Способ получения производного @ 3н @ -имидазо- @ 5,1- @ -1, 2,3,5-тетразин-4-она
Изобретение касается замещенных гетероциклнческих веществ и, в част нести, получення ЗН имидазо- 5, l-aj 1,2,3,5-тетразин-4-онов, замещенных в положенни 3 метилом, 2 хлорэтилрм или 2-бромэтилом и в положении 8 карбамонлом, метилкарбамонлом нли диметилкарбамонлом, которые оказывают противоопухолевое действие, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание новых веществ с нехарактерной для данного класса активностью. Синтез ведут из соответствукщих 4(5)-дназоимидазол-5
6® (И) А3
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОЯИТЕТ СССР
AO ДЕЛАЯ И306РЕТЕНИЙ И ОТМРЫТИЙ
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Й ПАТИН ТУ (21) — 3482389/23-04 (22) 23.08.82 (31) 8125791 (32) 24.08.81 (33) GB (46) 23.12.88.. Бюл.В 47 (71) Мэй энд Бейкер Лимитед (GB) (72). Эдвард Лант, Малкольм Фрэнкис
3 рахам Стивенс, Роберт Стоун и Кеннет
Роберт Харри Вулдридж (СВ) (53) 547.883.07(088.8) (56) Tveit К,М., Fodstad О., Olsnes S„
Rinl Л. In vitro sensitivity of human
melanoma xenografts to cytotoxic
drugs, Correlation with in vivo che mosepsitivity. Inst. I.Cancer. 26, 198О1 р. 717-722.
Патент СССР Ф 1227117, кл. С 07 Н 15/24, 22.08.81. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНОГО .
:(зн)-ИИИДАЗО- P,1 ag-1,2,3,5-ИТРА НИ-4-ОНА
СЯ1 4 С 07 D 487 04 А 61 К 31 53 (57) Изобретение касается замещенных гетероциклических веществ и, в частности, получения (ЗН)-имидазо- 5,i-а)
l,2,3,5-тетразин-4-онов, замещенных в положении 3 метилом, 2-хлорэтилом или 2-бромэтилом и в положении 8 карбамоилом, метилкарбамоилом или диметилкарбамоилом, которые оказыва« ют противоопухолевое действие, что может быть использовано и медицине.
Цель изобретения - создание новых веществ с нехарактерной для данного класса активностью. Синтез ведут из соответствующих 4(5)-диазоимидазол-5 (4)-карбоксимида и изоцианата при температуре от комнатной до 30 С в темноте. Новые вещества образуются либо в кристаллической, либо в полиморфной форме. Их активность, например, против лнмфомы типа Т Х5 при дозе 40 мг/кг (по времени жйзни мыаей) составляет 60 дней. 2 табл.
1447284
Изобретение относится к способуполучения нового производного ЗН)имидаэо- (5,1-а)-1,2,3,5-тетразин-4она общей формулы
10 где R q прецставляет собой метильную, 2-хлорэтильную или 2-бромэтильную группу, а R представляет собой карбамоильную, метилкарбамоильную или диметилкарбамоильную группу, обладающего противоопухолевой активностью.
Цель изобретения — получение новых 20 производных тетразина, обладающих новым спектром биологических свойств.
Пример 1 8-Карбамоил-3метил-(ЗН1-имидазо (5,1-а)-1,2,3,5тетразин-4-он. Соединение, А. 25
4 (5) -Диазоимида зол-5 (4 ) -карбоксимид (500 мг) суспендируют в метилизоцианате (3,0 мл) и перемешивают в ,темноте при температуре окружающей среды в течение 21 дня. Затем реакционную смесь разбавляют безводным диэтиловым эфиром и отфильтровывают.
Остаток быстро промывают безводным метанолом, затем безводным диэтиловым эфиром и высушивают на воздухе, в темноте при комнатной температуре с получением 8-карбамоил-3-метил(ЗН)-имидазо (5 1-а)-1,2,3,5-тетразин4-она в виде светло-коричневого микрокристаллического твердого веще ства (198 мг) с т.пл. 210 С (с выделением газа и потемнением в диапазоне а температур 160-210 С).
