Способ получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений, или их стереоизомеров, или смеси стереоизомеров, или их кислотно-аддитивных солей

 

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности способа получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений об0;ей формулы % .у(СН2)

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУВЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (62) 3917403/23-04 (21) 4027758/23-04 .22) 02.07.86 ,(23) 1с> 06.85 (31) 622421 (32) 20.06.84 (33) US (46) 07.12.88. Бюл. и 45 (71) Циба-Гейги AI (СН) (72) Ласли Джонстон Браун (GB) (53) 547. 822.3. 07 (088. 8) (56) Мищенко Г.Л. и Вацуро К.В. Син— тетические методы органической химии. — M. Химия, 1982, с.408. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЗАМЕЩЕННЫХ

АЗОТСОДЕР>КАЩИХ БИЦИКЛИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ИЛИ ИХ СТЕРЕОИЗОМЕРОВ, ИЛИ

СМЕСИ СТЕРЕОИЗОМЕРОВ,ИЛИ ИХ КИСЛОТНОАДДИТИВНЫХ СОЛЕЙ (57) Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности способа получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений общей формулы где R Н, С„-С -алкил, CN, галоген, карбамоил, С1-С -алкилкарбамоил или формил; К вЂ” Н, фенил-С -С4—

-алкил, карбокси-С,-С -алкил, С,-С4-алкоксикарбонил-С 1-С4-алкил или

С,-С -алкилтиогруппа; и = 1, 2 или

3, или их стереоизомеров, или смеси стереоизомеров, или их кислотноаддитивных солей, обладающих свойствами ингибиторов ароматазы; Цель— создание новых активных соединений (51)4 С 07 D 487/04 // А 6! К 31/44

/ указанного класса. Синтез целевых соединений ведут циклизацией соединения общей формулы где R — Н или тритильная группа;

К „ и К имеют указанные значения, Х вЂ” галоген. Полученные соединения выделяют в свободном виде или в виде кислотно-аддитивных солей или соединение формулы (I): а) где R7 — С,-G4-алкоксикарбонил-С1-04-алкил, гидролизуют с образованием соединения (I), где R< — карбокси-С„-С4-алкил; б) где

R 1 Н и Группа С6 Н 4 "„1 находится в положении 5, обрабатывают С1-С4-алкилдисульфидом с образованием соединения I, где R — С„-С4-алкилтиогруппа или фенил-С „-С -алкилгалогенидом с образованием соединения I.ãäå R>— фенил-С1 — С -алкил.Для получения соединений формулы (I), где R, = С,", соединение формулы I: а) где R „— карбамоил, дегидратируют; б) где

К 1 — галоген, обрабатывают CuCN; в) где R, — формил, окисляют; r) где

К 1 — С,-С 4-алкилкарбамоил, деалканолизируют, или полученный рацемат разделяют на оптические изомеры и выделяют целевой продукт в свободном ниде или в виде кислотно-аддитивной соли. Новые соединения ингибируют ароматазу в минимальной концентрации 1-30 нмоль/л, что в 1000 раз ниже, чем у аминоглутедимида.

1 табл.

1443802

Изобретение относится к получению новых гетероциклических соединений, в частности к способу получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений общей фор(сн,)„ ()

ЯфЯ

81 где n — 1, 2 или 3;

К, " водород, С,-С -алкил, цианогруппа, галоген, карбамоил, С„-С „-алкилкарбамоил или

Формил;

R < — водород, Фенил-С, -С -алкил, карбокси-С „-С „-алкил, С q-C —

-алкоксикарбонил-С,-С -алкил, или С, -С -алкилтиогруппа, или их стереоизомеров, или смеси их стереоизомеров, или их кислотно-аддитивных солей, обладающих свойствами ингибиторов ароматазы.

Цель изобретения — создание на

30 основе известных методов способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Пример 1. Гидрохлорид 5-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а3пиридина. 35

Раствор 2,0 г 4-(4-хлор-4)- пара-цианофенил-(н-бутил)-1Н-имидазола в 50 мл хлороформа кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч в атмосфере азота, охлаждают, выпари- .40 вают и получают целевое соединение.

Получение исходных соединений.

4-(3-Формил-н-пропил)-1-триметилсилилимидазол.

