Способ диагностики вирусных гепатитов


 


Владельцы патента RU 2517265:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине и, в частности к гематологии, вирусологии и инфекционным заболеваниям и описывает способ диагностики вирусных гепатитов путем определения в пробе крови РНК или ДНК вирусов методом ПЦР, при этом в случае отсутствия РНК или ДНК вирусов в сыворотке, плазме крови или «шапке» сгустка крови исследование проводят в сгустке крови больного, предварительно отделенном от сыворотки крови, высушенном и растворенном в физиологическом растворе хлористого натрия, и в случае наличия РНК или ДНК вирусов диагностируют гепатит. Способ обеспечивает повышение точности диагностики. 1 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к проблеме изучения инфекционных вирусных заболеваний, и касается поиска новых направлений в специфической диагностике острых и хронических вирусных гепатитов.

Известным специфическим способом диагностики острых и вирусных гепатитов является выявление Hbs Ag, антител к вирусу гепатита С или выделение РНК вирусом методом ПЦР в сыворотке или плазме крови, или других биологических жидкостях (1, 2, 3, 4, 5). В том числе и в содержимом светлого образования, находящегося на сгустке крови, в случае его появления (6).

Однако при использовании для исследования только жидкой части крови (сыворотки, плазмы или содержимого «шапки» сгустка крови) не всегда можно выделить маркеры вирусных гепатитов, особенно при тяжелых злокачественных или хронических формах вирусного гепатита.

Предложен способ диагностики вирусных гепатитов путем определения в пробе крови РНК и ДНК вирусов гепатита. Исследование крови проводят в пробе крови, состоящей только из сгустка крови, предварительно высушенного и растворенного в дистиллированной воде. Исследование сгустка крови проводят только при отсутствии маркеров вирусных гепатитов в сыворотке, плазме крови или «шапке» сгустка крови.

Способ осуществляется следующим образом.

В пробе крови, взятой у больных с вирусным гепатитом или подозрением на это заболевание, исследуют наличие маркеров вирусных гепатитов, используя для исследования сыворотку крови и «шапку» сгустка крови. При отсутствии их в этих объектах из крови выделяют сгусток крови и помещают его на лист фильтровальной бумаги. После того как жидкая часть крови впитывается в фильтровальную бумагу, сгусток высушивают при температуре 34-35°С в течение 24-48 часов. Полученную плотную массу помещают в стеклянный сосуд и добавляют дистиллированной воды из расчета 1-2 г сухой массы на 1-3 мл жидкости. Сосуд встряхивают или содержимое перемешивают стеклянной палочкой в течение 30-60 минут. Полученную жидкость исследуют на наличие РНК или ДНК стандартным ПЦР методом.

Пример конкретного использования предлагаемого изобретения.

Больная М., 30 лет поступила в областную клиническую инфекционную больницу с диагнозом: «Вирусный гепатит». В стационаре больная была обследована, однако маркеров вирусных гепатитов в сыворотке крови и «шапке» сгустка крови обнаружено не было. И больной был выставлен основной диагноз: «Цирроз печени смешанной этиологии (алкогольный, вирусный), стадия декомпенсации, осложненный портальной гипертензией, асцитом.

Одновременно у больной было проведено исследование сгустка крови после его выделения и высушивания при температуре 34-35°С в течение 36 часов. Для исследования было взято 1,5 г сухого сгустка крови в 2,0 мл физиологического раствора хлористого натрия. И в нем методом ПЦР была обнаружена РНК вирусного гепатита С.

Это позволило дополнить заключительный диагноз сопутствующим заболеванием «Острый вирусный гепатит С» и объяснить быстрое (в течение года) развитие декомпенсированного цирроза печени, асцита с крайне неблагоприятным для жизни прогнозом.

Также в течение 2011 года было проведено 118 исследований методом ПЦР сгустка крови после высушивания и «шапки» сгустка крови у людей, у которых не определялись в сыворотке крови маркеры вирусных гепатитов. Исследования показали, что в 25% было обнаружено РНК и ДНК вирусных гепатитов в высушенном сгустке крови при отрицательных результатах исследования сыворотки крови и «шапки» сгустка крови методом ПЦР.

