Способ получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений,или их кислотно-аддитивных солей,или их стереоизомеров,или смеси стереоизомеров

 

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности спо соба получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений общей формулы n-R. На СбН4 Jf (1) где R,-H, С -С4 алкил, галоген или CN; , фенил-С -С4-алкил, карбокси-С.,-С4-алкил, С -С4-алкоксикарбонил-С,-С4 -алкил или С1-С4-алкилтиогруппа, или их кислотно-аддитивных солей, или стереоизомеров, или смеси стереоизомеров,которые могут быть использованы в медицине в качестве ингибиторов ароматазы. Цель - создание новых более активных соединений указанного класса. Процесс ведут циклизацией соединения обшей формулы ) n-Ri-CeH4-7-N N р 2 (iU где RI - см. выше, один из R и - Н, другой - X - галоген или СН-COOC j Hf, причем в данном случае R - Н, R - Rj, Полученное соединение I: а) при R2 - Н обрабатывают галоген-С-С -алкилфенилом для получения R2 -фeнил-С -С.-алкил или б) при С -С -алкоксикарбонил-С,-С4-алкил гидролизуют.для получения К -карбокси- С -С4-алкил, или в) при обраба-- тывают С -С4-диалкилдисульфидом для получения R -C -C -алкилтиогруппа. Целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли с предварительным разделением на оптические изомеры в случае получения рацемата. Новые соединения ингибируют ароматазу при минимальной концентрации 1-30 нмоль/л,что примерно в 1000 раз меньше, чем у аминоглутедимида. 1 табл. § О) со 05 00 00 ы

СОЮЗ СО8ЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4027754/23 04 (62) 3917403/23-04 (22) 02.07.86 (23) 19.06.85 (31) 622421 (32) 20.06.84 (33} uS (46) 07.11.88. Бюл.9 41 (7l) Циба-Гейги АГ (СН) (72) Ласло Джонстон Браун (ГВ) (53) 547.822.3.07(088.8) (56) Мищенко Г.Л., Вацуро К.В.

Синтетические методы органической химии.- M.: Химия, 1982, с.406, 408. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЗАМЕЩЕННЫХ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ БИЦИКЛИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ

ИЛИ ИХ КИСЛОТНО-AlllIHTHBHbIX СОЛЕЙ, ИЛИ ИХ СТЕРЕОИЗОМЕРОВ, ИЛИ СМЕСИ

СТЕРЕОИЗОМЕРОВ (57) Изобретение касается гетероцик« лических соединений, в частности спо соба получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений общей формулы

К2 и- — С6Н > (}) где R Í, С„-С4.-алкил, галоген или

CN; В. -Н, фенил-С„-С4-алкил, карбокси-С<-С -алкил, С,-С4-алкоксикарбонил-С,-С,!-алкил или С„-С -алкилтиогруппа, или их кислотно-аддитивных

„.SU„„3436878 А 3!

5ц 4 С 07 D 487/04// A 61 К 31/44 солей, или стереоизомеров, или смеси стереоизомеров,которые могут быть использованы в медицине в качестве ингибиторов ароматазы. Цель — создание новых более активных соединений указанного класса. Процесс ведут циклизацией соединения обшей формулы

Rgg у — (СН )2 — —

Tl — 31 — С6Н вЂ” у — Я К <11)

2 где R< — см. выше, один из R и К

Нэ другой — К, Х вЂ” галоген или

>СН-COOC Н, причем в данном случае

l

К вЂ” Н, К вЂ” Rz Полученное соединение Т: а) при R — Н обрабатывают ra2 логен-С-С -алкилфенилом для получения

Ф

R<-фенил-С„-С4-алкил или б) при В.„— .С -С,!-алкоксикарбонил-С,-С -алкил гид. ролизуют.для получения R -карбоксиС1-С -алкил, или в) при К -Н обраба-. тывают С --С -диалкилдисульфидом для получения К -С<-С„-алкилтиогруппа.

Целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли с предварительным разделением на оптические изомеры в случае получения рацемата. Новые соединения ингибируют ароматазу при минимальной концентрации 1-30 нмоль/л,что примерно в 1000 раз меньше, чем у аминоглутедимида. ! табл.

1436878

Изобретение относится к получению новых гетероциклических соединений в

В частности к способу получения соедине ний общей формулы

10 где В., — водород, С -С »алкил, гало- t5 ген или циано;

R Водород фенил С< С4 BJIKHJI карбокси-С„-С4-алкил, С„-С алкоксикарбонил-С,-С -алкил или С -С -алкилтио, 20 или их кислотно-аддитивных солей, или их стереоизомеров, или смеси стереоизомеров, обладающих свойствами ингибиторов ароматозы.