Элементный анализ.
Найдено, 7: С 36,6; Н 3,10;
N 44,2.
C6H Вычислено, l: С 37,1; Н 3,09; N 43,3, П р и и е р 2. Соединение С. 4 (5) -Диазоимидазол-5 (4)-карбокс50 амид (300 мг) суспендируют в безводном дихлорметане (10 мл) и добавляют 2-хлорэтилизоцианат (1,0 мл), Затем реакционную смесь перемешивают в темноте при комнатной температуре в течение 30 дн» Полученную таким образом суспензию кремового цвета отфильтровывают, остаток промывают безводным диэтиловым эфиром и высушивают на воздухе в темноте с получением 8-карбамоил-3-(?-хлорэтил)13Н1-имида зо-)5, 1-а 1-1, 2, 3, 5-тетразин-4-она (483 мг} в виде порошка кремового цвета с т.пл. 158 С (с сильным разложением). Элементный анализ. Найдено, %: С 34,7; Н 3,0! N 34,9. C H C1N Oi Вычислено, %: С 34,7; Н 2,91; N 34,7 ° Повторением указанной методики получают также 8-карбамоил-3-(2хлорэтил)- (ЗН)-имидазо-$5,1-a)-1,2, 3,5-тетразин-4-он в другой полиморфной форме с т.пл. 164-165 С (с разложением). Пример 3. Соединение А. Суспензию 4(5}-диазоимидаэол-5(4)— карбоксамида (1,37 г) и этилацетате (20 мл) обрабатывают метилизоцианатом (7,0 r) и перемешивают в закрытом сосуде в темноте при комнатной температуре и течение 3 нед. Полученное твердое вещество отфильтровы-. вают и промывают диэтиловым эфиром с получением 8-карбамоил-3-метил-(ЗН1имидазо-(5,1-<)-1,2,3,5-тетразин-4она (1,.9 г) в виде твердого вещества кремового цвета с т.пл. 212 С (с гао зовыделением), Это вещество перекристаллизовывают из растворителей трех систем с получением трех различных продуктов, каждый из которых имеет слабое отличие в ИК-спектрах. Вероятно все три продукта были полиморфными формами 8карбамоил-3-метил- ЗН1-имидазо-15,1а) -1,2,3,5-тетразин-4-она. (i) Бесцветные иглы получены из смеси ацетон — вода (3:1 по объему), ма кс 3410э 3265, 1730, 1758 и 1678 см, т.пл. 212 С (с газовыделением). (11} Белые микрокристаллы получены из смеси ацетон — вода (1:3 по объе-1 му), „ „ 3430, 3200, 1740 и 1675 см т.пл. 210 С (с газовыделением). (ii .) Гранулированное твердое вещество получено из горячей воды, 1м кс 3450, 3380, 3200, 1742, 1688 и 1640 см, т.пл. 215 С (с газовыО делением, потемнение при 2!0 С). Пример 4. Соединение С, Суспензию 4(5)-диазоимидазол-5(4)карбоксамида (1,0 г} в этилацетате 14472 (30 мл) обрабатывают 2-хлорэтил-изоцианатом (3,3 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 дн. Затем реакционную смесь 5 разбавляют диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают с получением 8-карбамоил-3(2-хлорэтил) - (ЗН1-имидазо (5 1-aj— 1,2,3,5-тетразин-4-она (1,6 г) в виде 10 бесцветного твердого вещества с о т.пл. 164-165 С (с разложением}. Элементный анализ. Найдено, _#_: С 34,5; Н 2,88; N 34,5; С1 14,6. CHС>>o Вычислено, Х: С 34,65; Н 2,91; N 34,65; Cl 14,61. Пример 5. Соединение С. 20 Суспензию 4 (5)-диазоимидазол-5 (4)карбоксамида (5,0 г} в смеси дихлорметана (158 мл) и N-метилпирролид-2она (8, 3 мл) обрабатывают 2-хлорэтилизоцианатом (16,7 мл) и смесь перемешивают в темноте при комнатной температуре в течение 14 дн. Затем реакционную смесь разбавляют безводным диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровьвают и 30 промьвают диэтиловым эфиром с получением 8-карбамоил-3-(2-хлорэтил)(ЗН)-имидазо 5,1-а1 -1,2,3,5-тетразин4-она (6,3 r) в виде твердого вещества пурпурного оттенка с т.