Способ оценки функционального состояния печени

Авторы патента:

Большухин Сергей Юрьевич (RU)

Кудрявцева Юлия Владимировна (RU)

Кудрявцев Владимир (RU)

Косых Александр Александрович (RU)

Цапок Пётр Иванович (RU)

Козвонин Валерий Анатольевич (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2629202:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кировская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО Кировская ГМА Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки функционального состояния печени при патологии. Производят оценку лабораторных данных, характеризующих состояние органа: интенсивность процессов липопероксидации (ДК, МДА), функциональная активность (БИЛ, АлАТ, Рж, ЦП) и состояние гистоструктур органа (МИТ, ГЕП, СТ); определяют фазу патологического процесса. Для этого показатели сравниваются с их табличными значениями, полученными на основе математического анализа зависимостей, отображающих отдельные параметры реального состояния органа. Способ позволяет повысить точность диагностики состояния печени. 11 ил., 7 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно - к лабораторной диагностике патологических состояний печени, в основе которых лежит системный анализ изменений, происходящих при заболеваниях печени, и может быть использовано для оценки фазы патологического процесса. Способ базируется на анализе изменений и динамики отдельных показателей состояния в рамках системно организованных процессов: липопероксидации (ДК, МДАг), функциональной активности (АлАТ, БИЛ, Рж, ЦП) и состояния гисто структур органа (МИТ, ГЕП, СТ), и позволяет на стадии развития заболевания определять фазу патологического процесса. Данные, отображающие изменения и особенности динамики, позволяющие определять фазы для изменений отдельных показателей, сведены в таблицы (табл. 1-5).

Обобщенные данные, где за базовую фазность приняты результаты исследования митотической активности органа, сведены в специальную таблицу значений сравниваемых параметров (табл. 6), подтверждаемых клиническими данными (табл. 7).

В основе предложенного подхода к оценке состояния органа лежит принцип организации живой системы, согласно которому она стремится сохранить свою функциональную целостность, пока не исчерпан запас внутреннего противоречия. С этих позиций можно объяснить как состояние гомеостаза, так и возникновение компенсаторных явлений, роль адаптации [3, 4, 5]. Используя такой подход можно не только объективно определить фазу развития патологического процесса и оценить напряжение регуляторных систем, а также сформировать наиболее эффективный терапевтический комплекс, ускоряющий процесс выздоровления или выхода в состояние ремиссии.

Печень - самая крупная железа организма, она является важнейшим посредником в энергетическом и пластическом обмене организма с внешней средой. Именно в ней и происходит основная часть процессов, направленных на поддержание гомеостаза всего организма.

В силу высокой компенсаторной способности печени патологический процесс часто диагностируется уже на хронической стадии его течения и сопровождается значительными морфологическими изменениями. Поэтому задача лечения зачастую состоит в стимуляции восстановительных процессов, которые нередко заключаются в обратном развитии тех изменений, которые по ходу заболевания сложились как компенсаторные и адаптивные [6, 7].

Патологические изменения могут быть обусловлены различными факторами, как эндогенного, так и экзогенного характера: это гипоксия, нарушение оттока желчи в экстрапеченочных желчевыводящих протоках, эндогенная интоксикация при обширных травмах, воспалительных процессах, бактериальная эндотоксемия, поражение панкреа-тодуоденальной зоны, гепатотоксическое влияние фармпрепаратов, экзогенных токсинов, органических растворителей, алкоголя, гепатотропных вирусов и др. [8]. В структуре заболеваний значительная часть принадлежит гепатитам вирусной этиологии [9].

Однако, как свидетельствуют исследования, независимо от причин вызывающих патологический процесс, реакция организма на повреждение на тканевом и органном уровнях во многом однотипна [1; 2]. Объяснятся это универсальностью механизма повреждения клеток печени и системного ответа на нарушение функций органа [10-13].

Основными базисными параметрами, позволяющими судить о состоянии органа и его потенциальных возможностях, являются: состояние клеток и объемная доля соединительной ткани, число гепатоцитов, пролиферативная активность, обеспечивающая способность органа к регенерации. Для доказательства данного положения необходимо подчеркнуть, что любая реакция в самоорганизующейся живой системе направлена на стабилизацию состояния (гомеостаз) и на обеспечение ее функциональной активности. Причем, эта реакция в зависимости от состояния структурной организации печени и в силу ограниченности энергетических ресурсов, не линейна. Поскольку в основе метаболических процессов в живой системе лежит сохранение жизни, то нелинейность и детерминированность ее реакции, по существу, являются основой, предопределяющей формирование нового стационарного состояния, например, хронического. Стационарность живой системы формируется на базе антагонистических влияний, как повреждающих факторов, так и восстановительных процессов, поэтому в условиях действия патогенного фактора такой анализ позволяет оценить возможность сохранения ее функциональной активности [3,5].

Таким образом, оценка состояния живой системы и наличия у нее мобилизационных резервов позволяют не только обоснованно прогнозировать дальнейшее развитие событий, но и предложить превентивные меры по стабилизации состояния. Предлагаемый подход существенно повышает чувствительность анализа и позволяет выявить не только способность системы реагировать на нарушение стационарности (ее подвижность), но и определять направленность и интенсивность такой реакции. Кроме того, рассмотрение динамики процессов позволяет оценить интенсивность выраженности сдвигов реакции органа при нарушении гомеостаза, определить его состояние и ту грань, после которой начинает формироваться новое стационарное состояние - новый гомеостаз.