Целью изобретения является создание на основе известных методов спо соба получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Пример 1. Гидрохлорид 5-(па- 30 ра-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5-а)пиридина.

Раствор 8,1 r 5-(3-хлорпропил)-1(пара-цианофенилметил)-IН-имидазола в 50 мл тетрагидрофурана охлаждают о до 0 С. K нему частями прибавляют

7,0 r твердого трет-бутилата калия.

Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, нейтрализуют

10%.-ной уксусной кислотой и обраба- 40 тывают смесью метиленхлорида и воды.

Органический слой промывают водой, сушат над сульфатом магния, выпаривают и получают масло, которое растворя ют в небольшом объеме ацетона и 45 нейтрализуют эфирным раствором хлорис того водорода. При охлаждении получают целевое соединение в виде белого твердого продукта, т.пл. 201-203 С.

После обработки соединения 2N

Na0H, хроматографирования свободного соединения на силикагеле этилацетатом и переосаждения его гидрохлорида с помощью ЗЯ эфирного хлористого водорода точка плавления целевого о продукта повышается до 209-210 С.

Получение исходных соединений.

А. 1-Диметилкарбамоил-4-. (3-триметилсилилоксипропил)-IH-имидазол.

К суспензии 51 8 г 4-(3-окси-нпропил)-IН-имидазола/500 мл ацетонитрила прибавляют 50,0 r триэтиламина. К этой смеси по каплям прибавляют 48,6 г диметилкарбамоилхлорида. После прибавления смесь кипятят с обратным холодильником в течение

21 ч. Раствор охлаждают до 0 С, при этом выпадает в осадок гидрохлорид триэтиламина. К этой смеси прибавляют 50,0 r триэтиламина, а затем

54,0 г хлортриметилсилана. После прибавления перемешивание продолжают в течение 1 ч. Смесь разбавляют равным объемом серного эфира и фильтруют. Фильтрат выпаривают до масляного остатка, который растирают с серным эфиром и фильтруют для удаления гидрохлорида триэтиламина. Затем этот фильтрат выпаривают и получают целевое соединение (А) в виде масла.

Б. 1-(пара-Цианофенилметил)-5-(3оксипропил)-IН-имидазол.

Раствор 97,0 г 1-диметилкарбамоил

4-(3-триметилсилилоксипропил)-IН-имидазола и 72,0 г 1-бромметил-4-цианобензола в 500 мл ацетонитрила кипятят с обратным холодильником 10 ч. Расто вор охлаждают до 0 С на ледяной бане и пропускают через него газообразный аммиак в течение нескольких минут.

После этого смесь выпаривают в вакууме и получают соединение, которое растворяют в 500 мл IN хлористо-водородной кислоты. Раствор оставляют стоять при комнатной температуре в течение 15 мин и затем экстрагируют эфиром, рН водной фазы доводят до 9 с помощью 50%-ного раствора гидроокиси натрия и смесь экстрагируют метиленхлоридом. Метиленхлоридные экстракты промывают водой, сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают соединение, которое растирают с холодным ацетоном и получают целевое соединение (Б) в виде белого твердого продукта, т.пл. 121-123 С.

В. 5-(3-Хлорпропил)-1-(пара-циано фенилметил)-IН-имидазол.

К раствору 5,2 г тионилхлорида в 80 мл метиленхлорида прибавляют частями 8,4 г 1-(пара-цианофенилмвтил)-5-(3-оксипропил)-IH-имидазола.

Скорость прибавления регулируют для контролирования образующейся пены.

После завершения прибавления раствор кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 ч, охлаждают на льду, 3 143687 фильтруют и получают хлористо-водород ную соль целевого соединения (В) в виде тускложелтого твердого соединения, т.пл. 190-191 . Соль экстрагиру5 ют смесью метиленхлорида и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органические экстракты промывают водой, сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают свободное основание в виде масла,!О

Пример 2. Гидрохлорид 5-(пара-цианофенил)-5,6,?,8-тетрагидроими дазо(I 5-а)пиридина.

Раствор 1,13 г 5-(пара-карбамоилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(l,5-а)пиридина и 1,0 мл оксихлорида фосфора в 30 мл хлороформа кипятят с обратным холодильником в течение !

