Способ экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов с использованием кинетической модели медь-инициированного свободнорадикального окисления липопротеидов низкой плотности плазмы крови человека

Авторы патента:

Коновалова Галина Георгиевна (RU)

Тихазе Алла Карловна (RU)

Одинокова Ольга Александровна (RU)

Кандалинцева Наталья Валерьевна (RU)

Ягунов Семен Евгеньевич (RU)

Хольшин Сергей Викторович (RU)

Ланкин Вадим Зиновьевич (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N33/15 - медицинских препаратов

Владельцы патента RU 2629398:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский кардиологический научно-производственный комплекс" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "РКНПК" Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, позволяющим осуществлять эффективный скрининг антиоксидантов. Способ экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов заключается в том, что выделяют липопротеиды низкой плотности (ЛНП) из плазмы венозной крови здоровых доноров, осуществляют окисление липопротеидов низкой плотности при температуре 37°С внесением 30 мМ сульфата меди (CuSO₄), после чего через фиксированные интервалы времени измеряют накопление липогидропероксидов (конъюгированных диенов) при 233 нм (ΔD233) и по результатам исследования строят кинетическую кривую окисления ЛНП, из которой определяют продолжительность периода индукции (τ), затем в опытные пробы вносят исследуемые антиоксиданты (конечная концентрация 1 мкМ), растворенные либо в 96% этаноле - для жирорастворимых веществ или в среде инкубации - для водорастворимых веществ, и если продолжительность периода индукции исследуемого вещества выше 0,4 - вещество может рассматриваться в качестве эффективного антиоксиданта; если ниже 0,1 - исследованное вещество эффективным антиоксидантом не является. 3 пр., 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, который позволяет не только осуществлять эффективный скрининг антиоксидантов, но и одновременно выявлять антиоксиданты, которые могут быть потенциальными антиатерогенными препаратами.

Интенсификация свободнорадикального окисления сопутствует развитию атеросклероза и сахарного диабета, внося важный вклад в патогенез этих заболеваний. Исходя из этого, включение препаратов из класса ингибиторов свободнорадикальных процессов - антиоксидантов в комплексную терапию атеросклероза и диабета представляется вполне актуальным. К настоящему времени имеются примеры успешного применения антиоксидантов для подавления образования атерогенных липопротеидов низкой плотности (ЛНП) при холестерин-снижающей терапии и подавления рестенозирования коронарных сосудов после их стентирования (Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Кандалинцева Н.В. «Фенольные антиоксиданты в биологии и медицине». LAP LAMBERT Academic Publishing, Saarbrucken, 2012). Антиоксидант пробукол в течение ряда лет использовался в качестве антиатерогенного препарата (Lankin V.Z., Tikhaze А.K. et al., Mol. Cell. Biochem. 2003, 249(1-2): 129-40).

Например, антиоксидант мексидол широко применяется при осложнениях атеросклероза, включая нарушения кровообращения и микроинсульты. Кроме того, что антиоксиданты могут также использоваться для предотвращения дисфункции эндотелия у больных с заболеваниями сердечно-сосудистой системы (Shen Х.С. et al., ВМС Complement. Altern. Med. 2012, doi:10.1186/1472-6882-12-174). Таким образом, существует большая потребность в создании новых антиоксидантных препаратов медицинского назначения.

В настоящее время для скрининга антиоксидантных препаратов широко используется способ - метилолеатная модель свободнорадикального окисления (Меньшов В.А., Шишкина Л.Н., Кишковский З.Н. Прикладная биохимия и микробиология, 1994, 30(4): 632-637; Зенков Н.К., Кандалинцева Н.В., Ланкин В.З. и др. Фенольные антиоксиданты, 2003, стр. 41-53). Для осуществления скрининга испытуемые вещества растворяют в метиловом эфире олеиновой кислоты и проводят окисление субстрата при термостатировании и насыщении кислородом. В отобранных через определенные промежутки времени аликвотах субстрата при помощи йодометрического титрования анализируют содержание гидропероксидов олеиновой кислоты. По результатам строят кинетические кривые, из которых определяют продолжительность периода индукции (лаг-фазы) окисления.

