-хлоримидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (1,0 г, 4,75 ммоль) в ТГФ (20 мл), получая раствор ярко-красного цвета. После перемешивания в течение 30 минут при -78°C полученную реакционную смесь оставляют нагреться до -30°C и затем гасят насыщенным водным раствором аммонийхлорида (200 мл). Полученную смесь дважды экстрагируют этилацетатом, после чего объединенные органические экстракты сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент 0-40% этилацетат в циклогексане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (1,15 г, 65%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,54 минуты, M+H+ = 412.
Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты. Способ B
К перемешиваемой суспензии 2-фтор-4-йодоанилина (53,95 г, 0,256 моль) и метилового эфира 5-хлороимидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (62,0 г, 0,253 моль) в ТГФ (500 мл) в атмосфере азота при -78°C по каплям добавляют раствор литийбис(триметилсилил)амида (544 мл, 1М раствор, 0,544 моль) в течение 1 часа, поддерживая температуру ниже -65°C, получая в результате раствор красно-коричневого цвета. После перемешивания в течение 30 минут при -78°C полученную реакционную смесь оставляют нагреться до -30°C и затем гасят, добавляют воду (100 мл). Растворитель удаляют в вакууме перед тем, как разбавляют водой (500 мл), и полученную смесь экстрагируют 2-метилтетрагидрофураном (2×500 мл). Объединенные органические экстракты промывают водой, затем солевым раствором, сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток тщательно растирают с трет-бутилметиловым эфиром (600 мл), получая продукт в виде твердого вещества желто-коричневого цвета (87,2 г 83%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,54 минуты, [M+H]+ = 412.
5-(4-Бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
Стадия 1: Метиловый эфир 2-(4-бром-2-фторфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (11,6 г, 30,9 ммоль) в DCM (300 мл) при -30°C порциями добавляют N-бромсукцинимид (5,56 г, 30,9 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при -30°С в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток разделяют между насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. Органический слой выделяют и промывают водой, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде смолы оранжевого цвета (11,8 г, 100%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,67 минуты, M+H+ = 382/384.
Стадия 2: Метиловый эфир 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору метилового эфира 2-(4-бром-2-фторфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (11,8 г, 30,9 ммоль) в толуоле (550 мл) добавляют оксихлорид фосфора (V) (3,16 мл, 34 ммоль) и полученную реакционную смесь нагревают при 95°С в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и обрабатывают водным насыщенным раствором бикарбоната натрия, затем дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фракции промывают солевым раствором, сушат (Na2SO4) и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент 0-30% этилацетат в DCM), получая указанное в заголовке соединение в виде масла коричневого цвета (5,4 г, 49%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,56 минуты, M+H+ = 364/366.
Стадия 3: 5-(4-Бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
К раствору метилового эфира 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (5,4 г, 15 ммоль) в IMS (110 мл) добавляют водный раствор гидроксида натрия (30 мл, 1М, 30 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивают при 65°С в течение 1,5 часа. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме до объема ~50 мл и полученный раствор подкисляют до pH ~2, добавляя водный раствор хлористоводородной кислоты (1M), что вызывает образование осадка. Полученный осадок собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 35°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества темного желто-коричневого цвета (4,48 г, 85%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,81 минуты, M+H+ = 350/352.
5-(2-Фтор-4-циклопропилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
Стадия 1: Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-циклопропилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору 2-фтор-4-циклопропиланилина (395 мг, 2,61 ммоль) и метилового эфира 5-хлоримидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (500 мг, 2,37 ммоль) в ТГФ в атмосфере азота при -70°C (20 мл) по каплям добавляют литийбис(триметилсилил)амид (4,98 мл, 1М раствор, 4,98 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при -70°C полученную реакционную смесь оставляют нагреться и затем гасят насыщенным водным раствором аммонийхлорида. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом (150 мл), органический экстракт сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент 0-50% этилацетат в циклогексане), получая указанное в заголовке соединение (573 мг, 60%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,60 минуты, M+H+ = 326.
Стадия 2: 5-(2-Фтор-4-циклопропилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-циклопропилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (573 мг, 1,73 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляют водный раствор гидроксида натрия (10 мл, 1М, 10 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивают при 70°С в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме до объема ~20 мл и полученный раствор разбавляют водой (20 мл) и фильтруют. Полученный фильтрат подкисляют до pH ~1, добавляя водный раствор хлористоводородной кислоты (1M), что вызывает образование осадка. Полученный осадок собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 45°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества темного желто-коричневого цвета (476 мг, 87%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,81 минуты, M+H+ = 318.
5-(2-Фтор-4-метансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота. Способ A
Стадия 1: Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-метилсульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору 2-фтор-4-метансульфанилфениламина (410 мг, 2,61 ммоль) и метилового эфира 5-хлоримидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (500 мг, 2,37 ммоль) в ТГФ в атмосфере азота при -70°C (20 мл) по каплям добавляют литийбис(триметилсилил)амид (4,98 мл, 1М раствор, 4,98 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут при -70°C полученную реакционную смесь оставляют нагреться, затем гасят насыщенным водным раствором аммонийхлорида. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом (150 мл), органический экстракт промывают солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент 0-50% этилацетат в циклогексане), получая указанное в заголовке соединение (471 мг, 73%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,39 минуты, M+H+ = 332.
Стадия 2: 5-(2-Фтор-4-метансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-метансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (471 мг, 1,45 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляют водный раствор гидроксида натрия (10 мл, 1М, 10 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивают при 70°С в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме до объема ~20 мл и полученный раствор разбавляют водой (20 мл) перед тем, как подкисляют до pH ~1, добавляя водный раствор хлористоводородной кислоты (1M), что вызывает образование осадка. Полученный осадок собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 45°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества темного желто-коричневого цвета (413 мг, 87%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,98 минуты, [M+H]+ = 312.
5-(2-Фтор-4-метилсульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота. Способ B
Стадия 1: Диметиловый эфир пиридин-2,5-дикарбоновой кислоты
К суспензии пиридин-2,5-дикарбоновой кислоты (20 г, 120 ммоль) в дихлорметане (396 мл) и ДМФ (6,6 мл) по каплям добавляют оксалилхлорид (60,96 г, 480 ммоль) в течение 20 минут. После 16 часов при температуре окружающей среды полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и осуществляют азеотропную перегонку остатка с толуолом. Остаток помещают в холодный (0°C) метанол (276 мл) и перемешивают в течение 15 минут. Полученный раствор концентрируют в вакууме и остаток переносят в этилацетате. Полученную смесь промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором. Часть продукта собирают в виде осадка белого цвета. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (получено объединенного материала: 22,93 г, 98%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,48 минуты, [M+H]+ = 196.
Стадия 2: Диметиловый эфир 1-оксипиридин-2,5-дикарбоновой кислоты
К холодному (0°C) раствору диметилового эфира пиридин-2,5-дикарбоновой кислоты (22,93 г, 118 ммоль) в дихлорметане (472 мл) порциями добавляют 3-хлорпербензойную кислоту (62,5 г, 278 ммоль). Полученную реакционную смесь оставляют нагреться до температуры окружающей среды. После перемешивания в течение 18 часов полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и полученный остаток адсорбируют на HMN и обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 100%, этилацетат в гексане), получая указанное в заголовке соединение в виде масла бледно-желтого цвета (17,08 г, 69%). ЖХ-МС (способ B): RT = 1,64 минуты, [M+H]+ = 212.
Стадия 3: Диметиловый эфир 6-хлорпиридин-2,5-дикарбоновой кислоты
К раствору диметилового эфира 1-оксипиридин-2,5-дикарбоновой кислоты (17,08 г, 81 ммоль) в толуоле (450 мл) добавляют оксихлорид фосфора (8,3 мл, 89 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревают до 95°C и перемешивают в течение 1,5 часа. Реакцию гасят, добавляя воду, и полученную смесь разбавляют этилацетатом. Полученный раствор промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (11,97 г, 65%) которое используют без очистки на следующей стадии. ЖХ-МС (способ B): RT = 2,77 минуты, [M+H]+ = 230.
Стадия 4: Метиловый эфир 2-хлор-6-гидроксиметилникотиновой кислоты
Холодную (0°C) суспензию хлорида кальция (19,54 г, 176 ммоль) и боргидрида натрия (4,18 г, 110 ммоль) в безводном этаноле (176 мл) и безводном ТГФ (88 мл) перемешивают в течение 1 часа, после чего добавляют диметиловый эфир 6-хлорпиридин-2,5-дикарбоновой кислоты (9,97 г, 44 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение еще 6 часов реакцию гасят, добавляя H2SO4 (35 мл, 5M). Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом и фильтруют через Celite®. Полученный фильтрат промывают 1M NaOH, водой и солевым раствором, органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 100%, этилацетат в гексане), получая указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета (6,14 г, 69%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,34 минуты, [M+H]+ = 202.