5 ч, охлаждают и выпаривают с толуолом. Полученное глясло растворяют в 20

30 мл метиленхлоридя, охлаждают до

0 С и прибавляют 30 мл охлажденного

Ф льдом 50Х-ного раствора гидроокиси аммония. Органическую фазу отделяют, сушат и выпаривают до масла. Эильтро- 25 ванием через 20 r двуокиси кремния с этилацетатом получают свободное целевое соединение, .которое растворяют в

20 мл ацетона, обрабатывают 1,2 мл

3N эфирного раствора хлористого водо- >> рода и получают гидрохлорид, т.пл.

209-210 С.

Пример 3 ° 5-(пара-,цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а} пиридин.

Смесь 85 мг 5-(пара-бромфенил)5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридина и 74 мг одновалентной цианистой меди в 1 мл N,N-диметилформамида нагревают в атмосфере азота при 120 С 4О в течение ll ч. Реакционную смесь охлаждают, разбавляют 10 мл воды и экстрагируют этилацетатом. Органические экстракты сушат над сульфатом. натрия и выпаривают. Полученное масло 45 хроматографируют на силикагеле с этилацетатом и получают целевое соединение, т.пл. 117-118 С.

Пример 4. 5-(пара-Бромфенил)5,6,7,8-тетрягидроимидазо(1,5-а)пиридин.

Раствор литийдиизопропиламида ноо лучают при О С в атмосфере диизопропил амина и 0,33 мл н-бутиллития (2,5 М) в 2 мл тетрагидрофурана в атмосфере азота прибавляют к раствору О, 13 мл

N,N„ Nr N -тетраметилэтилендиамина и

0,124 г 1-(пара«бромбензил)-5-(3хлорпропил)-IFi-имидазола в 2 мл тет8

4 рагидрофураня при -78 С. Реакционную смесь перемешивают 3,5 ч, обрывают ре" о акцию прибавлением при -78 С насыщенного раствора хлорида аммония и экстрагируют метиленхлоридом (3 5 rrI(мл). Органические экстракты сушат над сульфатом натрия, BbrrrapHBarrrT u получают целевое соединение, которое очищают превращением в хлористо-водородную соль, т.пл. 216 С. о

Получение исходных соединений.

А. I - (пара-1 ромбензил) -5- (3-оксипропил)-IН-имидазол.

Раствор 11,2 г 1-диметилкарбямоил-4-(3-триметилсилилоксипропил)IН-имидазола и 12,49 г пара-бромбензилбромпдя в 1!О мл яцетонитрила ки» пятят с обратным холодильником в течение 24 ч. Раствор охлаждают до о

0 С и через реакционную смесь пропус" кают газообразный аммиак в течение

5 мин. Реакцию проводят еще в течение 45 мин при комнатной температуре и растворитель выпаривают. Остаток растворяют в 100 мл 1И НС1 и экстрагируют 50 мл эфира. Водную Фазу доводят до рН 8 и экстрагируют этилацетатом (5 .50 мл). Органические экстракты промывают водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают. Полученное масле хроматографируют на 530 г силпкягеля смесью этилацетат:метанол:насыщенный раствор гидроокиси аммония (90:5:5) и получают целевое соединение (А} в виде масла.

ЯМР, 8 5,00 (синглет, 2Н).

Б. 1-(пара-Бромбензил)-S-(3-хлорпропил)-IН-имидязол.

1-(пара-Бромбензил)-5-(3-оксипропил)-IН-имидазол обрабатывают тионил хлоридом по примеру 1 В и получают целевое соединение Б.

Пример 5. 5-(пара-Цианофенил(-5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1,5-а)пиридин.

Раствор 2,01 г 5-(пара-формилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидязо(1,5-"a} пиридина и 0,96 г азотисто-водородной кислоты в 30 мл бензола выдерживают с внешним охлаждением при комнатной температуре, по капле прибавляя

0,8 мл концентрированной серной кислоты. Реакционную смесь перемеши» вают в течение 2 ч и нейтрализуют.

Органическую фазу отделяют, сушат няд сульфатом натрия, выпаривают и получают масло, которое хроматографируют

50 альдегида.

5 143 на силикагеле с этилацетатом и получают целевое соединение.