Использованная литература

1. Эпидемиология, клиника, диагностика и профилактика вирусного гепатита В: ИП. - Кишинев, 1988 г.

2. О мерах по снижению заболеваемости вирусным гепатитом в стране. Приказ МЗРФ№408 от 12.07.1989 г. - М., 1989.

3. Н.Д. Ющук, Ю.Я. Венгеров. Лекции по инфекционным болезням. - М., 1989, т.2.

4. Амосов А.Д. Гепатит В. - Новосибирск, 2006, - 126 с.

5. О.Н. Ястребова. Гепатит С. - Кольцова, 2005 - 36 с. Информационно-методическое пособие.

6. Патент РФ №2371185. «Способ диагностики вирусного гепатита В». Автор и патентообладатель В.А. Фигурнов.

Способ диагностики вирусных гепатитов путем определения в пробе крови РНК или ДНК вирусов методом ПЦР, отличающийся тем, что в случае отсутствия РНК или ДНК вирусов в сыворотке, плазме крови или «шапке» сгустка крови исследование проводят в сгустке крови больного, предварительно отделенном от сыворотки крови, высушенном и растворенном в физиологическом растворе хлористого натрия, и в случае наличия РНК или ДНК вирусов диагностируют гепатит.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине и касается способа определения К-антигена Streptococcus pneumoniae для серологической диагностики циркулирующих штаммов пневмококков путем постановки реакции агглютинации на стекле с использованием определенного набора диагностических агглютинирующих пневмококковых сывороток, состоящего из 4 пуловых сывороток, в составе которых содержатся следующие антитела к К-антигенам, в первой из которых содержатся антитела к К-антигенам: 23F, 19F, 6A, 7F, 4, 14, во второй пуловой сыворотке: 19F, 18C, 9V, 6B, 4, 5, 14, в третьей пуловой сыворотке: 6A, 9V, 19A, 1, 4, 5, 14, в четвертой пуловой сыворотке: 7F, 6B, 1, 3, 5, 14.
Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно - к лабораторной диагностике и иммунологии, и может быть использовано для проведения исследований клинического материала и пищевых продуктов на наличие ботулотоксинов.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника. Сущность способа состоит в том, что у больных с воспалительными заболеваниями кишечника с помощью иммуноферментного анализа в крови определяют уровень α-дефензина (αД) в нг/мл в плазме крови и содержание β-дефензина (βД) в нг/г и кальпротектина (ФК) в мкг/г в кале, рассчитывают вероятность развития рецидива воспалительного заболевания кишечника (p) в % по формуле.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской генетике, и может быть использовано для определения вероятности возникновения врожденных пороков развития плода у беременных женщин.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для иммунохимического анализа. Аналитическая ванна для проведения мультиплексного дот-иммуноанализа представляет собой монолитный блок, выполненный из химически инертного термопластичного материала, с набором реакционных ячеек для рабочих и отмывочных растворов и термически герметизированных фольгой, имеющей слой полимерного термопластичного материала. Ячейки ванны выполнены в поперечном сечении в виде вытянутого ассиметричного шестиугольника с острыми противоположно расположенными углами, предназначенными в качестве направляющих при введении в ячейки ванны пластин иммуночипа для предотвращения их контакта с внутренней поверхностью ванны.

Изобретение относится к медицине и описывает способ оценки эффективности стимуляции антиоксидантной активности путем определения концентрации восстановленного глутатиона, при этом дополнительно в инкубационную среду добавляют 1,4-дитиоэритритол и аскорбиновую кислоту и при увеличении уровня восстановленного глутатиона с 0,75 нмоль/мг белка до 0,90 нмоль/мг белка и более стимуляцию антиоксидантной системы оценивают как эффективную, а при росте уровня восстановленного глутатиона с 0,75 нмоль/мг белка до 0,80 нмоль/мг белка и менее стимуляцию антиоксидантной активности оценивают как неэффективную.

