Способ прогнозирования течения острого панкреатита



Способ прогнозирования течения острого панкреатита
Способ прогнозирования течения острого панкреатита

 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2507519:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования сроков наступления реактивной фазы острого панкреатита. Осуществляют выделение ДНК из периферической венозной крови, проводят анализ полиморфизма гена фактора некроза опухоли α и при выявлении генотипов -308 АА или -308 GA TNFα прогнозируют риск позднего наступления реактивной фазы острого панкреатита. Изобретение обеспечивает получение новых критериев оценки сроков наступления реактивной фазы острого панкреатита. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования сроков наступления реактивной фазы острого панкреатита.

Проблема острого панкреатита является одной из актуальнейших в экстренной хирургии. Это связано не только с тем, что заболевание очень распространено, но и с тем, что оно сложно в прогнозе и в диагностике. Острый деструктивный панкреатит - первично асептический некроз поджелудочной железы с последующей воспалительной реакцией на очаги сформировавшегося некроза. Данное заболевание имеет фазовое течение: I фаза - ферментативная; II фаза - реактивная; III фаза - секвестрации и расплавления омертвевших участков. Важным прогностическим фактором течения острого панкреатита является продолжительность ферментативной фазы и соответственно срок наступления реактивной фазы. Во время первой фазы реализуется основная патологическая «программа» - формирование панкреонекроза и развитие эндотоксикоза, полиорганной недостаточности и эндотоксинового шока.

Считается, что при длительном течении ферментативной фазы и более позднем наступлении реактивной фазы происходит гиперпродукция провоспалительных цитокинов, истощение функциональных резервов организма, что обусловливает нарастание полиорганной недостаточности, развитие выраженного иммунодефицита и в последующем более тяжелое течение острого панкреатита.

Известен патент №2310848 (С1) по заявке РФ 2006112086/15, 20.11.2007 «Способ прогнозирования риска возникновения, клинического течения и исхода острого идиопатического панкреатита» (ГОУ ВПО "Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию"), предложен способ прогнозирования риска возникновения, клинического течения и исхода острого идиопатического панкреатита путем выделения ДНК из периферической венозной крови больного, типирования полиморфизма ДНК лимфоцитов для дальнейшего исследования мутаций генов SPINK1, GSTM1, GSTT1, PRSS1 и CFTR. При обнаружении гетерозиготных мутаций в генах SPINK1, PRSS1 и CFTR прогнозируют развитие деструктивной формы идиопатического панкреатита, при обнаружении сочетания не менее чем двух мутировавших генов из SPINK1, GSTM1, GSTT1, PRSS1 и CFTR у гетерозиготных носителей или гомозиготных носителей по мутации N348 гена SPINK1 в сочетании с гетерозиготной мутацией R122H гена PRSS1 прогнозируют формирование панкреонекроза тяжелой степени. Преимущество изобретения в том, что оно позволяет выделить группу больных с высоким риском развития деструктивных осложнений и обоснованно рекомендовать им проведение полномасштабной специализированной интенсивной терапии на ранних сроках, тем самым снизить или полностью исключить летальность у больных.

Недостаток прототипа заключается в том, что данный метод не позволяет прогнозировать сроки наступления реактивной фазы при остром панкреатите.

Известно, что значимое влияние на течение 1 и 2 фаз острого деструктивного панкреатита оказывает фактор некроза опухоли α - TNFα, который обладает провоспалительным эффектом и усиливает TNF-зависимый апоптоз [2, 3].

Фактор некроза опухоли α-гликопротеин с молекулярной массой 17 кДа является продуктом моноцитов/макрофагов, эндотелиальных, тучных и миелоидных клеток, клеток нейроглии, в особых случаях - активированных Т-лимфоцитов. Ген TNFα расположен на шестой хромосоме человека (6р21.3) в локусе, кодирующем молекулы главного комплекса гистосовместимости первого (HLA-A, В, С) и второго классов (HLA-DP, DQ, DR), между генами Ltα и Ltβ [4].