Стадия 5: Метиловый эфир 6-азидометил-2-хлорникотиновой кислоты
К холодному (0°C) раствору метилового эфира 2-хлор-6-гидроксиметилникотиновой кислоты (4,98 г, 24,8 ммоль) в дихлорметане (161 мл) добавляют мезилхлорид (2,5 мл, 29,8 ммоль). Полученную реакционную смесь оставляют нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 30 минут. Полученную смесь разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток помещают в диметилформамид (62 мл) и добавляют азид натрия (4,03 г, 62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 часов полученную реакционную смесь охлаждают до 0°C, гасят водой (примерно 50 мл) и трижды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты промывают водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 50%, этилацетат в гексане), получая указанное в заголовке соединение в виде масла бледно-желтого цвета (4,76 г, 85%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,22 минуты, [M+H]+ = 227.
Стадия 6: Метиловый эфир 6-аминометил-2-хлорникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 6-азидометил-2-хлорникотиновой кислоты (4,75 г, 21 ммоль) в ТГФ (189 мл) и воде (3,6 мл) добавляют трифенилфосфин (11 г, 42 ммоль), полученную реакционную смесь нагревают при 45°С в течение 16 часов. Полученную реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и осуществляют азеотропную перегонку остатка с метанолом. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 10%, метанол в дихлорметане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета. ЖХ-МС (способ B): RT = 2,65 минуты, [M+H]+ = 201.
Стадия 7: Метиловый эфир 2-хлор-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 6-аминометил-2-хлорникотиновой кислоты (740 мг, 3,7 ммоль) в муравьиной кислоте (18,5 мл) добавляют уксусный ангидрид (3,7 мл). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 часа. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и трижды осуществляют азеотропную перегонку с толуолом, получая указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета (757 мг, 90%), которое используют без очистки на следующей стадии. ЖХ-МС (способ B): RT = 2,20 минуты, [M+H]+ = 229.
Стадия 8: Метиловый эфир 2-(2-фтор-4-метилсульфанилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 2-хлор-6-формиламинометилникотиновой кислоты (123 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (1,6 мл) добавляют фосфат калия (119 мг, 0,76 ммоль), 2-фтор-4-метилсульфанилфениламин (102 мг, 0,65 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий (12,8 мг, 0,014 ммоль) и дициклогексил-(2',6'-диизопропоксибифенил-2-ил)фосфан (25 мг, 0,054 ммоль). Полученную реакционную смесь дегазируют аргоном, затем нагревают при 100°C. Через 25 часов полученную реакционную смесь охлаждают, разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным раствором аммонийхлорида, водой, затем солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток тщательно растирают с этилацетатом, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества ярко-желтого цвета (43 мг, 23%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,53 минуты, [M+H]+ = 350.
Стадия 9: Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-метилсульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии метилового эфира 2-(2-фтор-4-метилсульфанилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (309 мг, 0,89 ммоль) в толуоле (15,6 мл) добавляют оксихлорид фосфора (91 мкл, 0,98 ммоль) и полученную реакционную смесь нагревают до 95°C и перемешивают в течение 1 часа. Охлажденную реакционную смесь гасят, добавляя воду (примерно 2 мл), затем концентрируют в вакууме. Полученный остаток помещают в этилацетате и промывают водой, затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют, концентрируют в вакууме и остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 40%, этилацетат в гексане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (150 мг, 51%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,44 минуты, [M+H]+ = 332.
Стадия 10: 5-(2-Фтор-4-метилсульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-метилсульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (150 мг, 0,45 ммоль) в IMS (10 мл) добавляют гидроксид натрия (0,5 мл, 1M водный раствор, 0,5 ммоль), полученную реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 1,5 часа. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме, затем переносят в воду (примерно 15 мл), водный раствор промывают диэтиловым эфиром перед тем, как pH доводят до pH 3, используя 1M HCl, в результате чего образуется осадок в виде твердого вещества коричневого цвета. Полученный осадок экстрагируют, используя этилацетат, органическую фазу выделяют и промывают водой, затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества подобно коричневому цвета (109 мг, 76%). 1H ЯМР (CD3OD): 7,67 (1H, c), 7,44 (1H, д, J=9,53 Гц), 7,39 (1H, д, J=0,83 Гц), 7,24 (1H, дд, J=9,57, 0,80 Гц), 7,15 (1H, дд, J=11,47, 2,12 Гц), 7,02-7,01 (1H, м), 6,76 (1H, т, J=8,49 Гц), 2,49 (3H, c).
Метиловый эфир 5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
Стадия 1: 6-Хлор-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновая кислота
К холодному (-78°C) раствору 2-фтор-4-триметилсиланилфениламина (19,2 г, 105 ммоль) в безводном ТГФ (50 мл) по каплям добавляют раствор LHMDS (160 мл, 1M в гексанах, 160 ммоль) в течение 45 минут в атмосфере азота. Через 2 часа при -78°C добавляют раствор 2,6-дихлор-5-фторникотиновой кислоты (10,5 г, 50 ммоль) в безводном ТГФ (30 мл). Полученную смесь затем перемешивают при -78°С в течение 1 часа, затем оставляют нагреться до температуры окружающей среды. После 18 часов перемешивания при температуре окружающей среды реакцию гасят водой и доводят значение pH до 2, добавляя концентрированную HCl. Полученный раствор экстрагируют этилацетатом и органический слой выделяют, промывают водой, затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме. Полученный остаток тщательно растирают с метанолом и фильтруют, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (8,7 г, 49%). ЖХ-МС (способ B): RT = 4,92 минуты, [M+H]+ = 357.
Стадия 2: Метиловый эфир 6-хлор-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты
К суспензии 6-хлор-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (7,6 г, 21,3 ммоль) в дихлорметане (100 мл) и ДМФ (1 мл) по каплям добавляют оксалилхлорид (9,1 мл, 106,4 ммоль) в течение 20 минут. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 18 часов и затем концентрируют в вакууме и осуществляют азеотропную перегонку остатка с толуолом. Полученный остаток переносят в холодный (0°C) метанол (100 мл). Полученный раствор нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 1 часа, затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Полученный осадок промывают холодным метанолом и сушат в вакууме при 45°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (7,3 г, 92%). ЖХ-МС (способ B): RT = 5,38 минуты, [M+H]+ = 371.
Стадия 3: Метиловый эфир 6-циано-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты
Дегазированную суспензию метилового эфира 6-хлор-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (7,8 г, 21,2 ммоль), цианида цинка(II) (1,84 г, 15,6 ммоль) и Pd(PPh3)4 (2,43 г, 2,12 ммоль) в ДМФ (40 мл) подвергают микроволновому облучению при 150°С в течение 15 минут. Полученную реакционную смесь фильтруют через Celite® и полученный фильтрат разбавляют этилацетатом. Органическую фазу дважды промывают водой и один раз солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток тщательно растирают с диэтиловым эфиром и пентаном и затем сушат в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (6,9 г, 91%). ЖХ-МС (способ B): RT = 4,99 минут, [M+H]+ = 362.
Стадия 4: Метиловый эфир 6-аминометил-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты
К суспензии метилового эфира 6-циано-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (5,7 г, 15,8 ммоль) в метаноле (130 мл) добавляют хлорид кобальта(II) (7,5 г, 31,6 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают в течение 10 минут, затем охлаждают до 0°C и небольшими порциями добавляют боргидрид натрия (6,0 г, 158 ммоль) в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при 0°С в течение 15 минут и затем при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакцию гасят, добавляя концентрированную хлористоводородную кислоту (20 мл), и полученную смесь перемешивают в течение 15 минут. Полученную реакционную смесь фильтруют, чтобы удалить твердое вещество белого цвета, которое промывают дихлорметаном, и полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, затем водой, затем солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества коричневого цвета (2,0 г, 34%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,77 минуты [M+H]+ = 366.
Стадия 5: Метиловый эфир 5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 6-аминометил-5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)никотиновой кислоты (2,0 г, 5,5 ммоль) в муравьиной кислоте (30 мл) при 0°C добавляют уксусный ангидрид (6 мл). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 2 часов. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и осуществляют азеотропную перегонку полученного остатка с толуолом, затем растворяют в дихлорметане. Полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества темно-коричневого цвета (2,1 г, 100%). ЖХ-МС (Способ B): RT = 4,36 минуты, [M+H]+ = 394.
Метиловый эфир 5-(4-бром-2-фторфениламино)-8-фтор-имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: Метиловый эфир 2-(4-бром-2-фторфениламино)-5-фтор-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (2,6 г, 6,6 ммоль) в дихлорметане (65 мл) при -30 0C добавляют NBS (1,2 г, 6,6 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при -30°С в течение 1,5 часа и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток переносят в этилацетате и полученный органический раствор промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества коричневого цвета (2,49 г, 95%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,79 минуты, [M+H]+ = 400/402.
Стадия 2: Метиловый эфир 5-(4-бром-2-фторфениламино)-8-фтор-имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии метилового эфира 2-(4-бром-2-фторфениламино)-5-фтор-6-формиламинометилникотиновой кислоты (2,49 г, 6,2 ммоль) в толуоле (60 мл) добавляют оксихлорид фосфора (0,65 мл, 7,0 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревают до 90°C и перемешивают в течение 1,5 часа перед тем, как охлаждают до комнатной температуры и концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают водой, затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и затем солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 100%, эфир в гексане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (692 мг, 29%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,97 минуты, [M+H]+ = 382/384.