Известен способ определения стадии патологического процесса в тестах оценки функциональной активности лимфоцитов в реакции Е-розеткообразования (РОК), отличающийся тем, что используют инкубацию выделенной из крови лимфоцитарной взвеси в течение 90 мин. с лекарственным препаратом иммуномодулирующего действия, содержащим естественные пептиды химического или костно-мозгового происхождения, а затем, после 2-минутного центрифугирования, инкубацию продолжают с эритроцитами барана в течение 18 ч, после чего рассчитывают индекс чувствительности (ИЧ) по формуле:

Причем чем выше значение ИЧ, тем активность считают менее выраженной, а при ИЧ меньше 1,0-2 констатируют активный патологический процесс, при этом, чем меньше значение ИЧ, тем активность процесса считают более выраженной, а при значении ИЧ равном 1,02 констатируют отсутствие чувствительности к лекарственному препарату, где - стандартная ошибка, равная 0,02. [14]. Однако, данный способ определяет активность патологического процесса и реакцию органа на применение лекарственного препарата. Он не позволяет определить фазу патологического процесса, скорость и направленность происходящих в органе изменений.

Известен также способ оценки функционального состояния печени у больных хроническим гепатитом и циррозом печени [15]. Способ заключается в регистрации вязкостных характеристик свертывающейся крови периода реакции r, максимальной амплитуды МА, времени формирования сгустка t, суммарного показателя ретракции и спонтанного лизиса сгустка F, причем исследование проводят дважды до и после "манжеточной пробы", дополнительно определяют интенсивности спонтанной агрегации тромбоцитов Ar, показателя активности тромбина Кк, причем, при увеличении показателя r на 25-30%, снижении Ar на 30-40%, увеличении t на 20-30%, снижении Кк на 35-40%, снижении МА на 15-20%, увеличении F на 40-50% определяют отсутствие печеночно-клеточной недостаточности или компенсированную стадию цирроза печени; при укорочении показателя r на 50-100%, увеличении Ar на 20-40%, повышении Кк на 20-40%, увеличении t на 25-30%, повышении МА на 30-50%, при отсутствии статистически значимого изменения F определяют субкомпенсированную стадию цирроза; при укорочении показателя r на 25-30%, снижении Ar на 20-40%, снижении Кк на 50-100%, увеличении t на 30-50%, снижении МА на 10-20%, при отсутствии увеличения F определяют декомпенсированную стадию цирроза печени.

Способ осуществляют с помощью портативного анализатора реологических свойств крови АРП-01 "Меднорд", предназначенного для исследования реологических характеристик крови и регистрирующего самые незначительные изменения агрегатного состояния крови, которые отражают внутренние процессы, протекающие в крови при ее свертывании и лизисе сгустка. В течение всего исследования строится кривая, отражающая процесс, рассчитываются амплитудные и хронометрические константы r, Ar, t, Kk, МА, F, характеризующие основные этапы гемокоагуляции и фибринолиза [16, 17].

Построение графика изменений агрегатного состояния крови осуществляют в системе координат, где по оси абсцисс отражается время исследования в минутах, а по оси ординат - амплитуда в относительных единицах.

Наиболее близким к предлагаемому является способ оценки функционального состояния печени у больных хроническим гепатитом и циррозом печени, заключающийся в определении вязкостных характеристик свертывающейся крови периода реакции r, суммарного показателя ретракции и спонтанного лизиса сгустка F, отличающийся тем, что дополнительно определяют показатель активности тромбина Кк и при увеличении периода реакции r на 25-30%, снижении Кк на 35-40%, увеличении F на 40-50% определяют компенсированную стадию цирроза, при снижении r на 50-100%, увеличении Кк на 20-40% и увеличении F определяют субкомпенсированную стадию цирроза, при уменьшении r на 25-30%, снижении Кк на 50-100% и отсутствии увеличения F определяют декомпенсированную стадию цирроза печени [18].

Однако, при определении компенсированной, субкомпенсированной и декомпенсированной стадии патологического процесса, способ не позволяет определить фазу и направленность патологического процесса.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является определение фазы и направления патологического процесса при заболеваниях печени.

Поставленный технический результат достигается тем, что оценка функционального состояния печени базируется на системном анализе показателей интенсивности процессов липопероксидации, функциональной активности и гистоструктуры органа, при этом состояние печени оценивается на основании математического анализа непрерывной функциональной зависимости, полученной путем аппроксимации эмпирических данных сплайном, изменений изучаемых показателей от интенсивности патогенного фактора, сведенных в таблицу:

где:

МИТ - митотический индекс;

МДАг - малоновый диальдегид гомогената печени;

АлАТ - аланинаминотрансфераза;

БИЛ - билирубин;

Рж - относительная плотность жировых включений (в ткани печени);

ГЕП - число гепатоцитов в поле зрения;

ЦП - церулоплазмин;

СТ - объемная плотность соединительной ткани;

С - фаза, соответствующая физиологической норме;

А - фаза хронического состояния, соответствующая началу хронического процесса;

АА - фаза хронического состояния, соответствующая активному хроническому процессу;

ААХ - фаза хронического состояния, соответствующая терминальной стадии процесса (необратимых изменений).