Пример б. Гидрохлорид 5-(пара-циа нофенил) -5-метилтио-5, б, 7, 8«. тетрагидроимидазо (1, 5-а) пиридина., Раствор литийдиизопропиламида полу о чают при 0 0 в атмосфере азота из

0,6 мл н-бутиллития (2,5 N) и 0,15 r диизопропиламина в 5 мл сухого тетрагидрофурана и переносят в 0,29 r 5(пара-цианофенил)-, 5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а}пиридина в 10 мл тетрао гидрофурана при -78 С. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин и по каплям прибавляют О, 14 г диметилдисульфида. Через 30 мин охлаждение прекращают, смесь оставляют нагревать ся до комнатной температуры и прибавляют 10 мл насыщенного раствора хлорида аммония. Слои разделяют и органическую фазу промывают холодной 1N

НС1. Водную фазу нейтрализуют и экстрагируют этилацетатом. Органические экстракты сушат над сульфатом натрия и выпаривают до масла, которое хрома тографируют на силикагеле 5/-ным

I изопропанолом в этилацотате. Результирующее масло растворяют в ацетоне, обрабатывают 0,1 мл 4N эфирного раствора НС1 и получают целевое соединение т, пл, 204-205 С.

Пример 7. Раствор 1,25 5Н-5(4-трет-бутила!чинокарбонилфенил}-6,7дигидропирроло(1,2-с)имидазола в

10 мл тионилхлорида кипятят с обратным холодильником 1 ч, охлаждают и выпаривают. Остаток растворяют в

10 мл хлороформа при 0 С и.медленно прибавляют 10 мл охлажденного льдом концентрированного раствора гидроокиси аммония, Водный слой отделяют, промывают хлороформом (3"20 мл) и соединенные органические экстракты сушат над сульфатом натрия. Фильтрованием, выпариванием и хроматографированием на 45 r двуокиси кремния с

57.-ным раствором гидроокиси аммония в этилацетате получают масло, которое обрабатывают 1 молярным эквивалентом эфирного раствора НС1 и получают

0,5 r гидрохлорида 5Н-5-(4-цианофе" нил)-6,7"дигидропирроло(1,2-с)имида зола, т.пл. 227-228 С.

Пример 8. Раствор 1,29 г 5Н5-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)6,7,8,9-тетрагидроимидазо(1,5-а)азепина в 10 мл тионилхлорида кипятят

6878 6 с обратным холодильником 1 ч, охлаж дают и выпаривают. Остаток экстрагируют смесью метиленхлорида и ледяного раствора бикарбоната натрия. Водный слой отделя ат и экстрагируют метиленхлоридом (3 15 мл). Соединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и выпаривают. Результирующее масло хроматографируют на 26 г двуокиси кремния 5Х-ным метанолом в метиленхло риде. Продукт обрабатывают молярным эквивалентом фумаровой кислоты в этаноле и получают 5Н-5-(4-цианофенил)-6,7,8,9-тетрагидроимидазо(1 5-а)-азепинфумарат, т.пл, 153!

55 С.

Пример 9. Раствор 1,27 г этил-5-(1-(4-цианобензил)имидазол5-ил!-1-пент-2-еноата в 27 мл тетраа гидрофурана при 5 С в атмосфере азота обрабатывают 0,52 r трет-бутилата калия, Реакционную смесь перемешивают. а при 5 C 2 ч и прибавляют !0 мл 1N

25 НС1. Слои разделяют. Органическую фазу экстрагируют эфиром, доводят до рН 8 и эктрагнруют хлористым метиленом (3 15 мл). Органическую фазу сушат, выпаривают и получают продукт, З0 который обрабатывают 1 молярным эквивалентом эфирного раствора НС1. Результирующий твердый продукт перекристаллизовывают из ацетона и получают 5-4(цианофенил)-6-этоксикарбонилметил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т. пл. 126-127 С.

Исходное соединение получают следу ющим образом.

Л. Раствор 2,9 мл сухого диметил40 сульфоксида в 250 мл метиленхлорида о охлаждают до -78 С в атмосфере азота и по каплям прибавляют 2,1 мл оксалилхлорида. Через 30 мин при -78 С медленно прибавляют раствор 5,0 г 3!

1-(4-цианобензил)имидазол-5-ил) 1пропанола в 18 мл диметилсульфоксида.

Реакционную смесь перемешивают 2 ч и прибавляют 10,4 мл триэтиламина.