8-Фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
Стадия 1: Метиловый эфир 5-фтор-2-(2-фтор-4-йодофениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты
К раствору метилового эфира 5-фтор-2-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (2,4 г, 6,1 ммоль) в дихлорметане (15 мл) при 0°C добавляют ICl (2,0 г, 12,2 ммоль). Полученную смесь затем перемешивают при 0°С в течение 0,5 часа, затем гасят водой, промывают насыщенным раствором сульфита натрия, затем солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества коричневого цвета (2,7 г, 98%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,81 минуты, [M+H]+ = 448.
Стадия 2: Метиловый эфир 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии метилового эфира 5-фтор-2-(2-фтор-4-йодофениламино)-6-формиламинометилникотиновой кислоты (2,7 г, 6,2 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляют оксихлорид фосфора (1,1 мл, 12,2 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревают при 95°С в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и затем концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают водой, затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 50%, этилацетат в гексане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (1,0 г, 39%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,97 минуты, [M+H]+ = 430.
Стадия 3: 8-Фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
К раствору метилового эфира 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (500 мг, 1,17 ммоль) в IMS (10 мл) добавляют гидроксид натрия (1,75 мл, 1М водный раствор, 1,75 ммоль), полученную реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 45 минут. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток переносят в воду. Добавляют 1н. HCl, чтобы довести значение pH до 1. Образовавшийся осадок отфильтровывают и сушат в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (435 мг, 90%). ЖХ-МС (Способ B): RT = 3,47 минуты, [M+H]+ = 416.
СИНТЕЗ АЗАИМИДАЗО[1,5-a]ПИРИДИНОВ
Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: 3,5-Дихлорпиразин-1-карбоновая кислота
К раствору диизопропиламина (13,0 мл, 92,6 ммоль, 2,3 экв.) в безводном ТГФ (300 мл) при -78°C в атмосфере N2 добавляют по каплям раствор 1,6M nBuLi в гексанах (57,9 мл, 92,6 ммоль, 2,3 экв.). Через 1 час по каплям добавляют раствор 2,6-дихлорпиразина в безводном ТГФ (6,0 г, 40,3 ммоль) в течение 30 минут. После перемешивания при -78°С в течение 1 часа полученную реакционную смесь выливают на измельченный сухой лед (твердый диоксид углерода) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 16 часов. Полученную смесь затем разбавляют водой (100 мл) и промывают этилацетатом (3×100 мл). Водный слой охлаждают до 0°C, подкисляют 2н. HCl до достижения pH ~2 и экстрагируют этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические экстракты сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме. Полученный сухой остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 50%, метанол в дихлорметане), получая нужный продукт в виде твердого вещества бежевого цвета (3,16 г, 40,6%). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц), δ м.д.: 8,60 (с, 1H).
Стадия 2: 5-Хлор-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновая кислота
К раствору 2-фтор-4-триметилсиланилфениламина (3,8 г, 20,7 ммоль, 2,0 экв.) в безводном ТГФ (150 мл) при -78°C в атмосфере N2 добавляют по каплям раствор 1,0M LHMDS в ТГФ (33,2 мл, 30 ммоль, 3,2 экв.) в течение 20 минут. Через 1 час при -78°C добавляют раствор 3,5-дихлорпиразин-2-карбоновой кислоты (2,0 г, 10,3 ммоль) в безводном ТГФ (30 мл). Полученную смесь затем перемешивают при -78°С в течение 30 минут и затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 18 часов. Полученную смесь гасят водой и значение pH доводят до pH 2, добавляя 2н. HCl. Полученную реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и органические слой промывают водой и солевым раствором, затем сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме. Полученный остаток очищают на хроматографической колонке (Si-PPC, градиент от 20 до 50% этилацетат в гексане, затем от 0% до 30%, метанол в дихлорметане), получая нужное соединение в виде твердого вещества желтого цвета (2,95 г, 83,8%). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц), δ м.д.: 10,41 (c, 1H), 8,28 (т, J=7,79 Гц, 1H), 7,93 (c, 1H), 7,40-7,23 (м, 2H), 0,27 (c, 9H).
Стадия 3: Метиловый эфир 5-хлор-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновой кислоты
К раствору 5-хлор-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновой кислоты (2,95 г, 8,68 ммоль) в метаноле (50 мл) и толуоле (100 мл) при 0°C в атмосфере N2 добавляют раствор 2M триметилсилилдиазометана в гексанах (9,55 мл, 19,0 ммоль, 2,2 экв.) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором, затем сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме. Полученный остаток очищают, используя колоночную хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 50% этилацетат в гексане), получая нужное соединение в виде твердого вещества желтого цвета (2,18 г, 71,1%). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц), δ м.д.: 10,54 (c, 1H), 8,36 (т, J=7,86 Гц, 1H), 8,06 (c, 1H), 7,34-7,26 (м, 2H), 4,05 (c, 3H), 0,28 (c, 9H). ЖХ-МС (способ D1), RT = 1,38 минуты, [M+H]+ = 354.
Стадия 4: Метиловый эфир 5-циано-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновой кислоты
Дегазированную суспензию метилового эфира 5-хлор-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновой кислоты (1,35 г, 3,82 ммоль), цианида цинка (II) (492,8 мг, 4,2 ммоль, 1,1 экв.) и Pd(PPh3)4 (551,0 мг, 0,48 ммоль, 0,12 экв.) в безводном диметилформамиде (30 мл) подвергают микроволновому облучению при 150°С в течение 18 минут. Полученную реакционную смесь выливают в этилацетате и затем фильтруют через слой Celite®. Затем фильтровальную лепешку тщательно промывают этилацетатом (2×). Объединенные фильтраты промывают 50% солевым раствором (2×) и солевым раствором (1×), сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой остаток очищают на хроматографической колонке (Si-PPC, градиент от 0% до 30% этилацетат в гексане), получая масло коричневого цвета. В результате тщательного перетирания с MeOH получают нужное соединение в виде твердого вещества оранжевого цвета (1,31 г, 99,8%). 1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц), δ м.д.: 10,56 (c, 1H), 8,36 (c, 1H), 8,29 (т, J=7,82 Гц, 1H), 7,37-7,27 (м, 2H), 4,10 (c, 3H), 0,29 (c, 9H). ЖХ-МС (способ D1): RT = 1,28 минуты, [M+H]+ = 345.
Стадия 5: Метиловый эфир 5-аминометил-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновой кислоты
К раствору метилового эфира 5-циано-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновой кислоты (600 мг, 1,74 ммоль) в концентрированной ледяной уксусной кислоте (12 мл) добавляют 10% Pd на угле (120 мг). Полученную реакционную смесь вакуумируют и продувают H2 (3×), затем перемешивают в атмосфере H2 в течение 3,5 часа. Полученную реакционную смесь затем фильтруют через слой Celite®. Полученный фильтрат концентрируют в вакууме, получая нужный продукт в виде соли HOAc. ЖХ-МС (способ C): RT = 2,51 минуты, [M+H]+ = 349.
Стадия 6: Метиловый эфир 3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-5-формиламинометилпиразин-2-карбоновой кислоты
Вышеполученный раствор метилового эфира 5-аминометил-3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)пиразин-2-карбоновой кислоты (800 мг, 2,30 ммоль) в муравьиной кислоте (12 мл) и уксусный ангидрид (4 мл) затем перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1,5 часа. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и осуществляют азеотропную перегонку полученного остатка с толуолом. Полученный остаток разбавляют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде пены желтого цвета (850 мг, 98,3%). ЖХ-МС (способ D1): RT = 1,09 минуты, [M+H]+ = 377.
Стадия 7: Метиловый эфир 3-(2-фтор-4-йодофениламино)-5-формиламинометилпиразин-2-карбоновой кислоты
К холодному (0°C) раствору метилового эфира 3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-5-формиламинометилпиразин-2-карбоновой кислоты (480 мг, 1,28 ммоль) в дихлорметане (13 мл) в атмосфере N2 добавляют по каплям раствор 1М монохлорида йода в дихлорметане (3,0 мл, 3,0 ммоль, 2,4 экв.) и полученную смесь затем перемешивают при 0°С в течение 1,5 часа. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор тиосульфата натрия (~3 мл). После перемешивания в течение 10 минут полученную реакционную смесь выливают в этилацетат. Органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и выпаривают в вакууме, получая нужный продукт в виде твердого вещества желтого цвета (548 мг, 99%). ЖХ-МС (способ C): RT = 2,65 минуты, [M+H]+ = 431.
Стадия 8: Метиловый эфир 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
К суспензии метилового эфира 3-(2-фтор-4-йодофениламино)-5-формиламинометилпиразин-2-карбоновой кислоты (480 мг, 1,12 ммоль) в толуоле (18 мл) добавляют оксихлорид фосфора (0,42 мл, 4,4 ммоль, 4,0 экв.) и полученную реакционную смесь нагревают при 95°С в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и затем гасят насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2 мл). Полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 20%, метанол в этилацетате), получая масло желтого цвета. В результате кристаллизации из смеси дихлорметан-эфир-гексан получают нужный продукт в виде твердого вещества желтого цвета (190 мг, 41,3%). ЖХ-МС (способ C): RT = 2,45 минуты, [M+H]+ = 413.