Оценка функционального состояния печени производится на базе анализа зависимостей от интенсивности патогенного фактора системно связанных показателей: интенсивности процессов липопероксидации, функциональной активности и состояния гистоструктур органа: состояние печени может быть оценено на основании данных отдельных показателей (табл. 1-5; фиг. 2-11) или обобщенных данных, сведенных в специальную таблицу 6.

где:

МИТ - митотический индекс;

МДАг - малоновый диальдегид гомогената печени;

АлАТ - аланинаминотрансфераза;

БИЛ - билирубин;

Рж - относительная плотность жировых включений (в ткани печени);

ГЕП - число гепатоцитов в поле зрения;

ЦП - церулоплазмин;

СТ - объемная плотность соединительной ткани;

С - фаза, соответствующая физиологической норме;

А - фаза хронического состояния, соответствующая началу хронического процесса;

АА - фаза хронического состояния, соответствующая активному хроническому процессу;

ААХ - фаза хронического состояния, соответствующая терминальной стадии процесса (необратимых изменений);

И - число инъекций тетрахлорметана;

при этом стадию патологического процесса определяют по величине количественных изменений, указанных в таблице показателей;

Фаза - стационарное состояние (гомеостаз) печени, отличающееся соотношением гистоструктур, биохимическими показателями и ее функциональными возможностями (активностью).

Предлагаемый способ поясняется чертежами, где на фиг. 1 показаны изменения митотической активности (МА) гепатоцитов в зависимости от числа инъекций CCl₄; на фиг. 2 - зависимость числа митозов (МИТ) от степени интоксикации CCl₄ (аппроксимация сплайнами); на фиг. 3 - влияние тетрахлорметана на динамику митотической (МИТ) активности: d(MHT)/d(CCl₄) и d²(МИТ)/d(CCl₄)²); на фиг. 4 - зависимость числа гепатоцитов (ГЕП) от степени интоксикации CCl₄ (аппроксимация сплайнами); на фиг. 5 - влияние тетрахлорметана на динамику числа гепатоцитов (ГЕП): d(ГЕП)/d(CCl₄) и d²(ГЕП)/d(CCl₄)²; на фиг. 6 - зависимость содержания малонового диальдегида в гомогеннате печени (МДАг) от степени интоксикации CCl₄ (аппроксимация сплайнами); на фиг. 7 - влияние тетрахлорметана на динамику содержания малонового диальдегида в гомогеннате печени (МДАг): d(МДАг)/d(CCl₄) и d²(МДАг)/d(CCl₄)² на фиг. 8 - зависимость содержания билирубина в плазме крови (БИЛ) от степени интоксикации CCl₄ (аппроксимация сплайнами); на фиг. 9 - влияние тетрахлорметана на динамику содержания билирубина (БИЛ) в плазме крови: d(БИЛ)/d(CCl₄) и d²(БИЛ)/d(CCl₄)² на фиг. 10 - зависимость плотности соединительной ткани (СТ) от степени интоксикации CCl₄ (интерполяция сплайнами); на фиг. 11 - влияние тетрахлорметана на динамику плотности соединительной ткани (СТ): d(CT)/d(CCl₄) и d²(СТ)/d(CCl₄)², а также таблицами 1-5.

Указанные выше рисунки, для лучшего восприятия, выполнены как в цветном, так и в черно-белом виде при сохранении одной и той же нумерации фигур.

Наши исследования выполнены на крысах-самцах линии Wistar. Патология печени моделировалась введением тетрахлорметана (CCl₄) в дозе 0,3 мл 66%-ного масляного раствора на 100 г массы тела животного 4 раза в неделю через день. Одной группе животных проводили 4 инъекции CCl₄, другой - 8 инъекций, третьей - 20 инъекций и четвертой - 64 инъекции. Таким образом, моделировали острый гепатит (4 и 8 инъекций), хронический гепатит (20 инъекций) и цирроз печени (64 инъекции). Животных выводили из эксперимента через 10 суток. Морфометрическими методами на гистологических препаратах печени, окрашенных гематоксилином и эозином, определяли количество непаренхиматозных клеток (НПК) и их объемную плотность (Р_нпк). При окраске препаратов по Фельгену определяли митотическую активность гепатоцитов (МА), при окраске по Ван-Гизону определяли объемную плотность соединительнотканных волокнистых структур (Р_ст). Измерения проводили с помощью адаптивной окулярной сетки с равномерным шагом. Подсчет структур проводили с учетом правила разрешенных фигур. Доверительный интервал колебаний средней арифметической величины при Р+0,05 определяли по формуле и таблицам Стрелкова Р.Б., 1998). В сыворотке крови исследовали содержание МДА и билирубина.

При остром гепатите (4 и 8 инъекций CCl₄) значительно увеличивается митотическая активность гепатоцитов, особенно у животных, получивших 8 инъекций CCl₄ (фиг. 1).

Сразу после окончания введения тетрахлорметана МА возрастала до 9,5±1,9 (в норме 0,27±0,12), но через 10 суток она снижалась до 1,43±0,20. На стадии хронического гепатита (20 инъекций CCl₄) подъем МА наблюдался на 10 сутки после окончания введения CCl₄, на стадии цирроза печени (64 инъекции CCl₄) МА гепатоцитов резко увеличилась на 1 сутки.