Данный способ имеет целый ряд недостатков, а именно:

- механизм свободнорадикального окисления олеиновой кислоты существенно отличается от механизма окисления природных полиеновых липидов - основного субстрата окисления в живом организме;

- при использовании метилолеатной модели окисление происходит в гомогенной системе, тогда как природные липидсодержащие структуры являются гетерогенными, причем кинетические константы, характеризующие эффективность антиоксидантов, значительно отличаются при проведении исследования в гомогенных или гетерогенных системах;

- метилолеатная модель позволяет исследовать антиоксидантную активность исключительно жирорастворимых (гидрофобных) веществ, но не водорастворимых ингибиторов свободнорадикальных процессов;

- при использовании метилолеатной модели исследование занимает продолжительное время (до нескольких недель) и достаточно трудоемко (кинетика снимается по точкам, непрерывная регистрация невозможна).

Задачей предлагаемого изобретения является создание способа экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов с использованием кинетической модели медь-инициированного свободнорадикального окисления липопротеидов низкой плотности плазмы крови человека, позволяющего проводить предварительный отбор препаратов с высокой антиоксидантной активностью среди вновь синтезированных веществ для последующих биологических испытаний.

Технический результат изобретения заключается в повышении эффективности, быстроты и простоты осуществления анализов, а также возможности автоматизации определений.

Это достигается тем, что в заявляемом способе экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов, при котором выделяют липопротеиды низкой плотности (ЛНП) из плазмы венозной крови здоровых доноров, окисление липопротеидов низкой плотности осуществляют при температуре 37°С внесением 30 мМ сульфата меди (CuSO₄), после чего через фиксированные интервалы времени измеряют накопление липогидропероксидов (конъюгированных диенов) при 233 нм (ΔD233) и по результатам исследования строят кинетическую кривую окисления ЛНП, из которой определяют продолжительность периода индукции (τ), затем в опытные пробы вносят исследуемые антиоксиданты (конечная концентрация 1 мкМ), растворенные либо в 96% этаноле - для жирорастворимых веществ или в среде инкубации - для водорастворимых веществ, и если продолжительность периода индукции исследуемого вещества выше 0,4 - вещество может рассматриваться в качестве эффективного антиоксиданта; если продолжительность периода индукции исследуемого вещества в предлагаемой тест-системе ниже 0,1 - исследованное вещество эффективным антиоксидантом не является.

Для скрининга антиоксидантов более правильно использовать способ медь-инициированного свободнорадикального окисления ЛНП, в котором субстратом окисления служат полиеновые ацилы фосфолипидов природных липид-белковых нанодисперсий плазмы крови (ЛНП) доноров, а исследуемые вещества (водорастворимые и жирорастворимые) вносятся непосредственно в среду окисления. Продолжительность периода индукции окисления ЛНП определяется спектрофотометрически в кинетическом режиме по поглощению липогидропероксидов при 233 нм.

Следует отметить, что использование в качестве субстрата окисления природной липидной дисперсии - ЛНП плазмы крови человека позволяет не только осуществлять эффективный скрининг потенциальных антиоксидантов, но и одновременно выявлять антиоксиданты, которые могут быть потенциальными антиатерогенными препаратами, поскольку эффективное ингибирование свободнорадикального окисления ЛНП в организме рассматривается в качестве важного механизма подавления атерогенеза.

