Способ получения производных пиримидо (5-4 @ )-(1,4) оксазина или их аддитивных солей с кислотами

 

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению производных пиримидо /5-4B/-/1,4/-оксазина ф-лы 1 N=C(R<SB POS="POST">1</SB>)-N=C(R<SB POS="POST">2</SB>)-C=C-NH-C(O)-C(R<SB POS="POST">3</SB>)(R<SB POS="POST">4</SB>)-O, где R<SB POS="POST">1</SB> - C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил

R<SB POS="POST">2</SB> - группа ф-лы NR<SB POS="POST">5</SB>R<SB POS="POST">6</SB>, где R<SB POS="POST">5</SB> = H, C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, R<SB POS="POST">6</SB>-аминогруппа, незамещенный или замещенный алкильный /C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>/ радикал, у которого заместителями могут быть гидроксил, меркаптогруппа, аминокарбонил, фурил, фенокси или бензильная, или морофолинильная группы, незамещенные или замещенные алкилом /C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>/, или R<SB POS="POST">5</SB>-бензил, R<SB POS="POST">6</SB>-гидроксиалкил /C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>/, или NR<SB POS="POST">5</SB>R<SB POS="POST">6</SB> может представлять собой пиперазинил, замещенный алк(C<SB POS="POST">2</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>)оксикарбонилом или оксиалкилом (C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>)

R<SB POS="POST">3</SB> и R<SB POS="POST">4</SB> - одинаковые или различные и независимо друг от друга обозначают H или алкил C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, или их аддитивных солей с кислотами, которые обладают способностью повышать сократительную силу сердечной мышцы. Цель изобретения - разработка способа получения соединений, обладающих указанным действием. Получение ведут реакцией соединения ф-лы 1, где R<SB POS="POST">1</SB>, R<SB POS="POST">3</SB> и R<SB POS="POST">4</SB> - указано выше, а R<SB POS="POST">2</SB> - хлор, метансульфонил окси или 4-толуолсульфонилокси группы с амином HNR<SB POS="POST">5</SB>R<SB POS="POST">6</SB>, где R<SB POS="POST">5</SB> и R<SB POS="POST">6</SB> указано выше. В случае необходимости из соли выделяют свободное основание. Новые соединения повышают работу сердечной мышцы более чем на 30%. 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (I% (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 4028913/23-04 (22) 30.12.86 (31) 5042/85 (32) 30.12.85 (33) HU (46) 23.05.90. (>юл. Р 19 (71) Хиноин Дьедьсер еы Вадьесети

Термекек Дьяра PT (1Ш) (72) Эндре Кастрайнар, Дьердь Раблоцки, Нандор Макк, Дьердь Чех, Мария

Кухар, Эстер Дишлер, Пасло Яслитш, Ласло Шебеытьен, Лноы Веллманн, Анико Тегдеш, Ф)дит ((арошни, Перет

Матиаш, Андраш Варро, J(ac o Сам и Шарлота Вегвари (11V) (53) 547.853.3.07(088.8) (56) Вейганд-Хильгетаг. Современные методы эксперимента в органической химии. — М.: Химия, 1968, с. 372-438. (54) СПОСОБ ПО((У (ЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

ПИРИМИДО(5-4Ь)-(1,4)-ОКСАЗИНА (ШИ ИХ

АДД(ПИВНЫХ СО((Е((С КИС((ОТА?Я1 (57) Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению производных пиримидо (5-4Ь)-(1,4)-оксаэина ф-лы I

N С(RI) N С(R ) С С NH С(0) С(Е3) (Q) 0 где R — 01-С -алкил; R — группа ф лы NR>R где R 5 — Н, С(-С <-алкил, Изобретение относится к способу получения новых биологически активных соединений — производных пиримидо (5-4Ь)-(1,4)-оксаэина или их ад(5!)5 С 07 D 498/04//А 61 К 31/535

R6 — аминогруппа, незамещенный или замещенный алкильный (C,-С q) радикал, у которого заместителями могут быть гидроксил, меркаптогруппа, аминокарбонил, фурил, фенокси- или бенэильная, или морфолинильная группы, незамещенные или замещенные алкилом (С(- q), или R> — бензил, ((— гидроксиалкил (С<-С ), или NI< R может представлять собой пиперазинил, замещенный алк(С вЂ” <, )оксикарбонилом или оксиалкилом (С,-Сq) R и Rq— одинаковые или различные и независимо друг от друга обозначают Н или

С -С -алкил, или их аддитивных солей с кислотами, которые обладают способностью повьппать сократительную силу сердечной мышцы. Цель изобретения— разработка способа получения соединений, обладающих указанным действием.

Получение ведут реакцией соединения ф-лы I, где (((,К > и Rq — указано выше, à R< — хлор, мечансульфонилокси- или

4-толуолсульфонилоксигруппы с амином

HNR

В случае необходимости полученные основания переводят в аддитивную соль с кислотой и/или в случае необходимос . ти из соли выделяют свободное основание. Новые соединения повышают работу сердечной мышцы более чем на 30 (.

4 табл. дитивных солей с кислотами, которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения — получение новых соединений производных ряда пиримидо1567122 оксязиня - мялотоксичных и обладающих способностью повышать сократительную силу сердечной мышцы, сопровождающуюся пезначительным повышени5 ем частоты пульса.

Пример 1. 4-(4-Зтоксикарбонил-1-пиперазинил)-2-метил-б,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь)-(1,4)-оксязин7-он. 10

Смесь, состоящую из 1 r 4-хлор-2метил-б,/-диги/ ро-8Н-пиримидо(5,4-Ь)(1,4)-оксязин-7-она, 1,58 г 1-этоксикарбонилпиперязина и 10 мл н-бутилоВого спиртаq и условияхq исключающих 15 доступ влаги и двуокиси углерода, нагревают в течение 13 ч при температуре кипения реакционной смеси, а затем реакционную смесь упаривают. Остаток растирают с ?0 мл воды, смесь выдерживают в течение ночи, затем осадок отфильтровывают, промывают водой и диэтиловым эфиром, а затем сушат.

В результате получают 1,4 г (87%) продукта, т.пл. 197-199О С.

П р и и е р 2. 2, б-1(иметил-4- j4(2-оксиэтил)-1-пиперазинил)-6,7-дигидро-ЗН-пиримидо(5,4-b) (1,4)-оксазин-7-он.

Смесь, состоящую из 0,86 r 4-хлор2,б-диметил-б,7-дигидро-ЯН-пиримидо (5,4)-(1-4)оксазин-7-она, 1,04 г

1-оксиэтилпиперазина и 20 мл н-бутилового спирта, нагревают в течение

7 ч при температуре кипения реакционной смеси, после чего реакционную смесь упаривают. Остаток смеыивают с 20 мл воды, после чего производят экстрагировяние этиловым эфиром уксусной кислоты. Органическую фазу су40 шат и упаривают. После перекристаллизации остатка из этилового эфира уксусной кислоты получают 0,90 г продукта, т.пл. 160-161 С.

Соединения указанной формулы, в которой Н, — метильный радикал, получают аналогично примеру 1 или 2.

Полученные соединения представлены в табл. 1 °

lI

1! р и м е р 13. Дигидрохлорид 2-метил-4-(2-(4-морфолинил)-этил)-амико6,/-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь) †(1,4)— окс зин-7-оня, Способ осуществляют аналогично примеру 1, но применяют 1 г 4-хлор-2-ме- 55 тил-6,7-дигидро-81(-пиримипо-(5,4-b)— (1,4)-оксазин-7-он, 1,01 г триэтиламина и 0,65 г 2-(4-морфолинил)-этиламина, причем смесь нагревают при температуре кипения в течение 4О ч.

В результате получают 0,46 r (25%) продукта, т.пл. 233-237 С (с разложением) .

Пример 14., (игилро 2-метил-42-(4-морфолинил)-этил -амино-б,7дигидро-8Н-пиримидо(5,4-b) (1,4)-оксазин-7-она °

Метод А. Смесь, состоящую из 50 г

2-метил-.4-(4-толуолсульфонилокси)6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь)-(1,4)оксазин-7-она, 20,73 г безводного углекислого калия, 19,5 г 2-(4-морфолинил)-этиламина и 1250 мл абсолютного этилового эфира уксусной кислоты, перемешивают в течение /2 ч при

20 С, затем отфильтровывают нераствоо, римую фракцию, после чего фильтрат экстрагируют 1 н. водным раствором соляной кислоты.

Значение рН водной фазы доводят до 5, после чего производят экстрагирование дихлорметяном. Значение рН водной фазы доводят затем до 10, после чего еще раз производят экстрагирование дихлорметаном. Полученную при последнем экстрагировании органическую фазу сушат и упяривают. Остаток, т.е. неочищенное основание, растворяют в ацетоне. Полученный раствор при охлаждении вводят во взаимодействие с раствором хлористого водорода в абсолютном этиловом спирте. Образовавшийся осадок отделяют фильтрованием и промынают ацетоном. В результате получают 27,31 г (501() продукта, о, т.пл. 133-237 С (с разложением).

Метод В. Смесь, состоящую из 5 г

2-метил-4-(4-толуолсульфонилокси)—

6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-b) (1,4)оксазин-7-она, 2,99 г 2-(4-морфолинил)-этиламина, 9,11 r триэтиламина и 130 мл абсолютного этилового эфира уксусной кислоты, в течение 5 ч нагревают при температуре кипения, а затем фильтруют. ©ильтрат упаривают, остаток смешивают с водой, после чего значение рН доводят до ?. Затем смесь экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, водную

1 1

Соль указанного основания с фумаровой кислотой получаюI по следующей методике.

5 156712

К раствору 1 г неочищенного основания, полученного по методу А или В, в 9 мл этилового спирта прибавляют о при перемешивании и температуре 70 С нагретый до /О С раствор 0,2 г фумаровой кислоты в 5 мл этилового спирта, затем смесь охлаждают и выдерживают в течение ночи при 0-4 С. В результате почти с количественным выходом получают фумарат, т.пл. 215о, 216 С. Основание и фумаровая кислота содержатся в полученном фумарате в соотношении 2:2.

Вычислено, %: С 51,27; Н 6,03;

19,93.

С>о H4LNio(>to (м.масса 702,72) .

Найдено, %: С 51,63; Н 5,96;

19,06.

Найденное содержание фумаровой 20 кислоты 16,50% (вычислено 16,52%).

2-Метил-4-(4-толуолсульфонилокси)6,7-дигидро-8Н-пиримидо-(5,4-b)-(1,4)оксазин-7-он, который является общим исходным веществом при осуществлении обоих способов A (и В), получают следующим образом.

Раствор 157,2 г 4-толуолсульфонилхлорида в 450 мл ацетона в течение

3 ч прибавляют при комнатной темпе- 30 ратуре и перемешивании к раствору

135,8 г 4-окси-2-метил-6,7-дигидро8Н-пиримидо(5,4-Ь)-(1,4)-оксазин-7она в 1205 мл 1 н. водного раствора гидроокиси натрия, после чего смесь дополнительно перемешивают в течение

5 ч при комнатной температуре. Кристаллический продукт отфильтровывают, промывают водой, а затем растворяют ( в 1 800 мл аце тона. Нерастворимую

40 фракцию отделяют фильтрованием и промывают ацетоном. Ацетоновый раствор упаривают, осадок отфильтровывают, промывают неболыяим количеством ацетона и сушат. В результате получают

123 2 г (49%) продукта, т пл. 185186 С. разом.

2 мл 30%-ного раствора перекиси водорода прибавляют к смеси, состоящей из 0,83 r 2-метил-4-метилтио6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь) †(1,4)— оксазин-7-она и 8 MJI уксусной кислоты после чего реакционную смесь пеФ о ремешивают в течение 3 ч при 60 С.

Затем реакционный раствор упаривают досуха, после .удаления следов уксусной кислоты кристаллический остаток растирают с 5 мл воды, после чего значение рН смеси доводят до 6,7. Образовавшийся осадок отделяют, фильтруют и сушат. В результате получают

0,36 г (38%) исходного соединения, т.пл. 211 С.

II р и и е р 18. Дигидрат дигидрахлорида 4- ((4-бензил-2-морфолинил)-метил) — амино-2-метил-6,7-дигидро-ЯНпиримидо(5,4-Ь)-(1,4)-оксазин-7-она.

Метод А. Суспензию 16,1 г 2-метил4-(4-толуолсульфонилокси)-6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь) †(1,4)-оксазин7-она (пример 23), 8,93 г 2-аминометил-4-бензилморфолина и 6,6 r безводного углекислого калия в 400 мл абсолютного этилового эфира уксусной кислоты перемешивают в течение 80 ч при комнатной температуре. Затем нерастворимую фракцию отфильтровывают, раствор экстрагирувт 1 н. раствором соляной кислоты. Значение р!! водной фазы доводят до / посредством прибавления 1 н. раствора гидроокиси натрия, после чего производят экстрагирование диэтиловым эфиром. Эфирный раствор сушат и упаривант, остаток растворяют в абсолютном этиловом спирСоединения предлагаемой формулы, где К! — Ме т(й радик у а ЕЗ у

К 4 — атомы водорода, полученные по примеру 14, приведены в табл. 2.

Пример 17. Дигидрохлорид 2метил-4- (2-(4-морфолинил)-этил -амино-6,7-дигидро-ЯН-пиримидо(5,4-b)(1,4)-оксазин-/-она.

Сме сь О, 34 г 4-метанс ульфонилокси2-метил-6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь) †(1,4)-оксазин-7-она и 0,40 г

2-(4-морфолинил)-этиламина нагревают

2 6 в течение 10 мин при /5-80 С. После охлаждения смесь растворяют в 8 мл

1 н. раствора гидроокиси натрия, после чего производят полное экстрагирование дихлорметаном. Органический раствор встряхивают с водой, сушат, фильтруют и упаривают. В результате получают 0,21 г (52,5%) однородного неочищенного основания, которое превращают в дигидрохлорид способом, описанным в примере 14. Неочищенное основание может быть подвергнуто кристаллизации путем перемешивания с этиловым спиртом или ацетоном, т.пл. 143-145 С.

Примененный в качестве исходного соединения 4-метансульфонил-2-метил6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-b)-(1,4)оксазин-7-он получают следующим об1567122

50,2 г Аталимида калия прибавляют к раствору 61,2 г 4-бензил-2-хлорметилм»рА»пина в 150 мл абсолютного ди- 45 метилформамида, после чего смесь в течение 6 ч нагревают при перемешивании и температуре кипения. Образовавшийся после охлаждения кристаллический продукт отАипьтровывают, промывают диметипАормамидом, а затем воцой и сушат. 13 результате получают

68,95 г (76i!) продукта, т.пл. 130132 С.

Ь) Цигидрохл»рид 4-бензил-2-амино55 метилф»рм»лина.

Смесь 19,3 r продукта, полученного на стадии a, e 38 мл концентрированнс и с»пян»й кисл»ты нагревают в течете, а затем к приготовленному раствору прибавляют по каплям рассчитанн»е количество раствора хлористого в»д»рода в этиловом спирте. После

»хпаждения до 0-4 С образовывается о, 5 кристаллический осадок, который отфильтр»вывают, промывают холодным этил»вым спиртом и сушат. В результате получают 2,33 r (15/) продукта, т.пп. 196-199 С.

Метод В ° Суспензию, приготовленную из 3 г 2-метил-4-(4-толуолсульфонип»кси)-6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь) †(1,4)-оксазин-7-она (пр мер 14), 1,85 г 2-аминометил-4-бензипморАолина, 5,43 г триэтиламина и

80 мл абсолютного этилового эАира уксусной кислоты, нагревают при перемешивании в течение 8 ч при температуре кипения, смеси, а затем смесь, упаривают. Остаток перемешивают с

60 мл воды, после чего значение рН смеси доводят до 1-2 посредством прибавления 1 н ° раствора соляной кислоты. После экстрагирования этиповым эфиром уксусной кислоты значение рН водной Аазы доводят до 7 посредством прибавления 1 н. раствора гидр»окиси натрия, а затем проводят 30 зкстрагирование диэтиловым эфиром.

Дальнейшую обработку проводят в со»тветствии с методом А, в результате чего получают 1,0 г (131) продукта, т.пл. 195-198 С.

2-Аминометил-4-бензилморАолин, являющийся общим исходным веществом при осуществлении обоих методов А и 13, получают, например, следующим образом.

40 а) 4-Бензип-2-Аталимидометилморфолин ° ние 14 ч при перемешивании и температуре кипения. Выделившуюся после охлаждения в осадок Аталевую кислоту отфильтровывают, а водный раствор полностью освобождают »т присутствия фталевой кислоты п»средств»м экстрагирования этип»вым эАиром уксусн»й кислоты. Водную Аязу упаривают досуха, остаток растирают с абс»лвтным этиловым спиртом, кристаллическое вещество отделяют Аипьтр»ванием, пр»мывают абсолютным этил»вь(м спиртом и сушат. В результате п»лучавт 10,3 r (65Х) продукта, т.пп. 244-246 С.

Свободное осн»вание может быть выделено в своб» (н»м с»ст»янии из дигидрохлорида. Ири этом соль растворяют в воде, раствор подщелачивают прибавлением раствора гидро»киси натрия, после чего основание экстрагирувт хлороформом. После суыки »рганическую фазу упаривавт и в виде остатка получают с количественным выходом неочищенное основание, которое в полученной форме может быть применено при осуществлении способов, указанных в примерах.

Пример 19. 2-Метил-4- 13-(4морфолинил)-1-пр»пип)-амино-6,7-дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь)-(1,4)-оксазин-7-он.

Раствор, приготовленный из 0,7 мл триэтиламина и 1,44 r 3-(4- м»рАолинил)-1-пропиламина, в течение 8 ч прибавляют по каплям при перемешивании и температуре ки (ения к смеси, состоящей из 2 г 4-хлор-- -метил-6,7дигидро-8Н-пиримидо(5,4-Ь)-(1,4)-оксазин-.7-он; 1,4 мл триэтипамина и

5 мл абсолютного бенз»па. Затеи реакционную смесь в течение 8 ч нагревают при перемешивании и температуре ее кипения. Непосре)(ственно после этого реакционную смесь упаривают, остаток смешивают с 16 мп воды, твердое вещество отАильтровывают, пр»мывают сначала водой, а затем диэтил»вым эАиром. В результате п»случают 1,1 r (36/) про (укта, ч.пл. 165-168 (. .

Гидрохлорид получают посредством прибавления раствора хлористого водорода. в этиловом спирте к раствору основания в этип»вом эАире уксусной кислоты. Температура плавления гидрохлори1(а 250-251 С.

1 I

Пример 20,. 4-(2-Оксиэтип)амино-2, 6, б-триме тип-б, 7-пи гидр»-ЯНпиримидо (5, 4-Ъ) — (1, 4) — »к с аз ин-7-он .

1567122

Осуществляют способ аналогично примеру 2, н результате чего получают продукт с выходом 83Х, причем температура плавления продукта 168-170 С..

Гидрохлорид имеет т.пл. 190-191 С. о, 5

Пример 21. 4-Гидразино-2-метил-6,7-дигидро-HH-пиримидо(5,4-Ь)(1,4)-оксазин-7-он, Раствор 12,8 мл 98 .-ного гидразин- 10 гидрата в 40 мл н-бутилового спирта в течение 30 мин прибавляют по каплям при перемешивании и температуре 117 С к раствору 20 г 4-хлор-2-метил -6,7-ди гидро-8Н-пнримидо(5,4-b) †(1,4)-оксязин-/-она н 320 мл н-бутилового спирта. Затем реакционнув смесь переменинают в течение 45 мин при указанной температуре и непосредственно после этого охлаждают до комнатной темпера- 20 туры. Осадок отфильтровывают и промывают водой. В результате получают

11,66 r (56,3Ы) продукта, т.пл. 262264 С.

II р и м е р 22. Получение таблеток.25

Состав (в расчете на 100 таблеток), г: фумарат основания по примеру 2 10; лактоэа 185; микрокристаллическая целлюлозы 25; тальк 5 кукурузный крахмал 73; стеярат магния 2, 30

Всего 300 г.

Компоненты смешивают друг с другом, смесь гомогенизирувт, после чего из смеси отпрессовывяют таблетки, которые содержат по 10 мг биологически активного вещества.

1! р и м е р 23. Получение раствора для инъекций.

Состав (в расчете ня 2 л раствора): фумарат основания по примеру 2 2 г, 40 хлористый натрий 20 r, вода для инъекционных целей до 2000 мл.

Из указанных компонентов приготавливают раствор, который помещают в ампулы и стерилизуют. Одна ампула со- 45 держит 2 мл раствора.

Проведены биологические испытания соединений, полученных описываемым способом.

Повышающий сокрятительную силу 5р сердца эффект (Myocardial Сопг.гасСд1е

Force, далее сокращено MKF) определяли в проведенных на живых организмах опытах но следующим методикам.

А) Испытание на подвергнутых наркозу кошках.

Животных няркотизировали внутривенным (i.v.) введением 30 мг/кг натриеной соли пентобарбитала, после чеro при искусственном дыхании раскры-. вали их грудные клетки., После раскрытия перикярда прикрепляли strain

gauge к эпикярдиальной поверхности левого желудочка сердца. Кровяное давление измеряли посредством того, что катетер, соединенный с передатчиком давления и электроманометром, вводили в бедренную артерию. Биологически активное вещество вводили либо внутривенно через введенную н бедренную вену канюлю, либо интрадуоденально (i.d,) через i.d. кянюлю. В начале -опыта вводили 0,2 мкг/кг изопротеренола (Z8) в качестве внутреннего стандарта для того, чтобы проконтролировать миокярдияльнув реактивность, а именно наибольший "реал ) МС1 -от-. вет мог измеряться при всех положительных инотропных средствах в соответствии с личностью животного. Так изопротеренол применяли не в качестве подлинного нещества для сравнения.

MCF-ответ выражали н процентном изменении начального значения: действие 5 мг/кг исследуемого вещества, введенного внутривенно, сравнивали с действием О,? мкг/кг изопротеренола, введенного внутривенно, и выражали отношением.

Полученные результаты представлены в табл. 3.

IIo сравнению с изопротеренолом соответствующие изобретению соединения проявляют аналогичное или более сильное действие, проявляющееся в повышении сократительной силы сердца.

В качестве более сильного Р-адреноцептор-антагониста изопротеренол вьгэывает измеримое 11СР-повышение уже при вводимой внутривенно дозе

0,2 мкг/кг, но этот эффект краткосрочен, полностьв обратим и не оказывает влияния на параметры кровообращения. При действии соединений, укаэанных в табл. 3, частота пульса повышается незначительно или совершенно не повышается.

Действие некоторых соединений также исследовали после интрадеуденального введения. Соединение 18 обладает сильным положительным инотропным действием в дозе 20 мг/кг или даже после

5 мг/кг. Вещество 13 проянляет сильное и сохраняющееся продолжительное время действие уже при введенной внутривенно дозе 1 мг/кг.

1567122

1 з

В) Испытание на подвергнутых наркозу собаках.

Животных наркотизировали внутривенным введением 35 мг/кг натриевой соли пентобарбитала. После раскрытия грудной клетки и перикарда препарировали нижнюю восходящую часть Arteria

coronaria circumflexa и снабжали электромагнитным кровоточным зондом для того, чтобы измерять в коронарной артерии ток крови. На снабженную этим сосудом поверхность,помещали "strain gauge" для того, чтобы измерять повышающий сократительную 15 силу сердца эффект. Для измерения общего артериального давления крови применяли введенную в бедренную артерию канюлю, а для внутривенного введения биологически активного вещества 2р (исследуемого вещества) испольэовали введенную в бедренную вену канюлю.

dp/dt-значение рассчитывали из давления, которое измеряли с помощью введенного в левый желудочек сердца пе- 25 редатчика давления типа "Hillar". Все параметры регистрировали на приборе

"Beckmann Rf2 Dynograph" (с 8 каналами) .

С) Испытание на бодрствующих кошкахх.

В случае этих животных применяли метод Раблоцки и Мадера или некоторую модификацию этого метода. В аорту и легочную артерию вводили на постоян35 ное время катетеры для измерения давления крови. В соответствии с модификацией катетер также вводили и в правый желудочек сердца для того, чтобы определить dp/dt «, -значение °

4р

Положительное инотропное и расширяющее коронарные сосуды действие соответствующих изобретению соединений показано на полученных при проведении испытаний соединений 13, 18 резуль- 45 татах, причем испытания осуществляли по описанным методикам.

Испытание соединения 13.

Положительное инотропное действие этого вещества в случае подвергнутых наркозу собак с раскрытой грудной клеткой наблюдалось уже при дозах

0,025-1,6 мг/кг. Сила и продолжительность повьппения сокрятительной силы сердца зависят от дозы. Положительное

55 инотропное и расширяющее коронарные сосуды действие при введенных внутривенно дозах 0,2, 0,4 и 0,8 мг/кг этого соединения сравнимо с действием амринона (5-амино-3,4 -бипиридин-61Н-он) в дозах 0,5, 1,0 и 2,0 мг/кг.

В этом интервале доз соединение 13 вызывает зависимое от дозы повышение сократительной силы сердца,, (ействие введенного внутривенно амринона в дозе 2 мг/кг не было более сильным, чем действие соединения 13 в дозе

0,4 мг/кг. Очевидно, что на положительное инотропное действие обоих соединений оказывает благоприятное влияние расширяющий коронарные сосуды эффект. Однако повышающее сократительную силу сердца действие не было более продолжительным, чем действие на коронарные сосуды.

Благоприятное действие соединения

13 на сердечную мышцу также было обнаружено после интрадуоденального введения. После дозы 1 мг/кг сокоатительная сила сердца увеличивалась ня

35-401 без изменения кровотока в коронарных сосудях, Повьппяющий сократительную силу сердця эффект ямринона был по меньшей мере в пять раз слабее,.чем действие вещества 13.

На подвергнутых наркозу собаках с раскрытой грудной клеткой после острой ишемии значительно уменьшается положительное инотропное действие ямринона, но действие соединения 13 остается статистически неизменным.

Отрицательное инотропное действие

Вазопрессина в дозе 0,2 IU/xr значительно уменьшается блягодяря применению соединения 13 в дозе 0 8 мг/кг, введенной внутривенно. Сосудосуживающее действие этих соединений является прямо противоположным. Таким образом, соединение 13 может предотвращать развитие вызванной химическим путем ишемии.

Если в бодрствующих кошек с постоянным катетером вводят орально соединение 13 в дозах (),5, 2,0, 4,0 и

8,0 мг/кг, то общее артериальное давление крови и частота пульса практически не изменяются, но сократительная сила сердца после любой дозы значительно повьппается. Чем больше доза, тем более продолжительным является промежуток времени, при котором наблюдается положительное инотропное действие. Максимальное (peak) увеличение dp/dt-значения 60Х.

Положительное инотропное действие соединения 13 остается неизменным и при предварительном введении Р-адре13

14

1567122

35 ноцептор-антагонистов, гистамин Н-2у антагонистов или резерпина.

Испытания соединения 18.

Это соединение вводили в подвергну5 тых наркозу собак с раскрытой грудной клеткой внутривенно в дозе 1 мг/кг или интрадуоденально в дозе 5 мг/кг.

После внутривенного введения дозы значение, характеризующее сократительную силу сердца, повыыается на

40Х, циркуляция крови в коронарных сосудах увеличивается на 20%, частота пульса увеличивается в очень незначительной степени (на 1ОХ), общее ар- 15 териальное систолическое давление крови уменьыается на 10%, а диастолическое давление крови падает на 20,.

Период уменьшения повышающего сократительную силу сердца эффекта в два раза оказался равным 10 мин. Почти неизменный ответ коронарной артерии длится в течение 20 минут.

После интрадуоденальной дозы зна чение, характеризующее сократитель- 25 ную силу сердца, увеличивается приблизительно на ЗОХ и остается неизменным в течение 30 мин.

Биохимические фармакологические испытания.

Приводимые испытания проводили для того, чтобы прояснить действие соединения 13 на различные ферменты и, прежде всего, на связанные с мембраной ферменты клеток сердечной мышцы.

Действие соединения 13 на ферменты Na-К-АТР-азу и NADH-оксидазу.

Сарколеммный препарат получали из клеток сердечной мьппцы по методу

Д.М.Берса.

NADH-дихлорфенол-редуктазу определяли с помощью анализируюцего ферменты прибора (Centrif i-CK; .

Активность Na-К-ATP-азы измеряли

45 в 50 мМ растворе трис-НС1 при рН 7,5.

Уабаин, котopeN применяли в качестве вещества для сравнения, сильно ингибировал Na-К-АТР-азу и лишь незначительно уменьшая активность NADH-индофенол-редуктазы. На активность этого

50 фермента соединение 13 не влияло да-Ф же при концентрации 10 М.

Действие соединения 13 на фермент

Са-ATP-азу, регулирующую выведение + 55

Са -ионов.

Активность связанной с мембраной

Са-ATP-азы клеток сердечной мьппцы определяли по методу Мс Namara. В ходе in vitro опытов активность фермента под действием соединения 13 кон-Ф центрации 10 М изменялась от контрольного значения 1< =0,83 м11 до 1<,=

=1,8 мМ. Это означало низкий эффект, При осуществлении другого опыта соединение 13 в течение 5 сут вводили i р. при суточной дозе 2 мг/кг.

По отобранным иэ обработанных животных ех чivo пробам находили, что ак-. тивность Са-АТР-аэы в результате укаэанной обработки уменьыается на ЗОХ (скорректировано на 1 г сердечной ткани) °

Действие соединения 13 на прием

Са -ионов R Sarcoplasma-Reticulum в присутствии АТР.

Применяли метод Харигайа. Прием

Са -ионов в Sarcnplasma-Reticulum

2+ уменьшался на ?5Х в присутс соединения 13 в концентрации 5х10 М.

-3

Это соответствовало такому действию, которое вызывает кофеин концентрации 10 Ì.

Действие соединения 13 на содержание цикличвского аденозинмонофосфата (аАМР) в клетках сердечной мышцы.

Соединение 13 вводили i.ð. в крыс в дозе 5 мг/кг. Через 0,2,5,15 и

30 мин после этой обработки животных, умерщвляли. Их сердце гомогениэировали с трихлоруксусной кислотой, после чего с помощью специфического связующего белка определяли радиоактивным методом содержание циклического аденозинмонофосфата ° Соединение 13 не окаэывало существенного влияния на содержание циклического аденозинмонофосфата в сердце.

Действие соединения 13 на активность фосфодиэстеразы (@ДЭ) сердечной мышцы.

Выделение ДОДЭ -фермента и опреде.ление активности проводили по методу

Иарма и Ванга. Соединение 13 концентрации 100 мкМ не оказывало влияния на активность юДЭ-ферментов.

На основании результатов, получен" ных в описанных опытах, можно сделать вывод, что соединение 13 не оказывает характерного и типичного для сердечных гликозидов действия на ферменты (на ферменты Na-К-АТР†а или NADHоксидаэу) и не влияет на образ действия вегетативных рецептор-агонистов (т.е. на функции фермента аденилат» циклаэа).

7122 или

К вЂ” бенэил;

R — гидроксиалкил (< 4 С, ), или

1И 1<6 — пиперазинил, замещенный алк

5 6 (С -С )оксикарбонилом или и оксиалк илом (С < -С );

1< и К вЂ” одинаковые или различные и

15 независимо друг от друга водород или Ci-С 1-алкил; или их с кислотами, отличающийся тем, что соединение общей формулы

10

30 где R < — С,-С,1-алкил;

R — группа общей формулы tJR+R, 35 где R — водород, С 4-Сралкил; 1< — аминогруппа, незамещенный или замещенный алкильный (С -С g ) радик ал, у которого замесч ич елями могут быть гидроксил,меркаптогрупнование, Т а блиц а 1

Г ход, Темперач у, ра плавления (осноо вания), С

195-197

Иетил Н 1

H H 1

Иетил Н 2

156-158

185-187

92

255-257

136-138

Н 1

Н 1

77 ямино

l5 156

В отличие от некоторых ксантиновых производных или от новых пололсительных инотропных соединений типа бипи-. ридина (например, амринона) соедине ние 13 не оказывает влияния на функции ФДЭ-изоферментоя.

Острую токсичность соединения 13 изучали на мьппах и крысах.

Значения ЛД представлены в табл. 4.

Из табл. 4 видно, что испытанное соединение обладает низкой токсичностью, Проведенные испытания показали, что производные пиримидооксазина, полученные в условиях описываемого способа, обладают другим спектром биологического действия, чем соединения этого ряда, они малотоксичны и повышают работу сердечной мышцы более чем на ЗОХ.

Формула изобретения

Способ получения производных пиримидо (5,4b)-(1,4.)-оксазина общей формулы

2-Оксизтиламино

N-Иетил-N-(2-оксиэтил)-амино

2-Иеркаптоэтиламино

N-Иетил-N-(аминокарбонилметил) амико

N-Бензил-N-(2-оксиэтил)па, аминокарбонил, фурил, фенокси- или 6ензильная, или морфолинильная группы, незамещенные или замещенные С

С -алк илом, где К1,Н 3 и Ri меют указанные значения;

R — хлор, метансульфонилоксиили 4-толуол-сульфонилоксигруппы, вводят во взаимодействие с амином, общей формулы

ИНКА,, где R + и R< имеют ук аз анные значения, и в случае необходимости полученные основания переводят в аддитивную соль с кислотой и/или в случае необходимости из соли выделяют свободное осl7

1567122

6 7

Иетил

Н 2

Иетил 2

71

152-1 54

148-149

Метил

Н

Иетил

Иетил

68

54

187-188

142-144

1 62-164

11

12 ения, С о

Пример

ы

2- (2-Ие т ил-4-мо рфолинил)— этил амин о

196-1 90 (дигидрохлорщ )

193-195 (дпмале ат) 18

2-(4-Метил-1-пиперазинил)этиламино

Соединение МС> -по по примеру 1 от н ного з (2-(4-Иорфолинил)-этил)амино (2-(4-ИорАолинил)-этил)амино

4-(2-Оксиэтил)-1-пиперазинил

2-Фу рилме т ил амин о

2-Феноксиэтиламино

13 (14,17) 7

10

20

3

11

21

Амринон

83

51

73

i1,5

87,5

33

34

33

33

36

67

1

Таблица 3

1,2

1,2

1 ь2

2,05

1,04

3,0

0,42

1,16

1,00

1,58

0,58

0,53

0,55

0,66

0,8

0,96

0,59

0,71

1,5

Продолжение табл. !

Т а б л и ц а 2