Предварительная оценка имеющихся экспериментальных данных свидетельствует о невозможности выразить их в виде простых элементарных функций, что свидетельствует о сложности и многообразии реализующих определенное состояние органа процессов. При проведении анализа отдельных показателей, исходят также из того, что каждый из них отражает часть единого процесса, поэтому в той или иной степени они могут коррелировать между собой. Для построения непрерывных функций на основании имеющихся экспериментальных данных использованы возможности системы Mathcad. Один из подходов, для решения этой проблемы - аппроксимация экспериментальных данных сплайнами (фиг. 2, 4, 6, 8, 10), с помощью которого были проанализированы данные по митотической активности гепатоцитов (фиг. 2), по количеству гепатоцитов в поле зрения микропрепарата (фиг. 4), объемной плотности соединительной ткани (фиг. 10), МДА (фиг. 6), билирубина (фиг. 8) и зависимость полученных значений от степени интоксикации CCl₄.

Полученные графики, отображающие зависимости исследуемых параметров, подтверждают сложность процессов, вызванных действием на систему различных доз CCl₄. Для оценки динамики зависимостей использовался аппарат математического анализа - производные первого и второго порядков (фиг. 3, 5, 7, 9, 11).

Производные первого порядка (df/d(CCl₄)) позволяют исследовать динамику процесса - чувствительность исследуемого параметра «f» к введению CCl₄. Точки, где выражение (df/d(CCl₄)) максимально, представляют области доз, вызывающих наиболее выраженные изменения исследуемого параметра, точки в которых первая производная мала или обращается в нуль - (в математике такие точки называются точками экстремумов) представляют область доз, в которой реакция системы на вводимые дозы CCl₄ минимальна или полностью отсутствует. При этом важным является факт поведения графика зависимости в окрестности точки экстремума: либо это точка перехода от возрастания к убыванию (экстремум - max), либо наоборот (экстремум - min).

Производные второго порядка (d²f/d(CCl₄)²) являются аналитическим инструментом, позволяющим проследить соотношение действующих в системе сил, обеспечивающих стационарное состояние. Точки, в которых вторая производная равна нулю, характеризуются как точки перегиба графика зависимости. В нашем случае это точки, позволяющие оценить момент наступления явления декомпенсации для сложившейся структурной организации системы, которая отражающаяся в нелинейности ответной реакции и характеризует начало выхода системы из сложившегося стационарного состояния. Причем это может быть характерно как для физиологического, так и для хронического состояния. Таким образом, использование второй производной позволяет не только установить начало появления недостаточности компенсаторной реакции сложившегося стационарного состояния, но и, на основании исследования состояния, оценить наличие ресурса для возникновения стационарного состояния. Наиболее показательными для такого анализа являются результаты исследований, характеризующие состояние тканевых структур: количество гепатоцитов, их митотическую активность и объемную долю соединительной ткани. Из представленных на фиг. 1, 2 и 4 данных следует, что введение тетрахлорметана вызывало сложную реакцию живой системы, сопровождавшуюся изменением числа гепатоцитов и митотической активности. При этом, используя математические представления (равенство нулю второй производной) можно выделить несколько зон, отражающих реальное состояние системы (табл. 1 и 2; фиг. 2-5). Как следует из представленных данных (число гепатоцитов - ГЕП, митотическая активность - МИТ), с ростом степени интоксикации первая недостаточность компенсаторной реакции возникает при нарушении физиологического состояния (зона С) - при степени интоксикации от 4 до 5 инъекций CCl₄. Практически это тот рубеж, после которого начинает формироваться новое стационарное состояние системы - хроническое (зона А - адаптивная реакция). Стабильность этого состояния, характеризующегося тем, что на фоне снижения в 1.4 раза (р<0.05) числа гепатоцитов, функция органа обеспечивается возрастающей более чем в 30 раз их митотической активностью. Так как процесс деления клетки требует значительного количества энергии, то без значительного ущерба для организма обеспечить высокую митотическую активность гепатоцитов за счет углеводного обмена уже не возможно. Следовательно, на этой стадии развития патологии рост содержания нейтрального жира в гепатоцитах, является закономерной реакцией системы, направленной на обеспечение энергетических потребностей процессов восстановления [19].

Предлагаемый способ оценки функционального состояния печени позволяет существенно повысить точность и объективность при диагностике состояния печени, прогнозировать характер и динамику направленности сдвигов метаболизма для перехода системы в оптимальное стационарное состояние, а также контролировать лечебное воздействие.

Полученная экспериментальная модель патологического процесса в печени под влиянием тетрахлорметана соответствует клиническим формам гепатита [20-22].

Данный способ подтверждается клиническими наблюдениями [22]. Исследование метаболизма соединительной ткани было проведено у 72 ребенка в возрасте от 5 до 14 лет, из них 25 детей здоровых, 25 детей с хроническим персистирующим гепатитом, 12 детей с хроническим активным гепатитом и 10 детей с циррозом печени. В сыворотке крови детей определяли содержание пептидносвязанного и белковосвязанного гидроксипролина и гексозаминов. По результатам исследования пептидносвязанного и белковосвязанного гидроксипролина крови вычисляли гидроксипролиновый показатель (ГОПП - отношение пептидносвязанного гидроксипролина к белковосвязанному). Средние данные по группам больных представлены в таблице 7.