Осуществление способа

Для препаративного выделения липопротеидов низкой плотности (ЛНП) используют плазму венозной крови здоровых доноров, взятой натощак в присутствии 1 мг/мл ЭДТА в качестве антикоагулянта и антиоксиданта. Изолирование ЛНП осуществляют по стандарному методу Лингрена. Плазму подвергают двукратному ультрацентрифугированию в градиенте плотности NaBr в течение 2 час при 41000 об/мин в угловом роторе 50Тi при 4° в рефрижераторной ультрацентрифуге Beckman L-8 (США), а затем подвергают диализу при 4° в течение 16 час против 50 мМ фосфатного буфера рН 7,4. Содержание белка в ЛНП определяют по методу Лоури и ЛНП разбавляют до 50 мкг белка/мл раствором, содержащим 0,154М NaCl в 50 мМ фосфатном буфере рН 7,4.

Окисление ЛНП (контрольная проба) инициируют при 37° внесением 30 мМ сульфата меди (CuSO₄), после чего через фиксированные интервалы времени измеряют накопление липогидропероксидов (конъюгированных диенов) при 233 нм (ΔD233) на спектрофотометре Hitachi 220А (Япония). По результатам исследования строят кинетическую кривую окисления ЛНП, из которой определяют продолжительность лаг-фазы окисления (период индукции, τ). В опытные пробы вносят исследуемые антиоксиданты (конечная концентрация 1 мкМ), растворенные либо в 96% этаноле (конечная концентрация этанола в пробе не должна быть выше 2%) - для жирорастворимых веществ или в среде инкубации - для водорастворимых веществ. Если продолжительность периода индукции исследуемого вещества в предлагаемой тест-системе выше 0,4 - вещество может рассматриваться в качестве эффективного антиоксиданта и использоваться для доклинических испытаний; если продолжительность периода индукции исследуемого вещества в предлагаемой тест-системе ниже 0,1 - исследованное вещество эффективным антиоксидантом не является (дальнейшие доклинические испытания в для антиоксидантной терапии малоперспективны).

В качестве реперного антиоксиданта используется широко распространенный пищевой антиоксидант ионол (2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол, бутилированный гидрокситолуол, ВНТ), период индукции которого принимается за единицу. Это позволяет учесть различия в окислении контрольных образцов ЛНП, полученных из разных источников, для объективизации определений.

В случае необходимости свежевыделенные ЛНП могут быть заморожены при -70° в 20% сахарозе; аликвоты замороженных ЛНП могут храниться в течение 6 месяцев и, после разморозки, использоваться для последующих анализов.

Примеры осуществления способа

Пример 1

На Фиг. 1 показаны кинетические кривые Cu²⁺-инициированного свободнорадикального окисления ЛНП плазмы крови человека в присутствии ряда синтетических антиоксидантов (1 мкМ в среде инкубации). Приведены характерные кинетические кривые в контрольном образце (кривая 1); пробукола (4,4'-[1-метилэтилиден-бис(тио)]бис[2,6-бис(1,1-диметилэтил)фенол], (кривая 2); тиофана (бис-[3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфид, (кривая 3); и при добавлении реперного антиоксиданта - 1 мкМ ионола (кривая 4).

Пример 2

На Фиг. 2 показаны кинетические кривые Cu²⁺-инициированного свободнорадикального окисления ЛНП, изолированных из плазмы крови пациента с сахарным диабетом 2 типа, где кривая а - ЛНП из плазмы крови больного СД 2 типа, получавшего стандартную сахароснижающую терапию в течение 2 месяцев; кривая б - ЛНП из плазмы крови больного СД 2 типа, получавшего в течение 2 месяцев пробукол (1 г/сут) на фоне стандартной сахароснижающей терапии. Данные, приведенные на Фиг. 2, показывают, что пробукол (соединение №2), обладающий высокой антиокислительной активностью в исследованной системе, проявляет выраженные антиоксидантные свойства и in vivo, т.е. при исследовании ЛНП, изолированных из плазмы крови пациента с сахарным диабетом 2 типа после двух месяцев проведения терапии с включением этого антиоксидантного препарата.