Затем ее оставляют нагреваться до комнатной температуры и промывают водой (4к100 мл). Органическую фазу сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают 4,13 г 3 - (1-(4-цианобензил)имидазол-5-ил!-l-пропионового

ИК (СН С1 ):2750, 2250, 1732 см

Б. Раствор 23 ммолей литийдиизопропиламида, полученный из 3,2 мл

7 ! 436 диизопропиламина и 9,2 мл 2,5 M нбутиллития, в !70 мп тетрагидрофурана о при 0 С в атмосфере азота охлаждают о до -78 С и по каплям прибавляют

4,2 мл триэтилфосфонацетата. Через

30 мин медленно прибавляют раствор

4,1 г. 3 (I-(4-цианобензил)имидазол5--ил) -1-пропионового альдегида в

30 мл тетрагидрофурана. Реакционную смесь перемешивают при -78 С 2 ч, оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают еще 15 ч, после чего реакцию обрывают избытком насьпценного раствора хлорида аммония.

Водный слой отделяют и экстрагируют этилацетатом (2 50 мл). Соединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, выпаривают и получают желтое масло, которое хроматографируют на

20 "г двуокиси кремния и получают

3,56 г этил-5- (1-(4-цианобензил)-имидазол--5-ил)-1-пент-2-еноата. ИК (СН С1 ):??40, 1720 см

ll р и м е р 10. Раствор 0 21 г 25 гидрохлорида 5-(4-цианофенил)-6-этоксикарбонилметил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридина в 1,2 мл этанола и 1,2 мл IN гидроокиси натрия перемешивают при комнатной температуре 15 ч 30 выпаривают и остаток растворяют и коде. Водную фазу экстрагируют этилацетатом, доводят до рН 2, снова экстрагируют, нейтрализуют и выпаривают.

Остаток растирают с тетрагидрофура35 ном. Органическую фазу обрабатывают эфирным раствором НС1 и собирают

0,12 r 5-(4-цианофенил)-6-карбоксиметил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридина, т.пл. 209-211 С.

Пример 11. Раствор 0,80 ммолей литийдиизопропиламида, полученно» го из 0,12 мл диизопропиламина и

0,32 мл 2,5 М н-бутиллития в 6 мл о тетрагидрофурана при 0 С медленно при.45 бавляют к раствору 0,17 г 5-(4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо (1 5-а) пиридина в 2 мл тетрагидрофурана о при -78 С. Через 0,5 ч по каплям прибавляю 0,1 мл бензилбромида, Реакци» 5р онную смесь перемешивают еще в течение 1 ч, реакцию обрывают водой (5 мл), подкисляют IN HC1 разбавляют 20 мл эфира и слои разделяют.

Водную фазу доводят до рН 7, экстраги-55 руют этилацетатом (3 ° 15 мл) и органи-, ческие экстракты сушат над сульфатом натрия. Фильтрацией и выпариванием получают пену, которую обрабатывают

878 8

1 молярным эквивалентом эфирного раствора НС1 и получают гидрохлорид 5бензил-5-(4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(l 5-а)пиридина, т.пл.

249 -251 С.

II р и м е р 1-2. Рацемический гидрохлорид 5-(пара-цианофенил) -5, б, 7, 8тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридина пропускают аликвотами по 20 мг через колонну размером 4,6 250 мм, содержащую связанный с силикагелем бета-циклодекстрин с использованием смеси вода:метанол (7:3) в качестве элюента со скоростью потока 0,8 мл/мин. Отдельные фракции выпаривают под вакуумом и получают (-)-5-(napa-цианофенил)-5,6,7,8-.тетрагидроимидазо(1,5-а)

15 пиридин, P g = -89,2 С H (+)-5 — (naра-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, Poi) о

= 85,02 С, Оба соединения раздельно растворяют в ацетоне и обрабатывают

1 молярным эквивалентом эфирного раст. нора HCl получая хлористо-водородные о соли соответственно с т.пл. 82-83 С (аморфная) и 218-220 С.

Пример 13. Аналогично примеру 1 согласно предлагаемому способу циклизации получают следующие соединения: .5-(пара-карбамоилфенил)-5,6,7,8тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т. пл. 181-183 С;

5-(пара-толил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т.пл. его гид рохлорида 173-175 С;

5 †(пара-формилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т.пл. о его соли фумаровой кислоты 131 С;.

5-(пара-цианофенил)-5-метилтио-5, 6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а)пиридин, т. пл. его гидрохлорида 204205 С;

5Н-5-(4-трет-бутиламинокарбонилфенил)-6,7-дигидропирроло(1,2-с)имидазол, т.пл. 136-139 С;

5Н-5-(4-цианофенил)-6,7-дигидропирроло(1,2-с)имидазол, т.пл. 227228 С;

5Н-5-(4-цианофенил)-6,7,8,9-тетрагидроимидазо(1 5-а)азепин, т.пл. 153»

155 С;

5-(4-цианофенил)-6-карбоксиметил5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-a)пиридин, т.пл. 209-211 С;

1О

6878

Е0

1,2,3 и 5

10

1,5

9 143

5 -бензил-5-(4-цианофенил)-5, 6, 7 „8тетрагидроимидазо (1, 5" а) пиридин, т. пл. его гидрохлорида 249-251" С.

