Способ прогнозирования риска развития инфекционного эндокардита



Способ прогнозирования риска развития инфекционного эндокардита
Способ прогнозирования риска развития инфекционного эндокардита
Способ прогнозирования риска развития инфекционного эндокардита

 


Владельцы патента RU 2617060:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и хирургии, и может быть использовано для прогнозирования генетической предрасположенности или повышенного риска развития инфекционного эндокардита (ИЭ) у пациентов из группы риска. Сущность способа: проводят генотипирование по полиморфному локусу I462V гена CYP1A1 и по полиморфному локусу I105V гена глутатион-S-трансферазы Пи1 GSTP1 у пациентов группы риска, при выявлении носительства сочетания генотипов CYP1A1 I462I и GSTP1 I105V у их носителей прогнозируют 22,6-кратный риск развития инфекционного эндокардита. В группу риска входят лица с внутривенной наркоманией, врожденными и приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, иммунодефицитными состояниями. Способ позволяет установить генетическую предрасположенность к ИЭ у пациентов из группы риска, помогает определить тактику ведения пациентов и индивидуализировать комплекс профилактических и лечебных мероприятий. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и хирургии, и может быть использовано для прогнозирования генетической предрасположенности или повышенного риска развития инфекционного эндокардита (ИЭ) у пациентов из группы риска.

Известно, что многие широко распространенные заболевания - рак, иммунодефициты, аллергические состояния и другие, связаны с воздействием на организм вредных факторов внешней среды - ксенобиотиков. Их обезвреживание и удаление из организма осуществляется системой детоксикации, состоящей более чем из 200 ферментов. Детоксикация происходит в три этапа -1 фаза (активация), II фаза (конъюгирование или нейтрализация) и III фаза (утилизация). Ферменты I фазы осуществляют процессы окисления жирорастворимых токсинов супероксидными радикалами, что приводит к образованию на них реактивных участков для присоединения водорастворимых молекул ферментами II фазы и последующего выведения из организма. Риск развития патологии максимален при высокой активности ферментов I фазы, поскольку образованные при их участии реактивные сайты на молекулах ксенобиотиков обеспечивают легкое прикрепление последних к ДНК и белкам, что приводит к повреждению клеток. В то же время при инертности ферментов II фазы происходит накопление в организме токсичных для клеток реактантов.

ИЭ, являющийся тяжелой нозологией, нередко с летальным исходом, часто развивается на фоне приема наркотиков, глюкокортикостероидов, цитостатиков, при СПИДе, у лиц с врожденными или приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и с иммунодефицитными состояниями. Тем не менее, связь ИЭ с ферментами системы детоксикации, которые осуществляют метаболизм наркотических и лекарственных средств, не изучена. Активность ферментов детоксикации зависит от особенностей аллельных вариантов (полиморфизмов) кодирующих их генов. Ассоциация ИЭ с полиморфизмами генов ферментов детоксикации не исследовалась. Поиск связи ИЭ с аллельными вариантами иных генов пока малорезультативен. Так, показано, что полиморфизмы в гене рецептора тромбоцитов не влияют на течение ИЭ (Daga S., Shepherd J.G., Callaghan J.G., Hung R.K., Dawson D.K., Padfield G.J., Hey S.Y., Cartwright R.A., Newby D.E., Fitzgerald J.R. Platelet receptor polymorphisms do not influence Staphylococcus aureus-platelet interactions or infective endocarditis. Microbes Infect. 2011; 13 (3):216-225). Не обнаружено несомненных ассоциаций с ИЭ вариантов генов некоторых толл-подобных рецепторов и интерлейкинов - TLR4, IL 10, IL IB, IL6 (M. Weinstock, I. Grimm, J. Dreier, C. Knabbe, T. Vollmer. Genetic Variants in Genes of the Inflammatory Response in Association with Infective Endocarditis. PLoS One. 2014; 9 (10): el 10151. Published online Oct 9, 2014. doi: 10.1371/journal.pone.0110151 PMCID: PMC4192365).

