Способ приготовления пластин для тонкослойной хроматографии липидов

 

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ, ПЛАС1ТИН ДЛЯ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ЛИПНДОВ путем нанесения на подлокку тонкого слоя сорбента, состоящего из смеси силика1 Д я, гипса, сульфата аммония н соединений «еди о т л и ч а ю щ и и с я тем, что, с целью повыЕоения чувствительности анализа и ускорения процесса npriroтовления пластины, соединения меди вносят в виде ацетата меди пря cns , дунвдем соотноыении коАоюнентов, . мас.%.: , . . , . . Гипс7-8 . Сульфат аммония 10 Ацетат меди 5-7 Силикагель .Остальное

СО)03 СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

3Ш 001 и 33 48 —-f

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЙ .

И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3341890/28-13 . (22) 08.09.81 (46) 15.11.83- Бюл. М 42

30 (ОСЩРжТВЕННЦй НОМИТЕТ СССР

А6 ДЕЛАМ И306РЕТЕНИЙ И OTHPbITHA (72) Ю.A.ÑóëTàíîâè÷,. A.II.Íå÷àåç и Н.И.Моролева (74) Иосковский ордена Трудового

Мраснаго Знамени .технологический

iинститут ницевой промиыпенности . (53).:613» 11/12 (088. 8) (56) 1. Хроматография в тонких слоях. Под ред. З.Шталя. M., "Мир", 1965, с. 150-162..

2. Авторское свидетельство СССР по эаявке В 296759/23-04, кла @. 01 N 31/08 1980 и и

„„SU„„1054784 A (54) (57) СПОСОБ ПРИГОТОВЛКНИЯ, НЛАСi THH ДЛЯ ТОНМОСЛОИНОИ ХРОМАТОГРАФИИ липЦЦОВ путем нанесения на подлоику тонкого слоя сорбента, состоящего иэ смеси силикагеля, гипса, сульфата аммония и соединений меди, о т л и ч а ю ц и й. с я тем, что, с. целью. повмаения чувствительности аналиэа и ускорения процесса приготовления пластины, соединения меди вносят в виде ацетата меди при следумцем соотношении компонентов, мас.Ъ|

Гипс. 7-8

Сульфат аммония 10

Ацетат меди 5-7

Силика гель . Остальное Е

Р

1054784

Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способам количественного определения группового срстава липидов с использованием метода тонкослойной хроматографии. 5

Известен способ определения группового состава липидов путем тонкослойного хроматографического разделения на пластинах из силикагеля,, импрегнированного сульфатом аммония, 1О с последуюцим проявлением разделенных фракций липидов. Проявление разделенных фракций липидов осуществляется за счет выделяющейся при термо« деструкции сульфата аммония серной 25 кислоты 51).

Недостатком этого способа является его относительно невысокая точно ст ь

Наиболее близким к предложенному по ахнической сущности и достигаемому результату является способ определения группового состава липидов, включаюций приготовление сорбента из сииикагеля, гипса, сульфата аммония и катализатора окиси меди, нанесение сорбеита на пластинки, их активирование, тонкослойное хроматографическое разделение анализируемых веществ иа пластинках с сорбентом и проявление разделенных фракций липидов при нагревании (2).

Недостатком указанного способа является трудоемкость и длительность процесса введения катализатора в состав сорбента, что связано со свой 35 ствами окиси меди, представляющей собой порошок нерастворюай в воде.

Цель изобретения - повышение чувствительности анализа и ускорение 4Р процесса приготовления пластин.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу приготовления пластин для тонкослойной хроматографии липидов путем нанесения на 45 подложку слоя оорбента, состоящего из смеси силикагеля, гипса, сульфата аммония и соединения меди, соединение меди вносят в виде ацетата меди.при следующем соотношении RoM- 5p понентов, мас.Ф:

Гипс 7-8

Сульфат аммония 10

Лцетат меди 5-7

Силикагель Остальное

Способ осуществляют следующим образом.