Пример 3

В таблице указаны периоды индукции исследованных препаратов, определенные по кинетике Cu²⁺-инициированного свободнорадикального окисления ЛНП плазмы крови (концентрация веществ в среде инубации - 1 мкМ). Приведены структурные формулы 11 исследованных фенольных антиоксидантов, а также абсолютные и относительные (рассчитаны по отношению к периоду индукции ионола, принятому за единицу) значения периодов индукции свободнорадикального окисления ЛНП в их присутствии. Из приведенных данных видно, что антиоксидантные потенции соединения №5 и №7 сравнимы с таковыми реперного антиоксиданта ионола (соединение №1). Очевидно, что вышеперечисленные соединения являются весьма перспективными для дальнейшей разработки в качестве потенциальных антиоксидантных препаратов. В то же время в использованной модельной системе антиоксидантная активность соединений №10 и №11 (α-токоферол) не выявлена, тогда как соединения №3 и №8 не только не ингибировали свободнорадикальное окисление ЛНП, но обладали слабой прооксидантной активностью. Таким образом, приведенные в таблице данные позволяют убедиться в том, что предлагаемая модельная система дает возможность проводить быстрый скрининг большого количества соединений для оценки их антиоксидантной активности. Есть все основания полагать, что антиоксидантная активность веществ, охарактеризованная с использованием предлагаемой системы свободнорадикального окисления ЛНП, позволяет также предсказать антиоксидантные потенции этих соединений при их терапевтическом использовании.

Следует отметить, что α-токоферол (соединение №11), который не проявлял антиоксидантных свойств в предложенной системе тестирования антиоксидантов, не влиял и на окисляемость ЛНП in vivo в соответствии с полученными данными. Следовательно, предлагаемая система скрининга антиоксидантов позволяет не только отбирать соединения с высокой антиокислительной активностью, но и прогнозировать их антиатерогенную активность (т.е. способность подавлять in vivo образование окисленных ЛНП, обладающих про-атерогенными свойствами).

Таким образом, преимуществами предлагаемого способа экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов являются:

- использование окисления природных липидных дисперсий, свободнорадикальные реакции в которых развиваются в полиненасыщенных жирных кислотах, т.е. так же, как это происходит в биомембранах, ЛНП и других липид-белковых комплексах клетки при окислительном стрессе;

- инициация окисления осуществляется за счет образования супероксидного анион-радикала, т.е. таким же образом, как это происходит в организме в соответствии с реакцией:

O₂+Cu⁺→O₂^•-+Cu²⁺;

- предлагаемая система окисления предполагает возможность скрининга как гидрофобных (жирорастворимых) антиоксидантов, так и водорастворимых антиоксидантов;

- природный субстрат окисления - ЛНП плазмы крови человека после их препаративного выделения длительное время могут храниться в замороженном виде, причем само определение занимает, как правило, не более двух часов;

возможна непрерывная запись кинетики окисления в автоматическом режиме.

Способ экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов, при котором выделяют липопротеиды низкой плотности (ЛНП) из плазмы венозной крови здоровых доноров, окисление липопротеидов низкой плотности осуществляют при температуре 37°C внесением 30 мМ сульфата меди (CuSO₄), после чего через фиксированные интервалы времени измеряют накопление липогидропероксидов (конъюгированных диенов) при 233 нм (ΔD233) и по результатам исследования строят кинетическую кривую окисления ЛНП, из которой определяют продолжительность периода индукции (τ), затем в опытные пробы вносят исследуемые антиоксиданты (конечная концентрация 1 мкМ), растворенные либо в 96% этаноле - для жирорастворимых веществ или в среде инкубации - для водорастворимых веществ, и если продолжительность периода индукции исследуемого вещества выше 0,4 - вещество может рассматриваться в качестве эффективного антиоксиданта; если продолжительность периода индукции исследуемого вещества в предлагаемой тест-системе ниже 0,1 - исследованное вещество эффективным антиоксидантом не является.