Наиболее близким к заявляемому способу является способ определения высокого риска развития ИЭ у носителей варианта Q полиморфизма R753Q (rs 5743708) в гене толл-подобного рецептора 2 (TLR2) (Bustamante J., Tamayo Ε., Florez S., Telleria J.J., Bustamante Ε., Lopez J., San Roman J.A., Alvarez F.J. Toll-Like Receptor 2 R753Q Polymorphisms Are Associated With an Increased Risk of Infective Endocarditis. Rev. Esp. Cardiol. 2011; 64 (11): 1056-1059). Способ заключается в выделении геномной ДНК из образцов крови, взятой в пробирки с антикоагулянтом - этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА), определении полиморфизма R753Q в гене TLR2 с помощью по-лимеразной цепной реакции и рестрикционного анализа полученных ПЦР-продуктов. Авторами было обследовано 65 больных инфекционным эндокардитом в сравнении с 66 практически здоровыми индивидами. При статистическом анализе результатов генотипирования авторами была найдена значительная ассоциация с ИЭ полиморфизма R753Q гена TLR2 и установлен повышенный риск (в 3-13 раз) развития ИЭ у носителей аллеля Q. Однако указанный патологический вариант (аллель Q) был обнаружен авторами только у 33% больных инфекционным эндокардитом и у 12,9% практически здоровых людей. Выявленная относительно низкая частота аллеля Q у пациентов с ИЭ побуждает к поиску других более информативных генетических маркеров риска. Кроме этого, другие исследователи заявленную связь полиморфизма R753Q в гене TLR2 с ИЭ не подтвердили (Golovkin A.S., Ponasenko A.V., Yuzhalin А.Е., Salakhov R.R., Khutornaya M.V., Kutikhin A.G., Rutkovskaya N.V., Savostyanova Y.Y., Barbarash L.S. An association between single nucleotide polymorphisms within TLR and TREM-1 genes and infective endocarditis. Cytokine. 2014, 8; 71(1): 16-21).

Задачей настоящего изобретения явилось исследование ассоциации ИЭ с полиморфизмами генов ферментов I и II фаз системы детоксикации и разработка нового способа прогнозирования риска развития ИЭ.

Поставленная задача была достигнута проведением забора венозной крови у пациентов, выделением ДНК, проведением полимеразной цепной реакции, определением полиморфизма гена. Проводят генотипирование по полиморфному локусу 1462V гена CYP1A1 и по полиморфному локусу I105V гена глутатион-S-трансферазы Пи1 GSTP1 у пациентов группы риска и при выявлении носительства сочетания генотипов CYP1A1 14621 и GSTP1 I105V у их носителей прогнозируют 22,6-кратный риска развития инфекционного эндокардита.

В группу риска входят лица с внутривенной наркоманией, врожденными и приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, иммунодефицитными состояниями.

Новизна изобретения

1. Генотипирование по полиморфным локусам 1462V гена цитохрома Р-450 1А1 CYP1A1 и I105V гена глутатион-S-трансферазы Пи1 GSTP1 пациентов группы риска позволяет прогнозировать 22,6-кратный риск развития ИЭ у носителей сочетания генотипов CYP1A114621 и GSTP1 I105V.

2. В группу риска входят лица с внутривенной наркоманией, врожденными и приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, иммунодефицитными состояниями.

В патентной и научной литературе отсутствуют сведения об аналогичном способе определения генетического риска ИЭ.

Совокупность существенных признаков изобретения позволила получить новый технический результат, заключающийся в установлении генетической предрасположенности к ИЭ у пациентов из группы риска, что поможет определить тактику ведения пациентов и индивидуализировать комплекс профилактических и лечебных мероприятий.

Впервые предлагается использовать генотипирование по полиморфным локусам генов ферментов I и II фаз детоксикации CYP1A1 I462V и GSTP1 I105V для выявления максимального генетического риска ИЭ. У носителей сочетания генотипов CYP1A1 I462I и GSTP1 I105V среди пациентов с внутривенной наркоманией, врожденными и приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, иммунодефицитными состояниями выявлен 22,6-кратный риск развития ИЭ. Склонность к ИЭ, основным этиологическим фактором которого являются патогенные бактерии, преимущественно Staphylococcus и Streptococcus, у пациентов группы риска, по-видимому, связана с ослаблением врожденного и адаптивного иммунитета вследствие накопления в организме токсических реактантов в связи с генетически зависимой высокой активностью фермента Р-450 CYP1A1 и сниженной - фермента GSTP1.

Способ осуществляется следующим образом.

Геномную ДНК выделяют из клеток периферической крови с помощью коммерческих реагентов «ДНК-экспресс-кровь-плюс» или «ДНК-экспресс-кровь» (НПФ «Литех», Москва). Для генотипирования используют коммерческие комплекты реагентов для выявления мутаций (полиморфизмов) в геноме человека - «SNP-экспресс» (НПФ Литех, Москва). Генотипирование проводят по локусам I462V (нуклеотидная замена 2455A/G, аминокислотная замена Ile462Val) гена цитохрома Р-450 1А1 CYP1A1 [мутация -4 цитохрома Р450] и I105V (нуклеотидная замена 313A/G, аминокислотная замена Ile 105 Val) гена GSTP1 (мутация 1 Пи-глутатион-S-трансферазы) [НПФ Литех, Москва] с помощью метода аллель-специфической полимеразной реакции. Согласно инструкции к комплектам, с образцом выделенной ДНК осуществляют одновременно две реакции амплификации - с двумя парами аллель-специфичных праймеров, на параллельное выявление аллелей мутантного и нормального типа. Реакционная смесь для ПЦР состоит из 5 мкл исследуемого образца ДНК и 20 мкл рабочей амплификационной смеси, содержащей 0,2 мкл рабочего раствора Taq-полимеразы. Амплификацию проводят в автоматическом термоциклере Терцик («ДНК-Технология», Москва). Программа амплификации, соответственно инструкции, включает следующий температурный режим - 1 цикл при 93 С в течение 1 мин, 35 циклов с этапами денатурации ДНК в течение 10 сек при 93°С, отжига праймеров в течение 10 сек при 64°С и синтеза цепей в течение 20 сек при 72°С, и 1 цикл при 72°С в течение 1 мин. Анализ ПЦР-продуктов проводят после их электрофоретического разделения в 50 мл 3%-агарозного геля на 50×ТАЕ-буфере, в который до застывания вносят 5 мкл 1% раствора бромистого этидия. В каждом геле вырезают два ряда лунок - для детекции аллеля нормального типа и мутантного аллеля. Фрагменты анализируемой ДНК проявляются в виде светящихся полос. Гели анализируют в УФ-трансиллюминаторе ЕСХ-15М (Vilber Lourmat, Франция) с помощью гельдокументирующей видеосистемы GL-2 (Россия) и/или фотографируют при помощи цифрового фотоаппарата Canon PowerShot А590 IS в проходящем ультрафиолетовом свете с длиной волны 310 нм.

Изобретение иллюстрируется Фиг. 1 и Фиг. 2.

На Фиг. 1 представлены результаты проведения генотипирования 12 человек по полиморфизму I462V гена CYP1A1 в виде электрофореграммы, на которой показаны продукты амплификации исследуемого локуса в виде светящихся полос. К- - отрицательный контроль; дорожки 2-8, 10-12 - гомозиготный нормальный генотип I462I, дорожка 1 - гомозиготный мутантный генотип V462V, дорожка 9 - гетерозиготный генотип I462V.

На Фиг. 2 представлены результаты проведения генотипирования 8 пациентов с инфекционным эндокардитом по полиморфизму I105V гена GSTP1 в виде электрофореграммы, на которой показаны продукты амплификации исследуемого локуса в виде светящихся полос. К- - отрицательный контроль; дорожки 1-4, 6-8 - гетерозиготный генотип I105V, дорожка 5 - гомозиготный генотип I105I.

Всего обследовано 32 пациента (14 женщин и 18 мужчин) в возрасте от 23 до 75 лет, находившихся на стационарном лечении в терапевтических клиниках г. Новокузнецка с диагнозом «инфекционный эндокардит». Большинство пациентов страдали внутривенной наркоманией - 13 человек, у 5 человек обнаружен ревматический порок митрального и аортальных клапанов (МК, АК), проведено протезирование, у 2 - пролапс МК 2-3 степени, у 4 человек - атеросклеротические изменения МК и АК, у 2 - тяжелая вирусная инфекция без отягощенного ранее анамнеза, у 5 человек - хроническая болезнь почек с необходимостью проведения гемодиализа и выраженным иммунодефицитным состоянием, 1-му проведено аортокоронарное шунтирование.

Группу контроля составили 109 практически здоровых лиц. Забор крови и молекулярно-генетические исследования осуществляли на основании информированного согласия обследованных лиц. Математическую обработку результатов исследований проводили с помощью пакетов статистических программ InStatII, Microsoft Excel. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимался равным 0,05. Достоверность различий в распределении частот аллелей и генотипов между группами больных и здоровых индивидов оценивали двусторонним точным критерием Фишера. Частота аллеля/генотипа определялась по соотношению количества его носителей к общему количеству носителей тестируемых аллелей/генотипов в исследуемой выборке. Относительный риск заболевания по конкретному признаку вычисляли как соотношение шансов (OR-odds ratio): OR=(a×d)/(b×с), где a и b - количество больных, имеющих и не имеющих мутантный аллель (генотип) соответственно; с и d - количество человек в группе контроля, имеющих и не имеющих мутантный аллель (генотип) соответственно.

Результаты генотипирования по полиморфным локусам I462V гена CYP1A1 и I105V гена GSTP1 пациентов с ИЭ и практически здоровых лиц представлены в таблице 1. Они свидетельствуют, что 94% больных ИЭ являлись носителями гомозиготного варианта I462I полиморфизма CYP1A1 I462V, 2% больных ИЭ - носители гетерозиготного варианта CYP1A1 I462V, гомозигот по мутантному аллелю CYP1A1 462V среди больных лиц не обнаружено. Гомозиготных носителей CYP1A1 I105I в контроле было на 18% меньше. Риск заболевания среди носителей данного генотипа в группе риска оказался высоким. При сравнении частот аллелей этого полиморфизма выявлен сходный риск заболевания у носителей аллеля CYP1A1 462I.

Среди больных лиц наибольшее количество человек оказались носителями гетерозиготного генотипа GSTP1 I105V, и эти лица продемонстрировали высокую предрасположенность к ИЭ с 15-кратным риском его развития в сравнении с контролем. Анализ носительства сочетания исследуемых генотипов позволил обнаружить максимальную генетическую предрасположенность к заболеванию у носителей гомозиготного варианта CYP1A1 I462I и гетерозиготного варианта GSTP1 I105V c 22,6-кратным риском развития ИЭ. Анализ корреляционной связи исследуемых генотипов с ИЭ подтвердил положительную ассоциацию генотипа I462I и аллеля 462I гена CYP1A1 и генотипа I105 V гена GSTP1 с ИЭ. Наиболее сильная связь с ИЭ обнаружена у носителей сочетания генотипов CYP1A1 I462I и GSTP1 I105V.

Таким образом, нами выявлена ассоциация ИЭ с вариантами генов системы детоксикации ксенобиотиков, кодирующими антиоксидантный фермент I фазы детоксикации, цитохром Р-450 1А1, и антиоксидантный фермент II фазы детоксикации, глутатион-S-трансферазу P1. Был определен высокий риск развития ИЭ у носителей гомозиготного варианта I462I гена CYP1A1, у которых присутствие нормального аллеля CYP1A1 462I в обеих хромосомах обусловливает максимальную каталитическую активность фермента, а также у носителей гетерозиготного варианта I105V гена GSTP1, у которых присутствие молекул мутантной формы глутатион-S-трансферазы Р1 приводит к снижению каталитической способности фермента в отношении ряда субстратов. Сочетание данных вариантов в геноме приводит к 22,6-кратному усилению риска заболеть ИЭ в сравнении с контролем.

Таким образом, предложенный способ генотипирования по полиморфным локусам I462V гена CYP1Al и I105V гена GSTP1 позволяет обнаружить очень высокий риск развития инфекционного эндокардита у носителей гомозиготного генотипа I462I гена CYP1A1 при сочетании его с носительством гетерозиготного варианта I105V гена GSTP1 среди лиц с внутривенной наркоманией, врожденными и приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, иммунодефицитными состояниями.

Клинический пример №1. Пациент Р., 36 лет, поступил 12.12.2014 г. в отделение терапии с жалобами на слабость, потливость, одышку при обычной физической нагрузке, боль в грудной клетке, усиливающуюся при глубоком вдохе, кашле, трудноотделяемую гнойную мокроту, повышение температуры тела до 39-40°С, ознобы, боли в мышцах, в суставах. Болен в течение 2 недель, лечился самостоятельно безрезультатно жаропонижающими препаратами, цефтриаксоном. Доставлен бригадой скорой помощи. В анамнезе: гепатит, туберкулез, ВИЧ - отрицает. Прием наркотиков в/в в течение 15 лет (ханка, соли, героин). Курит в течение 15 лет по 1 пачке в сутки. Простудные заболевания 3-4 раза в год. Постоянной работы нет. При осмотре состояние средней степени тяжести, температура тела 38°С, кожа сухая, бледная, отеков нет, пониженного питания. В легких дыхание везикулярное, рассеянные сухие хрипы над всей легочной поверхностью, ЧД 22 в мин. Тоны сердца глухие ритмичные, ЧСС 110 в мин, систолический шум во всех точках, АД 120/80 мм рт. ст. Живот мягкий, безболезненный. Печень +1,5 см из под края реберной дуги. Стул, диурез в норме. При обследовании: AT к ВИЧ, ВГВ, трепонеме - не выявлены. Обнаружены AT к ВГС. Общий анализ крови - Нв 112 г/л, эр. 3,5, лейк. 8,4, п/я 20, лимф.- 13, СОЭ 50 мм/ч. Общий анализ мочи - уд. вес 1012, белок 0,3 г/л, лейк. в большом количестве, эр. -1-2 в п/зр, цилиндры гиалиновые 1-2 в п/зр. Анализ мочи по Нечипоренко: лейк. - 201500, эр. 2500, цилиндры 3000. Б/х ан. крови: сахар 5,7, креатинин 155 (№40-140) мкмоль/л, мочевина 8,0, АЛТ 132, ACT- 66 (повышены), фибриноген 5,25, белок 78,1, билирубин 11,7. Кровь на гемокультуру №3 - отрицательно. УЗИ - спленомегалия, печень +1,5 см из подкрая реберной дуги, размеры в норме. Диффузные изменения в паренхиме почек. ЭХО КГ - умеренно расширены правые полости, на ТК гипоэхогенный очаг вегетаций 13×5 мм, регургитация 2-3 ст, незначительный перикардиальный выпот, признаков легочной гипертензии не выявлено, ФВ 67%. ЭКГ - синусовая тахикардия 117 в мин. Рентгенография органов грудной клетки - двусторонняя септическая пневмония с распадом. Результаты генотипирования по полиморфным локусам I462V гена CYP1A1 и I105V гена GSTP1: выявлено сочетание генотипов CYP1A1 I462I и GSTP1 I105V, указывающее на 22,6-кратный риск заболевания ИЭ.

Дз: Острый инфекционный эндокардит с поражением трехстворчатого клапана, первичный. Недостаточность ТК. ХСН 1-2а ст. Двусторонняя септическая пневмония, с распадом, тяжелое, затяжное течение. Наркомания. Хр. вирусный гепатит С.

Проведено лечение: цефуроксим, ванкомицин, фраксипарин, гентамицин. Выписан с улучшением на дальнейшее амбулаторное лечение.

Клинический пример №2. Больная М., 26 лет. Госпитализирована в отделение пульмонологии с жалобами на сухой кашель, одышку при незначительной физической нагрузке, озноб, повышение температуры тела до 39°С, потливость по ночам, кашель с небольшим количеством гнойной мокроты. Больна в течение 2-3 недель, накануне перенесла ОРВИ, не обращалась за медицинской помощью, лечение симптоматическое, повышение температуры тела - в дебют заболевания в течение 3-4 дней. На фоне лечения - улучшение состояния, катаральные явления купированы, температура вернулась к норме. Сохранялась выраженная слабость, одышка при умеренной физической нагрузке. В течение последних 2 недель появились ознобы, вновь отмечалось повышение температуры до 39°С без эффекта от жаропонижающих препаратов, нарастала слабость, появился кашель, потливость по ночам. В анамнезе нередкие простудные заболевания до 4-6 раз в год, частое использование антибактериальных препаратов без назначения врача. В 2009 г. выявлен порок сердца, документов с результатами обследования нет, не наблюдалась. Прием наркотиков отрицает. Работа связана с переохлаждением (работала на хладокомбинате фасовщицей). Питание однообразное, мясо, фрукты - редко. Объективно: состояние средней степени тяжести за счет интоксикационного синдрома, температура тела - 38,5°С. Носовое дыхание не затруднено. Кожа бледная, влажная, чистая, отеков нет. В легких дыхание жесткое, ослаблено в подлопаточной области справа, хрипов нет, ЧД 18 в минуту, тоны сердца глухие, ритмичные ЧСС 110 в минуту, аускультативно - грубый систолический шум во всех точках. При обследовании: общий анализ крови -Нв. 91 г/л, эр. 3,4, л. 15,0, п/я. 14, лимф. 10,5, юные -1, тромбоциты - 415, СОЭ 52 мм/ч. Общий анализ мочи - уд. вес 1005, белок 2,5 гр/л, эр. 40-50 в п/зр., л. - 2-6 в п/зр. Б/х ан. крови: АЛТ 2,26, ACT- 3,0, мочевина 10,2, креатинин 106, белок 59,6, сахар 5,0, прокальцитонин 6,1, СРБ 460,3 мг/л. Д-димер 2350, AT к ВГВ, ВГС, ВИЧ не выявлены. ЭКГ - синусовая тахикардия, нарушение процессов реполяризации в задней стенке левого желудочка. Рентгенография органов грудной клетки - полисигментарная пневмония справа с распадом. ЭХО-КГ - признаки ревматического поражения митрального клапана, стеноз створок МК. Smo 1,62 см2, регургитация 1-2 ст. Аортальный клапан - стеноз не выявлен, кальциноз и фиброз створок, регургитация 2 степени. Уплотнены створки трикуспидального клапана и клапана легочной артерии, регургитация ТК-2 ст. В правом предсердии по в/стенке дополнительное округлое образование, подвижное, средней эхогенности 2,7×1,75 см. Дилятация полостей обоих предсердий, больше левого, ФВ 47,8%, пародоксальное движение МЖП. По УЗИ - гепатоспленомегалия. Диффузное изменение паренхимы почек. В динамике - появилась свободная жидкость в брюшной полости. По результатам посева крови на стерильность выявлены Staphylococcus aureus. В последующих посевах появилась Pseudo-monas stutseri. Учитывая тяжесть состояния, проводимую инфузионную, антибактериальную терапию, больной был поставлен подключичный катетер. Состояние ухудшилось: присоединился тромбоз подколенной артерии справа, рецидивировали ТЭЛА, нарастала сердечная, дыхательная недостаточность. Проведена ампутация правой нижней конечности до средней трети бедра. Результаты генотипирования по полиморфным локусам I462V гена CYP1A1 и I105V гена GSTP1: выявлено сочетание генотипов CYP1A1 I462I и GSTP1 I105V, указывающее на 22,6-кратный риск заболевания ИЭ.