пл. 164165 С (с разложением). Элементный анализ. Найдено, Х: С 34,7; Н 2,95; N 34,5; Cl 14,4. С Н1С160 х Вычислено, _#_: С 34,65; Н 2,91; N 34,65; Cl )4,61. Пример 6. Соединение С. Суспензию 4(5)-диазоимидазол-5(4)карбоксамида (145 r} в этилацетате 45 (2175 мп) обрабатывают 2-хлорэтилизоцианатом <478,5 мл) и перемешивают при 30 С в темноте в те— чение 2 дн. Затем смесь отфильтровывают с получением 8-карбамоил-3- 50 (2-хлорэтил)- (ЗН)-имидазо-(5,1-а)1,2,3,5-тетразин-4-она (250 r} в виде твердого вещества персикового цвета с т.пл. 166 С. Пример 7. Соединение А. Перемешиваемую суспензию 4(5)диазоимидазол-5(4)-карбоксамида (2,2 г) в смеси дихлорметана (70 мл} 84 4 и N — метилпирролид-2-она (3,5 мл) об" рабатывают метилизоцианатом (7,0 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 нед. Смесь разбавляют диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают с получением 8-карбамоил-3-метил-(3H)имидазо(5,1-aj-1,2,3,5-тетразин-4она (2,38 r) в виде твердого вещества бледно-пурпурного цвета с т.пл. 202-203 С (с разложением). Элементный анализ. Найдено, Х: С 36 8; Н 2,94; N 43, 10. С&Н&И6 0z Вычислено, X С 37,11; Н 3,14; N 43,3. Полиморфная форма 8-карбамоил-3метил- (ЗН -имидазо-f5,!-а)-1,2,3,5тетразин-4-она получена путем растворения его в ацетонитриле, фильтрования, концентрирования фильтрата досуха и растирания полученного ос татка с диэтиловым эфиром. Продукт получают в виде твердого вещества о оранжевой окраски с т.пл. 200 С (с разложением). Элементный анализ. Найдено, Х: С 37 4; Н 3,26 N 43,5. Спектр ЯМР этого соединения s диметилсульфоксиде-96 идентичен спектру указанного бледно-пурпурного твердого вещества, но его ИК-спектр (КВг диск) показал некоторое .различие. Пример 8. Соединение D. Перемешиваемый раствор нитрата натрия (0,64 r) в воде (4,6 мл) охлаждают до 5-10 С и при этой темпера; туре по каплям обрабатывают раствором 5-амино-4-метилкарбамоилимидазола (1,00 г) в водном раствбре уксус" ной кислоты (1И, 14 3 мл) в течение 5 мин. Перемешивание продолжают при 5-10 С в течение 5 мин. Затем темнокрасный раствор экстрагируют этилацетатом (4 35 мл) и объединенные экстракты высушивают над сульфатом магния. Получающийся раствор содержит сырой 4(5)-диазо-5(4)-метилкарбамоилимидазол, который нестабилен и сразу же использован на следующей стадии без дополнительной очистки. Раствор 4(5)-диазо-5(4)-метилкар" бамоилимидазола в этилацетате, полученный как описано выше, обрабатывают 2-хлорэтилизоцианатом (4,3 мл} и оставляют стоять в темноте в тече. 1447284 ние 1 дня. Затем раствор выпаривают при 40 С/!0 мм рт.ст. и остаток перетирают с петролейным эфиром о (т.кип. 40-60 С) с получением оран жевой смолы (4,23 г). Эту смолу об5 рабатывают этилацетатом (50 мл) и отфильтровывают, фильтрат. выпаривают о при 40 С/10 мм рт.