Изобретение относится к области медицины и касается рекомбинантных химерных полипептидов, несущих эпитопы различных иммунодоминантных белков спирохет комплекса Borellia Burgdorferisensu lato, и способа серодиагностики иксодового клещевого боррелиоза.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки функционального состояния лимфоцитов человека. Для этого проводят оценку реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) при стимуляции их в течение 72 часов фитогемагглютинином (ФГА) иммуноцитохимическим методом в люминесцентном микроскопе в реакции непрямой иммунофлюоресценции.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования бронхолегочной дисплазии у недоношенных детей с экстремально низкой массой тела (ЭНМТ) при рождении.
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для серологической оценки токсичности анатоксина Bordetella pertussis. Сущность способа заключается в том, что в лунки 96-луночных полистироловых планшетов с иммобилизированной гамма-глобулиновой фракцией кроличьих антисывороток к коклюшному токсину вносят исследуемые образцы полуфабриката бесклеточной коклюшной вакцины, прибавляют к ним пероксидазный конъюгат гамма-глобулиновой фракциии кроличьих антисывороток к коклюшному токсину, добавляют к ним субстратную смесь и регистрируют оптическую плотность смеси и на основе оптической плотности выявляют титр присоединившегося к иммуносорбенту коклюшного токсина.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Предложен способ прогнозирования исхода острого периода ишемического инсульта, заключающийся в определении в венозной крови на 1-й день ишемического инсульта соотношения содержания лиганда растворимого 6 члена суперсемейства рецепторов фактора некроза опухоли (sFasL) и растворимого рецептора Fas (sFas) (sFasL/sFas), и при соотношении концентраций sFasL/sFas, меньшем или равном 2,41±0,26, прогнозируют благоприятный исход, при большем 2,67 -неблагоприятный исход. 2 пр., 3 ил.
Изобретение относится к области медицинской диагностики и касается способа прогнозирования риска развития рассеянного склероза (РС) у больных с оптическим невритом. Сущность способа: в сыворотке крови пациента с острым оптическим невритом определяют значение разницы оптической плотности при длине волны 492 нм исследуемой сыворотки и контрольной сыворотки, в качестве которой используют смешанный пул сывороток здоровых людей, регистрируют величины пиковой латентности Р100 зрительных вызванных потенциалов (ЗВП) и амплитуды N95 паттерн-электроретинографии (ПЭРГ) на стандартный стимул. При значении разницы оптической плотности исследуемой сыворотки и контрольной сыворотки, равном или более 0,2, снижении амплитуды N95 ПЭРГ на стандартный стимул на 10% и более по сравнению с нормой и удлинении пиковой латентности Р100 ЗВП на 10% и более по сравнению с нормой, прогнозируют высокий риск развития рассеянного склероза. При значении разницы оптической плотности исследуемой сыворотки и контрольной сыворотки менее 0,2, снижении амплитуды N95 ПЭРГ на стандартный стимул менее чем на 10% по сравнению с нормой и удлинении пиковой латентности Р100 ЗВП менее чем на 10% по сравнению с нормой прогнозируют невысокий риск развития PC. Способ обеспечивает повышение надежности прогнозирования риска развития РС, отличается простотой и скоростью выполнения, не требует применения дорогостоящих методов исследования, не связан с травмированием тканей глаза. 2 пр.

Изобретение относится к медицине. При осуществлении способа через 3 ч после перорального введения препарата «Аласенс» в дозе 15 мг/кг массы тела получают трехканальное RGB флуоресцентное изображение зоны интереса. Оценивают долю участия красного канала в изображении опухоли. Оценивают значение Rcut=(R/(R+G+B))·100%, где Rcut - доля участия красного канала в изображении здоровой кожи, R, G и В - яркости красного, зеленого и синего каналов изображения здоровой кожи. Из полученного трехканального RGB флуоресцентного изображения формируют изображение в оттенках серого I(x,y). Для каждой точки изображения I(x,y) вычисляют отношение , где R(x,y), G(x,y), В(x,y) - яркости красного, зеленого и синего каналов RGB флуоресцентного изображения с координатами x, y. Выполняют действие I(x,y)=0 для точек, в которых значение меньше 10%. При отображении опухоли на полученном результирующем изображении I(x,y) диагностируется злокачественная опухоль, а при исчезновении опухоли - доброкачественная. Способ позволяет повысить информационную способность за счет более точного отображения границ недоброкачественной опухоли. 1 прим.