Раствор 1,82 г 4-(3-этоксикарбо- 45 нилпропил)-1Н-имидаэола в 30 мл тетрагидрофурана в атмосфере азота обрабатывают 0,5 г гидрида натрия (50X-ная суспензия в масле) нри 0 C в течение 30 мин и 1,45 мл триметил-50 о силилхлорида при 0 С в течение 3 ч.

Реакционную смесь промывают холодным

0,5 N раствором бикарбоната натрия, сушат над сульфатом натрия и выпаривают до сухого остатка. Масло снова растворяют в 100 мл метиленхлорида при -78 С в атмосфере азота и по каплям прибавляют 12,82 мл диизобу тилалюминийгидрида (1,56 M). Реакционную смесь перемешивают в течение

5 мин при -78 С, прибавляют 1 мл метанола, затем 10 мл воды и фильтруют

Ю через Celite . Органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают целевое соединение.

4-(4-пара-терт-Бутиламинокарбонилфенил)-4-окси-н-бутил 3-1-триметилсилилимидазол.

В раствор 6,95 г пара-(трет-бутил— аминокарбонил)-бром-бензола, растворенного в 175 мл тетрагидрофурана, при -70 С в атмосфере азота по каплям прибавляют 20,1 мл раствора н-бутиллития (2,7 М) в гексане. После проведения реакции в течение 30 мин медленно прибавляют раствор 5,69 r(4-(3формил-н-пропил)-1 òðèìåòèëñèëèëèìèдазола в 10 мл тетрагидрофурана. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и прибавляют 20 мл хлорида аммония.

Органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают целевое соединение.

4-54-Хлор-4-(-пара-цианофенил)-н-бутил )-1Н-имидазол.

Раствор 4,5 r 4 — (4-(пара-трет-бутиламинокарбонилфенил)-4-окси-н-бутил )-1-триметилсилилимидазола в

50 мл тионилхлорида кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают и выпаривают. Остаток экстрагируют смесью метиленхлорида и водного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают целевое соединение.

Пример 2, Гидрохлорид 5-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо 1.1, 5-а пиридина.

Раствор 1,13 г 5-(пара-карбамоилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо

L 1,5-а)пиридина и 1,0 мл оксихлорида

Фосфора в 30 мл хлороформа кипятят с обратным холодильником в течение

15 ч, охлаждают и выпаривают с толу олом. Полученное масло растворяют в

30 мл метиленхлорида, охлаждают до

0 С и прибавляют 30 мл охлажденного льдом раствора 507-ной гидроокиси аммония. Органическую фазу отделяют, сушат и выпаривают до масла. Фильтрованием через 20 г двуокиси кремния с этилацетатом получают целевое соединение, которое растворяют в

20 мл ацетона, обрабатывают 1,2 мл

3 N эфирного раствора хлористого воз 144 дорода и получают гидрохлорид. Т.пл.

209-210 r..

Пример 3. 5-(пара-Цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а1

,пиридин.

Смесь 85 мг 5-(пара-бромфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а) пиридина и 74 мг одновалентной цианистой меди в 1 мл N,N-диметилформамида нагревают в атмосфере азота при 120 С в течение 11 ч. Реакционную смесь охлаждают, разбавляют 10 мл воды и экстрагируют этилацетатом.

Органические экстракты сушат над сульфатом натрия и выпаривают. Полученное масло хроматографируют на силикагеле с этилацетатом и получают целевое соединение. Т.пл. 117

118 С.

Пример 4. 5-(пара-Цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо

f1 5-аЗпиридин.

Раствор 2,01 r 5-(пара-формилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридина и 0,96 r азотистоводородной кислоты в 30 мл бензола выдер— живают с внешним охлаждением при комнатной температуре, по капле лри— бавляя 0,8 мл концентрированной серной кислоты. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч и нейтрализуют. Органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают масло, которое хроматографируют на силикагеле с этилацетатом и получают целевое соединение.

Пример 5. Гидрохлорид 5-(пара-цианофенил)-5-метилтио-5,6,7,8-тетрагидроимида зо f l, 5-а )пиридина .

Раствор литийдиизопропиламида о получают при О С в атмосфере азота иэ- 0,6 мл и-бутиллития (2,5 M) и

0,15 г диизопропиламина в 5 мл сухоro тетрагидрофурана и переносят в

0,29 г 5-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроиимидазо(1,5-а|пиридина в 10 мл тетрагидрофурана при -78 С.

Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин и ло каплям прибавляют 0,14 г диметилдисульфида. Через

30 мин охлаждение прекращают, смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и прибавляют 10 мл насыщенного раствора хлорида аммония.

Слои разделяют и органическую фазу промывают холодной 1 N СН1. Водную фазу нейтрализуют и экстрагируют

3802

55 этилацетатом. Органические экстракты сушат над сульфатом натрия и выпаривают до масла, которое хроматографируют на силикагеле 5Х"ным изогропанолом в этилацетате. Полученное масло растворяют в ацетоне,, обрабатывают О, 1 мл 4 N эфирного раствора HCl и получают целевое соединение. Т.пл. 204-205 С.

Пример,6. Раствор 3,13 r

4-(3-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)-3-хлорпроп-1-ил)-1-тритилимидазола в 150 мл ацетонитрила кипятят с обратным холодильником 15 ч, охлаждают и прибавляют 150 мл метанола.

Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником еще 15 ч и выпаривают до сухого остатка. Остаток экстрагируют смесью серного эфира и воды.

Эфирный слой отделяют и промывают

1 N НС1 (2x15 мл). Соединенные водные экстракты доводят до рН 8, экстрагируют метиленхлоридом, который сушат над сульфатом натрия, фильтруют и выпаривают до белой пены. Продукт кристаллизуют из эфира и получают

1,30 г 5Н-5-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)-6,7-дигидропирроло (1,2-с1имидазола. Т.пл. 136-139 С.

Исходные соединения получают следующим образом.

Раствор 6,0 г метил-3-(1Н-имидазол-4-ил)пропионата и 11 мл триэтиламина в 31 мл диметилформамида обрабатывают раствором 9,65 г трифенилметилхлорида в 110 мл диметилформамида в течение 2 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь выливают в 700 г льда, результирующее твердое соединение собирают фильтрованием, перекристаллизовывают.иэ эфира и получают

l3,83 r метил-3-(1-тритилимидазол-4-ил)пропионата. ЯМР (CDCl >): d = 2,75 (мультиплет, 4Н); 3,05 (синглет, ЗН); 6,5-7,5 (мультиплет, 17Н) .

Раствор 44,4 ммоль диизобутилалюминийгидрида в 29 мл толуола прибавляют к раствору 8,79 г метил-3-(1-тритилимидазол-4-ил)пропиоиата в

175 мл метиленхлорида при -72 С в атмосфере азота. Через 5 мин реакцию обрывают добавлением !4 мл метанола, а затем 90 мл воды. Реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и фильтруют через цеолит.

Органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают до жел1443802 того масла, которое хроматографируют на 280 r двуокиси кремния и получают 4,13 г 3-(1-тритилимидазол-4-ил) пропиональдегида в виде масла. HK (CDClg): 2830; 2740; 1730 см

Раствор 25 ммоль н-бутиллития в

10 мл гексана по каплям прибавляют в раствор 3,19 г N-трет-бутил-4-бромбензамида в 250 мл тетрагидрофурана при -70 " в атмосфере аргона. Через 30 мин медленно прибавляют раствор 3,74 г 3-(1-тритилимидазол-4-ил)пропиональдегида в 100 мл тетрагидрофурана. Реакционную смесь о перемешивают при -70 С в течение

30 мин, оставляют нагреваться до

25 С, перемешивают при 25 в течение 2,5 ч,и обрывают реакцию избытком насыщенного раствора хлорида ам- 20 мония. Водный слой отделяют и экстрагируют метиленхлоридом (2х100 мл) .

Соединенные органические экстракты сушат над сульфатом натрия и выпаривают. Остаток хроиатографируют на

220 г двуокиси кремния смесью эфира и этилацетата в соотношении 5:1 и получают 4-(3-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил) -3-оксипроп-1-ил -1"тритилимидазол в виде масла. ИК (СН С1 ):

1660 см .

