Способ прогнозирования ишемически-геморрагических церебральных осложнений у новорожденных из группы высокого перинатального риска


 


Владельцы патента RU 2568915:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования ишемически-геморрагических церебральных осложнений у новорожденных. Сущность способа состоит в том, что в пуповинной крови определяют уровни 6-keto-простагландина F1α (6-KetoPGF-1α) и тромбоксана В2 (ТХВ2) и рассчитывают их соотношение К=6-KetoPGF-1α/TXB2. При значении коэффициента К равном 0,04 и менее прогнозируют возникновение ишемически-геморрагических церебральных осложнений. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность прогнозирования ишемически-геморрагических церебральных осложнений у новорожденных из группы высокого перинатального риска. 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к неонатологии, и может быть использовано для прогнозирования тяжелых ишемически-геморрагических осложнений у новорожденных из группы перинатального риска.

Общепризнано, что наиболее актуальное влияние на характер жизни человека оказывают болезни и повреждения, возникающие в перинатальном периоде. Риск, которому подвергается жизнь ребенка в период антенатального развития и родов, значительно выше, чем во все последующие периоды детства (Кельмансон И.А., 2002; Яцык Г.В., 2002; Шабалов Н.П., 2004; Володин Н.Н., Дегтярев Д.Н., 2005; Савельева Г.М., 2005).

Наибольшее воздействие при этом испытывает нервная система, именно от нее во многом зависит дальнейшее развитие ребенка. Среди факторов, повреждающих ЦНС, лидирующими остаются хроническая внутриутробная гипоксия плода и острая асфиксия в родах (Барашнев Ю.И., 2002, 2006; Баранов А.А. и соавт., 2005; Бомбардирова Е.П., Яцык Г.В., 2005; Яковлева Т.В., 2005; Смирнов И.Е. и соавт., 2010; Evans K. Et al, 2001; Volpe J.J., 2003; Ginet V. Et al., 2009; Lingwood B.E. et al., 2009).

Независимо от тяжести, интенсивности и продолжительности воздействия, перинатальная гипоксия может влиять на качество жизни ребенка. Это обусловлено особенностями метаболизма и чрезвычайной чувствительностью головного мозга к недостатку кислорода (Суслина З.А., Максимова М.Ю., Федорова Т.Н., 2007). Эти обстоятельства на фоне индивидуальных особенностей генетической программы, течения анте- и интранатального периода запускают разные варианты функциональных и структурных геморрагических нарушений различных отделов центральной нервной системы, что в итоге определяет степень церебрального дефицита (Зайнидинова Р.С., Смирнов И.Е., Иванов В.А., 2011).

В наших исследованиях установлено, что цереброваскулярные расстройства являются одним из доминирующих факторов в патогенезе гипоксически-ишемических и геморрагических поражений ЦНС. Допплерографическим исследованием выявлено повышение тонуса, а следовательно, снижение скоростей кровотока в среднемозговых артериях, в пользу чего свидетельствовали достоверно значимые по сравнению с контролем повышения индекса резистентности в средних мозговых артериях (СМА) у новорожденных с тяжелой церебральной патологией.

Представляет интерес наличие корреляционной зависимости между показателями индекса резистентности СМА и скорости кровотока по вене Галена (r=0,792170, p<0,05), поскольку подчеркивает неразрывную связь артериального и венозного церебрального кровотока, являющихся важными составляющими в обеспечении динамического равновесия объемного мозгового кровотока, объемов цереброспинальной жидкости и ткани мозга под контролем сложных механизмов регуляции, включающих регуляторы тонуса мозговых сосудов и гемостаза, в числе которых существенное место принадлежит двум разнопланово действующим метаболитам арахидоновой кислоты: 6-keto-простагландину F1 α (6-KetoPGF-1α) и тромбоксану В2 (ТХВ2) (P.D. Donnellan, Т. Kinsella, 2009).

Выявлен ряд особенностей и закономерностей их взаимоотношений в неонатальном периоде с учетом тяжести перинатального гипоксически-ишемического и - геморрагического поражения ЦНС. Установлен достоверно более высокий уровень обоих параметров в пуповинной крови новорожденных без изменений неврологического статуса в неонатальном и грудном возрасте по сравнению с соответствующими значениями у детей, имевших проявления церебральных ишемических, геморрагических и сочетанных нарушений и их последствий разной степени тяжести.