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной иммунологии и предназначено для определения функциональной активности комплемента по его действию на инфузории. В измерительные ячейки прибора для автоматизированного подсчета числа живых инфузорий вносят суспензию клеток Tetrahymena pyriformis и испытуемую сыворотку крови с последующим определением числа живых клеток в каждую минуту. Совпадение динамики изменения числа живых клеток во времени для испытуемой сыворотки и контрольной, представляющей пул 10 сывороток здоровых доноров, предполагает равенство активностей сывороточного комплемента в этих сыворотках. Предлагаемое изобретение обеспечивает универсальный способ расчета определения функциональной активности комплемента с использованием пригодной для всех видов животных мишени для действия активного комплемента, не требующей дополнительной сенсибилизации антителами и не подверженной реактивному лизису. 3 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к способам иммуноанализа для детектирования или количественного измерения искомых аналитов в образцах и может быть использовано в лабораторной и клинической практике для детектирования антител, протеинов, гормонов, лекарственных форм в биологических образцах в широком диапазоне концентраций. Сущность способа заключается в том, что для каждого искомого аналита иммобилизуют на твердом носителе на первой микрозоне первый специфический связывающий компонент с высокой аффинностью к искомому аналиту, на второй микрозоне иммобилизуют первый специфический связывающий компонент с низкой аффинностью к искомому аналиту, на микрозоны одновременно вносят аналит и второй специфический связывающий компонент, меченый первой детектируемой меткой и имеющий высокую аффинность к аналиту, первую смесь инкубируют и получают первый специфический комплекс, меченый первой детектируемой меткой, к первой смеси добавляют третий специфический связывающий компонент, меченый второй детектируемой меткой и имеющий низкую аффинность к искомому аналиту, при этом второй и третий специфические связывающие компоненты имеют идентичную эпитопную специфичность, затем инкубируют вторую смесь и получают второй специфический комплекс, меченый второй детектируемой меткой, удаляют не связавшиеся компоненты реакции и детектируют сигналы меток, связанных с первым и вторым специфическими комплексами в первой и второй микрозонах, концентрацию аналита определяют путем сравнения измеренных сигналов с калибровочной кривой, построенной для известных значений концентрации аналита. Использование способа позволяет повысить точность определения концентраций аналитов. 5 з. п.ф., 3 пр., 8 ил.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, и касается способа прогноза гипертензионных осложнений беременности у пациенток с гестационным сахарным диабетом. Способ основан на исследовании следующих параметров: наличие вариантного аллеля 704С гена AGT: (генотип 704ТС или 704СС), наличие вариантного аллеля 521Т гена AGT (генотип 521СТ или 521ТТ), наличие вариантного аллеля 1166С гена AGTR1 (генотип 1166АС или 1166СС), наличие вариантного аллеля 786С гена NOS3 (генотип 786ТС или 786 СС). Также устанавливают: возраст старше 35 лет, крупный плод в анамнезе, наличие у пациентки ИМТ ≥40 кг/м2, наличие патологии сердечнососудистой системы у родственников. Затем вычисляют прогностический индекс по формуле: Р=0,861 × X1+0,636 × Х2+0,271 × Х3+0,793 × Х4+1,487 × Х5+0,822 × Х6+0,869 × Х7+0,801 × Х8 - 2,421, где X1 - наличие С аллеля гена AGT (полиморфизм 704 Т>С) в генотипе (если есть -1, если нет - 0). Х2 - наличие Т аллеля гена AGT (полиморфизм 521 С>Т) в генотипе (если есть -1, если нет - 0). Х3 - наличие С аллеля гена AGTR1 (полиморфизм 1166 А>С) в генотипе (если есть -1, если нет - 0). Х4 - наличие С аллеля гена NOS3 (полиморфизм 786 Т>С) в генотипе (если есть -1, если нет - 0). Х5 - возраст старше 35 лет (если старше -1, если нет - 0). Х6 - крупный плод в анамнезе (если было - 1, если нет - 0). Х7 - индекс массы тела пациентки >40 кг/м (если>40 кг/м -1, если нет - 0). Х8 - наличие патологии сердечно-сосудистой системы у родственников (если есть - 1, если нет - 0). Const= -2,42129. Если P<0, судят об отсутствии угрозы развития гипертензионных осложнений. Если Р>0, прогнозируют развитие гипертензионных осложнений. Изобретение обладает чувствительностью 80%, специфичностью 74,47%, эффективностью 75%. Данная формула позволяет прогнозировать развитие гипертензионных осложнений до появления клинических признаков. 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине и может быть использована для обнаружения злокачественных опухолей, включая рак молочной железы, рак почек. Для этого проводят измерение экспрессии полипептида, обладающего способностью связываться посредством реакции антиген-антитело с антителом против белка CAPRIN-1, имеющего любую из аминокислотных последовательностей с четными номерами SEQ ID NO:2-30 списка последовательностей, в образце, полученном из живого организма, посредством реакции антиген-антитело в образце, выделенном из живого организма. Также предложен агент для обнаружения злокачественной опухоли. Группа изобретений обеспечивает высокую чувствительность при диагностике злокачественных опухолей. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований околоушной слюнной железы по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента. Для этого проводят исследования плазмы венозной крови и ротовой жидкости пациента методом стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа. Забор венозной крови и ротовой жидкости проводят в любой последовательности. В качестве биомаркера в ротовой жидкости пациента выбирают раковый антиген 125 / cancer antigen 125 (CA 125), а в качестве биомаркера в плазме крови выбирают нейрон-специфическую енолазу / neuron-specific enolase, при содержание в ротовой жидкости пациента CA 125 в количестве 957,1-1528,5 ед/мл и нейрон-специфической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 30-57,9 нг/мл диагностируют железистый рак околоушной слюнной железы пациента. Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента CA 125 в количестве 1739,3-2709,7 ед/мл и содержание в плазме крови пациента нейрон-специфической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 16,1-24,5 нг/мл - диагностируют лимфому околоушной слюнной железы пациента. Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения. Изобретение обеспечивает точность и чувствительность дифференциальной диагностики в день обращения пациента, повышение вероятности выявления процесса злокачественных новообразований у пациента на ранних стадиях заболевания. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для оценки локального иммунитета эндометрия. Для этого на исследование проводят забор эндометриальной ткани у женщин с патологией эндометрия на 7-9-й день менструального цикла путем пайпель-биопсии. Определяют в исследуемой ткани относительное содержание IFN-γ и IL-4-продуцирующих лимфоцитов с вычислением соотношения Th1/Th2. При соотношении Th1/Th2 более 0,92 у.е. судят о нарушениях на уровне локального иммунитета, а при Th1/Th2 менее 0,92 у.е. делают заключение об отсутствии признаков нарушений. Использование данного способа позволяет выявить нарушения локального иммунитета эндометрия и своевременно решить вопрос о необходимости проведения терапевтической коррекции выявленных нарушений у женщин с патологией эндометрия. 3 пр.