Для приготовления сорбента на

10 пластин берут 1,05 r силикагеля

0,105 г гипса и тщательно растирают их в фарфоровой ступке, добавляют

0,16 г сульфата аммония и 0,0735 г (7В от веса силикагеля )ацетата меди, растворенного в 7,5 мл дистиллированной воды. Суспензию еще раз расти рают и сливают в пробирку с притертой пробкой.

Перед нанесением на пластинки суспензию встряхивают. На каждую пластинку наносится 0,75 мл суспензии. Пластинки сушат при комнатной температуре а затем активируют в термостате при 110-120ОС в течение часа. высушенные пластинки хранят в эксикаторе над CaCi

На пластинки наносят 1 мкл 2Ъ-ного раствора липидов в хлороформе и проводят тонкослойное хроматографи-. ческое разделение в системе раство-. рителей гексан: диэтиловый эфир: уксусная кислота в соотношении 80

20 : 1 соответственно. Проявление разделенных фракций липидов проводят в термостате при 280 С.

i2 р и м е р 1. Приготовление пластинок проводят по указанному методу, но ацетат меди добавляют в концентрации 2.,5, 7 и .10 вес.Ъ. На пластины наносят маргариновую кислоту (A ) и стеариновую кислоту (Б ). Проявление разделенных фракций проводят при 220, 280 и 320 С.

На чертеже представлена диаграмма изменения значений интенсивности окраски маргариновой (А !и линоленовой (Е ) кислот в зависимости.от температуры проявления разделенных фракций липидов и содержания ацетата меди в составе сорбента:(цифрами .у столбиков показано содержание ацетата меди в сорбенте, вес.В ).

Из диаграммы видно, что оптимальные результаты получены при содержании ацетата меди в составе сорбентаравном 5-7% от веса силикагелъ и температуре проявления 250-280 С.

При температуре проявления ниже

250аС не достигается максимального значения интенсивности окраски фракций липидов. При температуре выше

280 С наблюдается снижение значений интенсивности окраски, что связано с окислением фракций лиПидов до СС(.

Пример 2. Определение груп« пового состава липндов микроорганизмов рода Candida scotti, Пластины приготовляют, активируют и хранят по указанному методу. Весовое соотношение ингредиентов на 10 пластин 0,973 г силикагеля 0,128 г гипса, 0,089 г сульфата аммония и

0,089 r (7% от веса сорбента ) ацетата меди. Наносят 1 мкл 2%-..ного раствора липидов в хлороформе. Результаты анализа представлены в таблице.

B таблице приведены также результаты анализа фракций триглицеридов и эфиров стеринов липидов пшеницы и липидов микроорганизмов рода Cand ida

scotti, полученные по способу, принятому эа прототип, а также методом жидкостной хроматографии.

1054784

----« - ---1----

Содержание компонентов, Ж, определенных по способу

МФ

Предложенному .

Известному (жидкостной хроматографии

Компоненты липидов

Прототипу

19,08

25,33

55,69

" суммарная интенсивность .отклика 678

""суммарная интенсивность отклика 2486 позволяет упростить и ускорить про20 цесс определения группового состава липидов за счет сокрашения времени ! при приготовлении сорбента в

6 раз (время приготовления сорбента согласно базовому спсообу

25 30 мин).

Как видно иэ таблицы, все этиданные хорошо согласуются, a,ñóììàð.ная интенсивность отклика по пред° лагаевюму способу увеличивается, что ведет к повышению точности измерений.

Использование изобретения по сравнению с базовым (прототипом) Составитель В, Котелевцев

Редактор О. Колесникова Техред ТФанта Корректор О.Тигор

««» ««« « «««ФЮ««««««

Заказ 9099/52 Тираж 873 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

««« . Филиал HIHI "патент", r. ужгород, ул. проектная, 4

Триглицериды, Эфиры стеринов

Остальное

23,52

30,05

46,43

25,22

27, 37

47,41