Из практики медицины известны способы прогнозирования патологии ЦНС у новорожденных. Наиболее близким к заявленному техническому решению является способ, основанный на двух методиках: определение уровня эндотелина-1 в пуповинной крови, проведение допплерометрического исследования среднемозговой артерии на шестые сутки жизни (В.В. Строгулин, А.Я. Бабиянц, А.А. Афонин, Е.А. Папшева, Н.А. Друкер «Способ прогнозирования патологии ЦНС у новорожденных», патент РФ №2317014, 2006). Данный способ имеет следующие недостатки:

1. Он базируется на проведении двух разноплановых исследований.

- Возможны индивидуальные колебания уровня эндотелина-1, зависящие от особенностей течения эмбрио-, фетогенеза, наличия сопутствующей патологии у новорожденного.

- Необходимость проведения допплерометрического исследования на шестые сутки жизни, т.е. к концу раннего неонатального периода, когда вероятная патология, особенно тяжелая, уже имеет клинические проявления.

- Необходимость использования дорогостоящей аппаратуры для проведения допплерометрического исследования.

Помимо указанных недостатков данный способ не оценивает состояние гемостаза и не позволяет дифференцировать характер поражения ЦНС.

Задача изобретения - повышение точности ранней диагностики поражения ЦНС и прогноза вероятных геморрагических нарушений.

Поставленная задача достигается тем, что в пуповинной крови определяют уровни 6-keto-простагландина F1 α и тромбоксана В2 и рассчитывают их соотношение: K=6-KetoPGF-1α/TXB2. При уровне коэффициента К=0,04 и менее прогнозируют возникновение ишемически-геморрагических церебральных осложнений.

Технический результат, получаемый в результате использования изобретения: нами впервые в неонатологической практике доказана чувствительность и специфичность простагландин/тромбоксанового коэффициента для использования его в точном прогнозировании тяжелого гипоксически-геморрагического поражения ЦНС у новорожденных из группы высокого перинатального риска.

Установлено, что при уровне коэффициента в пуповинной крови 0,04 и менее вероятность ишемически-геморрагических церебральных изменений составляет 85,7%. При его более высоких значениях (>0,04) с вероятностью 76,9% предполагается отсутствие ишемически-геморрагических церебральных осложнений.

Выявлено, что снижение или повышение уровня 6-KetoPGF-1α крови сопровождалось однонаправленным изменением уровня его физиологического антипода ТХВ2, чем обусловлена достоверная зависимость между ними при рождении у новорожденных с тяжелым гипоксически-ишемическим поражением ЦНС.

В то же время значительное преобладание генерации ТХВ2 над 6-KetoPGF-1α при большом разбросе индивидуальных показателей определяло целесообразность представления их разнонаправленного влияния на церебральный кровоток и гемостаз через коэффициент их соотношения. Определены достоверно значимые отличия простагландин/тромбоксанового коэффициента у новорожденных с тяжелой церебральной патологией ишемически-геморрагического генеза. Низкие значения простагландин/тромбоксанового коэффициента у детей с перинатальным поражением ЦНС тяжелой и средней степени тяжести по сравнению с контрольной группой свидетельствовали о снижении вазодилатирующего и повышении вазоконстрикторного влияния на церебральные сосуды с развитием ишемического характера нарушения мозгового кровообращения на протяжении всего неонатального периода.

При обсуждении особенностей системы гемостаза у новорожденных, перенесших перинатальную гипоксию, следует учитывать состояние церебральной гемодинамики, особенно уровни 6-KetoPGF-1α и ТХВ2. Именно вазодилатирующая и констрикторная их роли определяют величины просвета сосудов, гемодинамические условия течения крови и, как следствие, величину порога активации внутрисосудистого свертывания (Гузеватых А.П., 2000; Головченко Ю.И., Трещанская М.А., 2008; Sun C.W., Falk J.R., Hokomoto et al., 2000).

Таким образом, снижение простагландин/тромбоксанового соотношения является одним из факторов, способствующих развитию прокоагулянтных свойств эндотелия сосудов и, напротив, депрессии фибринолиза. Данное исследование не является инвазивным вмешательством и не является потенциально опасным с связи с возможностью инфицирования ВИЧ и вирусом гепатита В. Иммуноферментные исследования включали определение содержания в пуповинной крови ТХВ2 и 6-keto-PGFlα у 90 новорожденных с клиническими проявлениями поражения ЦНС и без клинических проявлений.

Подробное описание способа и примеры его конкретного выполнения

Определение содержания ТХВ2 осуществляют иммуноферментным методом с помощью коммерческих наборов фирмы «Enzo».

Набор «Assay Designs Correlate-EIA™ Thromboxane B2» основан на конкурентном иммуноферментном анализе и предназначен для количественного определения ТХВ2 в биологических жидкостях. В наборе используются поликлональные антитела к ТХВ2 конкурентного связывания ТХВ2, присутствующего в образцах или конъюгированного с молекулой щелочной фосфатазы, с которой ТХВ2 ковалентно связан.

После одновременной инкубации при комнатной температуре избытки реагентов удаляются при промывке и добавляется субстрат в разведении: 0, 156, 312, 625, 1250, 2500, 5000, 10000 pg/ml. После недолгой инкубации энзиматическая реакция останавливается, а развившееся желтое окрашивание измеряется с помощью микропланшетного ридера 405 нм. Интенсивность развившейся желтой окраски обратно пропорциональна количеству ТХВ2, присутствующего в образцах. Полученные данные используются для расчета концентрации ТХВ2 согласно приведенным табличным данным в инструкции по применению в pg/ml.

Определение содержания 6-keto-PGF1α осуществлялось иммуноферментным методом с помощью коммерческих наборов фирмы «Enzo».

После подготовки реагентов к использованию пипетируют 100 мкл стандартного раствора в микролунки, а затем - по 50 мкл приготовленных растворов в микролунки буфера с добавлением желтого антитела в каждую лунку. После этой процедуры в микролунках появляется зеленое окрашивание, за исключением NSB-лунок, которые имеют голубое окрашивание. После инкубации при температуре +4°C в течение 18-24 часов необходимо трижды промыть промывочным раствором, затем добавить по 200 мкл субстрата в каждую лунку, инкубировать при температуре +37°С, после этого энзиматическая реакция останавливается, и развившееся желтое окрашивание измеряется с помощью микропланшетного ридера 405 нм в диапазоне 570-590 nm. Полученные данные используются для расчета концентрации согласно приведенным табличным данным в инструкции по применению в pg/ml.

После определения уровня 6-keto-PGF1α и ТХВ2 рассчитывают их соотношение

К=6-KetoPGF-1α/TXB2,

где 6-KetoPGF-1α-6-Keto- простагландин F1α, TXB2 - тромбоксан B2.

При уровне коэффициента К=0,04 и менее прогнозируют возникновение ишемически-геморрагических церебральных осложнений у данного ребенка, что позволяет выбрать адекватную терапевтическую тактику.

Пример 1.

Ребенок А-в 7 суток, родился от 1 беременности, осложненной анемией, гестозом 1, 2 половины, угрозой прерывания в сроке 19 недель на фоне хронической фето-плацентарной недостаточности, срочных родов через естественные родовые пути, массой 3100 г, оценкой по шкале Апгар 4-6 баллов в тяжелом состоянии за счет неврологической симптоматики, характеризовавшейся слабым криком, тремором верхних и нижних конечностей, снижением мышечного тонуса, физиологических рефлексов, петехиальными кровоизлияниями на коже лица. В связи с тяжестью состояния и выраженностью неврологической симптоматики к концу первых суток ребенок был переведен в отделение патологии новорожденных. Определен уровень 6-KetoPGF-1α - 52,4 пг/мл и ТХВ2 - 1048 пг/мл в пуповинной крови, рассчитана величина простагландин/тромбоксанового коэффициента К, который при рождении составлял 0,05, что свидетельствовало об отсутствии вероятности геморрагических внутричерепных осложнений. Данный прогноз подтвержден результатами нейросонографического исследования головного мозга, выявившего повышение эхогенности паренхимы, неровность контуров сплетений. В динамике при транскраниальной допплерографии были получены следующие показатели: в первые часы жизни - индекс резистентности (IR) - 0,78, скорость кровотока по вене Галена (Vs) - 4,9 см/с; на 7 сутки жизни - IR - 0,72, Vs - 5,5 см/с. Для оценки состояния гемостаза проведено тромбоэластографическое исследование, выявившее гиперкоагуляционную направленность гемостаза без изменения коагуляционного индекса (Ci). На 7 сутки появилось расширение ликворных пространств (межполушарная щель - 4 мм, передние рога боковых желудочков S:D=4,2:4,4 мм). На основании полученных результатов исследования был установлен диагноз: гипоксически-ишемическое поражение ЦНС. На фоне проводимой терапии на 18 сутки был выписан с положительной динамикой.

Пример 2.