Оценка состояния печени производится по полученным на основании математического анализа (производные 1-го и 2-го порядка) зависимостей показателей (МИТ - митотический индекс; МДАг - малоновый диальдегид гомогената печени; АлАТ - аланинаминотрансфераза; БИЛ - билирубин; Рж - относительная плотность жировых включений (в ткани печени); ГЕП - число гепатоцитов в поле зрения; ЦП - церулоплазмин; СТ - объемная плотность соединительной ткани) от степени интоксикации в таблице, приведенной в формуле изобретения. В таблице приведены диапазоны изменения показателей для состояний печени: С - фаза, соответствующая

15. Способ оценки функционального состояния печени у больных хроническим гепатитом и циррозом печени (Патент RU №2194280. Опубликовано: 2002.12.10; Белоббродова Э.И.; Шписман М.Н.; Гайсаев P.O.; Каблукова И.Б.).

16. Новый способ интегративной оценки функционального состояния системы гемостаза/ Тютрин И.И., Пчелинцев О.Ю., Шписман М.Н. и др.// М., 1994. - 6. - С. 26-27.

17. Способ оценки функционального состояния системы гемостаза. Патент на изобретение РФ №2063037, опубл. 1996 г., Тютрин И.И.; Паршин А.Н.; Пчелинцев О.Ю.

18. Способ оценки функционального состояния печени у больных хроническим гепатитом и циррозом печени. Патент на изобретение РФ №2194280, опубл. 2002 г. Белобородова Э.И., Шписман М.Н., Гайсаев P.O., Каблукова И.Б.

19. Козвонин В.Н. Морфофункциональные особенности регенерации нормальной и патологически измененной печени под. влиянием озона. / Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. г. Саранск 2005 г. 18 с.

20. Солопаева И.М., Косых А.А., Жданова Т.Ф., Малюгин Г.В. и др. Сравнение хронической патологии печени в эксперименте и клинике. // Биологическая характеристика лабораторных животных и экстраполяция на человека экспериментальных данных. - М., 1980. - С. 276-278.

21. Блинова Т.В., Косых А.А., Коваленко И.А., Жарикова Г.В. Сравнительная Характеристика лизосомальных ферментов мышей, крыс и морских свинок. // Биологическая характеристика лабораторных животных и экстраполяция на человека экспериментальных данных. - М., 1980. - С. 150-151,

22. Косых А.А. Закономерности нарушений метаболизма соединительной ткани печени при хронических заболеваниях в эксперименте и клинике. // Генетика и селекция. Тр. НИИСХ Северо-Востока. - Киров, 1989. - С. 16-21.

Способ оценки функционального состояния печени, отличающийся тем, что оценка функционального состояния печени базируется на системном анализе показателей интенсивности процессов липопероксидации, функциональной активности и гистоструктуры органа, при этом состояние печени оценивается на основании математического анализа непрерывной функциональной зависимости, полученной путем аппроксимации эмпирических данных сплайном, изменений изучаемых показателей от интенсивности патогенного фактора, сведенных в таблицу

где:

МИТ - митотический индекс;

МДАг - малоновый диальдегид гомогената печени;

АлАТ - аланинаминотрансфераза;

БИЛ - билирубин;

Рж - относительная плотность жировых включений (в ткани печени);

ГЕП - число гепатоцитов в поле зрения;

ЦП - церулоплазмин;

СТ - объемная плотность соединительной ткани;

С - фаза, соответствующая физиологической норме;

А - фаза хронического состояния, соответствующая началу хронического процесса;

АА - фаза хронического состояния, соответствующая активному хроническому процессу;

ААХ - фаза хронического состояния, соответствующая терминальной стадии процесса (необратимых изменений);

И – число инъекций тетрахлорметана.

Изобретение относится к диагностике, в частности к гистохимии, и может быть использовано для оценки типа мышечных волокон. Для этого гистологические срезы для определения окислительного, окислительно-гликолитического и гликолитического типов мышечных волокон последовательно помещают вначале в 1% раствор CaCI2, затем в 2% раствор CoCI2 и далее в 1% раствор сульфида аммония, в последующем их помещают в кислую среду, в которой инактивируется «быстрый» миозин гликолитических волокон, и в щелочную среду для определения окислительно-гликолитического и гликолитического типов, в которой инактивируется «медленный» миозин окислительных волокон, при этом окислительные волокна на срезе окрашиваются черным цветом, окислительно-гликолитические волокна - серым цветом, а гликолитические волокна - белым цветом, тип же мышечных волокон определяют по площади их поперечного сечения, а в качестве маркеров используют ферменты: сукцинатдегидрогеназу - для оценки активности окислительных процессов в митохондриях и лактатдегидрогеназу - для определения интенсивности гликолиза в цитоплазме клетки.

Способ хирургического лечения гетеротопической оссификации с выполнением локального нейромоделирования спастического синдрома пациента // 2628370

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для хирургического лечения гетеротопической оссификации с выполнением локального нейромоделирования спастического синдрома пациента.

Способ приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом // 2627672

Изобретение относится к области клинико-диагностических исследований и может применяться для приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом при проведении анализа кариотипа гемопоэтических клеток.

Способ контроля эффективности сорбции липополисахарида при проведении селективной липополисахаридной гемосорбции // 2627653

Изобретение относится к области диагностики, а именно к способу контроля эффективности сорбции липополисахарида (ЛПС) при проведении селективной ДПС-гемосорбции. Способ контроля эффективности сорбции ЛПС при проведении селективной ЛПС-гемосорбции, включающий определение концентрации пресепсина в крови до и после колонки гемосорбента не реже, чем один раз в час, и при росте концентрации пресепсина в крови после колонки гемосорбента фиксируют снижение эффективности сорбции гемосорбента.

Способ прогнозирования течения раневого процесса // 2627650

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторному методу исследования, и может быть использовано при прогнозировании течения раневого процесса. Способ прогнозирования течения раневого процесса заключается в том, что производят микроскопическое исследование текстур, полученных в результате высыхания исследуемой биологической жидкости на обезжиренном предметном стекле в форме капли при температуре 20-30°С, исследование проводят на изотропных текстурах, а в качестве биологической жидкости используют сыворотку крови, которую высушивают в течение 24 часов, а затем осуществляют микроскопическое исследование в проходящем свете и, при выявлении изотропных текстур в форме языковых полей, выпуклых округлых образований, трехлучевых трещин, делают прогноз по дальнейшему течению раневого процесса - наличие одного из видов изотропных текстур или их сочетание свидетельствует об осложнении заживления раны.

Способ прогнозирования гематогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы у пациенток с хорошим ответом на неоадъювантную химиотерапию // 2627649

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и предназначено для прогнозирования риска возникновения гематогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы у пациенток с хорошим ответом на неоадъювантную химиотерапию.

Способ пошаговой диагностики наследственной тирозинемии 1 типа у детей // 2627647

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и касается способа ранней диагностики наследственной тирозинемии 1 типа (HT1). Сущность способа заключается в том, что детям первых 3-х месяцев жизни, у которых имеет место сочетание симптомокомплекса, состоящего из лихорадки неясного генеза, отеков, желтухи и диспепсического синдрома, а у детей в возрасте 4 месяцев и старше - гепато- или гепатоспленомегалии и клинических проявлений острого рахита, проводят исследование крови с оценкой уровня гемоглобина и количества эритроцитов, количества тромбоцитов, уровня АЛТ, ACT, билирубина и его фракций, уровня щелочной фосфатазы, кальция, фосфора, АФП, коагулограммы.

Способ обследования детей с подозрением на прогрессирующий семейный внутрипеченочный холестаз (псвх) // 2627615

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, для диагностики врожденных заболеваний, и может быть использовано для ранней диагностики прогрессирующего семейного внутрипеченочного холестаза у детей (ПСВХ).

Способ прогнозирования значений индекса атерогенности у стажированных работающих, экспонированных ртутью // 2627587

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования значений индекса атерогенности через 4-5 лет у стажированных работающих, экспонированных ртутью, без признаков патологии нервно-психической сферы.

Способ изготовления биомеханического сенсора для измерения сил адгезии в системе "клетка-клетка" // 2627455

Изобретение касается способа изготовления биомеханического сенсора для измерения сил адгезии в системе «клетка-клетка». Сущность способа заключается в том, что используют влажную камеру, стандартный tipless кантилевер, суспензию лимфоцитов.

Способ экспресс-диагностики скрытых воспалительных процессов молочной железы и репродуктивных органов коров // 2629273

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для экспресс-диагностики скрытых воспалительных процессов молочной железы и репродуктивных органов коров. Способ экспресс-диагностики скрытых воспалительных процессов молочной железы и репродуктивных органов коров включает определение гистамина в надосадочной жидкости, полученной в результате осаждения белков жидкой части крови ацетонитрилом. Осаждение белков жидкой части крови осуществляют ацетонитрилом, который берут в соотношении 1:2, взбалтывают, выдерживают не более 2 мин, добавляют 90-100 мкл едкого натрия и 400-500 мкл 2%-го медного купороса, встряхивают смесь и определяют наличие гистамина в надосадочной жидкости и по изменению окраски устанавливают реакцию. Светло-голубая окраска – реакция положительная, а фиолетовая окраска - реакция отрицательная. Способ позволяет в течение 5 минут и с высокой достоверностью определить наличие скрытого воспалительного процесса в организме коров. 2 пр.

Способ выявления возбудителей нозокомиальных оппортунистических инфекций и маркеров их резистентности к бета-лактамным антибиотикам и гликопептидам у женщин репродуктивного возраста и новорожденных детей для оптимизации антибактериальной терапии // 2629322

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии, клинической лабораторной диагностике, молекулярной биологии, акушерству, гинекологии и неонатологии. Cпособ выявления возбудителей нозокомиальных оппортунистических инфекций и маркеров их резистентности к бета-лактамным антибиотикам и гликопептидам у женщин репродуктивного возраста и новорожденных детей заключается в том, что выполняется ПЦР в режиме реального времени и определяются следующие показатели: наличие геномной ДНК человека, общая бактериальная масса, наличие ДНК УПМ, относящихся к восьми таксонам (семейство: Enterobacteriaceae, роды: Staphylococcus, Enterococcus, Acinetobacter, комплекс видов: Burkholderia cepacia, виды: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia), а также 15 маркеров резистентности микроорганизмов к антибиотикам: mecA, vanA, vanB, blaTEM, blaSHV, blaCTX-M blaOXA23-подобные гены, blaOXA40-подобные гены, blaOXA48-подобные гены, blaOXA51-подобные гены, blaOXA58-подобные гены, blaNDM, blaVIM, blaKPC, blaIMP и по полученным данным осуществляют оптимальный выбор антибактериальных препаратов. 5 табл., 3 пр.

Способ определения реактивности и дефицита кровотока в позвоночных артериях // 2629384

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для диагностики реактивности и дефицита кровотока в позвоночных артериях у пациентов с клиникой вертебрально-базилярной недостаточности. Для этого пациенту, в положении лежа, проводят цветное допплеровское картирование позвоночных артерий, из доступа у угла нижней челюсти регистрируют линейные и объемные скорости кровотока по позвоночным артериям в 3 сегменте, определяют среднюю скорость кровотока, проводят пробу с задержкой дыхания пациентом на 30 секунд, регистрируют изменения объемных, линейных скоростей кровотока и средней скорости после пробы, вычисляют индекс реактивности позвоночных артерий по формуле: ИР=V2-V1/V2⋅100%, где ИР - индекс реактивности; V1 - средняя скорость кровотока до пробы; V2 - средняя скорость кровотока после пробы, затем проводится исследование позвоночной артерии с другой стороны и при значении ИР менее 30% и суммарном объемном кровотоке по двум позвоночным артериям менее 250 мл/мин диагностируют низкую реактивность и дефицит кровотока в позвоночных артериях. Способ позволяет выбрать адекватный и полноценный способ реваскуляризации позвоночных артерий при простоте и точности определения реактивности и дефицита кровотока в них. 2 пр.

Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза trichostrongylus colubriformis // 2629386

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis. Способ заключается в том, что матриксы из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии мелких жвачных предварительно обрабатывают в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C. Затем проводят отбор 250 и более живых, активных, половозрелых 250 и более самок вида Trichostrongylus colubriformis. Отбор проводят в отдельные бактериологические чашки с раствором Ringer по 9 самок в каждую чашку. Затем их экспонируют при t = 25°C в течение 3-х часов в условиях термостата, после чего получают чистую культуру зрелых яиц Trichostrongylus colubriformis, выделенных живыми самками. Заявленный способ позволяет получить до 100% сбора только зрелых яиц от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis. 1 пр.

Способ диагностики дисфункции сфинктера одди iii типа у пациентов, оперированных по поводу желчнокаменной болезни // 2629396

Изобретение относится к медицине, и предназначено для ранней диагностики дисфункции сфинктера Одди III типа у пациентов, оперированных по поводу желчнокаменной болезни. Дополнительно определяют уровень нейропептидов пищеварительного тракта и оксида азота при поступлении в хирургическое отделение и при значениях концентрации нейропептидов-дилататоров ниже 0,5 нг/мл, нейропептидов-констрикторов выше 1,0 нг/мл, оксида азота ниже 9,75 мкмоль/л диагностируют дисфункцию сфинктера Одди III типа. Способ позволяет повысить эффективность ранней диагностики и своевременно проводить профилактические и лечебные мероприятия и диспансерное наблюдение этой категории пациентов. 3 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов с использованием кинетической модели медь-инициированного свободнорадикального окисления липопротеидов низкой плотности плазмы крови человека // 2629398

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, позволяющим осуществлять эффективный скрининг антиоксидантов. Способ экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов заключается в том, что выделяют липопротеиды низкой плотности (ЛНП) из плазмы венозной крови здоровых доноров, осуществляют окисление липопротеидов низкой плотности при температуре 37°С внесением 30 мМ сульфата меди (CuSO4), после чего через фиксированные интервалы времени измеряют накопление липогидропероксидов (конъюгированных диенов) при 233 нм (ΔD233) и по результатам исследования строят кинетическую кривую окисления ЛНП, из которой определяют продолжительность периода индукции (τ), затем в опытные пробы вносят исследуемые антиоксиданты (конечная концентрация 1 мкМ), растворенные либо в 96% этаноле - для жирорастворимых веществ или в среде инкубации - для водорастворимых веществ, и если продолжительность периода индукции исследуемого вещества выше 0,4 - вещество может рассматриваться в качестве эффективного антиоксиданта; если ниже 0,1 - исследованное вещество эффективным антиоксидантом не является. 3 пр., 2 ил., 1 табл.

Способ определения уровня свинца в мышечной ткани крупного рогатого скота // 2629605

Изобретение относится к областям экологии, ветеринарии, животноводства и предлагается для использования в качестве теста прижизненной оценки уровня аккумуляции свинца в мышечной ткани крупного рогатого скота герефордской породы. Способ заключается в определении в волосе концентрации стронция или цинка. Затем рассчитывают уравнение регрессии, при этом по содержанию стронция или цинка определяют концентрацию свинца в мышечной ткани y=0,0019x+0,0376, где x - содержание Sr (мг/кг) в волосе, y - содержание Pb (мг/кг) в мышечной ткани; y=0,0011x+0,0142, где x - содержание Zn (мг/кг) в волосе, y - содержание Pb (мг/кг) в мышечной ткани. Способ атравматичен, точен и неинвазивен, удобен и прост в использовании. 3 табл., 1 пр.