Метиловый эфир 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: Метиловый эфир 3-(4-бром-2-фторфениламино)-5-формиламинометилпиразин-2-карбоновой кислоты
К раствору метилового эфира 3-(2-фтор-4-триметилсиланилфениламино)-5-формиламинометилпиразин-2-карбоновой кислоты (1,84 г, 4,89 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при -30°C в атмосфере N2 добавляют NBS (0,96 г, 5,38 ммоль, 1,1 экв.) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при -30°С в течение 3 часов. Добавляют еще NBS (0,96 г, 5,38 ммоль, 1,1 экв.) и полученную реакционную смесь оставляют выстаиваться при 0°С в течение 18 часов. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом (250 мл). Органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой материал тщательно растирают с метанолом, получая нужный продукт в виде твердого вещества желтого цвета (1,50 г, 80,1%). ЖХ-МС (способ C): RT = 2,51 минуты, [M+H]+ = 383/384.
Стадия 2: Метиловый эфир 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
К суспензии метилового эфира 3-(4-бром-2-фторфениламино)-5-формиламинометилпиразин-2-карбоновой кислоты (1,40 г, 3,65 ммоль) в толуоле (100 мл) добавляют оксихлорид фосфора (1,50 мл, 16,1 ммоль, 4,4 экв.) и полученную реакционную смесь нагревают при 95°C в атмосфере N2 в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и затем гасят насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл). Полученный остаток растворяют в этилацетате и промывают водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 70% до 100% этилацетат в гексане, затем от 0% до 2% метанол в этилацетате), получая масло оранжевого цвета. В результате кристаллизации из смеси этилацетат-гексан получают нужный продукт в виде твердого вещества оранжевого цвета (1,26 г, 94,3%). ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,86 минуты, [M+H]+ = 366/367.
5-(2-Фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
К раствору 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (64,0 мг, 0,16 ммоль) в безводном ТГФ (3,6 мл) добавляют HOBt (56,5 мг, 0,42 ммоль, 2,6 экв.), DIPEA (0,073 мл, 0,42 ммоль, 2,6 ммоль) и EDCI (67,8 мг, 0,35 ммоль, 2,2 экв.) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 2 часов. Добавляют концентрированный водный раствор гидроксида аммония (0,50 мл) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 20 часов. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом (50 мл) и промывают насыщенным водным раствором аммонийхлорида, водой и солевым раствором. Органический слой выделяют и сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 20% метанола в дихлорметане), получая масло. В результате кристаллизации из смеси DCM-эфир-гексан получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бежевого цвета (9,9 мг, 16,0%). 1H ЯМР (MeOD, 400 МГц), δ м.д.: 8,74 (c, 1H), 7,86 (c, 1H), 7,79 (c, 1H), 7,62 (дд, J=10,4 Гц, 2,0 Гц, 1H), 7,48 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,59 (т, J=8,4 Гц, 1H). ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,84 минуты, [M+H]+ = 398.
ПРИМЕР 5
(2-Гидроксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1. Способ A: (2-винилоксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (2,10 г, 5,29 ммоль) и О-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (0,87 г, 8,46 ммоль) в ДМФ (30 мл) добавляют EDCI гидрохлорид (1,31 г, 6,90 ммоль), HOBt (0,93 г, 6,90 ммоль) и DIPEA (1,17 мл, 6,90 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов перед тем, как ее концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в смеси 1:1 трет-бутилметиловый эфир:этилацетат (20 мл) и добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл). Полученную смесь обрабатывают ультразвуком до образования осадка и полученный осадок собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 45°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желто-коричневого цвета (1,55 г, 60%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,80 минуты, M+H+ = 483.
Стадия 1. Способ B: (2-винилоксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновая кислота
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (1,5 г, 3,64 ммоль) и O-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (749 мг, 7,28 ммоль) в ТГФ (30 мл) при 0°C добавляют литийбис(триметилсилил)амид в виде раствора в ТГФ (18 мл, 1М, 18 ммоль) в течение 5 минут. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при ~0°С в течение 1 часа перед тем, как гасят насыщенным водным раствором аммонийхлорида. Летучие растворители удаляют в вакууме и затем добавляют диэтиловый эфир (10 мл) и этилацетат (20 мл). Полученную смесь обрабатывают ультразвуком, что вызывает образование осадка, который отфильтровывают, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (1,07 г, 61%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,79 минуты, M+H+ = 483.
Стадия 1. Способ C: (2-винилоксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К механически перемешиваемому раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (82,17 г, 0,2 моль) и O-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (40,73 г, 0,382 моль) в сухом ТГФ (1,27 л) при 5°C в атмосфере N2 добавляют литийбис(триметилсилил)амид в виде раствора в ТГФ (1 л, 1М, 1 моль) в течение 1 часа, поддерживаемая температура ниже 10°C. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при 0-5°С в течение 20 минут, после чего ее гасят, добавляя воду (200 мл) и насыщенный солевой раствор (350 мл). Летучие растворители удаляют в вакууме и остаток разбавляют водой (1,5 л) и экстрагируют 2-метилтетрагидрофураном (3×1 л). Органические слои промывают водой (500 мл), насыщенным солевым раствором (500 мл), сушат (Na2CO3) и абсорбируют на силикагеле (200 г) и очищают на силикагеле (400 г), используя этилацетат в качестве элюента. Полученный сырой продукт тщательно растирают с трет-бутилметиловым эфиром (400 мл), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества коричневого цвета (58,36 г, 60%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,79 минуты, [M+H]+ = 483.
Стадия 2. Способ A: (2-гидроксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии (2-винилоксиэтокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (2,87 г, 5,95 ммоль) в метаноле (45 мл) добавляют водный раствор хлористоводородной кислоты (11,9 мл, 1М, 11,9 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 45 минут, причем за это время твердая часть растворяется. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме, чтобы удалить метанол. Полученный раствор разбавляют смесью 1:1 трет-бутилметиловый эфир:этилацетат (20 мл) и добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл). Полученную смесь обрабатывают ультразвуком до тех пор, пока не образуется осадок, и полученный осадок собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 45°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (2,5 г, 92%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 8,05 (1H, c), 7,58 (1H, дд, J=10,69, 1,92 Гц), 7,43 (1H, c), 7,39 (1H, д, J=9,33 Гц), 7,31-7,28 (1H, м), 6,89 (1H, д, J=9,31 Гц), 6,34 (1H, т, J=8,68 Гц), 4,64 (1H, c), 3,64 (2H, т, J=4,78 Гц), 3,46 (2H, м). ЖХ-МС (способ A): RT = 5,58 минуты, M+H+ = 457.
Стадия 2. Способ B: (2-гидроксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии (2-винилоксиэтокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (58,36 г, 0,12 моль) в метаноле (600 мл) добавляют водный раствор хлористоводородной кислоты (242 мл, 1М, 0,242 моль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают и нагревают до 45°С в течение 1 часа, причем за это время твердая часть растворяется. Полученную реакционную смесь затем охлаждают до комнатной температуры и концентрируют в вакууме для удаления метанола. Полученный остаток обрабатывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа перед тем, как собирают сырой продукт фильтрованием и сушат при 55°C над оксидом фосфора (V) в вакууме в течение 24 часов. Сырой продукт кристаллизуют из смеси IPA:H2O (1:1, об./об.) (800 мл) при медленном охлаждении и механическом перемешивании. Продукт собирают фильтрованием и промывают холодной смесью IPA:H2O (1:1, об./об.) (100 мл) затем сушат в вакууме при 55°C, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества светло-коричневого цвета (50,2 г, 90%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 8,05 (1H, c), 7,58 (1H, дд, J=10,69, 1,92 Гц), 7,43 (1H, c), 7,39 (1H, д, J=9,33 Гц), 7,31-7,28 (1H, м), 6,89 (1H, д, J=9,31 Гц), 6,34 (1H, т, J=8,68 Гц), 4,64 (1H, c), 3,64 (2H, т, J=4,78 Гц), 3,46 (2H, м). ЖХ-МС (способ A): RT = 5,58 минуты, [M+H]+ = 457.
ПРИМЕР 6
((R)-2,3-Дигидроксипропокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: ((S)-2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (326 мг, 0,82 ммоль) в ТГФ (4,1 мл) добавляют O-((R)-2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметил)гидроксиламин (362 мг, 2,46 ммоль), DIPEA (1,26 мл, 7,4 ммоль), HOBt (327 мг, 2,46 ммоль) и EDCI (471 мг, 2,46 ммоль), полученную смесь перемешивают в течение 18 часов при температуре окружающей среды. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем водой и затем солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. В результате очистки полученного остатка с помощью флеш-хроматографии (Si-PPC, градиент от 0% до 10%, метанол в дихлорметане) получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (364 мг, 84%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,58 минуты, [M+H]+ = 527.
Стадия 2: ((R)-2,3-Дигидроксипропокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Раствор ((S)-2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (364 мг, 0,7 ммоль) в метаноле (0,5 мл) и дихлорметана (0,5 мл) вводят в SCX-2 картридж. Картридж промывают метанолом и нужный продукт элюируют, используя 2M раствор аммиака в метаноле. Соответствующие фракции объединяют и концентрируют при пониженном давлении и осуществляют азеотропную перегонку полученного остатка с дихлорметаном. В результате очистки полученного остатка с помощью флеш-хроматографии (Si-PPC, градиент от 0% до 10%, метанол в дихлорметане) с последующей обработкой с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка Gemini 5 мк, C6-фенил, 250×21,20 мм, 20 ммоль Et3N на литр растворителя, градиент ацетонитрил/вода, от 5 до 98%, время стабилизации 25 минут) получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (77,6 мг, 23%). 1H ЯМР (ДМСО-d6): 8,01 (1H, c), 7,58 (1H, дд, J=10,68, 1,92 Гц), 7,42 (1H, c), 7,38 (1H, д, J=9,34 Гц), 7,30 (1H, дд, J=8,43, 1,82 Гц), 6,91 (1H, д, J=9,32 Гц), 6,32 (1H, т, J=8,68 Гц), 3,72-3,67 (1H, м), 3,60-3,51 (2H, м), 3,30 (2H, д, J=4,94 Гц). ЖХ-МС (способ A): RT = 5,13 минуты, [M+H]+ = 487.
ПРИМЕР 7
((S)-2-Гидроксипропокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (130 мг, 0,33 ммоль) в ТГФ (1,7 мл) добавляют гидрохлорид (S)-1-аминооксипропан-2-ола (84 мг, 0,66 ммоль), DIPEA (0,23 мл, 1,32 ммоль), HOBt (88 мг, 0,66 ммоль) и EDCI (126 мг, 0,66 ммоль). После 18 часов перемешивания при температуре окружающей среды добавляют еще гидрохлорид (S)-1-аминооксипропан-2-ола (84 мг, 0,66 ммоль), DIPEA (0,23 мл, 1,32 ммоль), HOBt (88 мг, 0,66 ммоль) и EDCI (126 мг, 0,66 ммоль) и ТГФ (1,7 мл). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение еще 5 часов. Полученную реакционную смесь вводят в Isolute® SCX-2 картридж. Картридж промывают метанолом и нужный продукт элюируют, используя 2M раствор аммиака в метаноле. Соответствующие фракции объединяют и концентрируют при пониженном давлении и осуществляют азеотропную перегонку полученного остатка с дихлорметаном. В результате очистки полученного остатка с помощью флеш-хроматографии (Si-PPC, градиент от 0% до 10%, метанол в дихлорметане) получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (17 мг, 11%). 1H ЯМР (ДМСО-d6): 8,07 (1H, c), 7,58 (1H, дд, J=10,71, 1,92 Гц), 7,43 (1H, c), 7,38 (1H, д, J=9,31 Гц), 7,31-7,28 (1H, м), 6,89 (1H, д, J=9,31 Гц), 6,35 (1H, т, J=8,68 Гц), 3,69-3,60 (1H, м), 3,45-3,38 (2H, м), 0,96 (3H, д, J=6,35 Гц). ЖХ-МС (способ A): RT = 6,01 минуты, [M+H]+ = 471.
ПРИМЕР 8
(2-Гидроксиэтокси)амид 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: (2-Винилоксиэтокси)амид 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (2,0 г, 5,7 ммоль) и O-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (0,71 г, 6,8 ммоль) в ДМФ (44 мл) добавляют гидрохлорид EDCI (1,42 г, 7,41 ммоль), HOBt (1,0 г, 7,41 ммоль) и DIPEA (0,97 мл, 5,69 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов перед тем, как концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в смеси 1:1 диэтиловый эфир:этилацетат (30 мл) и добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл). Полученную смесь обрабатывают ультразвуком до тех пор, пока не образуется осадок. Полученный осадок собирают фильтрованием и промывают смесью 1:1 диэтиловый эфир:этилацетат, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желто-коричневого цвета (1,33 г, 53%). ЖХ-МС (способ B): RT = 2,78 минуты, M+H+ = 435/437.
Стадия 2: (2-Гидроксиэтокси)амид 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К суспензии (2-винилоксиэтокси)амида 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (1,33 г, 3,05 ммоль) в метаноле (40 мл) добавляют водный раствор хлористоводородной кислоты (6,7 мл, 1М, 6,7 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут, затем концентрируют в вакууме для удаления метанола. Полученный остаток растворяют в смеси 1:1 диэтиловый эфир:этилацетат (30 мл) и добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл). Полученную смесь обрабатывают ультразвуком до образования осадка, полученный осадок собирают фильтрованием и промывают водой, затем диэтиловым эфиром, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (1,12 г, 90%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 9,20 (1H, c), 8,07 (1H, c), 7,51 (1H, дд, J=10,86, 2,22 Гц), 7,44 (1H, c), 7,40 (1H, д, J=9,33 Гц), 7,16 (1H, ддд, J=8,61, 2,20, 1,07 Гц), 6,89 (1H, д, J=9,31 Гц), 6,50 (1H, т, J=8,84 Гц), 4,63 (1H, c), 3,65 (2H, т, J=4,79 Гц), 3,46 (3H, c). ЖХ-МС (способ A): RT = 5,22 минуты, [M+H]+= 409/411.
ПРИМЕР 9
((S)-2-Гидроксипропокси)амид 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (271 мг, 0,77 ммоль) в диоксане (3,9 мл) добавляют HOBT (306 мг, 2,3 ммоль) и EDCI (442 мг, 2,3 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут, затем добавляют гидрохлорид (S)-1-аминооксипропан-2-ола (294 мг, 2,3 ммоль) и DIPEA (1,2 мл, 6,9 ммоль), полученную смесь затем перемешивают в течение 60 часов при температуре окружающей среды. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом, затем промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 100%, этилацетат в дихлорметане, затем градиент от 0% до 10%, метанол в дихлорметане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества зелено-желтого цвета (80 мг, 25%). 1H ЯМР (ДМСО-d6): 8,10 (1H, c), 7,51 (1H, дд, J=10,87, 2,22 Гц), 7,43 (1H, c), 7,39 (1H, д, J=9,31 Гц), 7,18-7,14 (1H, м), 6,88 (1H, д, J=9,31 Гц), 6,51 (1H, т, J=8,85 Гц), 4,69 (1H, c), 3,68-3,59 (1H, м), 3,42 (2H, д, J=5,81 Гц), 0,95 (3H, д, J=6,35 Гц). ЖХ-МС (способ A): RT = 5,71 минуты, [M+H]+ = 423/425.
ПРИМЕР 10
((S)-2-Гидроксипропокси)амид 5-(4-бром-2-фторфениламино)-8-фторимидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору метилового эфира 5-(4-бром-2-фторфениламино)-8-фторимидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (351 мг, 0,92 ммоль) в IMS (10 мл) добавляют гидроксид натрия (1,0 мл, 1М водный раствор, 1,0 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 1 часа и затем концентрируют в вакууме. Осуществляют азеотропную перегонку полученного остатка с толуолом и затем суспендируют в диоксане. Добавляют EDCI (353 мг, 1,84 ммоль) и HOBt (248 мг, 1,84 ммоль) и полученную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Добавляют гидрохлорид (S)-1-аминооксипропан-2-ола (235 мг, 1,84 ммоль) и DIPEA (0,63 мл, 3,68 ммоль) и полученную смесь затем перемешивают в течение 18 часов перед тем, как концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток переносят в этилацетат, затем промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0 до 10%, метанол в дихлорметане), получая твердое вещество бледно-желтого цвета (124 мг), которое затем очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка Gemini 5 мк, C18, 250×21,20 мм, 0,1% муравьиная кислота, градиент ацетонитрил/вода, от 5 до 85%, время стабилизации 15 минут), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества не совсем белого цвета (70 мг, 17%). 1H ЯМР (CDCl3): 9,45 (1H, c), 8,99 (1H, c), 7,76 (1H, д, J=2,95 Гц), 7,59 (1H, c), 7,29 (1H, дд, J=10,10, 2,16 Гц), 7,12 (1H, д, J=8,52 Гц), 6,50 (1H, д, J=10,18 Гц), 6,41 (1H, т, J=8,54 Гц), 4,03 (1H, т, J=7,52 Гц), 3,94 (1H, д, J=11,57 Гц), 3,70 (1H, т, J=10,24 Гц), 1,14 (3H, д, J=6,46 Гц). ЖХ-МС (способ A): RT = 7,83 минуты, [M+H]+ = 441/443.
ПРИМЕР 11
(2-Гидроксиэтокси)амид 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: (2-Винилоксиэтокси)амид 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
8-Фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновую кислоту (0,20 г, 0,48 ммоль), O-(2-винилоксиэтил)гидроксиламин (55 мг, 0,53 ммоль), EDCI (102 мг, 0,53 ммоль), HOBt (72 мг, 0,53 ммоль) и DIPEA (90 мкл, 0,53 ммоль) растворяют в ДМФ (10 мл) и полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов перед тем, как концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в этилацетате (10 мл), промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и водную фракцию дважды экстрагируют этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические фракции промывают солевым раствором (20 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (SiO2, градиент 0-10% метанол в DCM), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (200 мг, 83%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,41 минуты, [M+H]+ = 501.
Стадия 2: (2-Гидроксиэтокси)амид 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Раствор (2-винилоксиэтокси)амида 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (200 мг, 0,39 ммоль) в метаноле (1 мл) вводят в колонку SCX-2. Колонку промывают метанолом (10 мл) затем продукт элюируют аммиаком в метаноле (20 мл, 2M), соответствующие фракции концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой (10-90% ацетонитрил/вода 0,1% муравьиная кислота, Phenominex gemini PhC6, 5 мк, 250×20 мм). Полученный продукт растворяют в этилацетате (5 мл) и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Водную фракцию дважды экстрагируют этилацетатом (2×10 мл) и объединенные органические фракции промывают солевым раствором (20 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (88 мг, 39%). 1H ЯМР (ДМСО-d6): 8,20 (1H, c), 7,60 (1H, c), 7,57 (1H, дд, J=10,73, 1,96 Гц), 7,26 (1H, дд, J=8,43, 1,82 Гц), 6,82 (1H, д, J=11,14 Гц), 6,30 (1H, т, J=8,71 Гц), 3,65 (2H, т, J=4,77 Гц), 3,45 (2H, т, J=4,68 Гц). ЖХ-МС (способ A): RT = 7,71 минуты, [M+H]+ = 475.
ПРИМЕР 12
((R)-2,3-Дигидроксипропокси)амид 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: ((R)-2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)амид 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
8-Фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновую кислоту (235 мг, 0,57 ммоль), O-((R)-2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметил)гидроксиламин (92 мг, 0,62 ммоль), EDCI (120 мг, 0,62 ммоль), HOBt (84 мг, 0,62 ммоль) и DIPEA (0,1 мл, 0,62 ммоль) растворяют в ДМФ (10 мл) и полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 72 часов перед тем, как концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в этилацетате (10 мл), промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и водную фракцию дважды экстрагируют этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические фракции промывают солевым раствором (20 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (SiO2, градиент 0-10% метанол в DCM), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (298 мг, 97%). ЖХ-МС (способ B): RT = 3,34 минуты, [M+H]+ = 545.
Стадия 2: ((R)-2,3-Дигидроксипропокси)амид 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору ((R)-2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)амида 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (298 мг, 0,55 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляют хлористоводородную кислоту в диоксане (2 мл, 4н., 8,0 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем концентрируют в вакууме. Полученный остаток растворяют в этилацетате (5 мл), промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и водную фракцию дважды экстрагируют этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические фракции промывают солевым раствором (10 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой (10-90% ацетонитрил/вода 0,1% муравьиная кислота, Phenominex gemini PhC6, 5 мк, 250×20 мм). Полученный продукт растворяют в этилацетате (5 мл) и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Водную фракцию дважды экстрагируют этилацетатом (2×10 мл) и объединенные органические экстракты промывают солевым раствором (20 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (83 мг, 30%). 1H ЯМР (ДМСО-d6): 11,63 (1H, c), 8,97 (1H, c), 8,22 (1H, д, J=3,06 Гц), 7,61 (1H, c), 7,57 (1H, дд, J=10,74, 1,93 Гц), 7,26 (1H, д, J=8,50 Гц), 6,82 (1H, д, J=11,09 Гц), 6,32 (1H, т, J=8,74 Гц), 3,72-3,65 (1H, м), 3,59-3,50 (2H, м), 3,29 (2H, м). ЖХ-МС (способ A): RT = 7,11 минуты, [M+H]+ = 505.
ПРИМЕР 13
((S)-2-Гидроксипропокси)амид 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Суспензию 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (100 мг, 0,23 ммоль), HATU (130 мг, 0,34 ммоль), DIPEA (0,06 мл, 0,34 ммоль) и гидрохлорида (S)-2-гидроксипропоксиамида (44 мг, 0,34 ммоль) в ТГФ (1 мл) затем перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. Полученную реакционную смесь разделяют между этилацетатом (5 мл) и 1М HCl, органический слой выделяют и промывают насыщенным водным NaHCO3 (2×5 мл) и солевым раствором (2×5 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают с помощью препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (колонка Gemini 5 мк, C18, 250×21,20 мм, 0,1% муравьиная кислота, градиент ацетонитрил/вода от 5 до 98%, время стабилизации 20 минут), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (13 мг, 8%). 1H ЯМР (ДМСО-d6): 11,51 (1H, ушир.), 8,95 (1H, ушир.), 8,25 (1H, c), 7,60 (1H, c), 7,55 (1H, д, J=10,7 Гц), 7,27 (1H, д, J=8,4 Гц), 6,82 (1H, д, J=11,1 Гц), 6,32 (1H, т, J=8,8 Гц), 4,66 (1H, ушир.), 3,64 (1H, м), 3,43 (2H, д, J=5,8 Гц), 0,94 (3H, д, J=6,3 Гц). ЖХ-МС (способ A): RT = 8,13 минуты, [M+H]+ = 489.
ПРИМЕР 14
(2-Гидроксиэтокси)амид 5-(2-фторметансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: (2-Винилоксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-метансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К смеси 5-(2-фтор-4-метансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (400 мг, 1,26 ммоль), О-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (260 мг, 2,52 ммоль) и HOBt (221 мг, 1,64 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавляют гидрохлорид EDCI (312 мг, 1,64 ммоль) и DIPEA (0,285 мл, 1,64 ммоль) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 часов. Продукты разделяют между этилацетатом и насыщенным водным NaHCO3. Органический слой выделяют и промывают солевым раствором, затем сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (263 мг, 52%). ЖХ-МС (способ B): RT=2,64 минуты, [M+H]+=403.
Стадия 2: (2-Гидроксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-метансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору (2-винилоксиэтокси)амида 5-(2-фтор-4-метансульфанилфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (263 мг, 0,65 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляют 1М хлористоводородную кислоту (1 мл, 1 ммоль) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную смесь концентрируют в вакууме перед тем, как разделяют между насыщенным водным NaHCO3 и этилацетатом. Органический слой выделяют, промывают водой, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток тщательно растирают с этилацетатом и твердую часть собирают фильтрованием, обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0 до 10%, метанол в DCM), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желто-коричневого цвета (123 мг, 50%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 11,54 (1H, c), 9,39 (1H, c), 7,93 (1H, c), 7,39 (1H, c), 7,32 (1H, д, J=9,36 Гц), 7,16 (1H, дд, J=11,86, 2,13 Гц), 6,93-6,88 (2H, м), 6,57 (1H, т, J=8,65 Гц), 4,62 (1H, c), 3,66 (2H, т, J=4,85 Гц), 3,45 (2H, т, J=4,77 Гц), 2,40 (3H, c). ЖХ-МС (способ A): RT = 5,15 минуты, [M+H]+ = 377.
ПРИМЕР 15
(2-Гидроксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: 5-(2-Фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (140 мг, 0,34 ммоль) в безводном 1,2-дихлорэтане (2,5 мл) добавляют гидроксид триметилолова (215 мг, 1,19 ммоль, 3,5 экв.). Полученную реакционную смесь нагревают при 85°С в течение 1 часа и затем охлаждают до комнатной температуры. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме и сырой остаток разбавляют этилацетатом. Органический слой промывают HCl (3×), водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. В результате кристаллизации из смеси дихлорметан-эфир-гексан получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (132,1 мг, 97,7%). 1H ЯМР (MeOD, 400 МГц), δ м.д.: 8,76 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,86 (c, 1H), 7,64 (дд, J=10,13, 1,84 Гц, 1H), 7,55-7,50 (м, 1H), 6,72 (т, J=8,49 Гц, 1H). ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,77 минуты, [M+H]+ = 399.
Стадия 2: (2-Винилоксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
Смесь 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (110 мг, 0,28 ммоль), O-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (45,6 мг, 0,44 ммоль, 1,6 экв.), HATU (157,6 мг, 0,41 ммоль, 1,5 экв.) и DIPEA (96,0 мкл, 0,55 ммоль, 2,0 экв.) в безводном ДМФ (4,2 мл) перемешивают в течение 18 часов в атмосфере N2 при температуре окружающей среды. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 15%, метанол в дихлорметане), получая нужный продукт в виде твердого вещества желтого цвета (24 мг, 18%). ЖХ-МС (способ D1): RT = 1,00 минуты, [M+H]+ = 484.
Стадия 3: (2-Гидроксиэтокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
К раствору (2-винилоксиэтокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (24,0 мг, 0,05 ммоль) в метаноле (0,5 мл) и дихлорметане (1,0 мл) добавляют 4M HCl в 1,4-диоксане (30 мкл, 0,1 ммоль, 2,5 экв.) и затем реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в атмосфере N2 в течение 2 часов. Полученную реакционную смесь концентрируют в вакууме, затем выливают в этилацетат. Органический слой промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 25%, метанол в дихлорметане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (11,6 мг, 51%). 1H ЯМР (MeOD, 400 МГц), δ м.д.: 8,74 (c, 1H), 7,87 (c, 1H), 7,84 (c, 1H), 7,62 (дд, J=10,20, 1,82 Гц, 1H), 7,48 (д, J=8,41 Гц, 1H), 6,61 (т, J=8,53 Гц, 1H), 4,05 (т, J=4,80 Гц, 2H), 3,78 (т, J=4,80 Гц, 2H). ЖХ-МС (способ E1): RT = 4,33 минуты, [M+H]+ = 458.
ПРИМЕР 16
((S)-2-Гидроксипропокси)амид 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты
К раствору 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (85 мг, 0,21 ммоль) в безводном ДМФ (1,0 мл) добавляют гидрохлорид (S)-1-аминооксипропан-2-ола (32,7 мг, 0,26 ммоль, 1,2 экв.), DIPEA (0,13 мл, 0,77 ммоль, 3,6 экв.), HOBt (36,0 мг, 0,26 ммоль, 1,2 экв.) и EDCI (51,2 мг, 0,26 ммоль, 1,2 экв.) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 часов. Полученную реакционную смесь выливают в этилацетат и органический слой промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, 50% солевым раствором и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 40%, метанол в этилацетате), получая масло. В результате кристаллизации из смеси дихлорметан-эфир-гексан получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (10,7 мг, 10,6%). 1H ЯМР (MeOD, 400 МГц), δ м.д.: 8,76 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,86 (c, 1H), 7,64 (дд, J=10,13, 1,84 Гц, 1H), 7,55-7,50 (м, 1H), 6,72 (т, J=8,49 Гц, 1H). ЖХ-МС (способ E1): RT = 5,14 минуты, [M+H]+ = 472.
ПРИМЕР 17
(2-Гидроксиэтокси)амид 5-(4-циклопропил-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
Стадия 1: (2-Винилоксиэтокси)амид 5-(4-циклопропил-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К смеси 5-(4-циклопропил-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (400 мг, 1,29 ммоль), O-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (265 мг, 2,57 ммоль) и HOBt (225 мг, 1,67 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавляют гидрохлорид EDCI (320 мг, 1,67 ммоль) и DIPEA (0,290 мл, 1,67 ммоль) перед тем, как полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. Продукты разделяют между этилацетатом и насыщенным водным NaHCO3, органический слой выделяют и промывают солевым раствором, затем сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент 0-35% этилацетат в циклогексане), получая указанное в заголовке соединение (270 мг, 53%). ЖХ-МС (способ B): RT=2,79 минуты, [M+H]+=397.
Стадия 2: (2-Гидроксиэтокси)амид 5-(4-циклопропил-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты
К раствору (2-винилоксиэтокси)амида 5-(4-циклопропил-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиридин-6-карбоновой кислоты (270 мг, 0,681 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляют 1М хлористоводородную кислоту (2 мл, 2 ммоль) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Растворитель удаляют в вакууме, затем добавляют насыщенный водный NaHCO3 и полученную смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток тщательно растирают с TBME и твердую часть собирают фильтрованием, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества не совсем белого цвета (103 мг, 41%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 7,81 (1H, c), 7,37-7,34 (1H, м), 7,27 (1H, д, J=9,37 Гц), 6,95 (1H, д, J=9,34 Гц), 6,91 (1H, дд, J=12,49, 1,92 Гц), 6,75 (1H, дд, J=8,27, 1,96 Гц), 6,56-6,46 (1H, м), 3,71-3,65 (2H, м), 3,48-3,43 (2H, м), 1,89-1,80 (1H, м), 0,91-0,85 (2H, м), 0,65-0,57 (2H, м). ЖХ-МС (способ A): RT=5,68 минуты, [M+H]+=371.
ПРИМЕР 18
(R)-N-(2,3-Дигидроксипропокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Стадия 1: (R)-N-((2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
К раствору 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (100,0 мг, 0,25 ммоль) в безводном ДМФ (2,5 мл) добавляют, в указанном порядке, (R)-O-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил)гидроксиламин (40,7 мг, 0,28 ммоль, 1,1 экв.), HOBt (37,3 мг, 0,27 ммоль, 1,1 экв.), EDCI (53,0 мг, 0,27 ммоль, 1,1 экв.) и N-метилморфолин (0,1 мл, 0,91 ммоль, 3,6 ммоль). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 3 дней. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом и органический слой промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором. Органическую фазу выделяют, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 80% до 100%, этилацетат в гексане, затем градиентное элюирование от 0% до 20% метанол в этилацетате), получая твердое вещество желтого цвета (72,6 мг, 54,8%). ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,97 минуты, [M+H]+ = 528.
Стадия 2: (R)-N-(2,3-Дигидроксипропокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
К гетерогенной смеси (R)-N-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамида (69,5 мг, 0,13 ммоль) в безводном метаноле (1,6 мл) добавляют 4M HCl в 1,4-диоксане (0,13 мл, 0,5 ммоль, 4,0 экв.). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Затем добавляют твердый сульфат натрия (200 мг). Полученную реакционную смесь абсорбируют на силикагеле и затем обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 40% метанол в дихлорметане), получая указанное в заголовке соединение в виде пены желтого цвета (43,2 мг, 67,3%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц), δ м.д.: 11,90 (c, 1H), 10,30 (c, 1H), 8,82 (c, 1H), 7,95 (c, 1H), 7,91 (c, 1H), 7,74 (д, J=9,6 Гц, 1H), 7,44 (д, 8,4 Гц, 1H), 6,60 (т, J=8,4 Гц, 1H), 4,86 (д, J=4,4 Гц, 1H), 4,55 (ушир. c, 1H), 3,99-3,91 (м, 1H), 3,79-3,69 (м, 2H), 3,39 (ушир. c, 2H). ЖХ-МС (способ E2): RT = 8,40 минуты, [M+H]+ = 488.
ПРИМЕР 19
N-Этокси-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (165,0 мг, 0,40 ммоль) и гидрохлорид O-этилгидроксиламина (78,1 мг, 0,80 ммоль, 2,0 экв.) в безводном ТГФ (9,4 мл) при 0°C добавляют литийгексаметилдисилазид (1M в ТГФ, 1,2 мл, 1,2 ммоль, 3,0 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 часов добавляют дополнительно гидрохлорид O-этилгидроксиламин (234,3 мг, 2,40 ммоль, 3,0 экв.) и литийгексаметилдисилазид (1M в ТГФ, 3,6 мл, 3,6 ммоль, 9,0 экв.) при 0°C и полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 3 дней. Полученную реакционную смесь затем гасят насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (5 мл) и разбавляют этилацетатом (50 мл). Органический слой выделяют и промывают водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент 45% до 100%, этилацетат в гексане, затем градиент от 0 до 15% метанол в этилацетате), получая масло. В результате кристаллизации из смеси DCM-эфир-гексан получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета solid (33,7 мг, 19,1%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц), δ м.д.: 11,86 (c, 1H), 10,38 (c, 1H), 8,82 (c, 1H), 7,94 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,73 (д, J=10,4 Гц, 1H), 7,44 (д, 8,4 Гц, 1H), 6,57 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,90 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 1,18 (т, J=6,8 Гц, 3H). ЖХ-МС (способ D2): RT = 1,24 минуты, [M+H]+ = 442.
ПРИМЕР 20
N-(Циклопропилметокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Указанное в заголовке соединение получают аналогично способу получения N-этокси-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамида, используя гидрохлорид O-(циклопропилметил)гидроксиламина в качестве исходного материала. 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц), δ м.д.: 11,82 (c, 1H), 10,36 (c, 1H), 8,82 (c, 1H), 7,95 (c, 1H), 7,91 (c, 1H), 7,73 (дд, J=10,4 Гц, 1,8 Гц, 1H), 7,44 (д, 8,4 Гц, 1H), 6,58 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,67 (д, J=7,2 Гц, 2H), 1,12-1,01 (м, 1H), 0,54-0,48 (м, 2H), 0,28-0,23 (м, 2H). ЖХ-МС (способ D2): RT = 1,33 минуты, [M+H]+ = 468.
ПРИМЕР 21
5-(2-Фтор-4-йодофениламино)-N-метилимидазо[1,5-a]пиразин-6-
карбоксамид
К раствору метилового эфира 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (108 мг, 0,26 ммоль) в безводном метаноле (0,5 мл) добавляют 2M метиламин в ТГФ (1,3 мл, 2,6 ммоль, 10 экв.) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 3 дней. Полученную реакционную смесь разбавляют этилацетатом (50 мл). Органический слой промывают водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают с помощью препаративной ВЖЭХ с обращенной фазой [Gemini-NX (100×30 мм, l0 мк), 0,1% FA в смеси вода/ацетонитрил, 5-85%, время стабилизации за 10 минут, скорость потока 60 мл/мин], получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (48,3 мг, 44,8%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц), δ м.д.: 10,89 (c, 1H), 8,95-8,91 (м, 1H), 8,86 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,88 (c, 1H), 7,76 (дд, J=8,4 Гц, 1,2 Гц, 1H), 7,44 (д, J=6,8 Гц, 1H), 6,51 (т, J=6,8 Гц, 1H), 2,81 (д, 4,0 Гц, 3H). ЖХ-МС (способ E2): RT = 12,23 минуты, [M+H]+ = 412.
