Способ получения соединений цефалоспорина

 

Изобретение касается производных цефалоспорина, в частности получения соединений общей ф-лы 1 @ , где K - *98N-О-СН-СН<SB POS="POST">2</SB>-СН<SB POS="POST">2</SB>-NH-С=О

R<SB POS="POST">1</SB> - аминогруппа

один из R<SB POS="POST">2</SB> и R<SB POS="POST">3</SB> - низшая алкилтио-, NH<SB POS="POST">2</SB>, низший алкил, галоген, низшая алкоксигруппа, а другой - водород, NH<SB POS="POST">2</SB>, которые как антибиотики могут быть использованы в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соединений ф-л II и III @ (III), где X - галоген или ацетоксигруппа

R<SB POS="POST">4</SB> - C(O)OH или п-метоксибензилоксикарбонил

R<SB POS="POST">5</SB> - NH<SB POS="POST">2</SB> или тритиламиногруппа

один из R<SB POS="POST">6</SB> и R<SB POS="POST">7</SB> - низшие алкилтио-, алкокси-или алкил, ациламиногруппа, NH<SB POS="POST">2</SB>, галоген, а другой - водород или NH<SB POS="POST">2</SB>, формиламиногруппа, причем когда R<SB POS="POST">4</SB> - п-метоксибензиооксикарбонил, R<SB POS="POST">5</SB> - тритиламиногруппа и R<SB POS="POST">6</SB> и/или R<SB POS="POST">7</SB> - формиламиногруппа, проводят удаление защитных групп. Новые вещества малотоксичны и в ряде случаев в 8 раз активнее известных цефалоспоринов. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

24 А3 (19) (11) (51)5 C 07 D 501/46 //А 61 К 31/545

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Ь».,. а

1 2 (21) 4355226/23-04 „(72) Тоенари Ойне, Иицуеси Вагацума (62) 4202778/04 и Тотаро Ямагути (JP) (22) 23 ° 02 ° 88 (53) 547.869.1.07(088.8) (23) 15.06.87 (56) Европейский патент tt 101265, (31) 140988 кл. С 07 D 501/24, опублик. 1984, (32) 16.06.86 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОЕДИНЕНИЙ (33) JP 1 ЦЕФАЛОСПОРИНА

:(57) Изобретение касается производных (46) 15.03.90. Бюл. N - 10 . цефалоспорина, в частности получения (71) Танабе Сейяку Ко, Лтд (JP) соединений общей ф-лы Е

Й1 C=N-С- С(=К)-C(0) -МН-CH-CH — 8 — СНг Rg 8 3

1 II II. 1 I

S CH О=С N-CM=C-СН -N=CH-CH)CH)CH=CH, где K — ) N-О-CH-CHg-CHg-NH-C=O; R

1 аминогруппа; один из К и R3 — низшая

BJIKBJITHO NHg - HH9UIHA алкил, I éËOÐÂH, низшая алкоксигруппа, а другой — водород, NH<, которые как антибиотики могут быть использованы в медицине.

Цель — создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соединений ф-лы ХХ и III р; С=к-с-С(=к -С(О) NH-CH-CH — s — CH>

I II 1 1 1

s сн О=с-ы-св;-с-сн -х ногруппа, NH, галоген, а другой водород или NH, формиламиногруппа, причем когда R g — п-метоксибензиооксикарбонил, R 5 — тритиламиногруппа и R и/или R 7 — формиламиногруппа, проводят удаление защитных грулп. Новые вещества малотоксичны и в ряде спучаев в 8 раз активнее известных цефалоспоринов. 3 табл.

Н (HO >

1 1 6

rye Х вЂ” галоген или ацетоксигруппа;

К,)- С(О)ОН или п-метоксибензилокси« карбонил; R <- NH g или тритиламиногруппа; один из К и R> — низшие алкилтио-, алкокси- или алкил, ациламиИзобретение относится к способу получения новых антибиотиков цефалоспоринового ряда, в частности к способу получения соединений цефалоспорин.а формулы I

1551249

Г g >pcH -N+ соо- 83 где R, — аминогруппа, один из Кg и Rg — низшая алкилтио, группа, аминогруппа„ низшая алкиль ная группа, атом галогена или низшая алкоксигруппа, а другой из R и R>— атом водорода или аминогруппа, обла дающих активностью против грамположи тельных и грамотрицательных бактерий, а также против микроорганизмов, продуцирующих р-лактамазу. 20

Цель изобретения — получение. новых соединений цефалоспоринового ряда, обладающих улучшенной антибактериальной активностью.

Пример 1. I. Смесь 1,8 мл 25 .воды и 5,25 r йодида натрия нагревают

: до 80 С и в эту смесь добавляют

0,95 r 3-формиламино-5-метоксипиридина и 1,34 r 7(s- 1(2)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-2- (((38) — 2-оксопирролидинЗ»ил) оксиимино) ацетамидо ) -цефалоспорановой кислоты. Смесь перемешивают при той температуре в течение 30 мин.

После охлаждения в смесь добавляют

30 мл воды, а нерастворимые материалы

35 отделяют фильтрацией. Фильтрат пропускают через колонку, снабженную материалом СХП-20II. Колонну промывают водбй и элюируют 25Х-ным водным раствором метанола. Фракции, содержащие целевой продукт, собирают и выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении. В остаток добавляют ацетон и полученный в результате порошок собирают фильтрацией и сушат, в результате чего получают 360 мг

7 — 1(2)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-2((3S)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино 1ацетамидо )-3- ((3-формиламино5-меток си:-1-пиридино) метил -3-цефемо 50

4-карбоксилата. T.ïë. 164-175 С (разложение) .

IIMP (DgO), I: 2, 1-2, 6 (2Н, мультиплет): 3, 0-3,8 (4Н, мультиттлет);

3,90 (ÇH, синглет), 4,93 (1H, триплет, Л = 8 Гц); 5,13 (1Н, дублет, Л

14 Гц); 5,19 (1Н, дублет, 3 = 5 Гц);

5,30 (1Н, дублет, J:= 14 Гц); 5,72 (1Н, дублет1 I = 5 Гц), 6,72 (1Н, синглет); 7,87 (1Н, мультиплет); 8,27 (1Н, синглет); 8,41 (1Н широкий синглет); 8,90 (1Н, широкий синглет), 2. Смесь 260 мг 7P- f(Z)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-(((3S)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино7ацетамидо)-3((3-формиламино-5-метокси-1-пиридино)метил)-3-цефем-4-карбоксилата и

6 мл 57.-ной хлористоводородной кислоты перемешивают при 40 С в течение

45 мин. Смесь охлаждают и рН обеспечивают на уровне 4,8 при помощи анионообменной смолы (которая производится формой Ром и Хасс Ко., CllIA, под торговым наименованием "Амберлит ИРА93", в дальнейшем она сокращенно обозначается ИРА-93). Смолу отделяют фильтрацией и фильтрат пропускают через колонну, упакованную материалом

СХП-20II. Колонну промывают водой и элюируют, 307-ным водным раствором метанола. Фракции, содержащие целевой продукт, собирают и выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении. В остаток добавляют ацетон. Полученный в результате порошок собирают фильтрацией, в результате чего получают 102 мг 7 5- ((Z)-2-(2-аминотиазол4-ил)-2- Г(ЗЯ)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино)ацетамидот-3- ((3-амино-5метокси-1-пиридинио)метил1-3-цефем-4карбоксилата. Т.пл. 180-195 С (разложение), ЯМР (D O + CF COOD), : 2,0-2,7 (2Н, мультиплет); 3,20 (1Н, дублет, J = 181 Гц); 3,2-3,6 (2Н, мультиплет);

3,63 (i H, дублет, J = 18 Гц); 3,88 (3 Н, синглет); 5, 03 (1 Н, триплет, Я =; 5 07 (1Н, дублет,Л = 14 Гц);

5,22 (1H, дублет, J = 5 Гц); 5,37 (1Н, дублет, J = 14 Гц); 5,77 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 7, 00 (1Н,,синглет); 7, 10 (1Н, широкий синглет).

Пример 2. Смесь 2 мл диметилформамида и 2 мл воды нагревают до

75-80 С и в эту смесь добавляют 8 r йодида натрия и 1,6 r 2-метилтиопиридина. В смесь добавляют 2,0 r 7Pi%(Z)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)-215512

45 (((3$)-2-оксопирролидин-3-ил) оксиимино)ацетамидо)цефалоспорановой кислоты и смесь перемешивают при 80 С в течение 1 ч. После охлаждения в смесь

5 добавляют 40 мл воды и рН смеси обеспечивают на уровне 1 добавлением

6 н.раствора серной кислоты при охлаждении льдом. Осадки собирают фильтрацией и промывают водой, в результа- lO те чего получают 7P- W(Z)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил) -2- (((3$ ) -2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино)ацетамидо)-3((2-метилтио-1-пиридинио) метил )-3цефем-4-карбоксилата в виде неочищен- 15 ного продукта. Неочищенный продукт растворяют в 12 мл 887-ной муравьиной кислоты и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч.

В смесь добавляют 40 мл воды и нераст-!О воримые материалы отделяют фильтрацией, Фильтрат промывают простым эфиром и концентрируют до сухого состояния при пониженном давлении. Остаток растворяют в 40 мл воды и рН раствора обес- 25 печивают на уровне 6,0 при помощи водного раствора бикарбоната натрия.

Нерастворимые материалы отделяют фильтрацией, а фильтрат подвергают хроматографии на колонне СХП-20. Ко- 30 лонну.промывают водой, а затем элюируют 257.-ным водным раствором метанола. Фракции, содержащие целевой продукт, собирают и концентрируют до сухого состояния при пониженном давлении при температуре ниже 40 С. В остаток добавляют ацетон и полученный в результате порошок собирают фильтрацией, в результате чего получают

200 мг 7р- ((Е)-2-(2-аминотиазол-4- 40 ил)-2- (((3$)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино )ацетамидо )-3- ((2-метилтио1-пиридинио) метил )-3-цефем-4-карбоксилата.

ИК.,4 „„",(см ): 1780, 1690.

ЯМР (D>0) д: 2, 0-2, 7 (2Н, мультиплет); 2, 76 (ЗН, синглет); 3, 1-3,6 (4Н, мультиплет); 4,96 (1Н, триплет, J = 7 Гц); 5,13 (1Н, дублет, J = 50

= 5 Гц); 5, 18 (1Н, дублет, J = 15 Гц);

5, 65 (1H, дублет, J = 15 Гц); 5,75 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,83 (fH синглет); 7,4-7,8 (2Н, мультиплет);

8,0-8,3 (1Н, мультиплет); 8,53 (1Н, дублет, J = 7 Гц) .