Изобретение относится к медицине, и предназначено для ранней диагностики дисфункции сфинктера Одди III типа у пациентов, оперированных по поводу желчнокаменной болезни.

Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза trichostrongylus colubriformis // 2629386

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis. Способ заключается в том, что матриксы из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии мелких жвачных предварительно обрабатывают в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C.

Способ определения реактивности и дефицита кровотока в позвоночных артериях // 2629384

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для диагностики реактивности и дефицита кровотока в позвоночных артериях у пациентов с клиникой вертебрально-базилярной недостаточности.

Способ выявления возбудителей нозокомиальных оппортунистических инфекций и маркеров их резистентности к бета-лактамным антибиотикам и гликопептидам у женщин репродуктивного возраста и новорожденных детей для оптимизации антибактериальной терапии // 2629322

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии, клинической лабораторной диагностике, молекулярной биологии, акушерству, гинекологии и неонатологии.

Способ экспресс-диагностики скрытых воспалительных процессов молочной железы и репродуктивных органов коров // 2629273

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для экспресс-диагностики скрытых воспалительных процессов молочной железы и репродуктивных органов коров.

Способ оценки функционального состояния печени // 2629202

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки функционального состояния печени при патологии. Производят оценку лабораторных данных, характеризующих состояние органа: интенсивность процессов липопероксидации (ДК, МДА), функциональная активность (БИЛ, АлАТ, Рж, ЦП) и состояние гистоструктур органа (МИТ, ГЕП, СТ); определяют фазу патологического процесса.

Способ оценки типов мышечных волокон // 2628810

Изобретение относится к диагностике, в частности к гистохимии, и может быть использовано для оценки типа мышечных волокон. Для этого гистологические срезы для определения окислительного, окислительно-гликолитического и гликолитического типов мышечных волокон последовательно помещают вначале в 1% раствор CaCI2, затем в 2% раствор CoCI2 и далее в 1% раствор сульфида аммония, в последующем их помещают в кислую среду, в которой инактивируется «быстрый» миозин гликолитических волокон, и в щелочную среду для определения окислительно-гликолитического и гликолитического типов, в которой инактивируется «медленный» миозин окислительных волокон, при этом окислительные волокна на срезе окрашиваются черным цветом, окислительно-гликолитические волокна - серым цветом, а гликолитические волокна - белым цветом, тип же мышечных волокон определяют по площади их поперечного сечения, а в качестве маркеров используют ферменты: сукцинатдегидрогеназу - для оценки активности окислительных процессов в митохондриях и лактатдегидрогеназу - для определения интенсивности гликолиза в цитоплазме клетки.

Способ хирургического лечения гетеротопической оссификации с выполнением локального нейромоделирования спастического синдрома пациента // 2628370

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для хирургического лечения гетеротопической оссификации с выполнением локального нейромоделирования спастического синдрома пациента.

Способ приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом // 2627672

Изобретение относится к области клинико-диагностических исследований и может применяться для приготовления цитологических препаратов метафазных хромосом при проведении анализа кариотипа гемопоэтических клеток.

Способ контроля эффективности сорбции липополисахарида при проведении селективной липополисахаридной гемосорбции // 2627653

Изобретение относится к области диагностики, а именно к способу контроля эффективности сорбции липополисахарида (ЛПС) при проведении селективной ДПС-гемосорбции. Способ контроля эффективности сорбции ЛПС при проведении селективной ЛПС-гемосорбции, включающий определение концентрации пресепсина в крови до и после колонки гемосорбента не реже, чем один раз в час, и при росте концентрации пресепсина в крови после колонки гемосорбента фиксируют снижение эффективности сорбции гемосорбента.

Способ модельно-дискриминационной оценки фармацевтической эквивалентности лекарственных средств, покрытых кишечнорастворимой оболочкой // 2629397

Изобретение относится к фармации, фармакологии и клинической фармакологии и касается способа модельно-дискриминационной оценки фармацевтической эквивалентности лекарственных средств, покрытых кишечнорастворимой оболочкой, включающего определение кинетики растворения изучаемых препаратов и препарата сравнения путем последовательного помещения по одной единице твердой дозированной формы в фосфатный буфер объемом 500 мл с рН 1,05±0,05 и при температуре 37±0,05°С, перемешивания с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбора аликвоты через 2 часа и ее фильтрации, определения в аликвоте действующего вещества, переноса лекарственной формы в фосфатный буфер с рН 7,0±0,05, перемешивания с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбора аликвот через 10, 15, 20, 30, 45, 60 минут и в дополнительное расчетное время объемом 5 мл с восполнением этого объема средой растворения; аликвоты фильтруют, прибавляют к 2 мл фильтрата аликвот по 400 мкл 0,25 моль/л натрия гидроксида, определяют количество действующего вещества, перешедшего в раствор, параллельно проводят второй этап сравнительного теста кинетики растворения, включающий последовательное помещение по одной единице твердой дозированной формы в среду растворения с рН 4,0±0,05 объемом 500 мл, перемешивание с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбор проб через 10, 15, 20, 30, 45, 60 минут объемом 5 мл с восполнением этого объема средой растворения, фильтрацию аликвот, прибавление к 2 мл фильтрата аликвот по 400 мкл 0,25 моль/л натрия гидроксида, определение количества действующего вещества, перешедшего в раствор, с рН 7,0±0,05, объемом 900 мл, перемешивание с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбор проб через 10, 15, 20, 30, 45, 60 минут, при этом дополнительно определяют точку отбора аликвоты из среды растворения с рН 7,0±0,05 по формуле Тр=(Тк×0,121)+t(1).

Способ определения фазы вегетации лекарственного растительного сырья горца птичьего, горца перечного и горца почечуйного по малатдегидрогеназе с помощью электрофореза в полиакриламидном геле // 2622023

Изобретение относится к области фармации и может быть использовано для определения фазы цветения лекарственного сырья, в частности горца птичьего, горца перечного и горца почечуйного.

Способ определения феназепама // 2622000

Изобретение относится к области аналитической химии и касается способа определения феназепама. Сущность способа заключается в том, что готовят растворы определяемого вещества в концентрации 0,02 мг/мл и образца сравнения.

Способ одновременного определения примесей этилендиаминтетрауксусной кислоты, диметилсульфоксида и n-этилмалеимида в фармацевтических субстанциях методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии // 2621645

Изобретение относится к исследованию или анализу материалов с использованием хроматографии. Способ одновременного определения примесей этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), диметилсульфоксида (ДМСО) и N-этилмалеимида (ЭТМ) в фармацевтических субстанциях методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии включает определение ЭДТА, ДМСО и ЭТМ во время одного анализа, с использованием хроматографической колонки длиной не более 150 мм, заполненной носителем с зернением не более 5 мкм, используя раствор кислоты ортофосфорной 10-30 мМ (рН 1,9-2,26) с градиентом органического растворителя от 0 до 100%, при температуре колонки 25-45°С, достигается предел детектирования для ЭДТА - от 4,14 до 8,0 нг, ДМСО - от 0,8 до 3,0 нг, ЭТМ - 0,04 до 1 нг и предел количественного определения ЭДТА - от 12,9 до 30 нг, ДМСО - от 2,66 до 10 нг, ЭТМ - от 0,13 до 3 нг.

Способ количественного определения производных дибензотиоксантенов (группы тиксолов) // 2614724

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтическому анализу, и может быть использовано для количественного определения хлорпротиксена гидрохлорида, зуклопентиксола и флупентиксола в субстанциях.

