Бензотиазолиламид 4-нитро-n-(4-этоксифенил)антраниловой кислоты, проявляющий противовирусную активность

 

Изобретение касается бензотиазолип-замещенных соединений, в частности бензотиазопипа .-a.:-a.w-----.- ..L мида 4 -нитpo-N-(4-этoкcифcнил)aнтpaнl1ПOЗoй кислоты (БАК), который проявляет протисовирусчую активность, и может быть использовано в медицине Для выявления новой SKTMBHOCTW среди соединений указанного класса получен новый Б - К Синтез его ведут из 4-нитpo-N-(4-этoкcифeilил)aнтpг чилoвoй кислоты и тионилхлорида при чагренании с последующей обработкой 2-аминобг нзотиезолом Выход 74%. т.па 182-184°С. Испытания БАК показывают , что он тормозит репрсд хцию R .ipyca ccii ,- кулярного стоматита, имеет лу-:ший, чем рибач идил, химиотерапевтический индекс i-i может ouri:, нелользован в терапии р.лбдовирусмых инфекций

(В) SU (11) 1340076 АМ

51 5 С07 D27 З1„ .а5 ()

С()К)3 СОВЕТСКИХ

С(ЩИЛЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕППОЕ ПАТЕИТ11ОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕИТ СССР)

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4002310/04 (22) 3012.85 (46) 30.1293 Бюл. Мя 47-48 (71) Харьковский фармадевтичесхий институт; Новосибирский государственный медицинский институт (72) Гайдукевич А.Н„ Микитенко ЕЕ. Левитин E,ß.

Яворовская В Е; Евстропов АН. (54) БЕНЗОТИАЗОЛИПАМИ4 4 — НИТРОР(-(4-ЭТОКСИФЕНИЛ)АНТРА НИЛОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНУЮ АКТИВНОСТЬ (57) Изобретение касается бензотиазолип-замещенных соединечий, в частности бензотиазопиламида 4 -нитро-N-(4-этоксифенил)антоаниловой кислоты (6AK), который проявляет протнвовирусчую активность, и может быть использовано в меди .ине

Дпя выявления новой активности среди соединен:.й указанного класса получен новый Б — К Синтез его ведут из 4-нитро-N-(4-этоксифенил)антрачиловой кислоты и тионилхлорида при нагревании с посп.— дующей обработкой 2-аминобензотиазопом Выход 7496, тпп. 182 — 184 С. Испытания БАК показывают, что он тормозит репродукцию вируса;ъ;— кулярного стоматита, имеет лу-,ыий, чс риб; .;ндил, химиотерапевтический индекс и может б,л, использован в терапии рабдовирусных инф;-..r,, èé

1340076

И зобов гение относится к новому биоло;ич "..ал активному соединению, а именно к бензотиазолиламиду 4-нитро-«ч-(4-этоксифенил)антраниловой кислоты, проявляющему прстивовирусную активность, которое

:- <ожет найти применение в медицине.

Цель изобретения — выявление новых свойств в ряду производных N-фенилантраниловой кислоты.

Пример. Бензотиазолиламид 4-нитpQ N-(4 этоксифенил)антраниловой кислоты (соединение 1).

2 г (0 0074 моль) 4-нитро-й-(4-этоксифенил)антраниловой кислоты, 6 мл тионилхлорида, 25 лл бензола нагревают на водяной бане в течение 30 мин, отгоняют под вакуу«ло«водоструйного насоса избыток тионилхлорида. диоксид серы и хлористый водород.

Полученный хлорангидрид растворяют в 20 мл сухого диоксана и прибавляют 1 r (0,0074 моль) 2-аминобензотиазола, раство«.енного в 15 мл сухого диоксана. Нагревают на водяной бане в течение 5 мин. По охлаждении продукт выливают в воду. Образуется маслообразное вещество, которое после отделения воды растворяют в ацетоне, а целево. продукт. осаждаемый эфиром, крис га. л««зу «эт из водного э1 виола, Яь«хсд: 1,51 г {47$), T.ïë. 182-184"С.

Ч=434, . « .

Въ;.«i Рань, : С 60,82; N " .89: S 7,38.

1"., -гйдено, : С 60,64, N 1ч,02;: 7.14.

:> . I «1ö "й 0.1

Чl «=-0,52 (э1илацотата-хлороформ 4: ).

t =0,74 (пропанол: - хлороформ 1:1); 14:-:",:«сктр, см 1: 3260 (NH); 1640 (С=О): -„ 95 « i. Îð)); 1480 (NH); 1350 (Й02).