Дз: Вторичный инфекционный эндокардит. Хр. ревматическая болезнь сердца: комбинированный митральный порок с преобладанием стеноза. Недостаточность АК, ТК, ХСН 2Б. ФК III. Состояние после ампутации правой нижней конечности до ср./ трети бедра по поводу острого артериального тромбоза. Полисегментарная пневмония справа с распадом. Рецидивирующие ТЭЛА.

1. Способ прогнозирования риска развития инфекционного эндокардита, включающий забор венозной крови, выделение ДНК, проведение полимеразной цепной реакции, определение полиморфизма гена, отличающийся тем, что проводят генотипирование по полиморфному локусу I462V гена цитохрома Р450 1А1 CYP1A1 и по полиморфному локусу I105V гена глутатион-S-трансферазы Пи1 GSTP1 пациентов группы риска и при выявлении сочетания генотипов CYP1A1 I462I и GSTP1 I105V у их носителей прогнозируют 22,6-кратный риск развития инфекционного эндокардита.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в группу риска входят лица с внутривенной наркоманией, врожденными и приобретенными пороками сердца, протезированными клапанами и другими операциями на сердце, коронарных артериях, иммунодефицитными состояниями.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования осложненного течения ОРИ у детей. Для этого у детей путем в браш-биоптате слизистой носо-ротоглотки определяют местный неспецифический секреторный иммуноглобулин А, колонизационную активность: индекса инфицирования, индекса адгезии, степени деструкции эпителиоцитов и уровень внеклеточного фосфатидилхолина.
Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики острого риносинусита. Способ дифференциальной диагностики острого риносинусита включает исследование сыворотки крови больного до начала лечения и определение уровней цитокинов интерлейкина - 6 (IL-6) и γ-интерферона (γINF) пг/мл, после чего вычисляют коэффициент диагностики K по формуле: K=IL-6/γINF, и при значении K≤1,4 диагностируют вирусный риносинусит, при выполнении условия 1,4<K<2,5 диагностируют поствирусный риносинусит, при значении K≥2,5 диагностируют бактериальный риносинусит.

Изобретение относится к акушерству и касается прогнозирования угрозы невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации. Способ состоит в том, что в лейкоцитах периферической крови беременной на 5-11 неделе гестации с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени определяют уровни экспрессии генов Toll-подобных рецепторов TLR4 и TLR9, гена противомикробного пептида HBD1.
Изобретение относится к области диагностики, а именно к способу определения пола плода в ранние сроки его внутриутробного развития. Способ определения пола плода заключается в определении уровня антимюллерова гормона (АМГ) в сыворотке крови, в сроки 7, а также 9-10 недель беременности, и при увеличении АМГ в 2,6 и более раз за этот период диагностируют наличие плода мужского пола, при увеличении его не выше чем в 1,5 раза - наличие плода женского пола.

Изобретение относится к биотехнологии и вирусологии и может быть использовано специалистами, работающими в области производства медицинских и ветеринарных биопрепаратов.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к оптическим биосенсорам, предназначенным для определения белковых молекул в малых концентрациях. Заявленный флуоресцентный оптический ДНК-биосенсор состоит из подложки, адсорбированной на подложке тонкой пленки комплекса ДНК-белок, причем подложка выполнена из монокристаллического кремния с ориентацией поверхности (100), размером 18×18 мм и толщиной 380±20 мкм, шероховатость рабочей поверхности ≤0,06, а содержание белка в тонкой пленке составляет от 10-15 до 10-9 моль/л.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике. Сущность способа: осуществляют забор крови в пробирку, содержащую антикоагулянт, перемешивают и оставляют на 20 мин для свободного осаждения эритроцитов при комнатной температуре, после седиментации эритроцитов берут 0,5 мл лейкоцитарной взвеси и определяют в ней количество лейкоцитов любым способом (рутинным или автоматизированным), доводят ее концентрацию до величины 5*109 лейкоцитов/л дистиллированной водой, биологическую жидкость помещают в морозильную камеру при температуре -20°С до полного замораживания и используют ее после процесса размораживания для иммуноферментного определения спонтанной продукции цитокинов.