ст. с получением оранжевой смолы (2,94 r). Эту смолу очищают колоночной хроматографией при среднем давлении на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и ацетонитрила (4:1 по объему) с получением 3-(2-хлорэтил)-8-метилкарбамоил-(3H)- 15 имидазо Р5, 1-а)-1, 2, 3, 5-тетразин-4-она (0,81 г) в виде твердого вещества пурпурного цветя с т.пл. 120-122оС (с разложением). Элементный анализ. Найдено, Х: С 37,3; Н 3 58; М 31,9. СВНз С1Н О g Вйчислено, Х: С 37,4; Н 3,53; М 32,?. 25 Пример 9. Соединение Н. Раствор 4(5) -диазо-5(4)-диме— гилкарбамоилимидазола (1,59 r) в сухом этилацетате (57 мл) обрабатывают 2-хлорэтилизоцианатом (6,36 г) 30 и перемешивают при комнатной температуре в темнс те в течение 24 ч. Затем раствср выпаривают в вакууме при 35 С и в конце при. 0,1 мм рт.ст. для удаления избытка 2-хлорэтилизо- 35 цианата. Остаточную жидкость очищают колоночной хроматографией при среднем давлении на силикагеле, элюируя смесью этилацетатацетонитрил (4: 1 по объему) с получением 3-(2-хлорэтил)-8- 40 диметилкарбамоил- 13Н)-имидазо-(.5, l 81"1,2,3,5-тетразин-4-она (0,82 г) в виде бесцветных кристаллов с т.пл. 114-116 С. Элементный анализ. 45 Найдено, Х: С 39, 7; Н 3, 95; N 80,8. С,Н„С1Н,О, Вычислено, Х: С 39,9; Н 4,10; Пример 10. Соединение I. Перемешиваемую суспензию 4(5)диазоимидазол-5 (4)-карбоксимида (1 0 г) р гексаметилфосфорамиде (4 мл) обрабатывают 2-бромэтилизоциа-55 натом (4,5 мл) и смесь перемешивают в темноте при комнатной |температуре в течение 2 дн. Реакционную смесь затем разбавляют безводным диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают и промывают безводным диэтиловым эфиром с получением 3-(?-бромэтил)-8-карбамоил-(ЗН 1имидазо-(5,1-а)-1,?,3,5-тетразин-4она (1,17 r) в виде бесцветного твердого вещества с т.пл. 156-157 С (с разложением). Элементный анализ. Найдено, Х; С 29,5; Н 2,36; N 29,1; Br 27,3. С Н BrNe0< Вйчислено, Х: С 29,3; Н 2„46; N 29,3; Br 27,8. Пример 20. (справочный), (i) Однородную смесь 5-нитроимидазол-4-карбоновой кислоты (2,0 г) и пентахлорида фосфора (2,67 r) перемешивают и нагревают на масляной бане при 120 С в течение l ч ° Получающуюся желтую суспензию выпаривают при 60 С/О ° 1 мм рт.ст„ в течение 30 мин с получением 1,б-динит-, ро-5Н, 1ОН,.-диимидазо (1,5-а; 1, 5 -д)пиразин-5,10-диона (1,90 г) в виде желтого твердого вещества с о т.пл. 249-251 С (с разложением). j макс (KHr диск) 1 750 см ; m/е 278 {M <)). (ii) Водный раствор диметиламина (25 мас.Х, 60 мл) охлаждают до 0-5 С и обрабатывают порциями при перемешивании 1,6-динитро-5Н, 10Н-диимидазо (1,5a:1, 5 -с1)пиразин-5, 10-дионом (6,0 г) при той же температуре. Получающийся пурпурный раствор перемешивают в течение 2 ч. Раствор выпаО ривают при 50 С/10 мм рт.ст. и затем подкисляют обработкой концентрированной соляной кислотой с получением оранжевого раствора. Этот раствор экстрагируют этилацетатом (7» 200 мл), объединенные экстракты сушат над сульфатом магния и выпаривают с получением твердого вещества желтого цвета (б,б r). Это твердое вещество перетирают с толуолом (50 мл) и затем перекристаллизовывают из этилацетата с получением 5(4)-иитро-4(5)-диметилкарбамоилимидазола (2,53 г) в виде желтых кристаллов с т.