Способ количественного определения амантадина в плазме крови



Способ количественного определения амантадина в плазме крови
Способ количественного определения амантадина в плазме крови
Способ количественного определения амантадина в плазме крови
Способ количественного определения амантадина в плазме крови
Способ количественного определения амантадина в плазме крови
Способ количественного определения амантадина в плазме крови
G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2650968:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии, и предназначено для количественного определения амантадина в плазме крови. Для количественного определения амантадина в плазме крови осуществляют анализ крови методом хромато-масс-спектрометрии. Хромато-масс-спектрометрию проводят с использованием матрицы в виде плазмы крови с амантадином и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу - N-адамантил-гексаметиленимина. Разделение продуктов экстракции проводят на обращенно-фазной хроматографической колонке 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм. В качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония - раствор А и смесь ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 - раствор Б в соотношении А:Б - 42:58. Разделение продуктов экстракции осуществляют с температурой разделения 30°С и скоростью подачи элюента 0,6 мл/мин. Детектирование внутреннего стандарта проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона с m/z 234.0. Детектирование амантадина проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с m/z 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV, а его концентрацию рассчитывают по формуле: С=1198, 5306×AR, где С - концентрация амантадина (мкг/мл), AR - отношение площади хроматографического пика амантадина к площади пика внутреннего стандарта. Способ обеспечивает высокую воспроизводимость и точность количественного определения амантадина в плазме крови. 4 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии и может быть использовано для количественного определения амантадина в плазме крови для фармакокинетического сопровождения лечения пациентов, страдающих болезнью Паркинсона, получающих амантадин как монотерапию, так и в комбинации с другими противопаркинсоническими препаратами.

Амантадин - противовирусный и, одновременно, антипаркинсонический дофаминэргический препарат, по своей химической природе - трициклический аминоадамантан, производное адамантана-1-аминоадамантана гидрохлорид, или 1-адамантиламина гидрохлорид. Белый или белый со слабым желтоватым оттенком кристаллический порошок горького вкуса. Препарат был первоначально предложен в 1967 году в качестве противовирусного средства, эффективного в отношении вирусов гриппа типа А2. В дальнейшем была обнаружена его эффективность при паркинсонизме. Механизм лечебного действия амантадина при паркинсонизме объясняют тем, что он стимулирует выделение дофамина из нейрональных депо и повышает чувствительность дофаминергических рецепторов к нейромедиатору (дофамину); таким образом, даже при уменьшении образования дофамина в базальных ганглиях создаются условия для нормализации происходящих в них нейрофизиологических процессов. Имеются также данные, свидетельствующие о том, что амантадин тормозит генерацию импульсов в моторных нейронах ЦНС, являясь слабым антагонистом глутаматных NMDA-рецепторов. Амантадин в комбинации с другими препаратами используется для лечения вируса гриппа А, гепатита С, паркинсонизма и рассеянного склероза. В неврологии амантадин преимущественно применяется в фармакотерапии болезни Паркинсона. При всех своих важных положительных свойствах амантадин характеризуется достаточно большим числом побочных эффектов (особенно у пожилых лиц), минимизация которых требует привлечения наиболее чувствительных технологий терапевтического лекарственного мониторинга с оценкой содержания данного лекарственного вещества в крови пациентов. Амантадин в дозе 200 мг/день противодействует экстрапирамидным симптомам как при идиопатической болезни Паркинсона, так и в случае паркинсонических расстройств, обусловленных нейролептиками. Стационарный концентрационный уровень в крови достигается в течение 4-7 дней. Индивидуальные концентрационные значения в крови пациентов могут варьировать в терапевтическом диапазоне 200-900 нг/мл. Существует доказанная взаимосвязь между содержанием амантадина в крови и его влиянием на экстрапирамидную симптоматику. Данный препарат может вступать в лекарственные взаимодействия с другими веществами, как с положительными, так и с негативными клиническими эффектами. Так, например, амантадин усиливает подавление вирусной активности интерфероном, потенцирует антдискинезийный эффект леветирацетама у пациентов с болезнью Паркинсона и может являться причиной интенсивных и рекуррентных парамнестичеких симптомов (типа дежавю) при одновременном применении с фенилпропаноламином при лечении гриппа. Побочные эффекты амантадина, такие как тошнота, головокружение, бессонница встречаются у пациентов довольно часто (5-15%), особенно при длительном приеме (более 6 недель). Побочные эффекты амантадина включают также амфетаминоподобные эффекты, такие, как синдром повышенной нервно-рефлекторной возбудимости, тревожность, кошмарные сны, и изредка - галлюцинации. Концентрация амантадина в крови, превышающая 1600 мкг/мл считается токсичной. Лечение высокими дозами амантадина является причиной серьезных побочных эффектов, таких как инфаркт миокарда, попытки суицида, импотенция, спутанность сознания, дисфония и алопеция. Лекарственные взаимодействия напрямую зависят от сывороточной концентрации амантадина. Управление этими эффектами и тестирование комплаентности пациентов требует применения адекватного метода количественного анализа. Существующие методы анализа, такие как газовая хроматография/масс-спектрометрия, как правило, довольно сложны в исполнении, по причине необходимости применения сложной многостадийной пробоподготовки с последующей дериватизацией амантадина. Это является причиной того, что рутинный анализ амантадина представлен в очень малом числе клинических лабораторий, а также того, что терапевтический лекарственный мониторинг этого препарата недостаточно распространен. Создание метода анализа амантадина на основе жидкостной тандемной хромато-масс-спектрометрии может позволить существенно упростить пробоподготовку, уменьшить продолжительность работы и стоимость анализа одного образца, а также улучшить селективность и специфичность метода.

На сегодняшний день известен метод определения остаточного амантадина и римантадина в яйцах и цыплятах путем диспергирования твердофазной экстракции - сверхвысокой эффективности жидкостной хроматографии(СВЭЖХ)-тандемной масс-спектрометрии (Lin Т, Fan J, Liu X, Chen X, Li Y, Liu H Determination of amantadine and rimantadine residues in egg and chicken samples by dispersive solid phase extraction purification-ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, Se Pu, 2015 Nov; 33(11):1169-74). Данный способ разработан только для определения амантадина, в частности его остаточного содержания, в яйцах и цыплятах.

Наиболее близким техническим решением является способ определения амантадина в плазме крови с помощью жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии, в котором авторы применяли хроматограф Surveyor MS pump, оснащенный автосамплером и трехквадрупольным детектором TSQ Quantum mass, производства фирмы Thermo Electron (США), условия хроматографирования были следующими: режим элюирования - изократический, подвижная фаза состояла из воды и ацетонитрила, взятых в соотношении 60/40 (об./об.) с добавлением муравьиной кислоты (5 г/л), скорость потока составляла - 0,2 мл/мин с общим временем хроматографирования - 3 минуты; для разделения использовали хроматографическую колонку Phenomenex Luna С8, 100×2.0 мм; с размером частиц 3 мкм. Масс-спектрометрическое определение осуществляли в режиме положительно заряженного электроспрея, в режиме мониторинга выбранных реакций, с MRM переходами: m/z 152.→135.1 при нормализованной энергии соударений 22 эВ для амантадина и m/z 214.1→135.1 при 26 эВ для внутреннего стандарта. В качестве способа пробоподготовки авторами применяется простое разведение образцов сыворотки крови деионизированной водой в соотношении 1:462 (сыворотка: вода) (Arndt Т., Guessregen В., Hohl A., Reis J. Determination of serum amantadine by liquid chromatography -tandem mass spectrometry // Clin. Chim. Acta. 2005; 359:125-131). К недостаткам указанного метода, относится то, что данный способ пробоподготовки сопряжен с сильным уменьшением концентрации целевого соединения в финальном образце, что требует применения дорогостоящего масс-спектрометрического оборудования с особо высокой чувствительностью. Это делает метод недостаточно универсальным и ограничивает сферу его применения трехквадрупольными хромато-масс-спектрометрами и другими приборами со сходными характеристиками по чувствительности. Кроме того, указанный метод, согласно приведенному описанию, относится к категории микроколоночной ультра-высокоэффективной жидкостной хроматографии, что опять же ограничивает выбор хроматографов, пригодных для реализации данного метода, позволяя применять только те хроматографические насосы, которые способны развивать давление, достаточное для того, чтобы работать с ультрамелкозернистым сорбентом (с размером частиц 3 мкм и ниже).

Технический результат заявленного изобретения заключается в создании способа определения амантадина в плазме крови с высокой воспроизводимостью и точностью, и наиболее адаптированного для решения задач экспериментальной и клинической фармакокинетики.

Технический результат достигается тем, что проводят количественное определение амантадина в плазме крови путем ее анализа на наличие амантадина высокоселективным методом хромато-масс-спектрометрии, при этом хромато-масс-спектрометрию проводят с использованием матрицы в виде плазмы крови с амантадином и внутреннего стандарта, вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу - N-адамантил-гексаметиленимина, разделение продуктов экстракции проводят на хроматографической колонке 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм, при этом в качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония - раствор А и смесь ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 - раствор Б, взятых в процентном соотношении раствора А к раствору Б - 42:58, соответственно, причем разделение продуктов экстракции осуществляют с температурой 30°С и скоростью подачи элюента 0,6 мл/мин, детектирование внутреннего стандарта проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона с m/z 234.0, а детектирование амантадина проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с m/z 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV, а его концентрацию рассчитывают по формуле: С=1198, 5306×AR, где С -концентрация амантадина (мкг/мл), AR - отношение площади хроматографического пика амантадина к площади пика внутреннего стандарта..

Способ осуществляется следующим образом.

Все растворители имели квалификацию «Для хроматографии», реактивы - не ниже «ч.д.а.». Для приготовления растворов стандартных образцов использовали субстанции стандартов амантадина (адамантан-1-амин) - C10H17N с молекулярной массой: 151,249 а.е.м. (производства Sigma-Aldrich, США) и N-адамантил-гексаметиленимина (см. фиг. 1А, Б). На фиг. 1А, Б показаны структурная формула амантадина (см. фиг. 1А) и N-адамантил-гексаметиленимина (см. фиг. 1Б) В качестве биологической матрицы использовали плазму крови.

Для выделения амантадина из плазмы крови и очистки экстракта используют метод жидкостной экстракции. К образцу плазмы крови объемом 500 мкл добавляют 50 мкл внутреннего стандарта (N-адамантил-гексаметиленимина, 50 мкг/мл) и 500 мкл пересыщенного раствора бикарбоната натрия (NaHCO3, 1,14 моль/л) с целью повышения коэффициента извлечения амантадина. Затем приливают 5 мл органического экстрагента - диэтилового эфира. Образовавшуюся смесь встряхивают в течение 5 минут на вортекс-миксере Heidolph Ultra, а затем центрифугируют на скорости 3500 об/мин для разделения органического и гидрофильного слоя. Надосадочную жидкость осторожно декантируют и упаривают в центрифужном вакуумном концентраторе Eppendorf Concentrator 5301 при температуре 45°С. Полученный сухой остаток перерастворяют в 500 мкл метанола. Образец переносят в хроматографическую виалу, которую помещают в автосамплер хроматографа для дальнейшего хромато-масс-спектрометрического анализа. Раствор инжектируют в петлю хроматографа в объеме 10 мкл.

В данных условиях коэффициент экстракции для амантадина составляет 88,97±1,25%, для внутреннего стандарта - 90,96±0,93%.

Для высокоэффективной жидкостной хромато-масс-спектрометрии используют хроматограф - «Finnigan Surveyor LC Pump Plus», детектор - масс-спектрометрический детектор «LCQ Fleet MS» (квадрупольная ионная ловушка) и аналитическую колонку - обращенно-фазную колонку Hypersil Gold фирмы Thermo Scientific, США (4,6×100 мм; 5 мкм).