Существует три основных направления действия TNFα: цитотоксическое, направленное на клетки опухоли; иммуномодулирующее и провоспалительное, вызываемое активацией макрофагов, нейтрофилов, эозинофилов и эндотелиальных клеток; влияние на метаболизм. TNFα активно участвует в процессе быстрого увеличения размеров клетки и инициации апоптоза. Помимо прямого провоспалительного действия TNFα обладает широким спектром иммунорегуляторных эффектов и участвует в регуляции обменных процессов [5].

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов прогнозирования течения острого панкреатита по данным о генетическом полиморфизме - 308 G/A TNFα.

Технический результат использования изобретения - получение критериев оценки сроков наступления реактивной фазы острого панкреатита.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования течения острого панкреатита, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови; анализ полиморфизма гена фактора некроза опухоли α; прогнозирование позднего наступления реактивной фазы острого панкреатита в случае выявления генотипов -308 АА или -308 GA.

Новизна и изобретательский уровень заключаются в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза сроков наступления реактивной фазы острого панкреатита по данным полиморфизма - 308 G/A TNFα.

Способ осуществляют следующим образом:

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови больных острым панкреатитом в 2 этапа. На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl (рН 7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4°С, 4000 об/мин в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (рН 8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10 мг/мл) и инкубируют образец при 37°С в течение 16 часов.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об/мин в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -20°С.

Выделенную ДНК затем подвергают полимеразной цепной реакции с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров (таблица 1).

Изучение полиморфного локуса фактора некроза опухоли α проводили методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров и зондов (табл.1) с последующим анализом полиморфизма методом дискриминации аллелей.

Реакционная смесь объемом 25 мкл включает: 67 мМ трис-HCl (рН 8,8), 2,5 мМ MgCl2, 0,1 мкг геномной ДНК, по 10 пМ каждого праймера, по 5 пмоль каждого зонда, по 200 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы.

После денатурации (5 мин при 95°С) выполняли 40 циклов амплификации по схеме: отжиг праймеров - 1 мин при 52°С; денатурация - 15 сек при 95°С.

Таблица 1
Структура праймеров и зондов, используемых для генотипирования исследуемого ДНК-маркера
Ген Полиморфизм и его локализация в гене Структура праймеров Литература
F: 5--GAAATGGAGGCAATAGGTTTTGAG-3'
TNFα -308G/A (промотор) R: 5'-GGCCACTGACTGATTTGTGTGTAG-3' (Т.Kim, 2003)
5'-FAM-CCGTCCTCATGCC-RTQ1-3'
5'-ROX-CCGTCCCCATGCC-RTQ1-3'

Изобретение характеризуется следующими графическими материалами:

На Фиг.1 представлена дискриминация аллелей по локусу - 308 G/A TNFα, где • - гомозиготы -308АА, ■ - гомозиготы -308GG, ▲ - гетерозиготы -308GA. Дискриминация аллелей осуществляется методом Tag Man зондов по данным величин RFU, где RFU - это уровень относительной флуоресценции (УОФ) каждого зонда. Зонд с флуоресцентным красителем ROX соответствует аллелю G, зонд с красителем FAM - аллелю А.

На Фиг.2 представлены сроки наступления реактивной фазы острого панкреатита в зависимости от генотипов локуса -308 G/A TNFα.

На фиг.1 две полосы, вертикальная и горизонтальная, делят график на четыре секции: одна для каждого гомозиготного состояния, одна для гетерозиготного состояния и секция без реакции. Присвоение генотипов неизвестным образцам определяется вычерчиванием УОФ для одного флуорофора на оси х относительно УОФ для другого флуорофора на оси у на диаграмме дискриминации аллелей.

Если значения УОФ неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и правее вертикальной полосы, генотип гетерозиготен (GA). Если значения УОФ неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и левее вертикальной полосы, генотип гомозиготен по аллелю G (УОФ аллеля G отложены по оси у). Если значения УОФ неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и правее вертикальной, генотип гомозиготен по аллелю А (УОФ аллеля А отложены по оси х). Если значения УОФ неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и левее вертикальной, определение генотипа невозможно (в данном случае неопределенный образец - отрицательный контроль).

Формирование базы данных и статистические расчеты осуществлялись с использованием программы «STATISTICA 6.0». Ассоциации аллелей и генотипов изученного ДНК-маркера со сроками наступления реактивной фазы острого панкреатита оценивали с помощью непараметрического метода - критерия Манна-Уитни. Для описания рассматриваемых количественных показателей применяли медиану (Me) и интерквартильный размах (Q25-Q75) [7].

Возможность использования предложенного способа для прогнозирования течения острого панкреатита подтверждает анализ результатов наблюдений 195 больных острым панкреатитом. Пациенты включались в соответствующую группу больных только после установления диагноза заболевания, подтвержденного с помощью клинических и лабораторно-инструментальных методов обследования.

В исследуемую группу включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья России и не имеющие родства между собой.

Получено, что у индивидуумов, имеющих генотипы -308 АА и -308 GA TNFα, реактивная фаза острого панкреатита наступала через 6 дней (нижний квартиль 5 дней; верхний квартиль 7 дней), а у пациентов с генотипом -308 GG TNFα этот показатель составил 5 дней (интерквартильный размах 4,00-6,00 дней, р=0,03) (фиг.2).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о важной патогенетической роли молекулярно-генетического маркера -308 G/A фактора некроза опухоли α в развитии острого панкреатита. Маркерами более позднего наступления 2 фазы острого панкреатита являются генотипы -308 АА и -308 GA TNFα.

Больным с острым панкреатитом при выявлении генетических факторов более позднего наступления реактивной фазы, которыми являются -308 АА или -308 GA TNFα, следует в полном объеме проводить комплекс лечебных мероприятий (медикаментозных, элементов «малой» хирургии, экстракорпоральной детоксикации), направленных на сокращение сроков ферментативной фазы, что может улучшить результаты лечения острого панкреатита.

Литература

1. Кузнецов, Н.А., Родоман, Г.В., Бронтвейн, А.Г. Лечение больных панкреонекрозом // Хирургия. 2004. №12. С.22-27.

2. Глотов О.С., Баранов B.C. Генетический полиморфизм, мультифакториальные болезни и долголетие // Медицинская генетика-2007. - т.6, №4(58) - С.17-29.

3. Сотниченко, Б.А., Салиенко, С.В., Маркелова, Е.В. Деструктивный панкреатит: профилактика и лечение гнойно-септических осложнений // Анналы хирургической гепатологии. 2006. Т.11 №1. С.67-71.

4. Царегородцева Т.М. Цитокины при гастроэнтерологической патологии // Медицинская газета. - 2005. - №63. - С.17-24.

5. Баранов B.C. Геном человека и гены «предрасположенности» (Введение в предиктивную медицину) / B.C.Баранов, Е.В.Баранова, Т.Е.Иващенко // СПБ: «Интермедика», 2000 - 272 с.

6. Polymorphisms of tumor necrosis factor (TNF) α and β genes in Korean patients with psoriasis / T.Kim [et al.] // Arch. Dermatol. Res. - 2003. - V.295. - P.8-13.

7. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA [Текст] / О.Ю.Реброва. - М.: Медиасфера, 2006. - 305 с.

Способ прогнозирования течения острого панкреатита, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови, отличающийся тем, что проводят анализ полиморфизма гена фактора некроза опухоли α и прогнозируют риск позднего наступления реактивной фазы острого панкреатита в случае выявления генотипов -308 АА или -308 GA TNFα.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области косметики и представляет собой способ определения водостойкости антиперспиранта, включающий: a) отбор участников исследования; b) выполнение требований участниками исследования о не использовании каких-либо продуктов или использовании продуктов, не содержащих антиперспирант, в подмышечных областях в течение требуемого периода; c) очистку подмышечных областей каждого участника исследования; d) нанесение необходимого количества антиперспирантного продукта на одну подмышечную область и плацебо на другую подмышечную область каждого участника исследования; e) выполнение стадии d) до достижения необходимого числа нанесений, если выбирается более одного нанесения; f) после выполнения последнего нанесения проводят водное испытание, включающее круговое движение участников исследования в бассейне и/или плавание в течение периода времени активности в бассейне с глубиной воды, достаточной для смачивания подмышечных областей; g) проведение оценки потоотделения; и h) определение того, проявляет ли антиперспирантный продукт по меньшей мере стандартную антиперспирантную эффективность.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ выявления мутации c.-53-2A>G в гене SLC26A5, сопровождающийся развитием несиндромальной аутосомно-рецессивной глухоты.
Изобретение относится к области медицины, в частности к прогнозированию риска раннего развития атеросклероза у больных хроническим простатитом. Сущность способа состоит в том, что в сыворотке крови больных хроническим простатитом молодой возрастной группы определяют уровень общего тестостерона, секссвязывающего глобулина с последующим расчетом индекса свободного тестостерона, а также определяют содержание липопротеидов высокой плотности, триацилглицеридов и рассчитывают коэффициент атерогенного риска по формуле.

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ диагностики предрасположенности пациента к наследственной макулодистрофии Штаргардта.

Изобретение относится к медицине, в частности к способу оценки функционального состояния эндотелия (ФСЭ) экспериментальных животных после реконструктивных операций на брюшной аорте.
Предлагаются модели на насекомых, предназначенные отображать проницаемость гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) у млекопитающего, в частности, человека. Изобретение касается способа оценки транспорта химического соединения через ГЭБ, а также применения насекомых в скрининге веществ, обладающих биологическим действием на мозг или центральную нервную систему и/или действующих на заболевание или нарушение, затрагивающее мозг или центральную нервную систему.
Изобретение относится к педиатрии и онкогематологии и может быть использовано для прогнозирования развития нарушений функции миокарда у детей с острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) на разных этапах полихимиотерапии (ПХТ).

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к определению ферментов в костной и хрящевой тканях при изучении регенераторных процессов, и описывает способ определения щелочной фосфатазы в костной и хрящевой тканях, включающий подготовку образцов исследуемых тканей и гистохимическое исследование срезов полученного материала, где образцы исследуемых костной и хрящевой тканей выдерживают в забуференном растворе нейтрального 10% формалина в течение 1 суток при температуре +4°C, затем обрабатывают в 0,1 М растворе фосфатного буфера сначала в 4 смены по 2 часа каждая, а после в 9 смен по часу с добавлением сахарозы постепенно возрастающей концентрации, после чего исследуемый материал погружают в реагент Tissue-Tek O.C.T.

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ оценки индивидуальной чувствительности генома человека к воздействию повышенных доз излучений радона и продуктов его распада.
Изобретение относится к области биохимии и микробиологии и может быть использовано для определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий. Сущность способа состоит в том, что среда, содержит агарозу или агар (500 мг), неионный детергент (50 мкл), хлористый кальций (12,5 мг), 0,05 М Трис-HCl буфер pH 8,3 (до 100 мл), причем после застывания среды в ней делают лунки, в которые вносят исследуемый образец в объеме 10-50 мкл на одну лунку, затем среду с исследуемым образцом инкубируют при 37°C в течение 12 часов и визуально определяют наличие или отсутствие липолитической активности в исследуемом образце.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития ангиопатии нижних конечностей у больных сахарным диабетом 2-го типа. Осуществляют выделение ДНК из периферической венозной крови, проводят анализ полиморфизма -308G/A гена фактора некроза опухоли α и при выявлении аллеля -308A TNFα прогнозируют повышенный риск развития ангиопатии нижних конечностей у больных сахарным диабетом 2-го типа. Изобретение обеспечивает получение новых критериев оценки риска развития диабетической ангиопатии у больных сахарным диабетом 2-го типа. 1 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и ветеринарии и предназначено для диагностики вируса инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых. Осуществляют два раунда полимеразной цепной реакции с праймерами B37-B853r и B123-B320r для выявления фрагмента сегмента В, кодирующего РНК-зависимую РНК-полимеразу вируса инфекционного некроза поджелудочной железы с последующим электрофоретическим определением размера амплифицируемого фрагмента нуклеотидной последовательности. По наличию на электрофореграмме фрагментов длиной 860 и/или 240 пн в исследуемом образце диагностируют вирус инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых. Предлагаемое изобретение применимо в диагностических исследованиях в научно-исследовательских институтах, ветеринарных лабораториях, рыбоводческих хозяйствах. 2 ил., 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования in vitro способности популяции клеток, полученных из сустава, продуцировать стабильный гиалиновый хрящ in vivo. В популяции клеток определяют экспрессию ряда маркерных генов, включающих позитивный маркер FRZB (Frizzled-Подобный Белок 1). негативный маркер ALK1 (Рецептор Активина А, Типу II-Подобная Киназа) и один или более маркеров, выбранных из группы, состоящей из негативного маркера PEDF (Фактор, Выделенный из Пигментного Эпителия), позитивного маркера COL11 (Коллаген, Тип XI А1), позитивного маркера COL2 (Коллаген, Тип II, Альфа 1) и позитивного маркера FGFR3 (Рецептор Фактора Роста Фибробластов 3). Уровни экспрессии каждого индивидуального маркера представляют с помощью числового значения. Числовые значения комбинируют в кумулятивный показатель, где значение кумулятивного показателя указывает на способность к продукции стабильного хряща. Предлагаемое изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование способности популяции клеток, полученных из сустава, продуцировать стабильный гиалиновый хрящ in vivo. 5 з.п. ф-лы, 4 ил., 11 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для прогнозирования сроков формирования абсцесса в фазу секвестрации острого панкреатита и, как следствие, неблагоприятного течения заболевания. Способ прогнозирования сроков формирования абсцесса в фазу секвестрации острого панкреатита включает выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ полиморфизма +250 A/G Ltα и при выявлении генотипов +250 GG или +250 AG Ltα прогнозируют риск раннего формирования абсцесса в фазу секвестрации острого панкреатита. 1 табл., 2 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа выявления O-гликозилированных белков в составе клеточных гомогенатов, подготавливаемых к протеомному и фосфопротеомному анализу. Предложенное изобретение может быть использовано для проведения протеомного и фосфопротеомного анализа. Способ включает проведение двумерного электрофореза с последующей идентификацией пятен методами спектроскопии MALDI-TOF или фосфопротеомики. Проводят обессоливание клеточных гомогенатов методом гель-хроматографии или диализа клеточных гомогенатов. Подвергают клеточные гомогенаты дегликозилированию по принципу β-элиминирования в растворе 0,05 М NaOH, который содержит 38 мг/мл NaBH4, в течение 16 часов при +45°C с последующим добавлением цианинового красителя JC-1 в концентрации 10-6 М. Инкубируют клеточные гомогенаты в течение 15 мин при комнатной температуре. Концентрируют гомогенаты осаждением 50% ацетоном, подвергают двумерному электрофорезу с образованием электрофореграмм, анализируемых на флуоресценцию при облучении на трансиллюминаторе синего цвета со светофильтром янтарного цвета, визуально проявляющуюся в виде светящихся в темноте полос. Данные полосы экстрагируют из геля и используют для проведения протеомного или фосфопротеомного анализа. Дополнительный анализ интенсивности и расположения экстрагируемых полос выполняют за счет сравнения окрашенных азотнокислым серебром электрофореграмм гомогенатов до и после процедуры дегликозилирования. Предложенное изобретение позволяет идентифицировать белки, меняющие состав или степень своего O-гликозилирования в результате какого-либо физиологического воздействия на клетку. 5 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии, и может быть использовано для определения адгезии золотистого стафилококка. Для этого исследуют чистую культуру золотистого стафилококка в концентрации 1 млрд/мл. Определяют среднее количество микробов, адгезированных на одном эритроците при подсчете не менее 25 эритроцитов. При этом в качестве субстрата адгезии используют эритроциты барана в концентрации 100 млн/мл, которые предварительно отмывают 50-ти % формалина. Изобретение обеспечивает качественную и количественную экспресс-диагностику определения степени выраженности адгезивных свойств стафилококков.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики вариантов поражения проводящей системы миокарда при инфекционной кардиомиопатии у детей. Для этого пациенту проводят клинический осмотр и лабораторные исследования. Выполняют электрокардиографическое исследование. Проводят исследование крови, определяют антикардиальные антитела - АКАТ к антигенам отдельных структур сердца, по превышению титров которых относительно нормы определяют наличие воспалительного процесса в соответствующих структурах миокарда. При выявлении на ЭКГ нарушения ритма на фоне повышения значения титра АКАТ к проводящей системе миокарда диагностируют вариант поражения проводящей системы миокарда в виде нарушения ритма. При выявлении на ЭКГ нарушения проводимости на фоне повышения значения титров АКАТ к проводящей системе миокарда к кардиомиоцитам диагностируют вариант поражения проводящей системы миокарда в виде нарушения проводимости. При выявлении на ЭКГ изменения положения ST-T линии выше или ниже изолинии и повышении значения титров АКАТ к кардиомиоцитам диагностируют вариант поражения проводящей системы миокарда в виде нарушения реполяризации желудочков сердца. Изобретение позволяет на ранних стадиях заболевания провести адекватную терапию и предупредить развитие жизнеугрожающих осложнений. 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития бронхиальной астмы. Осуществляют выделение ДНК из лимфоцитов периферической венозной крови больного. Проводят генотипирование полиморфных вариантов rs7216389 гена гасдермина В (GSDMB), rs12342831 гена бета 1,4-галактозилтрансферазы 1 (B4GALT1) и rsl496499 гена белка 3, связывающего инсулиноподобные факторы роста (IGFBP3). При выявлении одного из сочетаний генотипов по трем полиморфным локусам генов: GSDMB*rs7216389C/T-B4GALT1*rs12342831T/Т-IGFBP3*rs1496499T/G; GSDMB*rs7216389T/T-B4GALT1*rs12342831T/Т-IGFBP3*rs1496499T/G; GSDMB*rs7216389T/Т-B4GALT1*rs12342831T/Т-IGFBP3*rs1496499T/T, прогнозируют риск развития бронхиальной астмы у индивидов различной этнической принадлежности. Изобретение обеспечивает эффективный способ прогнозирования риска развития бронхиальной астмы и способствует разработке профилактических мероприятий с учетом индивидуальных особенностей каждого больного. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Представлен способ, основанный на измерении в вагинальных соскобах уровня экспрессии мРНК генов интерлейкинов IL1B, IL8, IL10 и IL18 относительно представленности мРНК референсных генов B2M, GUS, TBP или HPRT; на основании полученных уровней экспрессии вычисляется значение канонической линейной дискриминантной функции (КЛДФ) следующим образом: Y=1,09*IL1B-0,61*IL8+0,21*IL10-0,11*IL18-0,91 (формула 1), где IL1B - относительный уровень экспрессии IL1B, IL8 - относительный уровень экспрессии IL8, IL10 - относительный уровень экспрессии IL10, IL18 - относительный уровень экспрессии IL18; IL=2^(Cpmin-Cpil)/NF (формула 2), где IL - относительный уровень экспрессии гена интерлейкина, Cpmin - коэффициент минимального значения уровня экспрессии, для IL1B Cpmin=17,9; IL8 Cpmin=16,6; IL10 Cpmin=28,8; IL18 Cpmin=23,3; Cpil - значение порогового цикла соответствующего IL в образце, определяемого автоматически; NF - фактор нормировки, вычисляется по формуле 3: (формула 3), где NF - фактор нормировки, вычисляемый как среднее геометрическое 4 факторов нормировки для референсных генов (см. формулу 4); NFref=2^(Cpmin-Cpref) (формула 4), где NFref - фактор нормировки для референсного гена, Cpmin - коэффициент минимального значения уровня экспрессии референсного гена, Cpref - показания прибора порогового значения в образце; значения Cpmin для референсных генов следующие: GUS Cpmin=26,5; HPRT Cpmin=26,8; B2M Cpmin=18,9; ТВР Cpmin=28,4; при этом, если значение КЛДФ≤0,1, делается заключение об отсутствии вагинита, значения КЛДФ>0,1 соответствуют вагиниту. Изобретение позволяет объективно выявить наличие вагинита у беременной женщины. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 3 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине. Сущность способа определения липидов заключается в том, что к 10 мл хлороформного экстракта липидов добавляют 25 мкл 10% раствора тезита при одновременном перемешивании смеси с помощью шейкера при 20°C и частоте колебаний платформы 120 в минуту в течение 30 минут получают прозрачный раствор липидов для ферментативного определения триацилглицеридов. Способ позволяет повысить эффективность и точность определения липидов тканей. 1 табл.
Наверх