Способ прижизненной оценки действия реагентов на образование стоматоцитов // 2629609

Изобретение относится к медицине и фармации, а именно к прижизненной оценке действия реагентов на образование стоматоцитов. Способ прижизненной оценки действия реагентов на образование стоматоцитов, включающий выделение эритроцитов из крови и изучение их формы с помощью светового микроскопа, отличается тем, что суспензию эритроцитов помещают на предметное стекло, опускают в нее объектив микроскопа (100х), после образования эхиноцитов и добавления реагентов проводят микрофотосъемку. Способ обеспечивает прижизненное изучение образования стоматоцитов под влиянием различных реагентов. 4 пр., 4 ил.

Способ прогнозирования степени риска формирования синдрома поликистозных яичников у девочек-подростков // 2629720

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования степени риска формирования синдрома поликистозных яичников (СПКЯ) у девочек-подростков. В качестве анамнестических данных оценивают наличие: наследственной отягощенности по СПКЯ со стороны как матери, так и отца, отягощенного семейного анамнеза по сахарному диабету 2 типа, отягощенной наследственности по ожирению. При наличии каждому признаку присваивают по 2 балла. Также определяют наличие низкой ≤2800 г или высокой ≥ 4000 г массы тела ребенка при рождении при доношенном гестационном сроке, гестационного сахарного диабета у матери во время беременности, избытка массы тела у матери во время беременности, хронических тонзилогенных инфекций и частых ангин у девочки, черепно-мозговой травмы, нейроинфекции в анамнезе, малоподвижного образа жизни, перенесенный сильный психоэмоциональный стресс. При наличии их присваивают по 1 баллу. Среди клинических данных оценивают наличие: нарушения менструального цикла по типу олиго-/аменореи в течение более чем 1,5-2 лет после менархе, ановуляторного цикла, ожирения - индекс массы тела (ИМТ) более 30 кг/м2, гирсутизма. При наличии каждому признаку присваивают 3 балла. При наличии избытка массы тела при ИМТ 26-30 кг/м2, абдоминального перераспределения жироотложений, пограничного оволосения - 8-14 баллов по шкале Ферримана-Голлвея, повышенной сальности волос и кожи, угревой сыпи и акне, себореи, негроидного акантоза, фиброзно-кистозной мастопатии, каждому признаку присваивают 2 балла. Оценивают в 1 балл наличие нормальной массы тела, дисфункционального маточного кровотечения пубертатного периода. Определяют лабораторные показатели: при наличии увеличения отношения лютеинизирующего гормона к фолликулостимулирующему гормону (ЛГ/ФСГ) более 2,5 присваивают 3 балла. Также определяют наличие повышенного уровня лютеинизирующего гормона, повышенного уровня общего тестостерона, повышенного уровня андростендиона, повышения инсулина натощак, увеличения уровня гликозилированного гемоглобина. Оценивают при их наличии в 2 балла каждый показатель. При наличии повышения уровня антимюллерового гормона выше возрастной нормы присваивают 1 балл. Определяют эхографические признаки: объем яичников более 10 см3, не менее 12 кистозно-атрезирующихся фолликулов диаметром 2-9 мм, при наличии которых присваивают 3 балла. При наличии мультифолликулярных яичников присваивают 1 балл. Полученные баллы суммируют. При сумме баллов 1-15 определяют низкую степень риска формирования синдрома поликистозных яичников. При сумме баллов 16-31 - среднюю степень риска. При сумме баллов 32-62 - высокую степень риска формирования синдрома поликистозных яичников. Способ позволяет объективно, эффективно, просто и на ранних сроках прогнозировать формирование синдрома поликистозных яичников у девочек-подростков за счет оценки комплекса наиболее значимых показателей. 1 табл., 2 пр.

Способ обследования детей с подозрением на синдром алажилля // 2629828

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии при диагностике врожденных заболеваний, и может быть использовано для ранней диагностики синдрома Алажилля у детей. Способ обследования детей с подозрением на синдром Алажилля заключается в том, что детям первых 3-5 месяцев жизни, при наличии симптомокомплекса, проявляющегося низкой массой тела при рождении, длительным, более 2-х недель, желтушным периодом, а детям старше 5-ти месяцев наличием кожного зуда, гепато/гепатоспленомегалии, ахолии/гипохолии стула, проводят биохимический анализ крови для подтверждения признаков холестаза, таких как прямая гипербилирубинемия, умеренная цитолитическая активность, повышение уровня холестерина, после чего, при выявлении признаков холестаза, проводят ультразвуковое исследование органов брюшной полости и, при выявлении неоднородности печеночной паренхимы и утолщения стенок внутрипеченочных желчных протоков, проводят ультразвуковое исследование сердца и рентгенографию грудопоясничного отдела позвоночника, а при выявлении изменений со стороны сердечно-сосудистой системы, скелета и почек дополнительно проводят молекулярно-генетическое исследование для верификации синдрома Алажилля. 5 ил., 1 пр.