Масс-спектрометрическое детектирование амантадина проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с m/z 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV. Масс-спектр второго порядка для амантадина представлен на фиг. 2 А и для N-адамантил-гексаметиленимина на фиг. 2 Б (по вертикали интенсивность (Intensity) по горизонтали масса заряда (m/z).

Внутренний стандарт детектируют по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате распада молекулярного иона внутреннего стандарта с m/z 234.0. Масс-спектрометр работал в режиме регистрации ионов, положительно заряженных электроспреем (ESI), создаваемым напряжением в 5 кВ. Скорость потока газа-небулайзера (азота): 5 л/мин, давление на распылителе - 100 psi. Температура интерфейса капилляра составляла 350°С, температура нагревателя - 300°С. Амплитуда возбуждения на концевых электродах ловушки 0,1 В. В качестве демпфирующего газа в ионной ловушке используют гелий. Данные обрабатывают с помощью компьютерной хроматографической программы Xcalibur 2.1 w/Foundation 1.0.1. (Thermo Scientific, США).

Разделение осуществляют на обращенно-фазной хроматографической колонке Hypersil Gold фирмы Thermo Scientific, США, 5 мкм, 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм. Подвижная фаза состоит из двух растворов: 10 мМ ацетата аммония, (раствор А) и смеси ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 соответственно (раствор Б). Растворы А и Б взяты в процентном соотношении 58А:42Б. Работа проводилась в изократическом режиме элюирования. Скорость потока подвижной фазы составляла 0,6 мл/мин. Объем пробы - 10 мкл. Температура разделения 30°С. Продолжительность хроматографирования - 11 минут. Время удерживания аналита - 3,28±0,05 минут. Время удерживания внутреннего стандарта (N-адамантил-гексаметиленимина) - 7,28±0,05 минут.

Демонстрационная хроматограмма образца плазмы крови с концентрацией амантадина 500 нг/мл представлена на фиг. 3, на котором видна хроматограмма экстрагированного образца плазмы крови с концентрацией амантадина 500 нг/мл, верхний пик - пик аналита, нижний пик - пик внутреннего стандарта (по вертикали относительное содержание (Relative abundance), по горизонтали время (Time) в минутах).

Для приготовления калибровки готовили маточные растворы стандартов амантадина и внутреннего стандарта в метаноле с концентрациями 1 мг/мл. Раствор амантадина применяли для приготовления растворов рабочих стандартных образцов на плазме крови с концентрациями 31,3 нг/мл; 62,5 нг/мл; 125 нг/мл; 250 нг/мл; 500 нг/мл; 1000 нг/мл. Раствор внутреннего стандарта с концентрацией 1 мг/мл разбавляли в 20 раз для получения рабочего раствора внутреннего стандарта с концентрацией 50 мкг/мл. Калибровочная кривая амантадина в плазме крови показана на фиг. 4.

Количественное определение осуществляли по градуировочной зависимости для амантадина в плазме крови и рассчитывали по формуле:

С = 1198,5306×AR, где С - концентрация амантадина (мкг/мл), AR (Area Ratio) -отношение площадей пиков аналита и внутреннего стандарта. Коэффициент корреляции составил R2=0,9985, что соответствует надлежащей аналитической аппроксимации. Предел количественного определения - 31,3 нг/мл.

Точность и воспроизводимость.

Точность выражалась в виде коэффициента вариации (% C.V.) для каждой серии образцов согласно уравнению:

, где

SD - стандартное отклонение серии определений;

- среднее арифметическое значение полученных концентраций.

Воспроизводимость измерялась, как процент отклонения (%dev.) от теоретического значения по формуле:

, где

- среднее арифметическое значение полученных концентраций;

- теоретическая концентрация

Для метрологической валидации полученной методики определяют точность в течение рабочего дня. Каждый из образцов, предназначенных для контроля качества, анализировали в течение 1 рабочего дня (6 определений). Результаты представлены в таблице 1.

Относительная ошибка определения амантадина не превышала 10%. Таким образом, представленный метод обладает высокой эффективностью в проведении анализа, не требует использования большого количества химических реактивов. Высокая точность и чувствительность данного метода количественного определения амантадина в плазме крови обеспечивает идентификацию вещества с установленными характеристиками погрешности, что позволяет использовать данную методику для решения задач по изучению как экспериментальной, так и клинической фармакокинетики препарата.

Способ количественного определения амантадина в плазме крови, включающий анализ крови на наличие амантадина высокоселективным методом хромато-масс-спектрометрии, отличающийся тем, что проводят хромато-масс-спектрометрию с использованием матрицы в виде плазмы крови с амантадином и внутреннего стандарта, вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу - N-адамантил-гексаметиленимина, разделение продуктов экстракции проводят на хроматографической колонке 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм, при этом в качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония - раствор А и смесь ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 - раствор Б, взятых в процентном соотношении раствора А к раствору Б - 42:58, соответственно, причем разделение продуктов экстракции осуществляют с температурой 30°C и скоростью подачи элюента 0,6 мл/мин, детектирование внутреннего стандарта проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона с m/z 234.0, а детектирование амантадина проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с m/z 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV, а его концентрацию рассчитывают по формуле: С=1198, 5306×AR, где С - концентрация амантадина (мкг/мл), AR - отношение площади хроматографического пика амантадина к площади пика внутреннего стандарта.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к питанию грудных детей. Набор инструментов для производства персонализированной концентрированной смеси грудного молока для ребенка состоит из: как минимум одного анализатора для определения концентрации, по крайней мере одного питательного вещества и/или микроэлемента в сцеженном материнском молоке, как минимум одного устройства для селективного концентрирования по крайней мере одного питательного вещества и/или микроэлемента в сцеженном материнском молоке и как минимум одной градуированной емкости для сцеженного грудного молока и для измерения его объема, как минимум одной градуированной емкости, совместимой с устройством для селективного концентрирования грудного молока, в которую можно налить молоко, из которого будет изготовлена персонализированная концентрированная смесь.

Изобретение относится к области биохимии и молекулярной биологии, в частности к набору синтетических олигонуклеотидов. Указанный набор предназначен для определения последовательности 1 интрона, примыкающей ко 2 экзону, генов системы HLA I и II классов (HLA-A и HLA-DRB1) методом ПЦР и состоит из следующих праймеров: dr1in6s 5’-GGATCCTCCTCCAGCTCCTG-3’, dr1in2a 5’-CCGCTCCGTCCCATTGAAGA-3’, A1in1s 5’-CTCCGAACCCTCCTCCTGCTA-3’, A1in2a 5’-GCTGTCGAACCGCACGGACTG-3’.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, для прогнозирования развития преэклампсии на ранней стадии беременности на сроке 11-14 недель проводят сбор анамнестических данных.

Изобретение относится к таким областям медицины как акушерство, гинекология и репродуктология и представляет собой способ прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) при селективном переносе эмбрионов.

Изобретение относится к таким областям медицины как акушерство, гинекология и репродуктология и представляет собой способ прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) при селективном переносе эмбрионов.

Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской генетике и офтальмологии, и предназначено для ДНК-диагностики врожденной формы катаракты. Из периферической крови выделяют ДНК.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской лабораторной диагностике в онкологии, и позволяет проводить дифференциальную диагностику лихорадки неясного генеза.

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству, гинекологии, репродуктологии и иммунологии, и предназначено для прогнозирования результативности программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и гинекологии. Предложен способ выявления наследственной предрасположенности к развитию задержки роста плода у курящих женщин.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована при диагностике 5Т4-положительного рака. Способы по изобретению включают тестирование образца крови от млекопитающего, где образец крови содержит популяцию клеток, закрепление образца крови на подложке, детектирование в образце крови наличия или отсутствия ядросодержащих клеток с использованием первого маркера, детектирование наличия или отсутствия в образце крови экспрессии на клетке второго маркера, детектирование в образце крови наличия или отсутствия экспрессии на клетке третьего маркера, детектирования в образце крови наличия или отсутствия экспрессии на клетке четвертого маркера, где четвертый маркер представляет собой человеческий антиген 5Т4 и анализ первого, второго, третьего и четвертого маркеров в популяции клеток для распознавания и характеристики циркулирующих опухолевых клеток.
Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано для прогнозирования прогрессирующего течения сенсоневральной тугоухости (СНТ).

Группа изобретений относится к области определения частоты проведения анализа газового состава артериальной крови. Способ определения частоты проведения анализа газового состава артериальной крови (ABG) содержит этапы, на которых: принимают предыдущие результаты ABG-анализа; определяют исходное время для следующего ABG-анализа на основе предыдущих результатов ABG-анализа и правила из набора правил; принимают данные мониторинга; определяют уточненное время для следующего ABG-анализа на основе исходного времени для следующего ABG-анализа и данных мониторинга; и извлекают параметры степени насыщения крови кислородом на основе данных мониторинга.

Группа изобретений относится к обнаружению аналита в физиологических текучих средах. Способ определения концентрации глюкозы в крови осуществляют с помощью системы измерения глюкозы, которая включает тест-полоску и измерительный прибор, причем измерительный прибор имеет микроконтроллер, запрограммированный для приложения множества тестовых напряжений к тест-полоске и измерения выходного переходного токового сигнала, который является результатом электрохимической реакции в камере для анализа тест-полоски, причем способ включает: вставку тест-полоски в разъем порта для установки полоски измерительного прибора для соединения по меньшей мере двух электродов тест-полоски с цепью измерения полоски; запуск последовательности анализа после нанесения пробы; приложение первого напряжения в течение первого промежутка времени и измерение первого выходного значения тока; переключение первого напряжения на второе напряжение, отличное от первого напряжения; изменение второго напряжения на третье напряжение, отличное от второго напряжения; измерение второго выходного значения тока переходного токового сигнала с электродов после изменения со второго напряжения на третье напряжение; оценку третьего тока, близкого к выходному значению установившегося тока переходного токового сигнала, после установки третьего напряжения на электродах; вычисление концентрации глюкозы в крови на основе первого, второго и третьего выходных значений тока переходных токовых сигналов с помощью заданного соотношения.
Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии. Для оценки степени тяжести пациентов с острой кровопотерей при травматических повреждениях печени определяют частоту сердечных сокращений (ЧСС), уровень артериального давления, значения гемоглобина, гематокрита и количество эритроцитов.

Изобретение относится к судебной медицине и представляет собой способ посмертного определения наличия периода жизни после перенесенного инфаркта миокарда у лиц пожилого и старческого возраста в случаях, когда причиной смерти явился инфаркт миокарда, путем определения и анализа динамики веществ низкой и средней молекулярной массы в моче, отличающийся тем, что производят забор мочи и исследуют в ней вещества низкой и средней молекулярной массы на длинах волн 239-298 нм с шагом 4 нм, определяют наличие пика на длине волн 274-278 нм, что свидетельствует о наличии периода жизни после перенесенного инфаркта миокарда, а его отсутствие свидетельствует, что смерть наступила мгновенно.

Изобретение относится к акушерству и предназначено для прогнозирования преждевременных родов путем определения в периферической крови беременных уровня активности каталазы.

Группа изобретений относится к области отделения плазмы и/или сыворотки от крови. Система для отделения плазмы и/или сыворотки от крови содержит: фильтр, выполненный с возможностью отделения плазмы крови или сыворотки от некоторого количества крови, при этом фильтр имеет входную сторону и выходную сторону; канал, выполненный с возможностью сбора отделенных плазмы крови или сыворотки на выходной стороне фильтра; порт для анализа, расположенный в канале, выполненный с возможностью удерживания некоторого количества плазмы или сыворотки в процессе анализа плазмы или сыворотки; и источник давления, выполненный с возможностью сообщения с каналом таким образом, что по меньшей мере часть плазмы крови или сыворотки на выходной стороне фильтра направляется в порт для анализа.

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к устройствам для регистрации процесса свертывания крови, преимущественно к тромбоэластографам. Анализатор коагуляции - тромбоэластограф - содержит кювету 1 с исследуемой жидкостью 2, погруженный в кювету поплавок 3, установленный на штоке с возможностью совершения возвратно-поворотного перемещения, жестко связанные со штоком поплавка датчики вращающего момента 4 и угла поворота 5, последовательно соединенные усилитель 6, фазовый детектор 7 и регистрирующее устройство 8, а также генератор синусоидальных колебаний 9, связанный с датчиком угла поворота 5 и фазовым детектором 7.

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к устройствам для регистрации процесса свертывания крови, преимущественно к тромбоэластографам. Анализатор коагуляции - тромбоэластограф - содержит кювету 1 с исследуемой жидкостью 2, погруженный в кювету поплавок 3, установленный на штоке с возможностью совершения возвратно-поворотного перемещения, жестко связанные со штоком поплавка датчики вращающего момента 4 и угла поворота 5, последовательно соединенные усилитель 6, фазовый детектор 7 и регистрирующее устройство 8, а также генератор синусоидальных колебаний 9, связанный с датчиком угла поворота 5 и фазовым детектором 7.

Изобретение относится к применению коагулирующих композиций, содержащих в основном выделенные или по меньшей мере частично очищенный активатор протромбина змеиного яда, а также к контейнерам, содержащим указанные коагулирующие композиции, и к родственным способам применения.9 н.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и иммунологии, и может быть использовано для выявления нарушения у детей иммунологической реактивности в условиях избыточной экспозиции стронцием. Для этого проводят отбор пробы крови у ребенка с определением в ней содержания стронция, а также пробы буккального эпителия с выделением дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК). Затем на детектирующем амплификаторе с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени проводят генотипирование полиморфизма генов TLR4 и HLA-DR, используя в качестве праймера участок ДНК путем исследования генотипов гена TLR4 A8595G (rs1927911) и гена HLA-DR С/Т (rs3135388), устанавливая при этом для каждого из указанных генов одно из следующих его состояний: гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное. При одновременном выполнении следующих условий: наличие вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена TLR4 A8595G (rs1927911) и/или гена HLA-DR С/Т (rs3135388) и превышении концентрации стронция в крови выше референтного уровня на 20% диагностируют у ребенка наличие нарушений иммунологической реактивности в условиях избыточной экспозиции стронцием. Способ позволяет обеспечить точность оценки влияния стронция на наличие нарушения иммунологической реактивности, с обеспечением возможности в последующем судить о развитии аутоиммунных и атопических состояний у детей уже на ранних стадиях их формирования. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии, и предназначено для количественного определения амантадина в плазме крови. Для количественного определения амантадина в плазме крови осуществляют анализ крови методом хромато-масс-спектрометрии. Хромато-масс-спектрометрию проводят с использованием матрицы в виде плазмы крови с амантадином и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу - N-адамантил-гексаметиленимина. Разделение продуктов экстракции проводят на обращенно-фазной хроматографической колонке 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм. В качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония - раствор А и смесь ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 - раствор Б в соотношении А:Б - 42:58. Разделение продуктов экстракции осуществляют с температурой разделения 30°С и скоростью подачи элюента 0,6 млмин. Детектирование внутреннего стандарта проводят по дочернему иону с mz 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона с mz 234.0. Детектирование амантадина проводят по дочернему иону с mz 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с mz 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV, а его концентрацию рассчитывают по формуле: С1198, 5306×AR, где С - концентрация амантадина, AR - отношение площади хроматографического пика амантадина к площади пика внутреннего стандарта. Способ обеспечивает высокую воспроизводимость и точность количественного определения амантадина в плазме крови. 4 ил., 1 табл.

Наверх