пл. 193-195 С. Элементный анализ. Найдено, Х: С 39,9; Н 4, 23; N 30,4. CeHeN4O3 Вычислено, : С 39,!; Н 4,38; N 30,4, 1447284 (11 5 ) Раствор 5 (4)-нитро-4 (5) -ди,метилкарбамоилимидазола (1,62 r) в I сухом диметилформамиде (32 мл) обрабатывают окисью платины (0,32 r) и встряхивают в атмосфере водорода при атмосферном давлении и комнатной температуре. После 3 ч поглощение водорода завершено (710 мл). Смесь обрабатывают активированным углем и отфильтровывают через диатомит. Темно-коричневый фильтрат выпаривают о при 50 С/0,1 мм рт.ст. и получающийся остаток перетирают с диэтиловым эфи,ром с получением сырого 5(4)-амино 4(5)-диметилкарбамоилимидазола ! (1,75 г) в виде темно-коричневого кристаллического вещества с т.пл 179-181 С (Q „ (KBl диск) 1595 см, ЯМР в диметилсульфоксиде-Э : сингле- 20 . ты при 3, 2 и ?, 0 F), которое еще содержит примесь коллоидальной платины и которое используют в следующей стадии дополнительной очистки., (N) Перемешиваемый раствор нитрата25 натрия (0,79 r) в воде (5,7 мл) охлаждают до 5-10 С и обрабатывают, по каплям, при этой температуре раствором 5(4)-амино-4(5)-диметилкарбамоилимидазола (1,75 г) в водной уксусной 30 кислоте (1M, 17,6 мл) в течение . . 5 мин. Получающийся. раствор экстрагируют этилацетатом (4 40 мл), объединенные экстракты высушивают над сульфатом магния и выпаривают при 30 С/10 мм рт.ст. с получением 4(5)-диазо-5(4)-диметилкарбамоилимидазола (1,59 r) в виде оранжевых кристаллов с т.пл. 101-103 С (с разложением). 4р Элементный анализ. Найдено, Х: С 42 б; Н 4 17; N 41,4. С,H„N 0 Вычислено, %: С 43 6; Н 4,27; Б 42,4. Активность новых соединений (А, I, С, D, Н) против лимфомы типа TLX5, имплантированной на мышах, иллюстрируется табл.l. Активность соединения С против различных опухолей, имплантированных на мышах, иллюстрируется табл.2. Клетки 10 опухоли вида L 1210 имплантировали внутрибрюшинно в мышей BDF, в 0 день. Мышей обрабатывали в первый день внутрибрюшинным введением соединения С, растворенного в 10Х-ном диметилсульфоксиде.в арахисовом масле (0,1 мл), а затем как указано в табл.2. Клетки 10 опухоли вида Р388 имплантировали внутрибрюшинно в мышей BDF в 0 день. Затем мышей обрабатывали соединением С по указанной методике. Формула изобретения Способ получения производного (3H)-имидазо-(5,1-а)-1, 2,3,5-тетразин-4-она общей формулы 2 м I xN Л 1 где К, — 2-хлорэтип или 2-бромэтил; R — карбамоил, метилкарбамоил или диметилкарбамоил, отличающийся тем, что соединение общей формулы где R имеет указанные значения, подвергают взаимодействию при темпео ратуре от комнатной до 30 С и в.отсутствии света с изоцнанатом общей формулы R,NC09 rpe R, имеет указанные значения. 1447284 Таблица 1 выживания еыии с оль ными 160 16,0 160 16,2 40 То же 40 Мыши, которые спустя 60 дн. оставались живыми, далее не исследовались Таблица 2 L 1210 40 60 60 25 12,5 9 Р388 40 20 20 60 7,5 Ф Мьпии, которые спустя 60 дн оставались живыми, далее не исследовались. Тип опух ли Все 5 обработан- 60 ных мышей продолжали жить 60 дн после имплантации