Ребенок М-в, родился от 2 беременности, протекавшей на фоне гестоза 2 половины, хронического пиелонефррита, вегето-сосудистой дистонии по смешанному типу, хронической внутриутробной гипоксии плода, от 2 родов в срок оперативным путем с обвитием пуповины вокруг шеи, массой 3700 г, оценкой по Апгар 3-5 баллов. В роддоме у ребенка имелись признаки тяжелой неврологической симптоматики в виде гипервозбудимости, болезненного крика, гипертонуса мышц конечностей с мелкоразмашистым тремором, стробизма. Отмечалась мраморность кожи с акроцианозом, кровоизлияния в склеры, петехии на коже лица. В связи с тяжестью состояния к концу первых суток ребенок был переведен в реанимационное отделение. Определен уровень 6-KetoPGF-1α - 43,5 пг/мл и ТХВ2 - 1450 пг/мл в пуповинной крови, рассчитана величина простагландин/тромбоксанового коэффициента К, который при рождении составлял 0,03, что свидетельствовало в пользу возникновения геморрагических осложнений. В динамике при транскраниальной допплерографии были получены следующие показатели: в первые часы жизни - индекс резистентности (IR) - 0,81, скорость кровотока по вене Галена (Vs) - 5,2 см/с; на 7 сутки жизни - IR - 0,75, Vs - 5,7 см/с. Для комплексной оценки сосудистого тонуса и гемокоагуляции проведено тромбоэластографическое исследование, выявившее гиперкоагуляционную направленность гемостаза с тенденцией к повышению коагуляционного индекса (Ci). Нейросонографическое исследование головного мозга в 1 сутки жизни выявило повышение эхогенности паренхимы, неровность контуров сплетений, субэпендимальные псевдокисты, повышенную пульсацию сосудов, наличие перивентрикулярных кровоизлияний 2 степени и внутрижелудочковых кровоизлияний 3 степени, подтвержденных МРТ-исследованием на 4 сутки жизни. На основании полученных результатов исследования был установлен диагноз: ишемически-геморрагическое поражение ЦНС, ПВК 2 степени, ВЖК 3 степени. На фоне комплексной терапии, включавшей метаболические и улучшающие микроциркуляцию препараты, на фоне охранительного режима и дегидратирующей терапии состояние ребенка улучшилось. На 17 сутки был переведен в отделение патологии новорожденных для дальнейшего лечения. В возрасте 37 дней ребенок был выписан с положительной динамикой.

Заявленным способом обследовано 90 новорожденных с клиническими проявлениями поражения ЦНС и без клинических проявлений. Результаты показали целесообразность использования простагландин/тромбоксанового коэффициента в практике для прогноза развития геморрагических осложнений. Целесообразность использования упомянутых показателей подтверждена с помощью логистического регрессивного анализа.

Преимущества метода

Заявленный способ позволяет прогнозировать тяжелые гипоксически-геморрагические поражения ЦНС у новорожденных из группы высокого перинатального риска. Данное исследование не является травматичным вмешательством и не является потенциально опасным в плане возможности инфицирования ВИЧ и вирусом гепатита В. Данный способ является существенным вкладом в практику детских неврологов и неонатологов, поскольку позволяет своевременно и более активно проводить антигеморрагическую терапию, что улучшает прогноз в остром периоде и предотвращает в последующие этапы формирование тяжелого церебрального дефицита.

Способ прогнозирования ишемически-геморрагических церебральных осложнений у новорожденных из группы высокого перинатального риска путем исследования крови ребенка, отличающийся тем, что в пуповинной крови определяют уровни 6-KetoPGF-1α и ТХВ2 и рассчитывают их соотношение К=6-KetoPGF-1α/TXB2,
где 6-KetoPGF-1α-6-keto-простагландин F1α; ТХВ2 - тромбоксан В2 и при уровне коэффициента К равном 0,04 и менее прогнозируют возникновение ишемически-геморрагических церебральных осложнений.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для прогноза неблагоприятных исходов псевдотуберкулезной (ПСТ) инфекции у детей.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в нейрохирургии для прогнозирования направленности патологического процесса у пациентов со зрелыми внемозговыми интракраниальными опухолями.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития патологических изменений в тканях пародонта и слюнных железах у женщин при эстрогендефицитных состояниях.

Изобретение относится к области биохимии и медицины, в частности к аналитической химии и иммунохимическому анализу, и описывает способ обработки образца сыворотки или плазмы крови.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и касается способа прогнозирования риска прерывания беременности в раннем сроке после экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов у пациенток с бесплодием трубно-перитонеального генеза.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложено гуманизированное антитело и его фрагмент, способные специфически связывать бета-амилоид, охарактеризованные фрагментами последовательностей на основе антитела мыши 8F5, и Fc-областью человеческого IgG1, содержащей аминокислотную замену D265A; а также кодирующая нуклеиновая кислота, вектор экспрессии, продуцирующие антитело или его фрагмент клетки, способ продуцирования антитела или его фрагмента; композиция, применение антитела и его фрагмента для изготовления лекарственного средства, способ предупреждения, лечения или облегчения эффектов амилоидоза; способ диагностики амилоид-ассоциированных заболеваний или состояний, способ определения степени нагрузки амилоидогенных бляшек и тест-набор для выявления и диагностики амилоид-ассоциированных бляшек.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и оториноларингологии, и может быть использовано для диагностики воспалительных и не воспалительных процессов в глоточной миндалине у детей.