Данные по токсичности.

l0 самцам и 10 самкам крыс в течение 13 недель перорально вводят хлористо-водородный 5-(пара-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо(1,5-а) пиридин в дозе 0,2 мг на 1 кг веса тела в сутки и 1 0 мг на 1 кг веса тела в сутки соответственно. В печени животных не наблюдают изменений.

Фармакологические испытания.

Активность предлагаемых соедине-* ний относительно ингибирования арома, тазы п ч 1го определяют следующим

1, образом.

Изготавливают микросомную фракцию из свежих человеческих плацент по методу, подвергают лиофилизации и хранят в дессикаторе при »40 С.

, Опыт проводят в общем количестве 1 мл 0,05 М калийфосфатного буфера (pH 7,4) при 37 С. Инкубационная

: смесь содержит 1,135 ° 10 М (4 С)андростен-3,17-диона 2,4 ° 10 M

NADPH (Sigma, тетранатриевая соль типа Т1Х}, различные концентрации 5-. пара»цианофенил-5,6,7,8-тетрагидро имидазо(1,5-а)пиридина в качестве ис пытуемого соединения и 226 мкг/мл

,микросомной энзимной фракции, что (, соответствует 120 мкг/мл микросомного протеина. ПослЕ 2g-минутной инкубации

1 смесь экстрагируют два раза 7 объемами этилацетата и объединенные экстракты испаряют досуха. Полученный остаток выделяют хроматографией в течение 65 мин на тонкослойных пластинах, предварительно покрытых сили-, кагелем 60, с применением смеси этклацетата и изооктана (соотношение 70:

:30 об/об} в качестве системы растворителей. Устанавливают расположение радиоактивных зон пластины и определяют пик эстрона путем. сравнения с аустентичным стандартным веществом.

Соответствующую полосу силикагеля переводят в пробирки отсчитывания в целях определения с помощью детектора жидкостной сцинтилляции, В этой систе ме ни концентрация субстрата, ни.

NADPH не ограничивают скорости реакции. Число отсчитанных импульсов из эстрона вычисляют в присутствии испытуемого соединения и каждой концентрации испытуемого соединения. Минимальная концентрация МИК, в присутствии которой получают специфически существенное ингибирование ароматазы, представлена в таблице.

Ф

Значение МИК для соединений, пред ставленных в таблице, примерно в

1000 раз ниже значения МИК для аминоглутедимида (Nerk Index, Х, N 443), являющегося высокоактивным ингибитором ароматазы.

Формула изобретения

Способ получения замещенных азотсодержащих бициклических соединений общей формулы 1

Щ где R ) Водороду С» С4 алкилр Гало ген или циано;

К вЂ” водород, фенил-С -С -алкил, карбокси-С, -С4-алкил, С„-С4-алкокси карбонил-С -С4-алкил или С„-С4-алкил-

r5 тио, или их кислотно-аддитивных солей или их стереоизомеров, или смеси стереоизомеров, отличающийся тем, что подвергают циклизации соединение общей формулы

nfl

Составитель Н.Банникова

Техред М.Дидьпс

Корректор Л.Пилипенко

Редактор И.О1улла

Тираж 370

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 5663/59

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 где R имеет указанные значения;

II

К и R < — один водород, а другой принимает значения R

K — галоген йли группа -СН-C00Et

I причем в последнем случае R — водород, а R< принимает значения R, II и в случае, когда в соединении форму36878 12 лы (I) R — водород,его подвергают взаимодействию с галоген-С -С -алкилфенилом

< для получения соединения I

5 где R — фенил-С - С -алкил

2 4 или полученное соединение

I где R -С„-С4-алкоксикарбонил-С,-С алкил, подвергают гидролизу с образо ванием соединия I, где R -карбокси10 С -С4-алкил; или для получения соединения I, где R -С -С4-алкилтио, со единие I где R — водород, подвергают взаимодействию с С<-С4-диалкилдисульфидом и в случае, когда получа15 ют рацемат, его разделяют на отдельные оптические изомеры, а целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли.