Способ определения 1-амино-4,8-дисульфокислоты нафталина мононатриевой соли в биологических жидкостях

 

Союз Советских

Соцмапмстическнх

Респубпкк

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву(22)Заявлено 31.12.80 (21) 3227731/28-13 (5I)M. Кл.

G 01 N ЗУ48 с присоединением заявки МВиударстесииый комитет

СССР по делам иаа4ретеиий и открытий (23) П рноритет

Опубликовано 15. 1 О, 82. Бюллетень М 38

Дата опубликования описания 15 . 10 .82 (53) УДК 616.0 j (088. 8) Н.В.Зайцева, Л.Н.Шестопалова и А.В.Ми

1 (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

Пермский политехнический институт (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 1-АМИНО-4%8-ДИСУЛЬФОКИСЛОТЫ

НАФТАЛИНА МОНОНАТРИЕВОЙ СОЛИ В БИОЛОГИЧЕСКИХ

ЖИДКОСТЯХ

Изобретение относится к медицинским токсикологическим исследованиям, в частности, санитарной токсикологии. и может быть использовано для количественного определения l-амино-4,8дисульфокислоты нафталина монанатриевой соли в биосредах, например, в крови.

Известен способ определения в крови первичных аминов, к которым относится и данное соединение, путем предварительной подготовки отобранной для анализа пробы, обработки ее

3/-ным раствором фенола и гипохлорита натрия с содержанием 1Ф-ного ак" тивного хлора с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора (1 .

Недостатком способа является его невысокая чувствительность (.1 мг/л1 °

Цель изобретения состоит в повышении чувствительности способа.

Поставленная цель достигается способом определения l-амино-4,8дисульфокислоты нафталина мононатриевой соли в биологических жидкостях, включающим обработку анализируемой пробы окрашивающим реагентом и фотометрирование полученного окрашенного. раствора, причем в качестве окрашивающего реагента используют

1о спиртовой раствор и-диметиламинобензальдегида и кислого сернокислого ка лия, смешанных в эквимолекулярных количествах,а обработку им ведут при рН 6,5-7,5.

О количестве исследуемого вещества судят по .величине оптической плотности.

При взаимодействии анализируемого указанным окрашивающим реагентом

20 образуется соединение, окрашенное в ярко-желтый цвет, которое фотометрируют при длине волны 457 нм и толщине поглощающего слоя 1 см.

96659

Способ осуществляют следующим образом.

К 1 мл исследуемой пробы (после предварительной подготовки биологического материала для анализа) при

pk = 6,5-7,5 добавляют 1 мл 14-ного спиртового раствора цветореагента, приготовленного растворением в 504ном этиловом спирте навески смеси эквимолекулярных количеств и-диметил 1о аминобензальдегида и кислого сернокислого калия. Содержимое пробирки перемешивают. Через 15-20 мин измеряют оптическую плотность окрашенного раствора на спвктрофотометре при д длине волны 457 нм, толщине поглощающего слоя 1 см. Установлено,что максимум поглощения полученного окрашенного соединения соответствует 457 нм.

На графике приведена калибровочная кривая для определения концентрации амино-С-кислоты в координатах: оптическая плотность - концентрация.

При концентрациях в диапазоне 0,13 мг/л существует. линейная зависимость оптической плотности от концентрации амино-С-кислоты. Минимальная концентрация амино-С-кислоты, которую можно определять, состав4 4 ляет 0,1 мг/л. Оптимальный температурный режим 18+3,0 С. Концентрация определяемого вещества в стандартном растворе 1 мг/мл.

Пример . Анализируют пробы крови с содержанием амино-С-кислоты

0,2; 0,8; 1,5; 2,0 мг/л.

К 1 мл исследуемой крови добавляют 1 мл 101-ного раствора трихлорук сусной кислоты для осаждения белков.

После центрифугирования пробы для последующего анализа берут 1 мл надосадочной жидкости, добавляют 0,1 мл

5 -ного раствора углекислой соды. (рН = 6,5-7,5). После перемешивания к содержимому добавляют 1 мл 14-ного спиртового раствора цветореагента, приготовленного растворением в 503ном этиловом спирте навески смеси эквимолекулярных количеств п-диметиламинобензальдегида и кислого сернокислого калия. Содержимое пробирки перемешивают, через 15-20 мин проводят измерение оптической плотности окрашенного раствора на. спектрометре при длине волны 457 нм и толщине поглощающего слоя 1 см.

