Способ диагностики острого сепсиса

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО СЕПСИСА путем иссп€и1ования крови, о тли чающий с я тем, что, с целью ускорения диагностики и повышения |ее точности, кровь разделяют в градиенте фикол-уротраста, выделяют фракцию с. плотностью 1,065-1,080 г/л, далее выявляют в ней лимфоци ты с наличием участков синтеза рибонуклеи.новой кислоты в ядрышках и при повьвиении их количества на 10-20% по сравнению с нормой диагносцируют острый сепсис.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) 3(5П А 61 В 10 00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

AO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗО6РЕТЕНИЯ н автавсномм сиидетвъствм (21) 3471981/28-13 (22) 13.08. &2 (46) 15. 12.83. Бюл. В 46 (72) И.И.Дзержинская (71) 2-й йосковский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова (53) 616.07 (088.8) (56) 1.Бакулина И.A. Краева Э.Л.

Микробиология. М., Медицина, 1980, с. 229-26 3 ..

2.0еменова Ю.М. Методы лабораторных клинических исследований. М., Меди-. цина, 1972, с. 190-230 (прототип) . (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО

СЕПСИСА путем исследования крови, о т. л и ч а ю шийся тем, что, с целью ускорени я диагностики и повышени я

jee точности, кРовь разделяют в градиейте фикол-уротраста, выделяют фрак-: цию с плотностью 1,065-1,080 г/л, далее выявляют в ней лимФоциты с наличием участков синтеза p%. çîíóêëåè.- новой кислоты в ядрышках и прн повыаении их количества на 10-20Ъ по сравнению с нормой диагносцируют острый сепсис.

1060172

Изобретение относится к клинической биохимии и может быть использовано для диагностики острого сепсиса.

Известен микробиологический спо" соб диагностики, сепсиса. Метод заключается в посеве крови на питательные .среды, выделении чистой культуры возбудителя и его идентификации. Определение вида и типа возбудителя производят по ряду признаков: морфологии способности окрашиваться различ- о ными красителями (тинкториальные свой. ства) „- характеру ро" та на. искусственных питательных средах (культураль ные свойства), ферментации углеводов и белков (биохимические свойства) . 15

Окончательно. принадлежность выделенной культуры к определенному виду (типу) микроорганизмов устанавливают после изучения антигенной структуры„ используя различные иммунологичес 70 кие реакции (агглютинации, преципитации, нейтрализации и др;) .

В первый день кровь засевают на чашки с агаром Посевы выдерживают в термостате при 37 С 18-20 ч. На второй день просматривают колонии, делают мазки, Микроскопируют колонии, окруженные зоной гемолиэа, отсевают в пробирку с бульоном. На третий день учитывают характерный рост и проводят определение серологической группы, изучают, определяя признаки патогенности. В зависимости от всех этих качеств культивирование продолжается 5 — 7 дней jl) .

Известен также способ диагностики сепсиса путем клинического анализа крови. В мазках крови наблюдают лейкоцитаз с нейтрофилезом, ядерный сцвиг влево за счет миелобластов,мие:лоцитов; анемию гипохромного типа. 40

Однако аналогичные изменения бывают при любом тяжелом воспалительном процессе и, следовательно, этот способ не может быть специфическим при данном заболевании )ZJ . 4s

Известные способы характеризуются недостаточной точностью, малой информативностью, длительностью исследования, в тр время как сепсис может воэ-50 никнуть практически при любом бактери" альном заболевании, лечебных и диагностических манипуляциях, и летальность составляет 35 — 71% °

Цель изобретения - ускорение диаг- 55 ностики и повышение ее точности .

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагностики острого сепсиса путем исследования крови кровь разделяют в градиенте фикол- 60 уротраста, выделяют фракцию с плотностью 1 065-1,080 г/л, далее выявляют в ней лимфоциты с наличием участков синтеза рибонуклеиновой кислоты (РНК) в ядрышках и при повышении их количества на 10-20В по сравнению с нормой диагносцируют острый сепсис.

Способ осуществляют следующим образ ом.