Пример 3. Смесь 0,4 мл диетилформамида и 3,2 мл воды нагреают до 75-80 С, а затем в эту смесь

49 6 обавляют 9,44 г йодида натрия и ,41 r 3-метилтиопиридина. В смесь добавляют 2,41 г 7р- j(Z) 2-(2-аминотиазол-4-ил)-2- ((3$)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино1ацетамидо цефалоспорановой кислоты и смесь перемео шивают при 80 С в течение 1 ч. После реакции реакционную смесь концентрируют до сухого состояния при пониженном давлении. В остаток добавляют

80 мл ацетона и сме сь з атем п еремешивают. Нерастворимый порошок собирают фильтрацией и промывают ацетоном. Полученный таким образом порошок добавляют в 40 мл воды и рН смеси обеспечивают на уровне 6 при помощи водного раствора бикарбоната натрия. Нерастворимые материалы отделяют фильтрацией и фильтрат подвергают хроматографии на колонне СХП-20. Ко-:лонну промывают водой, затем элюируют

2SZ-ным водным раствором метанола.

Фракции, содержащие целевой продукт, собирают и концентрируют до сухого состояния при пониженном давлении, в результате чего получают 750 мл

7р- ((Е)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-2(((3$)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино)ацетамидоf-3- f(3-метилтио-1-пиридинио)метил)-3-цефем-4-карбоксилата в виде порошка.

ЯМР (Р О), д :2, 1-2,9 (2Н, мультиплет); 2,64 (ЗН, синглет); 3,0-3,9 (4Н, мультиплет); 5, 03 (1Н, триплет, = 7 Гц); 5,25 (1Н, дублет, J

= 15 Гц); 5,28 (1H, дублет,J = 5 Гц);

5,60 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,82 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,90 (1Н, синглет); 7,7-8,0 (1H, мультиплет);

8,1-8,4 (1Н, мультиплет); 8,5-8,7 (1Н, мультиплет); 8,82 (1Н, синглет) °

Пример 4. 1. Смесь 50 мл воды и 140 r йодида натрия нагревают до 75-80 С и в смесь добавляют 26 г

3-формиламино-5-метоксипиридина и

36,6 r 7p- I (Z)-2-(2-аминотиазол-4ил)-2- (((3$)-2-оксопирролидин-3-ил)— оксиимино)ацетамидо3-цефалоспорановой кислоты. Смесь перемешивают при

80 С в течение 30 мин. Смесь выпари— вают до сухого состояния при пониженном давлении и в остаток добавляют

1000 мл ацетона. Полученный в результате порошок собирают фильтрацией, в результате чего получают 7Р- 1(Е)2-(2-аминотиазол-4-ил)-2- (((3$)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино)ацетамидо )-3- ((3-@ормиламино-5-метокси-1-пи1551249

55 ридинио)метил )-З-цеАем-4-карбоксилат, в виде неочищенного продукта.

2. Полученный на стадии 1 продукт растворяют в 1,2 л 5 ной хлористоводородной кислоты, нерастворимые материалы отделяют фильтрацией, Фильтрат перемешивают при 40 С в течение 1 ч, а его рН обеспечивают на уровне примерно 4,5 при помощи водного раство10 ра гидрата окиси натрия при перемешивании и охлаждении, а затем концентрируют при пониженном давлении до объема примерно 500 мл, Концентрированный раствор пропускают через колон15 ну, которая упакована материалом

СХП-20П. Колонну промывают водой, а затем элюируют 30%-ным водным раствором метанола. Фракции, содержащие целевой продукт, собирают и выпаривают

20 до сухого состояния при пониженном давлении, в результате чего получают

8, 1 r 7p- I(Z) -2- (2-аминотиазол-4-ил)2- (((ЗБ)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино1ацетамидо j-3- f(3-амино-5-метокси-1-пиридинио)метил)-3-цефем-4-карбоксилата. (Физико-химические свойства этого продукта идентичны свойствам продукта, полученного в примере 1(2).

Пример 5. 1. Смесь Збмл воды и 10 5 г йодида натрия нагревают до 80 С и в смесь добавляют 1,7 г

3-формиламино-2-метилпиридина и

2, 68 r 7p- ((Z)-2-(2-аминотиазол-4-ил)—

2- (((ЗБ)-2-оксопирролидин-3-ил)оксиимино )ацетамидо )-цефалоспорановой кислоты. Смесь перемешивали при 80о

82 С в течение 30 мин и выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении. В остаток добавляют 100 мл ацетона. Полученный в результате порошок собирают при помощи фильтрации и растворяют в 80 мл воды. Нерастворимые материалы отделяют фильтрацией, 45 а фильтрат пропускают через колонну, заполненную СХП-20П. Колонну промывают водой и элюируют 25 -ным водным раствором метанола. Фракции, содержащие

) целевой продукт, собирают и выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении, в результате чего получают

7p- ((Z)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-2(((Ы)-2-оксипирролидин-3-ил)оксиимино)ацетамидо -3- ((3-формиламино-2метил-1-пиридиыио)метил)2-цефем-4карбоксилат.

2. Продукт, полученный на стадии 1, растворяют в 10 мл 50 -ного раствора г хлористоводородной кислоты и смесь перемешивают при 40 С в течение

40 мин. рН смеси обеспечивают на уровне примерно 4,5 при помощи НрА-93.

Смолу отделяют фильтрацией, а фильтрат пропускают через колонну, заполненную материалом СХП-20П. Колонну промывают водой и элюируют 30%-ным водным раствором метанола. Фракции, содержащие целевой продукт, собирают и выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении. В остаток добавляют ацетон. Полученный в результате порошок собирают фильтрацией, в результате чего получают 320 мг 7p- f(Z)2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-t((38)-2оксопирролидин-3-ил)оксиимино)ацетамидо)-3- ((3-амико-2-метил-1-пиридинио)метил )-2-цефем-4-карбоксилата.

Т.пл. 178-185 С (разложение).

ЯМР (Л,O), d : 2,0-2,7 (2Н, мультиплет); 2,51 (ЗН, синглет); 2,9-3,6 (4Н, мультиплет); 4,95 (1Н, триплет, 3 7 Гц); 5, 13 (1Н, дублет, 3

= 5 Гц); 5, 18 (1Н, дублет, J = 15 Гц), 5,52 (1Н, дублет, J = 15 Гц), 5,73 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,81 (1Н, синглет); 7,2-7,6 (2Н, мультиплет);

7,90 (1Н, мультиплет).

Пример 6. 1. 1,65 r дигидрата (Z)-2-(2-тритиламинотиазол-4ил)-2- (((3$)-2-оксопирролидин-3-ил)— оксиимино)уксусной кислоты растворяют в 6 мл диметилацетамида и в раствор по каплям при температуре -25 С доо бавляют 1,84 г оксихлорида фосфора.

Смесь охлаждают до температуры -30 С (полученный в результате раствор именуется далее раствором А).

1,43 г п-метоксибензил-7р-амино3-хлорметил-3-цефем-4-карбоксилат и-толуолсульфоната растворяют в 6 мл диметилацетамида, в этот раствор при температуре -20 С добавляют 2, 61 r пиридина и затем охлаждают до температуры -30 С. Эту смесь добавляют в раствор А, полученный выше, а смесь перемешивают в течение 10 мин. Смесь сливают в 100 мл смеси лед — вода и нерастворимые материалы собирают фильтрацией. Полученные таким образом материалы растворяют в этилацетате, промывают водным раствором хлорида натрия, сушат и затем выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении. Остаток подвергают очистке при помощи хроматографической колонны на силикагеле. Целевой про9 1551249 10 дукт собирают и концентрируют до су- ра бикарбоната натрия, а полученный хого состояния при пониженном давле- в результате раствор пропускают чении. В остаток добавляют простой рез колонну, заполненную СХП-20П. Коэфир а полученный в результате поро- лонну промывают водой а затем элюУ

У шок собирают фильтрацией, в резуль- ируют 257.-ным водным раствором метатате чего получают 1,46 r п-метокси- иола. Фракции, содержащие целевой бензил 7р- 1(Е)-2-(2-тритиламинотиа- продукт, собирают и выпаривают до зол-4-ил)-2- f((3S)-2-оксопирролиднн- сухого состояния при пониженном дав3-ил)оксиимино)ацетамидо1-3-хлорме- 10 лении. В остаток добавляют ацетон, тил-3-цефем-4-карбоксилата. Т.пл. а полученный в результате порошок со153-155 С. бирают фильтрацией, в результате чего

ИК, 1"""О (cM ) 1790, 1700, 1605. получают 140 мг 7 - (Е)-2-(2-амином е Кс см,, . тиазол-4-ил) -2- (((38) -2-оксопирролиЯМР (CDC1> ), 1: 2,20-2, 60 (2Н,муль- 5 дин-3-ил) оксиимино)ацетамидо j-3- 1(3типлет); 3, 20-3, 80 (4Н, мультиплет); амино-2-метилпиридинио) метил )-3-цефем3, 73 (ЗН, сингле т); 4, 30 (1 Н, дублет, 4-карбоксилата.

J = 12 Гц); 4,56 (1Н, дублет, J = физико-химические свойства этого

12 Гц); 4,92 (1Н, дублет, J = 5 Гц); продукта идентичные свойствам продук4,96 (1Н, триплет, J = 9 Гц); 5,14 та, полученного в примере 5(2), (2Н, синглет); 5,81 (1Н, двойной ду- Л р и м е р ы 7-26. Соответстблет, J = 5 и 9 Гц), 5,81 (1Н, двой- вующие исходные соединения обрабатыной дублет, 1 = 5-9 Гц); 6,70 (1Н, вают по той же схеме, что была описинглет); 6,80 (2Н, дублет,J = 9 Гц); сана в примере 1, в результате чего

7,20 (16Н, синглет), 7, 25 (2Н, дублет,25 получают соединения, приведенные

J = 9 Гц); 8,66 (1Н, дублет, J = в табл. 1.

= 9 Гц). Соединения формулы (1) обладают

2, 800 мг п-метоксибензил 7о- ((Е)- сильной противомикробной активностью 2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)-2-(((3$)- против грамположительных и грамотри2-оксопирролидин-3-ил)-оксиимино маце- 30 цательных бактерий, включающих самые тамидо)-3-хлорметил-3-цефем-4-карбо- разнообразные микроорганизмы, приксилата и 450 мг йодида натрия раст- надлежащие семействам Staphylococcus, воряют в 5 мл ацетона, смесь перемеши- Escherichia, Salmonella, К1еЬз е11а, вают при комнатной температуре в те- Proteus, Citrobacter, Entегоbacter чение 1 ч. Раствор 165 мг 3-формилами- и Serratia. но-2-метилпиридина растворяют в 20 мл

Соединения формулы (Х) обладают ацетона, добавляют в смесь при охлаж- также сильной противомикробной акдении льдом и смесь перемешивают при тивностью против бактерий, принадлекомнатной температуре в течение 5 ч. жащих семействам Pseudomonas ShigelРеакционную смесь выпаривают до сухо- 40 1а и Entегоcoccus. Например, при

ro состояния при пониженном давлении. исследовании минимальной ингибируВ остаток добавляют воду, а полученн ющей концентрации (МИК) испытываемоное в результате твердое вещество Io соединения с использованием метособирают фильтрацией, в результате да разбавления стандартных агаровых чего получают 1 г п-метоксибензил 45 пластинок (который основан на стан 7 - (Е)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)- дартном методе японского общества

2- 3((3S)-2-оксопирролидин-3-ил)окси- по Хемотерапии), с использованием имино)ацетамидо З- ((3-формиламино-2- arapa Мюллера-Хинтона в качестве метил-1-пиридинио)метил -2-цефем-4- среды (AMX: фирма Ниссуи), противокарбоксилата в виде неочищенного про- микробная активность 7р- (Е)-2-(2,50 дукта. Затем полученный таким обра- аминотиазол-4-ил)-2- (((ЗЯ -2-оксозом продукт растворяют в смеси 2 мл пирролидин-3-ил)оксиимино)ацетамидо 1 трифторуксусной кислоты и 1 мл анизо- -3- ((3-амино-5-метокси-1-пиридино)ла. Смесь перемешивают при комнатной метил)-З-цефем-4-карбоксилата, являтемпературе в течение 30 мин. 20 мл ющегося предметом изобретения против воды и 20 мл этилацетата добавляют Staphylococcus aureus 252 R.Proteus в смесь и водный раствор отделяют. :morganii 6501. Proteus rettgeri 6259 рН водного раствора обеспечивают и Entегоbacter cloacae TV-680 была на уровне 5 при помощи водного раство- не менее, чем примерно в 4 раза выll 155 ше по сравнению с противомикробной активностью 7р- ((Z) 2-(2-аминотиазол-4-ил) -2- (((3S ) -2-ок сопирролидин3-ил) оксиимино) ацетамидо) -3- ((1-пиридин но) метил 1-3-цефем-4-карбоксилата, который был предложен в Европейском Патенте l - 101265. Противомикробная активность вышеупомянутого соединения, являющегося предметом изобретения, против St aphylo co ccus au reus

Тераджимы, Escherichia cali NI HJ

JC-2, Salmonella СурЫmurium, Proteus vulgaris IID-874, Proteus inconst апэ 67 64, Cit robact er fr eundii

TL-12 и Serratia marcescens 7006 была также примерно в 2 раза выше, чем противомикробная активность соединения из Европейского Патента. Кроме того, когда 50% минимальную ингибирующую концентрацию против клинически изолированных штаммов анализировали при помощи той же процедуры, что бы-. ла упомянута выше„ противомикробная активность 7р- f(Z)-2-(2-аминотиазол4-ил)-2 (((3S)-2-оксопирролидин-3-ил)— оксиимино)ацетамидс)- 3- ((3-амино-5метокси-1-пиридинио)метил )-3-цефем-4карбоксилата, являющегося предметом изобретения, против Staphylococcus

aureus (бактерии, стойкие против метициллина, 19 штаммов), Citrobacter

freundii (20 штаммов) . Entегоbacter

sp. (20 штаммов), S errat ia marces cens (20 штаммов) была примерно в 2-4 раза выше по сравнению с противомикробной активностью вышеупомянутого соединения из Европейского Патента.

Кроме того, соединения формулы (I) характеризуются тем, что они обладают сильными защитными эффектами против инфекционных заболеваний, вызванных различными бактериями, которые включают Staphylococcus aureus H Pseudomonas aeruginosa. Соединения формулы (I) характеризуются также сильной противомикробной активностью в живом организме вследствие их высокой абсорбируемости или большой продолжительности терапевтических эффектов в живой ткани. Например, каждое испытываемое соединение применяют внутримьппечным способом мьш ам, которые были предварительно заражены внутрибрюшинным способом бактериями в достаточной степени, чтобы все необработанные мыши погибли в течение 24 ч, а затем его 50 -ную эффективную дозу (ЕД „) оценивают через 7 дней посг

1249 l 2 ле заражения при помощи процедуры запрещения на основе коэффициента выживания мыши. В этих экспериментах защитные эффекты 7p- f(Z)-2-(2-амино5 тиазол-4-ил) -2- f((38 ) -2-ок сопирролидин-3-ил) оксиимино 1ацетамидо -3- f(3-амино-5-метокси-1-пиридинио) метил j3-цефем-4-карбоксилата, являющегося предметом изобретения, против Staphyloco ccus aureus Смита (Диффузионного типа), Staphylococcus aureus 712 и

Pseudomonas aeruginosa TV-408 были соответственно. в примерно 6,2 и 3,5 раза выше по сравнению с защитными эффектами известного соединения, Кроме того, соединения (I) обладают высокой стабильностью против микроорганизмов, продуцирующих р-лактамазу, например против 8 — лактамаз, продуцированных организмами Escherichia coli МЛ-1410 РГН-823 или

Proteus vulgaris 1Н76/С-1. Соединения (I) обладают также низкой токсич25 ностью.

Результаты сравнительных испытаний.

Антибактериальная активность in

vit ro.

Жп имальную ингибирующую концентЗ0 рацию (NHK) испытуемых соединений (см. табл. 2) определяли стандартным методом на пластине в растворе агара.

Испытуемые микроорганизмы:

Грамположительные бактерии:

А — S t aphy 1o co c cus au r eus 2 09 PYC-,1

 — Entегоcoccus faecalis (S. faecalis CN-478)

Грамотрицательные бактерии:

40 С вЂ” Es cherichia co 1 i NIHJ JC-2

D — Salmonella typhymurium

Š— Proteus vulgaris IID-874

F - Proteus inconstans 6764

G — S errat i a татсез сепэ 7 006

Н вЂ” Pseudnmonas aeruginosa 4098

Микроорганизм, продуцирующий р-лактамазу

I — Staphylococcus aureus 252 R

J — Proteus vulgaris GN76/ñ-1

К вЂ” Proteus morganii 6501

Результаты испытаний даны в табл.3.

Из приведенных данных табл.3 видно, что предлагаемые соединения цефалоспорина в 2-4, а в некоторых случаях в 8 раэ активнее соединения 8 (известного) . При испытаниях на токсичность предлагаемые соединения признаков токсичности в испытуемых

13 1551249 розах не проявляли и их можно отнес- Ф о р м у ти к категории малотоксичных. Способ лоспорина

S Õ о - - -сн; Я

О COQ водород или аминогруппа, отличающийся тем, что соединение цефалоспорина общей формулы II

О о

Н где один из R и R — низший алкилтио, низший алкокси, низший алкил, амико, низший ациламино, такой, как формнламино, или атом галогена, а другой из R< и R — атом водорода, амино или низший ациламино, такой, как pMHJI8MHHO И В ÂÂó когда К, п-метоксибензилоксикарбонил, R<— тритиламиногруппа и R C и/или R7— низшая ациламиногруппа, удаляют защитные гp IIhl

Таблица 1

С-СОИИГ + R нр- (-х сну

Б СОО- Вз

О о

Соединение (I) (Пример

Свойства

T.ïë. 180-190 С (разлож.) ЯИР (D 0), Ю: 2,0-2,7 (2Н, мультиплет); 2, 29 (ЗН, синглет); 2, 9-3, 7 (4Н, мультиплет); 4,97 (1Н, триплет, Л = 8 Гц);

4 9-5 5 (2Н, мультиплет) 5 19 (1Н дублет

3 = 5 Гц); 5 75 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,83 (1H, . 4-СН

3-NHg, где  — аминогруппа; один из R u R — низшая алкилтио1 группа, аминогруппа, низшая алкильная группа, атом галогена или низшая алкоксигруппа, а другой из R< и R>1 где R — карбоксигруппа или п-метоФ ксибензилоксикарбонип;

R — аминогруппа или тритиламиноЮ группа;

Х, — реакционноспособный остаток, такой, как ацетокси или атом галогена, конденсируют с соединением пиридина

35 общей формулы III Rg

5

4 ла изобре тен ия получения соединений цефаобщей формулы I

1551249

1б

Продолжение табл. 1! Пример

Соединение (I) (Свойства

Г синглет); 7,43 (1Н, дублет, J = 6 Гц) g 7,92 (1Н, дублет, J = б Гц) р 8,60 (1Н, синглет)

Т. пл. 180-190 С (разл. ) ЯИР (020-CF gCOzD 1, 1 :

2, 1-2, 7 (2Н, мультиплет); 2, 56 (ЗН, синглет); 3,35 (1Н, дублет, J = 18 Гц); 3,33,7 (2Н, мультиплет); 3, 75 (1Н, дублет, J = l8 Гц); 5,13 (1Н, триплет, J = 9 Гц); 5,20 (1Н, дублет, Х = 15 Гц); 5,32 (1Н, J = 5 Гц);

5,62 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,88 (1Н, дублет, 8 3-NH7

5-S СН

= 5 Гц); 7, 16 (1H, синглет); 7, 45 (1Н, синглет);

7,96 (2Н, широкий синглет)

Т.пл. 177-185 С (разл.) 9 3-NH

5=8ã.

ЯИР (D20-CF CO D), d : 2, 1-2, 9 (2Н, мультиплет);

3,38 (1Н, дублет, J = 18 Гц); 3,4-3,7 (2Н, мультиплет); 3,80 (1Н, дублет, J = 18 Гц); 5,16 (1H, триплет, J = 9 Гц); 5,25 (1Н, дублет, J = 15 Гц);

5,36 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,70 (1Н, дублет, J = 15 Гц)р 5,92 (lH, дублет, J = 5 Гц); 7,20 (1Н, синглет); 7,90 (1Н, дублет, J = 2 Гц);

8,2-8,4 (2Н, мультиплет) Т.пл. 185-200 С (разл.) 4-S СН

ЯМР (D20 + CD CN), А 2,3-2,8 (2Н, мультиплет);

12 2-СН

5-ИН

2 13 3-NH

5 NH

2, 95 (3Н, сингле т); 3, 4-3, 8 (2Н, мультипле т);

3,35 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 3,83 (1Н, дублет, — 15 Гц); 5,18 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,22 (1Н, триплет, J = 7 Гц) 5,25 (1Н, дублет, Л

15 Гц); 5,45 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,02 (1H, дублет, J = 5 Гц) р 6,95 (1Н, синглет), 7,68 (1Н, дублет, J = 5 Гц) р 8р28 (1Н синглет); 8,28 (1H, дублет, J = 5 Гц)

ИКр 4 акс (см ): 1770, 1690, 1660.

ЯМР (D20-CDôD + CF3CO2D), сР:2,2-2,7 (2Н, мультиплет); 3,2-3,4 (2Н, мультиплет); 3,21 (1Н, дублет, J = 18 Гц), Зр67 (1Н, дублет, J = 18 Гц); 4,95 (1Н, триплет, J = 7 Гц); 5, 11 (1Н, дублет, 15 Гц); 5,21 (1Н, дублет, J = 51 Гц); 5,55 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,82 (1Н, дублет, J

= 5 Гц); 6,95 (1H, синглет), 7,5-7,6 (2Н, мультиплет); 7, 9-8,2 (2Н, мультиплет)

Т.пл. 170-178 С (разл.)

ЯИР (D<0) сР: 2, 0-2,85 (2Н, мультиплет); 2, 61 (ЗН, синглет); 3, 0-3, 7 (4Н, мультиплет); 5, 03 (1Н, триплет, J =- б Гц); 5,15 (1H, дублет, J = 15 Гц);

5,25 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,45 (1Н, дублет, J = 15 Гц; 5 84 ("1Нр- дублет, У = 5 Гц); 6,93 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,93 (1Н, синглет); 7,47,7 (2Н, мультиплет); 8,08 (1Н, мультиплет}. . Т.пл.: Продукт постепенно начинает, разлагаться . при 175 С

ЯИР (D,о + СоэCN), Ь : 2,0-2,6 (2Н, мультиплет);

3 02 (21Н. дублет, 3 = 18 Гц); 3,47 (1Н, дублетр

J = 18 Гц) 3 1-3 5 (2Н мультиплет) 4 81 (1H

1551249

Продолжение табл.

Соединение (I)

R Пример

Свойства

14 3-ИН2

5-сl

15 3-Р

16 4-ЯСН

1 7 4-CH

18 2-СН

19 3-СН СНЗ дублет, Л = 14 Гц); 4,88 (1Н, триплет, Л = 7 Гц);

5,09 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,12 (1Н, дублет, J = 14. Гц); 5,67 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,81 (1H, синглет); 6,67 (1Н, триплет, J = 2 Гц); 7,40 (2Н, дублет, J = 2Гц)

Т.пл. 160-170 С (разл.)

ИК, 4 „-„, (см- ): 1770, 1690, 1610.

ЯМР (D<0 + CD>CN) d : 2,10-2,60 (2Н, мультиплет);

3, 20-3,50 (2Н, мультиплет); 3,08-3, 75 (2Н, мультиплет); 4,90 (1Н, триплет, J = 9 Гц) ° 4,80-5,50 (2Н, мультиплет); 5,13 (1Н, дублет, J = 5 Гц);

5,72 (1H, дублет, J = 5 Гц); 6,86 (1Н, синглет);

7,52-7,61 (1Н, мультиплет); 8, 18-8,25 (2Н, мультиплет)

Т.пл. 175.-190 С (разл. )

ЯМР (DgO), d : 2, 0-2,6 (2Н, мультиплет); 3, 2-3, 8 (4Н, мультиплет); 4,73 (1Н, триплет, J = 7 Гц);

5,17 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,28 (1Н, дублет, 15 Гц); 5,57 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,73 (1H, дублет, J = 5 Гц); 6,89 (1Н, синглет); 7,89,0 (4Н, мультиплет)

ЯМР (DgO), 4: 2,0-2,7 (2Н, мультиплет); 2,49 (ЗН, синглет); 3,0-3,3 (4Н, мультиплет); 4,89 (1Н, триплет, J = 7 Гц); 5,00 (1Н, дублет, 3 = 15 Гц);

5,08 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,43 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,64 (1H, дублет, J = 5 Гц); 6,88 (1Н, синглет); 7,47 (2Н, дублет, J = 7 Гц); 8,22 (2Н, дублет, J = 7 Гц)

ЯМР (DgO) д : 2,0-2,8 (2Н, мультиплет); 2,60 (ЗН, синглех); 3, 1-3,6 (2Н, мультиплет); 3, 15 (1Н, дублет, J = 17 Гц); 3,62 (1Н, дублет, J =- 17 Гц);

4,92 (1Н, триплет, J = ; 5,21 (1H дублет, = 5 Гц); 5,27 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,43 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,76 (1Н, дублет, J

5 Гц); 6,84 (1Н, синглет); 7,73 (2Н, дублет, J = 6 Гц); 8,60 (2Н, дублет, J 6 Гц)

ЯМР (0 0), д": 2,1-2,7 (2Н, мультиплет); 2,73 (3H, синглет); 3, 1-3, 6 (4Н, мультиплет); 4, 90 (1Н, триплет, J = 7 Гц); 5,.11 (1Н, дублет, J = 5 Гц)р

5,17 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,42 (1Н, дублет, 1 = 15 Гц); 5 69 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,78 (1Н, синглет), 7,5-7,8 (2Н, мультиплет); 8,0-8,3 (1Н, мультиплет); 8,52 (1Н, широкий дублет, J = 6Гц)

ЯМР (D<0) 4 . 1,27 (ЗН, триплет, J = 7 Гц); 2,12,6 (2Н, мультиплет); 2,83 (2Н, квартет, - J

= 7 Гц); 3,1-3,6 (4Н, мультиплет); 4,95 (1Н, триплет, J = 7 Гц); 4, 9-5, 6 (2Н, мультиплет); 5, 18

1551249

19

Продолжение табл. 1

Соедин ение (1) (в„

Пример

20 4-СН СН з

3-СН

2-СН з

22 Э-СН

24 4-МН

25 З-С1

23 2-$ (:Н СНз Н

Свойства

1 (1Н, дублет, J = 5 Гц) 5,73 (1Н< дублет, Х

= 5 Гц); 6,82 (1H ; 7,79 (1H двойной дублет, J = 8 5 Гц); 8,22 (1Н, дублет, J = 8 Гц);

8,59 (1Н, дублет, Х = 5 Гц); 8,63 (1H, синглет)

ЯМР (DgO), d : 1,28 (ЗН, триплет, Х = 8 Гц); 2,1—

2,6 (2Н, мультиплет); 2,88 (2Н, квартет, J = 8 Гц)

3,1-3,6 (4Н, мУльтиплет)1 4,95 (1H, триплет, = 8 Гц); 4,9-5 6 (2Н, мультиплет); 5,18 (1Н, дублет, Х = 5 Гц); 5,72 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,80 (1Н, синглет); 7 70 (2Н, дублет, Х = 8 5 Гц); 8 59 (2Н, дублет, J = 8 Гц)

ЯМР (D@0), d :2,1-2,8 (2Н, мультиплет); 2,45 (ЗН, синглет); 2,68 (ЗН, синглет); 3,0-3,6.(4Н, мультиплет); 4,95 (1H, триплет, J = 7 Гц); 5, 15 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,25 (1Н, дублет, J = 16 Гц);

5,55 (1Н, дублет, Х = 16 Гц); 5,75 (1Н, дублет, = 5 Гц); 6,83 (fH, синглет); 7,58 (1Н, широкий дублет, Х = 7 Гц); 7,08 (1Н, дублет, J = 7 Гц);

8,41 (1Н, дублет, Х = 7 Гц)

ЯМР (0 0), д :

2, 0-2, 6 (2Н, мультиплет); 2, 45 (ЗН, синглет);

3, 0-3, 7 (4Н, мультинлет); 4,90 (1Н, триплет, = 7 Гц); 5, 13 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5, 15 (1Н, дублет, J = 16 Гц); 5,42 (1Н, дублет, J

16 Гц); 5,70 (1H, дублет, J = 5 Гц); 6,80 (1Н, синглет); 7,6-7,9 (1Н, мультиплет); 8,0-8,3 (1H, мультиплет); 8, 4-8, 7 (2Н, мультиплет)

ИК, 1 (см ): 1780, 1690, 1610

ЯМР (D O), с . 1,40 (ЗН, триплет, J = 3 Гц); 2,12, 6 (2Н, мультиплет); 3, 0-3, 5 (6Н, мультиплет);

4,92 (1Н, дублет, J = 7 Гц); 5,08 (1Н, дублет, = 5 Гц); 5,13 (1Н,триплет, Х = 15 Гц); 5,54 (1Н, дублет, J = 15 Гц); 5,70 (1Н, дублет, Х = 5 Гц), 6,80 (1H, синглет); 7,35-7, 6 (1Н, мультиплет);

7,69 (1H, дублет, J = 7 Гц); 7,95-8,2 (1Н, мультиплет); 8 50 (1Н, дублет, J = 6 Гц)

8К, 4 " „, (см ): 1775, 1690, 1610

ЯМР (D gO +CF3 CO D) j : 2, 1-2, 6 (2Н, мультиплет);

3, 2-3, 7 (4Н, мультиплет); 4, 95 (1 Н, триплет, J = 8 Гц); 5,0-5,6 {2Н, мультиплет); 5,15 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,70 (1Н, дублет, .Х = 5 Гц);

6,96 (1Н, синглет); 7,7-7,9 (2Н, мультиплет);

8, 3-8, 6 (2Н, мультиплет)

ИК, 4 " ", (см ): 1775, 1690, 1610

ЯМР (D O) дй 2,0-2,6 (2Н, мультиплет)1 3,1-3,5 (4Н, мультиплет); 4,95 (1Н, триплет, Х = 8 Гц);

5, 14 (1Н, дублет, Х = 16 Гц); 5,74 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 6,83 (1Н, синглет); 7,8-8, 1 (1Н, мультиплет); 8,3-8,6 (1Н, мультиплет); 8,7-8,9 (1H, 21

1551249

Продолжение табл. 1

Соедин ен ие (I ) (При мер

Свойства

I мультиплет ); 9,04 (1Н, дублет„З = 2 Гц)

HK, „, (см ): 1775, 1685, 1605

НМр (II p) ð 2 2 3 0 (2H, мультиплет), 3,1 4,1 (4Н мул типлет) 4 ) ° 5 7 (1Н триплет), J = 7 Гц); 5 40 (1Н, триплет, J

17 Гц)р 5,42 (1Н, дублет, J = 5 Гц); 5,70 (1Н, дублет, 3 = 17 Гц); 5,95 (1Н, дублет, J = 5 Гц)р

7,01 (1Н, синглет); 7,8-8,3 (2Н, мультиплет);

8, 5-8, 7 (1Н, мультипле т); 8, 7-8, 9 (1Н, мультиплет) 26 3-СООНз

П р и м е ч а н и е: Соединение (1) имеет (Z)-конфигурацию; (S) означает что атом углерода имеет (S)-конфигурацию.

С вЂ” COSH

S н. У,3:,3-,„,;„да

О СОО- R> 1

Isa+ о „

Таблица 2

Испытуемое соединение

3-НН, 2-СНЗ

2-8СН, 3- 1Н, 3-NH

3-m„

4-С Н

5-ОСН1

3-NH ъ

Н

5-Br

-4-SCH

5-NH

И

2

4

6

8 (известное) 3-СН,ОН

Т а б л и ц а 3

Минимальная ингибирующая концентрация (MHK), рг/мл, испытуемых микроорганизмов

А В С D Е Р G Н I J К

Испытуемое соединение

0,78 6,25

0,39 12,5

0,78 25

0,39 25

0,39 25

0,39 50

0,393, 13 100 (О, 05

<О, 05

0,1

<0,05

<О, 05

<О, 05

0,1

О,2

0,1

0,1

0,2 (0, 05

0,2

0,1

0,39

0,78 25

0,78 12,5

0,78 12,5

0,78 6,25

0,78 3,13

0,78 12,5

1,56 12,5

3,13 50

0,1

О,1

0,1

0,2 О, 05

0,1

0,1

0,39

0,1 0,39

0,1 0,39

0,2 0,39

0,2 0,39

0,1 0,2

0,2 0,78

0,1 0,1

0,391,56

0,2

0,2

0,78

0,78

0,2

0,78

0,39

1,56

1,56

0,78

0,78

3,13

3,13

1,56

3,13