Группа изобретений относится к индикаторным агентам для тестирования психических состояний посредством логистического регрессионного анализа, включающим по крайней мере три вида молекул, выбранных из группы, состоящей из IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, эотаксина, основного FGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IFN-α, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, PDGF-BB, RANTES, TNF-α, VEGF, CSF-2, TGF-β, нейротрофина 5, MCP-3, β-2-микроглобулина, ангиотензина II, CSF-3, CXC-хемокинового лиганда 1, CXC-хемокинового лиганда 5 и HGF; агентам для тестирования интенсивности психических расстройств, включающим по крайней мере три вида молекул, выбранных из вышеуказанной группы; а также к способу измерения психических состояний, включающему стадии измерения уровня факторов в биологическом образце с использованием тестового агента и сравнения количества, полученного в стадии измерения, с количеством индикаторного агента посредством пропорционального взвешивания; способу измерения психических расстройств, включающему стадии измерения уровня факторов в биологическом образце с использованием тестового агента и сравнения количества, полученного в стадии измерения, с количеством индикаторного агента посредством пропорционального взвешивания. Применение группы изобретений позволяет дать объективную и специфическую оценку различных психических или физических состояний, таких как стресс или утомление, для которых оценка традиционно возможна только субъективными, зависящими от симптомов методами. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 23 ил., 3 пр.
Наверх