В силикониэированнуюпробирку на

3 мл фикол-уротраста с плотностью

1,065-1,080 г/л наслаивают 3 мл цельной крови, взятой у пациента, центрифугируют при 4 С и 1500 об/мин в течение 20 мин. Получают чистую популяцию лимфоцитов. Взвесь клеток наносят на предметное стекло, сушат, красят 30 мин, считают 100 лимфоцитов и вычисляют процент лимфоцитов с наличием участков синтеза РНК (активирован ных) . С од ержани е акти виро в ан ных лимфоцитов (MI) у практически здорового человека 2 o-. .l р и м е р 1. Больной A. поступит в клинику по поводу мочекаменной болезни, состояния после ушивания дефекта правого мочеточника.

Больному произведена операция удаление камня из правого мочеточника.

Через месяц после операции мочевой затек забрюшинного пространства. На экскреторных урограммах функции почек удовлетворительная, пассаж мочи не нарушен, структура чашечно-лоханочной системы не изменена. В верхней трети правого мочеточника имеется дефект примерно 3 см. Больному произведена срочная операция - ревизия забрюшинного пространства справа, вскрытие мочевого затека, нефростомия, ушивание дефекта верхней трети мочеточника, дренирование забрюшинного пространства.

У больного после операции берут кровь.

Б силиконизированную центрифужную пробирку на 3 мл раствора фикол-уротраста пло.."-ностью 1,080 г/л наслаивают 3,0 мя крови, центрифугйруют при 0 С и 1000 об/мин в течение

О

15 мин, считают в иммерсионной системе микроскопа 100 лимфоцитарных клеток. В исследуемой крови содержание MI ЗЪ. Количество АЛ близко к норме с егментоядерных нейтрофилов

3720 в 1 мкл (60%), эозинофилов 62 в 1 мкл (lrI), лимфоцитов 1738 в 1 мкл (28%), моноцитов 1736 в 1 мкл -(10%) .

С первых дней после операции правая почка перестала функционировать, что подтверждено данными йефросцинтиграфии, У больного на 18 сутки после операции температура поднялась до

38,4 С, озноб. Область почки безбоо лезнена. Рекомендовано провести исследование крови на содержание АЛ.

Проводят наслаивание крови на градиент фикол-уротраста плотностью

1 075 г/л и центрифугированием при

4 С, 1500 об/мин в течение 10 мин.

Содержание)АЛ 11%. Дано заключение — у больного острый сепсис. В тот же день . взята кровь на посев.

1060172

На ангиограмме обнаружен тромбоз справа, релюмботомия, декапсуляция артерии enaбз справа. Больному про- нижнего полюса правой почки. изведена срочная нефрэктомия., В послеоперапионном периоде суб;

Через семь дней получены реэуль- фебри=:ьная температура. В крови лей-. таты посева кРови. ОбнаРУжена „ишеч- коциты до 9000 в 1 мкл. Боли в об- ная палочка и сапрофиты. повторный 5 ласти почки, слабость. через 10 дней анализ крови показывает, что процент состояние больной беэ положительной

АЛ составляет 11%,лейкоциты 9250 в динамики.

1 мкл, палочкоядерные нейтрофилы В силикониэированную пробирку на 92,5 в 1 мкл (1%), сегментоядерные РаствоР фикол-уротраста r плотностью нейтрофилы 4995 в 1 мкл (54%), лимфо- 10 1,070 r/ë наслаивают 3 мл крови, циты 3977, 5 в 1 мкл (4 3%), моноциты центрифугируют при 0 С, 1000 об/мин

185 в 1 мкл (2%) . Температура 38 в течение 10 мин, просчитывали 100

39 С по вечерам. лимфоцитов.

Больному назначен декарис по

150 мг день, общая доза 600 мг. Количество АЛ 19%, диагностируют

Через 4 дня процент MI равен 5. остРый сепсис. IIpH этОМ сОДЕРжание

Лейкоциты 9100 в 1 мкл„палочкоядер- в 1 мкл лейкоцитов 9300, палочкоЯных нейтрофилов 91 в 1 мкл (1%), дерных нейтрофилов 558 (63), сегменсегментоядерных нейтрофилов 5551 тоядерных нейтрофилов б 510 (70%), (53%), зозинофилов 637 в 1 мкл (7Ъ), y() зозинофилов 93 (1Ъ), лимфоцитов 186 лимфоцитов 2912 в 1 мкл (3?%), моно- (20%) ° моноцитов 219 (ЗЪ) т При посецитов 637 в 1 мкл (7Ъ) . ве крови роста микроорганизмов нет.

Температура по вечерам 37 — 37,5С. Больной ) назначена усиленная антиВ последующем больному были про . бактериальная терапия, однако половедены еще два курса декариса и уси- р5 жительной динамики нет, наступила лена противовоспалительная терапия смерть. Патоморфологический диагноз: в течение месяца. Количество MI 23, причин а смерти сепси с, се-..тическ ая лейкоцитов 5600 в 1 мкл, палочко- интоксикация, менингит. ядерных нейтрофилов 22,4 в 1 мкл, сегментоядерных нейтрофилов 2 85 б

Таким образом, несмотря на то, в 1 мкл (51%), зоэин филов 56 30 о осев кРови окаэалсЯ отрицатель1 мкл (1%), лимфоцитов 1904 в 1 мкл (34%), моноцитов 560 в 1 мкл (10%) . тельствовал о наличии острого сепсиса, При посеве крови роста нет. Состоячто было подтверждено при патсморфо ние больного удовлетворительное

Э логическом исследовании.

35 ри Гнойно-воспалительных осложчто содержание форменных элементов нениях процент АЛ не превышал 63, было в норме и по клиническим данным нельзя отдифференцировать воспалительный процесс от сепсиса, тем че менее содержание активированных лим- 40 фоцитов свидетельствует о наличии острого сепсиса который развился вследствие тромбоза артерии гйлобэ, что потребовало срочной нефрэкто и. о е имел диагностической ценности.

Данн е посева подтверди н чие 45 Всего обследовано 230 больных. микроорганизма в крови.

Из них 55 з них 55 больных — реципиентов трупной аллопочки. У 17 (30,9t) больных

Приме 2Бо е р . ольная О. постус помощью метода АЛ установлен у пила с диагнозом: всех сепсис (100%) . Посев крови окаострый правосто- l зался положительным у 5 больны ронний. пиелонефрит, бактериемйч Мский . 50 ьным у больны шок, мочеточниково-влагалищный свищ (23,5%), кото ыч,ал р удален тран спланправой почки. У больной бе т свищ тат и получена положите .":"::я те .": . динамиберут ка в лечении, 12 умерло. На секции на аство кровь в силиконизированную пробирку у всех подтве жден р ено, то смерть натью 1065глн а раствор Фикол-уротраста с плотнос- ступила вследстви . у 9" г/л наслаивают 3 мл крови, 55 больных с хронической почечной нецентрифугируют при 0 С и 1000 об/мин достаточностью (ХПН) в течение 15 в терминальной мин, взвесь клеток кра- стадии сепсис развился 23 сят 15 мин . Соде жанн е . я у больных цитов 5200 в 1 ержание АЛ 4%, лейко- . (32/). С помощью изобретения выявлен

1 мкл, палочкоядерных сепсис у 26 больных (90,3Ъ) . Посев нейтрофилов 52 в 1 мкл(1%),сегменто- 60; крови положительный у 15 больных ядерных нейтрофилов 3224 в 1 мкл (58%) . ольны 62%), зозинофилов 5? в 1 мкл (1%), ологич

% . 123 больны лимфоцитов 1352 1 цито 520 1 в мкл (26%), моно- ное з урологическими заболеваниями . Основ-, в в мкл (10%) . 4/)Y 1981 г е з аболевание осложнилось сепси сом произведена операция — пиелостомия у 26 больных (21%) . AJI положительны

ые я 65 у 26 больных (100 ) . Посев крови по--:

1060 172

Составитель Н.Хрусталева

Редактор Т.Веселова Техред М Тепер

Корректор Л. Патай

Заказ 9899/3 Тираж 713

ВНИИПИ Государственного камитета СССР по делам изобретений и открытий:

113035, Москва, Й-35, Раумская наб., д.4/5

Подписное филиал ППП Патент, г. ужгород, ул. Проектная, 4 ложительный у 14 больных (53,8%) .

Летательный исходом закончилось заболевание среди реципиентов трупной аллопочки у 12 больных (70,6%), среди больных ХНП - у 6 больных (21,4%), среди урологическнх больных - у 2

5 (7 у7%) .

Способ является информативным и точныа, позволяет диагностировать на- личие сепсиса и тем самым дает возможность своевременно внести коррекцию в лечение, сократить сфок лечения и уменыають летальность при столь серь" езном осложнении.