Изобретение относится к биохимии. Описаны способы определения наличия или метастазов опухоли, скрининга наличия опухоли среди популяции высокого риска, прогноза для пациента, имеющего опухоль, определения эффективности хирургического вмешательства, радиационной терапии или химиотерапии.

Изобретение относится к области медицины, а именно гастроэнтерологии и патологической анатомии, и предназначено для дифференциальной диагностики различных нозологических форм аутоиммунных заболеваний печени (АИЗП).
Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, а именно может быть использовано для определения предрасположенности больных с хронической ишемической болезнью сердца к прогрессированию атеросклероза.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в 10% гомогенате плаценты, взятой сразу после преждевременных родов, методом капиллярного электрофореза определяют содержание глутамата и агматина, рассчитывают их соотношение и при величине коэффициента, равного 1,70 и ниже, прогнозируют перинатальное поражение ЦНС у недоношенных новорожденных.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в 10% гомогенате плаценты, взятой сразу после преждевременных родов, методом капиллярного электрофореза определяют содержание глутамата и агматина, рассчитывают их соотношение и при величине коэффициента, равного 1,70 и ниже, прогнозируют перинатальное поражение ЦНС у недоношенных новорожденных.
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, гистологии и патологической анатомии, и может быть использовано для оценки анаболического действия лекарственных препаратов.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для укупорки реакционных кювет, содержащих высушенные реагенты для биоаффинных исследований. Система (20) для биоанализа содержит картридж (4) для биоанализа с реакционной камерой (6) и прокалываемую герметичную крышку (2).

Группа изобретений относится к анализу биологических жидкостей с помощью биосенсорных систем. Способ определения концентрации анализируемого вещества в образце включает: генерацию выходного сигнала, соответствующего концентрации анализируемого вещества в образце и входному сигналу; компенсацию выходного сигнала с помощью основной функции и первой функции невязки для определения скомпенсированного выходного сигнала, причем основная функция предназначена для компенсации основной ошибки в выходном сигнале, а первая функция невязки предназначена для компенсации оставшейся ошибки в выходном сигнале; и определение концентрации анализируемого вещества в образце по скомпенсированному выходному сигналу.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для количественного определения оксима пиностробина в плазме крови. Для этого проводят определение оксима пиностробина в плазме крови методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии с использованием смеси плазмы крови с оксимом пиностробина и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу.
Изобретение относится к области ветеринарии и животноводства и может быть использовано при искусственном осеменении для выявления генетически неполноценных сперматозоидов.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ишемической болезнью сердца с ишемической и/или постинфарктной дисфункцией миокарда на фоне хронической сердечной недостаточности.

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии, и может быть использовано в гепатологии и гастроэнтерологии для диагностики фибротических процессов печени.
(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для посмертной диагностики токсокароза плотоядных животных. Способ включает отбор проб массой 50,0 г.

Изобретение относится к области исследования и анализа биологических материалов и касается способа для подсчета биологических объектов в пробе и сканирующего цитометра на его основе. Для осуществления подсчета биологических объектов пробу помещают в прямоугольный капилляр, выполненный с возможностью отражения сигнала флуоресценции от верхней поверхности прямоугольного капилляра. Дополнительный сбор сигнала флуоресценции обеспечивают с помощью параболического отражателя, в фокусе которого устанавливают исследуемую зону капилляра, при этом смену исследуемых зон с биологическими объектами осуществляют за счет перемещения капилляра вдоль его оси. Детектируемый световой поток разделяют по длине волны и направляют на первый и второй фотоумножители, выходные сигналы которых пропорциональны световому потоку и сигналу флуоресценции. С выхода фотоумножителей сигналы поступают на амплитудный и фазовый преобразователи для одновременной обработки и последующего перемножения массивов данных, полученных с выходов амплитудного и фазового преобразователей сигналов в микропроцессоре. Технический результат заключается в повышении точности и упрощении способа измерений, а также в уменьшении габаритов и повышении мобильности устройства. 2 н. и 11 з.п. ф-лы, 4 ил.
Наверх