ПРИМЕР 22
5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксиэтокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Стадия 1: 5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-(винилокси)этокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
К перемешиваемому раствору метилового эфира 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (150 мг, 0,41 ммоль) и O-(2-винилоксиэтил)гидроксиламина (127 мг, 1,23 ммоль, 3,0 экв.) в безводном ТГФ (7,5 мл) при 0°C добавляют литийгексаметилдисилазид (1M в ТГФ, 1,2 мл, 1,23 ммоль, 3,0 экв.) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре. Через 1 час полученную реакционную смесь гасят насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и разбавляют этилацетатом. Органический слой выделяют и промывают водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0 до 5% метанол в дихлорметане), получая масло. В результате кристаллизации из смеси DCM-эфир-гексан получают нужный продукт в виде твердого вещества бледно-оранжевого цвета (160,2 мг, 89,4%). ЖХ-МС (способ C): RT = 2,53 минуты, [M+H]+ = 437/439.
Стадия 2: 5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксиэтокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
К раствору 5-(4-бром-2-фторфениламино)-N-(2-(винилокси)этокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамида (150 мг, 0,34 ммоль) в метаноле (4,5 мл) и дихлорметана (8,9 мл) добавляют 4M HCl в 1,4-диоксане (0,13 мл, 0,5 ммоль, 1,5 экв.) и полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 1 часа. К полученной реакционной смеси добавляют твердый карбонат натрия (50 мг). Полученную реакционную смесь абсорбируют на диоксиде кремния и затем обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 15%, метанол в дихлорметане), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (112,1 мг, 79,5%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц), δ м.д.: 11,85 (ушир. c, 1H), 10,32 (ушир. c, 1H), 8,83 (c, 1H), 7,97 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,64 (дд, J=10,4 Гц, 2,6 Гц, 1H), 7,30 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,77 (т, J=8,8 Гц, 1H), 4,68 (т, J=5,6 Гц, 1H), 3,89 (т, 4,8 Гц, 2H), 3,59 (кв, J=5,4 Гц, 2H). ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,786 минуты, [M+H]+ = 410/412.
ПРИМЕР 23
(S)-5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксипропокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Стадия 1: 5-(4-Бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновая кислота
Нужное соединение получают способом, аналогичным способу получения 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты, используя метиловый эфир 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты в качестве исходного материала. ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,713 минуты, [M+H]+ = 351/353.
Стадия 2: (S)-5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксипропокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
К раствору 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты (100 мг, 0,28 ммоль) в безводном ДМФ (1,5 мл) добавляют, в указанном порядке, гидрохлорид (S)-1-аминооксипропан-2-ола (37,4 мг, 0,29 ммоль, 1,03 экв.), HOBt (40,4 мг, 0,30 ммоль, 1,05 экв.), EDCI (57,3 мг, 0,30 ммоль, 1,05 экв.) и 4-метилморфолин (0,15 мл, 1,36 ммоль, 4,8 экв.). Полученную реакционную смесь затем перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 7 часов и затем разбавляют эфиром (25 мл) и этилацетатом (25 мл). Органический слой промывают водой и солевым раствором, сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный остаток обрабатывают, используя флеш-хроматографию (Si-PPC, градиент от 0% до 40% метанол в этилацетате), получая масло. В результате кристаллизации из смеси DCM-эфир-гексан получают нужный продукт в виде твердого вещества белого цвета (30,3 мг, 25,0%). 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц), δ м.д.: 11,88 (ушир. c, 1H), 10,29 (ушир. c, 1H), 8,82 (c, 1H), 7,98 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,65 (дд, J=10,6 Гц, 2,2 Гц, 1H), 7,30 (д, J=8,6 Гц, 1H), 6,78 (т, J=8,4 Гц, 1H), 4,80 (д, J=4,0 Гц, 1H), 3,90-3,81 (м, 1H), 3,75-3,62 (м, 2H), 1,05 (д, J=6,4 Гц, 3H). ЖХ-МС (способ D2): RT = 1,516 минуты, [M+H]+ = 424/426.
ПРИМЕР 24
(R)-5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2,3-дигидроксипропокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Стадия 1: (R)-5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Нужное соединение получают способом, аналогичным способу получения 5-(4-бром-2-фторфениламино)-N-(2-(винилокси)этокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамида, используя (R)-O-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил)гидроксиламин в качестве исходного материала. ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,954 минуты, [M+H]+ = 480/482.
Стадия 2: 5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксиэтокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Нужное соединение получают способом, аналогичным способу получения 5-(4-бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксиэтокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамида, используя (R)-5-(4-бром-2-фторфениламино)-N-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид в качестве исходного материала. 1H ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц), δ м.д.: 11,90 (ушир. c, 1H), 10,38 (ушир. c, 1H), 8,81 (c, 1H), 7,96 (c, 1H), 7,91 (c, 1H), 7,65 (д, J=10,4 Гц, 1H), 7,30 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,77 (т, J=8,8 Гц, 1H), 4,87 (c, 1H), 4,56 (ушир. c, 1H), 3,93 (дд, J=9,6 Гц, 3,2 Гц, 1H), 3,79-3,69 (м, 2H), 3,43-3,35 (м, 2H). ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,724 минуты, [M+H]+ = 440/442.
ПРИМЕР 25
5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(циклопропилметокси)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид
Указанное в заголовке соединение получают способом, аналогичным способу получения N-(циклопропилметокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоксамид, используя метиловый эфир 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-a]пиразин-6-карбоновой кислоты в качестве исходного материала. 1H ЯМР (MeOD, 400 МГц), δ м.д.: 8,74 (c, 1H), 7,87 (c, 1H), 7,84 (c, 1H), 7,48 (дд, J=10,4 Гц, 3,2 Гц, 1H), 7,30 (д, 8,4 Гц, 1H), 6,75 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,79 (д, J=7,2 Гц, 2H), 1,26-1,13 (м, 1H), 0,62-0,55 (м, 2H), 0,36-0,30 (м, 2H). ЖХ-МС (способ D1): RT = 0,985 минуты, [M+H]+ = 420/422.
1. Соединение формулы I:
и его фармацевтически приемлемые соли, где
Z1 представляет собой CR1;
R1 представляет собой Н;
R1' представляет собой Н;
Z2 представляет собой CR2;
Z3 представляет собой CR3 или N;
R2 и R3 независимо выбирают из Н, галогена;
R4 представляет собой Н;
Y представляет собой W-C(O)-;
W представляет собой 
или 
R5 представляет собой Н;
X1 выбирают из R11' и -OR11';
каждый R11' независимо представляет собой Н, С1-С2алкил, С2-С8алкенил;
X4 представляет собой
R6 представляет собой Н, галоген, циклопропил или -(CR19R20)n-SR16;
R6' представляет собой Н, галоген;
p представляет собой 0, 1, 2 или 3;
n представляет собой 0, 1 или 2;
где каждый указанный алкил в R11' независимо замещен одной или двумя группами, независимо выбранными из галогена, -(CR19R20)nOR16 и R21;
каждый R16 независимо представляет собой Н, С1-С12алкил;
R19 и R20 независимо выбирают из Н, С1-С8алкила;
R21 представляет собой циклопропил.
2. Соединение по п.1, где Z3 представляет собой CR3.
3. Соединение по п.2, где R2 представляет собой Н, Cl или F.
4. Соединение по п.2, где R3 представляет собой Н, Cl или F.
5. Соединение по п.2, где Y представляет собой W-C(O), W представляет собой X1-N(R5)- и X1 выбирают из
6. Соединение по п.2, где Y представляет собой W-C(O), W представляет собой X1-N(R5)- и X1 выбирают из
7. Соединение по п.5 или 6, где X выбирают из
8. Соединение по п.1, где указанное соединение выбирают из группы, состоящей из:
(2-Гидроксиэтокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
((R)-2,3-Дигидроксипропокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
((S)-2-Гидроксипропокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
(2-Гидроксиэтокси)амида 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
((S)-2-Гидроксипропокси)амида 5-(4-бром-2-фторфениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
((S)-2-Гидроксипропокси)амида 5-(4-бром-2-фторфениламино)-8-фторимидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
(2-Гидроксиэтокси)амида 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
((R)-2,3-Дигидроксипропокси)амида 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
((S)-2-Гидроксипропокси)амида 8-фтор-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
(2-Гидроксиэтокси)амида 5-(2-фторметансульфанилфениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
(2-Гидроксиэтокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоновой кислоты;
((S)-2-Гидроксипропокси)амида 5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоновой кислоты;
(2-Гидроксиэтокси)амида 5-(4-циклопропил-2-фторфениламино)имидазо[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты;
(R)-N-(2,3-Дигидроксипропокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида;
N-Этокси-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида;
N-(Циклопропилметокси)-5-(2-фтор-4-йодофениламино)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида;
5-(2-Фтор-4-йодофениламино)-N-метилимидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида;
5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксиэтокси)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида;
(S)-5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2-гидроксипропокси)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида;
(R)-5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(2,3-дигидроксипропокси)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида;
5-(4-Бром-2-фторфениламино)-N-(циклопропилметокси)имидазо[1,5-а]пиразин-6-карбоксамида; или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Фармацевтическая композиция для лечения гиперпролиферативного нарушения у млекопитающего, включающая соединение по любому из пп.1-8, и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Способ ингибирования аномального клеточного роста или лечения гиперпролиферативного нарушения у млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.9.