Изобретение относится к медицине и касается способа получения бифункционального аффинного сорбента для хроматографической очистки иммуноглобулинов флуоресцирующих путем иммобилизации неосмектина с гетерологичными антигенами, дающими перекрестные реакции с иммуноглобулинами, где к сорбенту вносят водорастворимый антиген, проводят экспозицию, отмывают от несвязавшегося антигена, доводят рН и проводят одномоментную очистку иммуноглобулинов флуоресцирующих от несвязавшегося ФИТЦ и гетерологичных антител с контролем иммунологических показателей готовых препаратов в РИФ.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для выявления антиотцовских антител после иммунизации женщин с идиопатическим привычным выкидышем лимфоцитами полового партнера.
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, может быть использовано при ведении пациентов после трансплантации сердца для диагностики отторжения трансплантированного сердца.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки готовности женщин с хроническим эндометритом к экстракорпоральному оплодотворению, включающий обследование женщин в период окна имплантации в цикле, предшествующем проведению программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), отличающийся тем, что у женщин с хроническим эндометритом на 19-21 день менструального цикла получают смыв из полости матки, в котором методом твердофазного иммуноферментного анализа определяют содержание альфа-2-макроглобулина (а2-МГ) и при содержании а2-МГ равном или более 4,5 мг/л оценивают готовность женщин к ЭКО как низкую, рекомендуют дополнительное лечение и перенос сроков ЭКО, а при содержании а2-МГ менее 4,5 мг/л оценивают готовность женщин к ЭКО как высокую и рекомендуют инициацию программы ЭКО. Осуществление изобретения обеспечивает неинвазивный способ оценки готовности к ЭКО, позволяющий повысить эффективность ЭКО за счет выбора оптимального периода начала программы. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии и детской кардиологии, и касается предгравидарного прогнозирования риска формирования септальных форм врожденных пороков сердца у плода. Способ включает молекулярно-генетическое тестирование семейной пары, планирующей беременность на догестационном этапе, с выявлением женского аллеля HLA-DRB1*03, HLA-DRB1*12 и мужского генотипа HLA-DRB1*01,04. Вероятный прогноз развития врожденного порока рассчитывают по формуле ,где Y - вероятность риска формирования септальных форм врожденного порока сердца в последующих поколениях (%); X1 - женский аллель HLA-DRB1*03, при этом X1 принимает значение равное 0 при отсутствии аллеля в генотипе, X1=1 при наличии аллеля HLA-DRB1*03 в гетерозиготе и X1=2 при наличии аллеля HLA-DRB1*03 в гомозиготе; X2 - мужской генотип HLA-DRB1*01,04, X2=0 при отсутствии данного генотипа, X2=1 при наличии генотипа HLA-DRB1*01,04; X3 - женский аллель HLA-DRB1*12, соответственно X3=0 при отсутствии аллеля в генотипе, X3=1 при наличии аллеля HLA-DRB1*12 в гетерозиготе и X3=2 при наличии аллеля HLA-DRB1*12 в гомозиготе. Изобретение обеспечивает повышение эффективности и достоверности прогнозирования развития септальных форм врожденных пороков сердца у плода в последующей беременности. 3 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и касается способа диагностики тяжести течения хронического гастрита у детей. Сущность способа заключается в изучении клинических, морфологических и иммуногистохимических показателей слизистой оболочки желудка на наличие антигенов простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барр. Поводят оценку числа микрососудов слизистой оболочки желудка и их эндотелий, неравномерность толщины стенки микрососудов, наличие разрастания соединительной ткани в их стенке, изменения ядер, ядерно-цитоплазматического индекса и наличие периваскулярного отека. При обнаружении вирусной моноинфекции с изменениями эндотелия до 40% микрососудов в виде неравномерного увеличения толщины их стенок, а также гиперхроматоза ядер эндотелиоцитов диагностируют легкое течение. При обнаружении не менее двух вирусных инфекций с увеличением числа микрососудов от 30% до 50% и изменением эндотелия в 45%-60% микрососудов диагностируют течение средней тяжести. При наличии вирусно-бактериальной инфекции с увеличением числа микрососудов более чем на 50% и тотальными изменениями эндотелия более 60% микрососудов диагностируют тяжелое течение хронического гастрита. Использование способа позволяет с высокой точностью оценить тяжесть течения хронического гастрита у детей. 3 пр.

Группа изобретений относится к области молекулярной диагностики и может быть использована для диагностики заболеваний с помощью молекул биомаркеров. Устройство для обнаружения специфической молекулы-мишени или биомаркера путем определения изменения электрических свойств включает: измерительный датчик, включающий проводящую или полупроводящую структуру; систему электродов, передающих сигнал от устройства; и контрольный датчик, имеющий структуру, идентичную измерительному датчику, но защищенную, т.е. предотвращающую образование связи с биомаркером и действующую как встроенный эталон. Структура измерительного датчика включает аптамерное покрытие и способна образовывать связь с биомаркером, вызывая изменение электрических свойств. Группа изобретений относится также к способу анализа пробы на наличие молекулы-мишени или биомаркера посредством указанного устройства. Группа изобретений обеспечивает повышение достоверности анализов. 2 н. и 28 з.п. ф-лы, 17 ил., 3 пр.

Изобретение относится к медицине и касается системы для получения аутологичной сыворотки с повышенным содержанием IL-1RA и со сниженным содержанием провоспалительного цитокина, включающей шприц, внутренние стенки которого покрыты твердофазным полимерным сорбентом с фиксированным на нем моноклональными антителами к IL-1β, содержащий стеклянные шарики диаметром от 2,5 до 3,5 мм, занимающие до 40% от общего объема шприца, и по меньшей мере один шприц, внутренние стенки которого покрыты твердофазным полимерным сорбентом с фиксированными на нем человеческими IL-1β, и стерильный переходник, выполненный с возможностью перемещения аутологичной сыворотки из шприца с антителами в шприц с человеческим IL-1β. Изобретение обеспечивает значительное снижение концентрации провоспалительного цитокина ИЛ-1β и повышение эффективности лечебного действия аутологичной концентрированной сыворотки. 3 з.п. ф-лы, 3 пр., 7 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству-гинекологии и лабораторным методам исследования, может быть использовано для диагностики гипоксического поражения центральной нервной системы у детей, рожденных от матерей с табакокурением. Предлагаемое изобретение направлено на повышение точности способа диагностики гипоксического поражения центральной нервной системы у детей, рожденных от матерей с табакокурением. Способ диагностики заключается в том, что методом иммуноферментного анализа в сыворотке пуповинной крови новорожденных определяют количественное содержание гипоксией индуцированного фактора - 2α и при его концентрации 0,04 нг/мл и выше диагностируют гипоксическое поражение центральной нервной системы. 1 табл., 2 пр.

Группа изобретений относится к области биохимии и медицины и касается иммунологических способов детекции интактного фибриногена, включающих стадии: a) получения образца, содержащего по меньшей мере некоторое количество фибриногена, необязательно превращенного по меньшей мере частично в фибрин, и необязательно содержащего тромбин; b) растворения образца в растворе растворителя, который ингибирует активность тромбина; c) переноса/нанесения части указанного образца на мембрану, связывающую белок, после необязательного ДСН-ПААГ-электрофореза; d) взаимодействия фибриногена с первичным моноклональным антителом, способным связываться с фрагментом фибринопептида A или фрагментом фибринопептида В; и e) детекции количества интактного фибриногена в образце посредством определения количества связанного первичного моноклонального антитела. Группа изобретений включает также способы оценки эффективности или стабильности гемостатического устройства, включающие использование заявленных способов детекции интактного фибриногена. Группа изобретений обеспечивает использование заявленных способов в качестве диагностических или прогностических критериев с высокой точностью. 5 н. и 22 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования риска метастазирования местно-распространенного рака толстой кишки. Проводят иммунофенотипирование лимфоцитов крови, взятой из локтевой вены до оперативного вмешательства, а также лимфоцитов ткани опухоли и перитуморальной области, с целью выявления субпопуляций лимфоцитов, таких как αβкр - Т-лимфоциты с рецептором αβ в крови (X1), CD4+Пери - Т-хелперно-индукторные лимфоциты в перитуморальной зоне (Х2), CD8+Пери - цитотоксические Т-лимфоциты в перитуморальной зоне (X3),CD19+Пери - В-лимфоциты в перитуморальной зоне (Х4), CD19+Оп - В-лимфоциты в опухолевой зоне (Х5), затем определяют показатель риска метастазирования местно-распространенного рака толстой кишки Рм по формуле и при значении Рм, равном 0,5 и более, прогнозируют появление метастазов местно-распространенного рака толстой кишки в ближайшие 2 года, при значении Рм менее 0,5 прогнозируют отсутствие риска. Способ позволяет своевременно и индивидуально прогнозировать развитие метастазов местно-распространенного рака толстой кишки в ближайшие 2 года. 2 пр., 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии и иммунологии, и может быть использовано для раннего прогнозирования исходов инфекционно-воспалительной патологии у глубоконедоношенных новорожденных. Для этого на 1-2 сутки жизни новорожденных проводят определение относительного содержания GranzymeB+ клеток в нейтрофильном гейте. При относительном содержании GranzymeB+ нейтрофилов, равном или менее 39%, прогнозируют благоприятный исход инфекционно-воспалительной патологии у глубоконедоношенных новорожденных, а при его содержании более 39% - летальный исход. Использование данного способа позволяет прогнозировать исходы инфекционно-воспалительной патологии, в том числе сочетанной и генерализованной, у глубоконедоношенных новорожденных, своевременно скорректировать и усилить назначенную терапию и тем самым улучшить исход заболевания. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а точнее к онкологии и лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностирования рака молочной железы. Сущность способа: определяют уровень экспрессии генов: MGB1, Ki67, Aurca, BIRC5, CCNB1, MMP11 в ткани молочной железы и при превышении уровня экспрессии значений для вышеперечисленных генов соответственно: 13120,05; 21,1; 52,54; 15,96; 13,89; 18,51 делают заключение о злокачественной природе процесса и рекомендуется провести биопсию ткани для получения морфологического подтверждения и/или проведения специфического лечения. Предлагаемое изобретение позволяет получить заключение о злокачественной природе ткани молочной железы и рекомендовать проведение повторной биопсии и/или специфического лечения. 2 табл., 1 ил.
Наверх