Испь тачия соеди««ения 1 на противови..., сную активность. ..«и ределение токсичности соединения 1 проводят в культурах фибробластов эмбриона человека (ФЭЧ) и Нер-2, для чего к пи ательной среде 199 добавляют различные коли 1ества соедииени 1, начиная с 5000 мкг, мл и менее на I мл среды. Наблюдения за культурой клеток ведут на протяжении четырех суто; с ежадневным просмотром.

За максимальную переносимую дозу (МПД) ,лпытуемого соединения 1 принима«от коичество, не выэыва«огцее дегенерации клеток. Рабо:эя доза {РД) 1/2 МПД. МПД

eeetè««åHëë 1 50 мгг/мл.

Определение противовирусной актив«осги к PMK-содержащим вирусам Коксаки

А13 (Р«о«ев). Коксаки В4 (Pawers), ECHO 11 (0psala), везикулярного стоматита (Indiana) проводят в культурах клеток ФЗЧ и Нер-2 в условиях одноциклового опыта Ponew

eta1 Агля virolohlca1982.26,3, 130-136). При смене среды в культуре клеток к 0.8 мл среды 199 добавляют РД исследуемого соединения 1 в объеме 0,1 мл и 100 ТЦДиул,1 „«« соответствующего тест-вируса. Каждый

5 опыт сопровождается контролем тест-вируса, взятого в той же дозе, Все пробирки с культурой клеток инкубируют при 37 С в течение одного цикла репродукции каждого тест-вируса, Затем после промораживания при (-) 10 С проводят титрование проб общепринятым методом, Снижение титра вируса под влиянием соединения 1 на 2,0 Ig u более по сравнению с хонтролем оценивали как проявление антивирусной активности испытуемого соединения. Исследование противогриппозной активности проводят в

- развивающихся куриных эмбрионах с использованием вируса гриппа А Виктория (35/72/ Н3 N2).

20 Определение противовирусной активности к ДНК-содержащему вирусу простого герчеса 1 типа (штамм Л-2) проводят методом, аналогичным вышеописанному.

Для определения величины химиотерапевтического индекса (ХТИ) по отношению к вирусам, в эксперименте с которыми отмечается антивирусное действие.

Тест-вирус в дозе 100 ТЦДо/1,о ил вносят в культуру клеток и инкубируют 1 ч при

30 37ОС. Непосредственно после адсорбции вирус сливается, клетки отмываются средой

199, а „»" пробирки вносят среду поддержки, содержа.цую различные концентрации исследуемого препарата. Наблюдение ведут на протяжении 72 ч с ежедневным просмотром. Отсутствие цитопатического действия виоуса в опыте, при срабатывании его в контроле, позволяет считать препарат в данной концентрации активным, 40 В результате установлено, что соединение 1 имеет МПД в культуре ФЭЧ и Нер-2 50 мкг/мл. Е рабочей дозе, равной 25 мкг/мл, задерживается репродукция вируса везикулярного стоматита на 2,0 Ig. Взятый в каче45 стве эталонного препарата широкого противовирусного спектра — рибамидил (МПД =- )50 мкг/мл, РЦ = 25 л«кг/мл) не влияет не репродукцию вируса везикулярного стоматита. Минимальная доза соеди50 нения тормозящая репродукцию вируса везикулярного стоматита 3,0 мкг/мл. Таким образом, ХТИ соединение 1=16.

Соединение 1 не влияет на репродукцию других тест-вирусов. Таким образом, 55 впервые установлена противовирусная активность соединения 1 в отношении вируса везикулярного стоматита. Обладая токсичностью, равной таковой у этал«> ного препарата-рибамидила, соединение 1 обладает высокой эффективностью и э««я «1«тельны««

1340076 химиотерапевтическим индексом. Учитывая отсутствие химиопрепаратов, эффективных в отношении рабдовирусов (куда входит, в частности, вирус бешенства). соединение 1 может быть использовано в экспериментальной терапии рабдовирусных инфекций.

ФоРмУла иэобРете ни" 10 проявляощий противовирусную

Бенэотиаэолиламид 4-нитро- N -(4-этоксифенил)антраниловой кислоты формулы

Составитель З,Латьпова

Техред М.Моргентал Корректор М.Максимишинец

Редактор Т.Шагова

Тираж Подписное"

НПО "Поиск" Роспатента

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Заказ 3466

,производственно-издательский комбинат " 1атент", г. Ужгород, ул.Гагарина. 101 и о он — (Qii oc (56) Рубцов M.В., Байчиков A.Ã. Синтетическое химико-фармацевтические npeaapsты. M.: Медицина. 1971. с.328.

Жданов В,М., Гайдамович й.С. Общая и частная вирусология, 1982, т.1, с.352,