Способ кулонометрического определения содержания воды в лекарственной форме мазь // 2614704

Изобретение относится к области аналитической химии и касается способа определения содержания воды в лекарственной форме мазь. Сущность способа заключается в том, что проводят растворение навески лекарственной формы мазь в растворителе толуол:метанол в соотношении 7:3, проводят электрогенерацию йода при постоянной силе тока 50мА в фоновом электролите «Аква М®-Кулон AG» в анодной камере, «Аква М®-Кулон СG» в катодной камере на платиновом электроде, далее в ячейку вносят аликвоту раствора эритромицина мази глазной массой 3 г, измеряют время достижения конечной точки титрования, рассчитывают содержание воды в аликвоте по формуле X=I×t×M/F, где I - сила тока, 0,05 A; t - время достижения конечной точки титрования, с; M - молярная масса эквивалента воды, 9,008 г/моль; F - постоянная Фарадея, 96485 Кл/моль, параллельно проводят определение воды в растворителе и по известным формулам рассчитывают содержание воды в мази.

Способ кулонометрического определения содержания воды в субстанции ампициллина тригидрата // 2614698

Изобретение относится к области аналитической химии и касается способа определения содержания воды в субстанции ампициллина тригидрата. Сущность способа заключается в том, что проводят растворение навески указанной субстанции в фоновом электролите «Аква М®-Кулон AG», далее в ячейку вносят аликвоту раствора субстанции ампициллина тригидрата массой 0,5г, проводят электрогенерацию йода при постоянной силе тока 50мА в фоновом электролите «Аква М® -Кулон AG» в анодной камере, «Аква М® -Кулон СG» в катодной камере на платиновом электроде, измеряют время достижения конечной точки титрования, рассчитывают содержание воды в аликвоте по формуле X=I×t×M/Fгде I - сила тока, 0,05 A; t - время достижения конечной точки титрования, с; M - молярная масса эквивалента воды, 9,008 г/моль; F - постоянная Фарадея 96485 Кл/моль, параллельно проводят определение воды в растворителе и по известным формулам рассчитывают содержание воды в субстанции ампициллина тригидрата.

Вольтамперометрический способ определения коэнзима q10 в кремах косметических // 2613897

Способ относится к области химической промышленности и позволяет определить содержание коэнзима Q10 в кремах косметических методом катодной дифференциально-импульсной вольтамперометрии.

Способ количественного определения производных дибензазепинов (группы ипраминов) // 2613876

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано для количественного определения производных дибензазепинов (группы ипраминов) в субстанциях.

Способ амперометрического определения молочной кислоты на платиновом электроде // 2612000

Изобретение относится к аналитической химии и касается способа определения молочной кислоты на платиновом электроде. Сущность способа заключается в том, что определяют молочную кислоту на платиновом электроде в фоновом электролите - боратный буфер (рН 9.18), при потенциале предельного тока восстановления Е=-0,7 В с помощью хлоридсеребряного электрода сравнения.

Способ количественного определения биоцидного азотсодержащего органического соединения гидразида изоникотиновой кислоты (изониазида) в водном растворе этого соединения // 2633080

Изобретение относится к медицине для определения концентрации в биосистемах (сыворотке крови, слюне и др.) и может быть использовано для количественного определения биоцидного гидразида изоникотиновой кислоты (изониазида) в водных растворах этого соединения при токсикологическом и техническом анализе субстанции и лекарственных форм этого препарата. Для этого сорбенты (силикагель или оксид алюминия) предварительно обрабатывают водным раствором соли меди и высушивают. Затем анализируемую пробу водного раствора наносят на сорбент и после развития окраски регистрируют параметр окраски. Регистрацию оптического сигнала осуществляют при сканировании поверхности сорбента с помощью оптического сканера по каналам цветности RGB с получением графического изображения. Концентрацию изониазида определяют по интенсивности отклика сигнала по цветовому каналу В с использованием графического редактора. Изобретение обеспечивает регулирование введения оптимальных доз лекарств при лечении активных форм туберкулеза, а также при исследовании фармакокинетики лекарственного препарата. 2 табл., 8 пр.