Раствор 3,21 г 4-(3-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)-3-оксипроп-1-ил)-1-тритилимидазола и 1,5 мл тионилхлорида в 50 мл метиленхлорида кипятят с обратным холодильником 1 ч, 35 охлаждают и выливают в 50 мл охпажденного льдом раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают 4- 3-(4-трет-бутил- 40 аминокарбонилфенил)-3-хлорпроп-1—

-an)1-тритилимидазол в виде белой пены. ЯМР {CDClq): сг = 1,45 (синглет, 9Н); 4,30 (триплет, Х = 6,0 Гц, 2Н) . 45

Пример 7» Раствор 1,25г

5Н 5-(4-трет- утиламинокарбонилфенил) -6,7-дигидропирроло (1,2-с )имидазола в 10 мл тионилхлорида кипятят с обратным холодильником 1 ч, 50 охлаждают и выпаривают. Остаток растворяют в 10 мл хлороформа при

0 С и медленно прибавляют 10 мл охлажденного льдом концентрированного раствора гидроокиси аммония. Вод- 55 ный слой отделяют, промывают хлороформом (Зх20 мл) и соединенные органические экстракты сушат над суль« фатом натрия. Фильтрованием, выпа- риранием и хроматографированием на

45 г двуокиси кремния с 57.-ным раствором гидроокиси аммония в этилацетате получают масло, которое обрабатывают 1-молярным эквивалентом эфирного раствора НС1 и получают

0,5 г гидрохлорида 5Н-5-(4-цианофенил)-6,7-дигидропирроло Г1,2-с)имидазола. Т.пл. 227-228 С.

Пример 8. Раствор 1,29 г

5Н-5-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)-6,7,8,9-тетрагидроимидазо (1,5-а) азепина в 10 мл тионилхлорида кипятя т с обратным холодильником

1 ч, охлаждают и выпирвают. Остаток экстрагируют смесью метиленхлорида и ледяного раствора бикарбоната на— трия. Водный слой отделяют и экстрагируют метиленхлоридом (Зх15 мл).

Соединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и выпаривают.

Полученное масло хроматографируют на

26 г двуокиси кремния 5 -ным метанолом в метиленхлориде. Продукт обрабатывают i-молярным эквивалентом фумаровой кислоты в этаноле и получают 5Н-5-(4-цианофенил)-6,7,8,9-тетрагидроимицазо(1,5 — а) азепинфумарат, Т, пл, 153

155 С.

Исходное соединение получают из этил-5-(1-тритилимидазол-4-ил)-1-пентаноата, полученного следующим образом аналогично получению 5H — 5-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)-6,7-дигидропирроло(1,2 — с1имидазола из этил-3-(1-тритилимидазол-4-ил)пропионата.

Раствор 5,6 мл диизопропиламина в 150 мл тетрагидрофурана при -70 С в атмосфере азота обрабатывают 14,5мл

2,5 М н-бутиллития в течение 30 мин и о каплям прибавляют 7,2 мл триэтилфосфоацетата. Через 30 мин медленно .прибавляют раствор 10,09 г 3†(1-тритилимидазол-4-ил)пропионозого альдегида в 50 мл тетрагидрофурана.

Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры, перемешивают в течение 15 ч и реакцию обрывают избытком насыщенного раствора хлорида аммония. Водный слой отделяют и экстрагируют этилацетатом (2х50 мл). Соединенные органические экстракты сушат над сульфатом натрия и выпаривают до масла (15,35 г), которое хроматографируют на 430 г двуокиси кремния эфи1443802

25 ром и получают 9,61 г этил-5-(1-тритилимидазол-4-ил) -1-пент-2-еноата.

Т.пл. 86-83 С.

Раствор 9 20 г этил5-(1-тритили)

5 мидазол-4-ил)-1-пент-2-еноата в

460 мл безводного этанола гидрируют с 1,88 г 107-ного палладия íà угле при атмосферном давлении в течение 20 мин. Катализатор удаляют филь-10 трованием через цеолит. Выпаривани. ем получают твердый продукт, который перекристаллизовывают из гексана и получают 8,64 г этил — 5-(1-тритили-. мидазол-4-ил)-1-пентаноата. Т.пл.

84-88 С.

Пример 9. Раствор 0,21 г гидрохлорида 5-(4-цианофенил)-6-этоксикарбонилметил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5-а пиридина в 1,2 мл этанола и 1,2 мл 1И гидроокиси натрия перемешивают при комнатной температуре 15 ч, выпаривают и остаток растворяют в воде. Водную фазу экстрагируют этилацетатом, доводят до рН

2, снова экстрагируют, нейтрализуют и выпаривают. Остаток растирают с тетрагидрофураном. Органическую фазу обрабатывают эфирным раствором

НС1 и собирают 0,12 r 5-(4-цианофенил)-6-карбоксиметил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридина. Т.пл.