Результаты выполненных анализов приведены в таблице (см.стр.6).

966594

I

I Я

1 L0

1 З о

I

1

I

I

I

1

1

1

I

1

1

1

1

I с

1 с

1 Е

1 °

I ОС

1 S

1 lg

1 О.

1- I.Z

1 Ф

I "М

1 Х

1 Ь

I

1

СО

Ф(>l

t

1 С>!

1 X

1 tL

I (С

1 СС

I Э

I О. о

I 1

1- 1

Z а!

=Г I

Х I

>X t

X I

X l I л >О 1

Е а l

Ф

Щ с

Э

СХ

Э

О. с о!

1» л о л

Ю м

Ю

1

1 >О

1 Е

1 Э

I

t Э

1 СЕ

I Э а с о

1 м <л

CV л л о о

C»I

3»3 а О

° — CO л л

C»31

) (С

1 <О

Х

I Z

I >О

I С(.

I >t3

1 (О

<Ч

СО

CD о

С»3

1

1

1 >О

1 (3

I X

1 О

1 г

I

1 3>3

I X

1 CIi

1 13:

1 Х

1 Cf

Э

I а о

I.

I

1.

I

1

1

Э

3Е (С

Э s а х

C Э

0 С.

l

1

1

1

I

1

I л

1

IФ

3С с

Ф

<й

1 Э а с

О

1 ! Ф CC:

x >s .о X

Э >О

3с а

С 1

Ф Z сЕ Э

Ф а Х с о о ы

СО о

С4

3Ф

Э

3Е

Э а

О

0О л

LA Я3

О1 л

С»3

1»3 л

С»3

Э (С и

С4 л ! о

1

СО о о

С»3

1

1

1

1

1

1

I

1

1

I

1

I

1

l0 I

О 1 О

U 1

О 1 О !

" I X

О 1 Э

I CQ о

C 1 3О

Б 1 С3. а! о а

С 1 С: о

М 1

I I

3 3 1

I 1

Z, 1

>33 I

3(С 1

S 1

Х 1

Ф 1

cf I

Ф 1 а

C I о

1

1- 1

СС3 1 ,I- I

А> I с

:л>

3>3 1

Э 1

С>

I

1

1

I

1:>>

1 о

1 Х

1 1о

1 Э

1 1О

1 Э

1 Лл

I 1

1

1

1

1

1 1

i 1, I 1

1 I (С

1 . I 3О

1 1

1 I Ф

1 С I IX, I I 1

1 3 I Э

1 Е I CZ

1 1 Э а

>с! С

К(О

=т

1 <О

I CL I (С

3- 1 3О

Z t Z

Э 1 Z

1 «Г I >33

1 Z I CX

О 1 е

I 3

I t

Э I с 1

Э I

ct

Э 1 а (с

1 о *

Ю >.О 1 » л о о о о О МЪ

СО Л

° л л л о о о о

I

I

I

I

1

1

I

I

I

1

1

I (1

1

I

Е 1

Ю 1 с4 1

1

1 !

1

1

I

I

I

I

1

1

I

1

I

1

1

1

3

I

1

1

1

I

1

1

1

I

I

1

3Л 1

3»3 3 л

1»3 I

1

I

I

1

ВНИИПИ Заказ 7835/62 Тираж 887 Подписное филиал ППП ."Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

7 96659

Технико-зкономическая эффективность способа заключается в том, что он позволяет определять амино-Скислоту в биосредах, например в крови, в концентрациях на уровне гигиенических нормативов (0,1 мг/мл), что дает воэможность изучать токсикодинамику данного вещества и поведение его в организме теплокровных животных и человека в минимально ю действующих концентрациях. формула изобретения

Способ определения 1-амино-4,8дисульфокислоты нафталина мононатриевой соли в биологических жидкостях путем обработки пробы окрашивающим реагентом с последующим фотометрированием полученного раствора, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в качестве окрашивающего реагента используют спиртовой раствор Il-диметиламинобензальдегида и кислого сернокислого калия, смешанных в эквимолекулярных количествах причем обработку осуществляют при оН 6,5-7,5.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Быховская M.Ñ., Гинзбург С.Л., Хализова О.Д. Методы определения вредных веществ в воздухе и других средах, N., Медгиз, 1961, ч.ll, 16р167.