209 †2 С.

Пример 10. Раствор О, SO ммоль литийдиизопропиламида, полученного из 0,12 мл диизопропиламина и 0,32 мл

2,5 М н-бутиллития, в 6 мл тетрагидрофурана при 0 С медленно прибавляют к раствору 0,17 г 5 †(4-цианофенил) -5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5- 40

-а)пиридина в 2 мл тетрагидрофурана при -78 С. Через 0,5 ч по каплям прибавляют 0,1 мл бензилбромида. Реакционную смесь перемешивают еще в течение 1 ч, реакцию обрывают водой (5 мл),подкисляют 1N НС1, разбавляют 20 мл эфира и слои разделяют.

Водную фазу доводят до рН 7, экстрагируют этилацетатом (Зх15 мл) и органические экстракты сушат над .суль50 фатом натрия. Фильтрацией и выпариванием получают пену, которую обра-батывают 1-молярным эквивалентом эфирного раствора НС1 и получают гидрохлорид 5-бензил-5-(4-пианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо 1,5-а пи ) — 55 ридина. Т,пл. 249-251 С.

Пример 11. Гидрохлорид 7-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо 1,5-а)пиридина, т.пл. 253— о

254 С, получают аналогично примеру 2.

Пример 12. Рацемический гидрохлорид 5-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо Г1,5-а1пиридина пропускают аликвотами по 20 мг через колонну размером 4,6х250 мм, содержащую связанный с силикагелем бета-циклодекстрин, с использованием смеси воды и метанола в соотношении

7:3 в качестве элюента со скоростью потока 0,8 мл/мин. Отдельные фракции выпаривают под вакуумом и получают (-) -5-(пара-цианофенил) -5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а )пиридин. (к) > = -89,2, и (+)-5-(пара-цианофенил) -5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, (Ы g =+85,02

Оба соединения раздельно растворяют в ацетоне н обрабатывают 1-молярным эквивалентом эфирного раствора

НС1, получая хлористоводородные соли соответственно с т.пл. 82-83 (аморфная) и 218-220"С.

Пример 13. Аналогично примеру 1 получают следующие соединения:

5-бенизл — 5-(4-цианофенил)-5«6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5-а)пиридин, т.пл. его гидрохлорида 249-251 С;

7-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т.пл. его гидрохлорида 253-254 С;

7-(пара-карбамоилфенил)-5,6,7,8тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т.пл. его фумарата 193-195 С;

5-(пара-карбамоилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо ti 5-а)пиридин, т.пл. 181 †1 С;

5-(пара-толил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5-а)пиридин, т.пл. его гидрохлорида 173-175 С;

5-(пара-бромфенил) -5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т.пл. его гидрохлорида 216 С;

5-(пара-формилфенил) -5,6, 7,8-тетрагидроимидазо 1,5-а)пиридин, т.пл. о его соли фумаровой кислоты 131 С;

5-(пара-цианофенил) -5-метилтио-5,6,7,8-тетрагидроимидазо 1,5-а)пиридин, т.пл. его гидрохлорида 204

205 С;

5Н-5-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)-6,7-дигидропирроло Р1 2-с)имидаэол, т.пл. 136-139 С;

5Н-5-(4-цианофенил)-6,7-дигидропирроло (1,2-с)имидазол, т.пл. 227—

228 С;

3802

Соединение по примеру

МИК ароматазы, нмоль/л

1,2,3 и 4

25

12

1,5

20

Ri где и R

55 R

9 144

5Н-5-(4-цианофенил)-6,7,8,9-тетрагидроимидазо (1,5-а7азепин, т.пл.

153-155 С

5-(4-цианофенил)-6-этоксикарбонилметил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т.пл . 126-127 С;

5-(4-цианофенил)-6-карбоксиметил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5-а пиридин, т.пл. 209-211 С.

Данные по токсичности, 10 самцам и 10 самкам крыс в течение 13 недель перорально вводили хлористоводородный 5-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин в дозе 0,2 .мг на кг веса тела в сутки и 1,0 мг на кг веса тела в сутки„ соответственно. В печени животных не наблюдалось изменений.

Фармакологические испытания.

Активность предлагаемых соединений относительно ингибирования ароматазы 1.11 v1rrо изучают следующим образом.

Метод испытания для определения данных по ингибированию ароматазы.

Изготавливают микросомную фракцию из свежих человеческих плацент, подвергают лиофилизации и хранят в о, дессикаторе при -40 С. Опыт проводят в общем количестве 1 мл 0,05 М кали ефосфатного буфера (рН 7,4) при

37"С. Инкубационная смесь содержит

1, 135х10 М j 4 — 14 С)-андростен-3,17-диона, 2,4х10 " М NADPH (Sigma, тетранатриевая соль типа III), различные-концентрации 5-пара-цианофенил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5-а) пиридина в качестве представитель-. ного испытуемого соединения и

22á мкг/мл микросомной энзимной фракции, что соответствует 120 мкг/мл микросомного протеина. После 20-минутной инкубации смесь экстрагируют два раза семью объемами этилацетата и объединенные экстракты испаряют до сухости. Полученный остаток выделяют хроматографией в течение 65 мин на тонкослойных пластинках,предварительно покрытых силикагелем 60, с применением смеси этилацетата и изооктана (соотношение 70:30 об/об) в качестве системы растворителей. Устанавливают расположение радиоактивных зон пластины и определяют пикэстрона путем сравнения с аутентичным стандартным веществом. Соответствующую полосу силикагеля переводят в пробирки отсчитывания в целях определения с помощью детектора жидкостной сцинтилляции. В этой системе ни концентрация субстрата, ни

NADPH не органичивает скорости ре5 акции. Число отсчитанных импульсов из эстрона вычисляют в присутствии испытуемого соединения и в присутствии каждой концентрации испытуемого соединения. Минимальная концентрация (МИК), в присутствии которой получают специфически существенное ингибирование ароматазы, представлена в таблице.

Значение МИК для приведенных в

35 1000 раз ниже, чем у аминоглутедимида (Nerk Index, Х, ¹ 443) — высокоактивного ингибитора ароматазы.

40 Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я

Способ получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений общей формулы

1,2 или 3„ водород, С 1-С .-алкил, цианогруппа, галоген, карбамоил, С -С -алкилкарбамоил или

1 оформил; водород, фенил-С, -С л-алкил, карбокси-С1-С -алкил, С,-С „-алкоксикарбонил-С,-С 4-алкил или Сл-С л-алкилтиогруппа, 1443802

5 (II) !

Составитель Н.Банникова

Редактор Н.Яцола Техред Л.Олийнык Корректор В.Бутяга

Заказ 6402/58 Тираж 370 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений .и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, ужгород, ул. Проектная ° 4 или их стереоизомеров, илн смеси стереоизомеров, или их кислотно-аддитивных солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы где R и R имеют указанные значения;

Х вЂ” галоген;

R — водород или тритильная группа 15 подвергают циклизации н полученное соединение общей формулы (1) выделяют в свобдоном виде или в виде кислотноаддитивной соли, или соединение общей формулы (I),где R — С, -С -алкоксикарбонил-С -С -алкил, подвергают гидролизу с образованием соединения (I),ãäå R< — карбокси-С -С -алкил или соединение общей формулы (I),ãäå R zводород и группа С Н-R „находится в

f положении 5, подвергают взаимодействию с С,.-С -алкил-дисульфидом с образованием соединения (I), где Rz—

С,-С„-алкилтиогруппа, или соединение общей формулы (I),ãäå R< — водород и группа С Н4-К, находится в положении 5, подвергают взаимодействию с фенил-С,-С -алкилгалогенидом с образованием соединения (I),ãäå К,1— фенил-С,-С -апкил, или для получения соединений общей формулы (I), где

R „ — цианогруппа, дегидратируют соединение общей формулы (I),ãäå R карбамоил, или соединение общей фор— мулы (I),ãäå R, - галоген, подвергают взаимодействию с CuCN, или окисляют соединение (I) где К, — формил, или деалканолизируют соединение (I), где К, — С,-С<-алкилкарбамоил, или полученный рацемат разделяют на оптические изомеры и полученный целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли.