Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови



Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови
Способ определения аполипопротеина а1 и аполипопротеина в сыворотки крови

 


Владельцы патента RU 2535142:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского" (RU)
Закрытое акционерное общество "Фирма "БИОМ" (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может применяться для определения аполипопротеина А1 и аполипопротеина В сыворотки крови с целью выявления факторов риска атеросклероза коронарных артерий при скрининге у населения. Способ включает пропускание ультразвука с изменяющейся частотой через пробы с дистиллированной водой и через пробы с сывороткой крови при двух разных температурах, измерение скоростей прохождения ультразвука через пробы и определение величин относительных скоростей прохождения ультразвука через пробы, при этом используют пару проб с дистиллированной водой и пару проб с сывороткой крови, при этом температуру одной из проб в паре поддерживают ниже, чем другой, но температуру проб в парах поддерживают одинаковыми в интервале температур 25-40°C, затем определяют коэффициент поглощения ультразвука в дистиллированной воде и коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови и его зависимость от частоты в диапазоне частот 4-15 МГц, а также зависимость от температуры скорости ультразвука в сыворотке крови, после чего определяют аполипопротеин А1 и аполипопротеин В путем решения системы линейных уравнений относительно двух неизвестных. Изобретение обеспечивает повышение точности и информативности, сокращение сроков проведения исследований. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может применяться для определения аполипопротеина A1 и аполипопротеина B сыворотки крови с целью выявления факторов риска атеросклероза коронарных артерий при скрининге у населения.

Для определения содержания аполипопротеина A1 (апоA1) и аполипопротеина B (апоB) сыворотки крови применяют разные методические подходы. Разделение апоЛП на основании их физико-химических свойств (электрофорез на разных поддерживающих средах, изоэлектрическое фокусирование) используют для качественного определения аполипопротеинов, а также (в сочетании со сканирующей денситометрией) для оценки соотношения аполипопротеинов. Методы применяют в научных исследованиях или используют как диагностические тесты в специализированных лабораториях, их применение в обычной лабораторной практике в настоящее время затруднительно.

Большая часть методов определения апоЛП основана на принципах иммунохимического анализа: иммунотурбидиметрия и иммунонефелометрия, радиальная иммунодиффузия и иммуноэлектрофорез, иммуноферментный и радиоиммунный анализ. Для количественного иммунохимического определения необходимо иметь специфическую антисыворотку и стандарт.

Используемые в настоящее время методы определения аполипопротеина A1 и аполипопротеина B сыворотки крови обладают рядом существенных недостатков, общими из которых является: длительное время проведения анализа; зависимость результатов от качества используемых реактивов; чувствительность существующих методов к температуре, мутность сыворотки, обусловленная высокой концентрацией липопротеидов, богатых триглицеридами.

Кроме того, каждый из известных способов предназначен для определения только одного из компонентов. Отсутствует единый универсальный метод одновременного определения аполипопротеина A1 и аполипопротеина B сыворотки крови.

Известен метод радиоиммунологического анализа (РИА) сыворотки крови с целью определения аполипопротеина A1 и аполипопротеина B с использованием моноклональных антител. К недостаткам метода следует отнести использование радиоактивных изотопов (обычно 125 I), для работы с которыми требуются специальные условия и дорогостоящее оборудование. Кроме того, метод требует постоянного обновления реактивов (1 раз в 2 месяца) из-за относительной нестабильности 125 I.

Радиальная иммунодиффузия (РИД) и иммуноэлектрофорез (ИЭФ) - методы менее чувствительны по сравнению с РИА, и для их выполнения необходимо значительно большее количество антисыворотки, что приводит к удорожанию метода. Кроме того, применение ИЭФ не позволяет определить общее содержание апоB в сыворотке крови, что обусловлено различиями в скорости движения при электрофорезе липопротинов разных классов в геле. РИД и ИЭФ занимают много времени, и поэтому их затруднительно использовать для большого количества образцов.

Иммунотубидиметрический анализ (ИТА) более прост для проведения анализов в клинических лабораториях, занимает мало времени, но требует реагентов, и, следовательно, качество анализа зависит от качества реагентов, поэтому лучшие результаты можно получить, используя дорогие реактивы.

Иммунонефелометрический анализ (ИНА) подобен ИТА, однако требует специальные приборы-нефелометры, поскольку при ИНА определяют изменение светорассеяния пробы, а не мутности образца, как при ИТА. Выполнение анализа ИНА методом также требует качественных реактивов, и поэтому стоимость анализа этим методом достаточно высока.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому изобретению является способ диагностики внутренних органов и способ получения контрольного образца для его осуществления (варианты), защищенный патентом RU 2082318 C1, A61B 8/08, опубл. 27.06.1997 г., принятый за ближайший аналог (прототип).

Способ по прототипу включает исследования сыворотки крови пациента в сравнении с контрольным образцом путем пропускания через них ультразвука переменной частоты в интервале 3-20 МГц для лабораторной диагностики заболеваний внутренних органов опухолевого генеза. Измерения проводят дважды, определяя величины относительных скоростей прохождения ультразвука для сыворотки крови и контрольного образца при двух температурах из диапазона температуры 15-40°C. После этого определяют величину П по формуле:

П=δ(S)·δ(mS)·S0·(mS)0·1010;

(mS)0=δ(mS)+φ3, где

T1 - температура в устройстве №1;

T2 - температура в устройстве №2;

φ1 - относительное изменение скорости ультразвука в контрольном образце относительно дистиллированной воды при температуре T1;

φ2 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды при температуре T1;

φ3 - относительное изменение скорости ультразвука в контрольном образце относительно дистиллированной воды при температуре T2;

φ4 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды при температуре T2.

При значении величины П, равном 300 и/или менее, диагностируют заболевание опухолевого происхождения внутренних органов.

Недостатками способа по прототипу является его длительность и сложность, поскольку требуется изготовление контрольного образца с применением химических реактивов - раствора трихлоруксусной кислоты и раствора двууглекислого натрия (NaHCO3), которые смешивают с сывороткой крови. Кроме этого с помощью данного метода можно диагностировать только наличие опухолевого поражения внутренних органов, т.к. на основании исследования сыворотки крови определяется не конкретный компонент, а критерий, определяющий данное заболевание.

В практической медицине более ценным является определение конкретных биохимических показателей крови, характеризующих те или иные обменные процессы.

Задачей изобретения является создание нового способа определения аполипопротеина А1 и аполипопротеина В сыворотки крови.

Техническим результатом от использования изобретения является повышение точности и информативности, сокращение сроков проведения исследования.

Это достигается тем, что в способе определения аполипопротеина А1 и аполипопротеина В сыворотки крови, включающем пропускание ультразвука с изменяющейся частотой через пробы с дистиллированной водой и через пробы с сывороткой крови при двух разных температурах, измерение скоростей прохождения ультразвука через пробы и определение величин относительных скоростей прохождения ультразвука через пробы, используют пару проб с дистиллированной водой и пару проб с сывороткой крови, при этом температуру одной из проб в паре поддерживают ниже, чем другой, но температуру проб в парах поддерживают одинаковыми, затем определяют коэффициент поглощения ультразвука в дистиллированной воде при соответствующих температурах и коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови и его зависимость от частоты, а также зависимость от температуры скорости ультразвука в сыворотке крови, после чего определяют аполипопротеин А1 и аполипопротеин В путем решения системы линейных уравнений относительно двух неизвестных:

К1· (апоА1)+К2· (апоВ)=Δφt

К3· (апоА1)+К4· (апоВ)=Δξf,

где:

(апоА1) - аполипротеин А, в г/л,

(апоВ) - аполипротеин В, в г/л,

К1 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина А1,

К2 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина В,

К3 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина А1,

К4 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина В,

Δφt - температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови,

Δξf - частотный коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови; температуры проб поддерживают в интервале 25-40°C.

Такой способ определения аполипротеина А1 и аполипротеина B в сыворотке крови является правомерным потому, что эти компоненты сыворотки крови содержат в своей структуре и липиды, скорость ультразвука в которых зависит от температуры, и белок, поглощение ультразвука в котором зависит от частоты ультразвукового сигнала.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Сначала помещают дистиллированную воду в акустические ячейки двух аналогичных устройств №1 и №2 для контроля биологических жидкостей, подключенных к компьютеру, в которых поддерживают температуру от 25°C до 40°C, которая в устройстве №1 ниже, чем в устройстве №2, на оба устройства подают электрический высокочастотный сигнал с генератора, также подключенного к компьютеру, в устройствах электрический сигнал преобразуется в ультразвуковой на пьезоизлучателе и обратно в электрический на пьезоприемнике, и определяют скорость прохождения и коэффициент поглощения ультразвука в дистиллированной воде при различных температурах в диапазоне от 25°C до 40°C и различных частотах в диапазоне от 4 до 15 МГц, затем в оба устройства заливают сыворотку крови и аналогичным образом определяют скорость прохождения и коэффициент поглощения ультразвука в ней, на основании полученных данных определяют относительные изменения скоростей ультразвука в сыворотке крови при соответствующих температурах и дополнительно определяют частотный коэффициент поглощения и температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови, после чего определяют концентрацию аполипопротеина А1 (апоА1) и аполипопротеина В (апоВ) в г/л, решая систему уравнений, рассматривая в качестве неизвестных указанные компоненты сыворотки крови:

К1· (апоА1)+К2· (апоВ)=Δφt

К3· (апоА1)+К4· (апоВ)=Δξf,

где:

Δφt=(φ12)/Δt,

Δξf=(ξ12)/Δf,

φ1 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды, помещенных в устройство №1;

φ2 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды, помещенных в устройство №2;

Δt=t1-t2 - разность температур между устройством №2 и №1,

ξ1 - разность коэффициентов поглощения ультразвука в сыворотке крови и дистиллированной воде в устройстве №1 при частоте f1,

ξ2 - разность коэффициентов поглощения ультразвука в сыворотке крови и дистиллированной воде в устройстве №2 при частоте f3,

Δf=f2-f1 - разность частот между устройством №2 и устройством №1,

К1 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина А1,

К2 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина В,

К3 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина А1,

К4 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина В,

Δφt - температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови,

Δξf - частотный коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови.

Ультразвук пропускают через дистиллированную воду и сыворотку крови с частотой, изменяющейся в диапазоне от 4 до 15 МГц. Температуру в акустических ячейках устройств №1 и №2 изменяют в диапазоне от 25 до 40°C.

Ниже приведены примеры конкретного использования предложенного способа, подтверждающие промышленную применимость изобретения.

Пример 1

У пациента из локтевой вены натощак забирают 5 мл крови без антикоагулянта и оставляют на 1,5 часа при комнатной температуре для образования сыворотки крови. Затем пробирку с кровью центрифугируют. Затем помещают дистиллированную воду в акустические ячейки двух аналогичных устройств №1 и №2 для контроля биологических жидкостей, подключенных к компьютеру, в которых поддерживают температуру от 25 до 40°C, которая в устройстве №1 ниже, чем в устройстве №2. На оба устройства для контроля биологических жидкостей подают сигнал частотой, изменяющейся на 5 МГц из любой части диапазона от 4 до 15 МГц (например, от 7,0 до 12,0 МГц), с высокочастотного генератора (например, ГЧ - 164), управляемого персональным компьютером. В устройствах электрический сигнал преобразуется на пьезоизлучателе в ультразвуковой сигнал той же частоты, который распространяется в дистиллированной воде, находящейся в акустических ячейках устройств. Пьезоприемники преобразуют ультразвуковой сигнал в высокочастотный электрический сигнал, который поступает на высокочастотный переключатель, управляемый компьютером, который через этот переключатель, подсоединяет к высокочастотному микровольтметру (например, В3-48) то одно, то другое устройство для контроля биожидкостей. Продетектированный высокочастотный сигнал с выхода высокочастотного микровольтметра поступает на вольтметр постоянного тока (например, В7 - 53), также управляемый компьютером. В результате обработки данных, получаемых с пьезоприемников устройств для контроля биологических жидкостей, в памяти компьютера фиксируются центральные частоты всех резонансных пиков в выбранном диапазоне частот (например, от 5,0 до 15,0 МГц) для дистиллированной воды. Затем в оба устройства помещают сыворотку крови, и аналогично в памяти компьютера фиксируются центральные частоты всех резонансных пиков в том же диапазоне (например, от 5,0 до 15,0 МГц) для сыворотки крови. Затем компьютер вычисляет среднюю разность частотного расстояния между резонансными пиками и номер выбранного резонансного пика по следующей формуле:

где: N - число частотных расстояний между резонансными пиками в выбранном частотном диапазоне;

j - номер выбранного резонансного пика;

fj - резонансная частота j-го резонансного пика;

fj+1 - резонансная частота j+1-го резонансного пика.

Затем выбирают значения центральных частот резонансных пиков одного и того же номера для дистиллированной воды, сыворотки крови и контрольных образцов №1 и №2 и вычисляют соответствующие скорости ультразвука по формулам:

где V ( H 2 O ) 1,2 - скорость ультразвука в дистиллированной воды в устройствах №1 и №2;

f j ( H 2 O ) 1,2 - центральные частоты резонансных пиков номера j для дистиллированной воды в устройствах №1 и №2;

Z j ( H 2 O ) 1,2 - продольные волновые числа в устройствах №1 и №2 с дистиллированной водой;

R - радиус устройства для контроля биосред.

где V ( S ) 1,2 - скорость ультразвука в сыворотке крови в устройствах №1 и №2;

f j ( S ) 1,2 - центральные частоты резонансных пиков номера j для сыворотки крови в устройствах №1 и №2;

Z j ( S ) 1,2 - продольные волновые числа в устройствах №1 и №2 с сывороткой крови;

R - радиус устройства для контроля биосред.

На основании результатов, полученных по формулам для V ( H 2 O ) 1,2 , V ( S ) 1,2 , вычисляют относительные изменения скорости ультразвука в сыворотке крови в устройствах №1 и №2, относительно дистиллированной воды по формулам:

где V ( H 2 O ) 1,2 - скорость ультразвука в дистиллированной воды в устройствах №1 и №2;

V ( S ) 1,2 - скорость ультразвука в сыворотке крови в устройствах №1 и №2;

φ1 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды, помещенных в устройство №1;

φ2 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды, помещенных в устройство №2;

определяют частотный коэффициент поглощения ультразвука при изменении частоты на 5 МГц в диапазоне частот от 4 до 15 МГц по формуле:

где Δ ξ f T 2 - частотный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови для устройства №2;

ξ f 2 T 2 - коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови в устройстве №2 при частоте 12 из диапазона от 4 до 15 МГц;

ξ f 1 T 2 - коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови в устройстве №2 при частоте f1 из диапазона от 4 до 15 МГц;

и температурный коэффициент скорости ультразвука при изменении температуры на 5 C в диапазоне температур от 25 до 40 C по формуле:

где Δφt - температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови;

φt1 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды в устройстве №1;

φt2 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды в устройстве №2;

после чего определяют концентрацию аполипопротеина A1 (апоА1) и аполипротеина В (апоВ) в г/л из решения системы уравнений:

К1· (апоА1)+К2· (апоВ)=Δφt

К3· (апоА1)+К4· (апоВ)=Δξf,

К1 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина A1,

К2 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина В,

К3 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина A1,

К4 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина В,

Δφt - температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови,

Δξf - частотный коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови.

Величины концентрационных коэффициентов в системе уравнений для определения апоA1 и апоВ находят общепринятым образом для каждого конкретного устройства №1 и №2 после выбора температур T1 и Т22>T1) и частот f1 и f2 (f2>f1) с использованием сывороток с известными значениями апоА1 и апоВ (см. Справочник «Медицинские лабораторные технологии», том 2, под редакцией Ф.И. Карпищенко, Санкт-Петербург, 1999 г., стр.59-60), например сывороток крови фирмы Human (Германия): Serodos - сыворотка с паспортными значениями в области нормальных показателей апоА1 апоВ и Serodos plus - сыворотка с паспортными значениями в области патологии апоА1 и апоВ.

Пример 2

Больная Н., 58 лет, диагноз гипертония II степени. Из локтевой вены натощак забирают 5 мл крови без антикоагулянта и оставляют на 1,5 часа при комнатной температуре для образования сыворотки крови. Затем пробирку с кровью центрифугируют. Затем помещают дистиллированную воду в акустические ячейки двух аналогичных устройств №1 и №2 для контроля биологических жидкостей, подключенных к компьютеру, в которых поддерживают температуру от 25 до 40°C, которая в устройстве №1 ниже, чем в устройстве №2. На оба устройства для контроля биологических жидкостей подают сигнал частотой, изменяющейся на 10 МГц из любой части диапазона от 4 до 15 МГц (например, от 7,0 до 12,0 МГц), с высокочастотного генератора (например, ГЧ-164), управляемого персональным компьютером. В устройствах электрический сигнал преобразуется на пьезоизлучателе в ультразвуковой сигнал той же частоты, который распространяется в дистиллированной воде, находящейся в акустических ячейках устройств. Пьезоприемники преобразуют ультразвуковой сигнал в высокочастотный электрический сигнал, который поступает на высокочастотный переключатель, управляемый компьютером, который через этот переключатель подсоединяет к высокочастотному микровольтметру (например, В3-48) то одно, то другое устройство для контроля биожидкостей. Продетектированный высокочастотный сигнал с выхода высокочастотного микровольтметра поступает на вольтметр постоянного тока (например, В7-53), также управляемый компьютером. В результате обработки данных, получаемых с пьезоприемников устройств для контроля биологических жидкостей, в памяти компьютера фиксируются центральные частоты всех резонансных пиков в выбранном диапазоне частот (например, от 7,0 до 12,0 МГц) для дистиллированной воды. Затем в оба устройства помещают сыворотку крови, и аналогично в памяти компьютера фиксируются центральные частоты всех резонансных пиков в том же диапазоне (например, от 7,0 до 12,0 МГц) для сыворотки крови. Затем компьютер вычисляет среднюю разность частотного расстояния между резонансными пиками и номер выбранного резонансного пика по следующей формуле:

где: N - число частотных расстояний между резонансными пиками в выбранном частотном диапазоне;

j - номер выбранного резонансного пика;

fj - резонансная частота j-го резонансного пика;

fj+1 - резонансная частота j+1-го резонансного пика.

Затем выбирают значения центральных частот резонансных пиков одного и того же номера для дистиллированной воды, сыворотки крови и контрольных образцов №1 и №2 и вычисляют соответствующие скорости ультразвука по формулам:

где V ( H 2 O ) 1,2 - скорость ультразвука в дистиллированной воды в устройствах №1 и №2;

f j ( S ) 1,2 - центральные частоты резонансных пиков номера j для дистиллированной воды в устройствах №1 и №2;

Z j ( H 2 O ) 1,2 - продольные волновые числа в устройствах №1 и №2 с дистиллированной водой;

R - радиус устройства для контроля биосред.

где V ( S ) 1,2 - скорость ультразвука в сыворотке крови в устройствах №1 и №2;

f j ( S ) 1,2 - центральные частоты резонансных пиков номера j для сыворотки крови в устройствах №1 и №2;

Z j ( S ) 1,2 - продольные волновые числа в устройствах №1 и №2 с сывороткой крови;

R - радиус устройства для контроля биосред.

На основании результатов, полученных по формулам для V ( H 2 O ) 1,2 , V ( S ) 1,2 вычисляют относительные изменения скорости ультразвука в сыворотке крови в устройствах №1 и №2 относительно дистиллированной воды по формулам:

где V ( H 2 O ) 1,2 - скорость ультразвука в дистиллированной воды в устройствах №1 и №2;

V ( S ) 1,2 - скорость ультразвука в сыворотке крови в устройствах №1 и №2;

φ1 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды, помещенных в устройство №1;

φ2 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды, помещенных в устройство №2;

определяют частотный коэффициент поглощения ультразвука при изменении частоты на 5 МГц в диапазоне частот от 4 до 15 МГц по формуле:

где Δ ξ f T 2 - частотный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови для устройства №2;

ξ f 2 T 2 - коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови в устройстве №2 при частоте f2 из диапазона от 4 до 15 МГц;

ξ f 1 T 2 - коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови в устройстве №2 при частоте f1 из диапазона от 4 до 15 МГц;

и температурный коэффициент скорости ультразвука при изменении температуры на 5°C в диапазоне температур от 25 до 40°C по формуле:

где Δφt - температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови;

φt1 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды в устройстве №1;

φt2 - относительное изменение скорости ультразвука в сыворотке крови относительно дистиллированной воды в устройстве №2;

после чего определяют концентрацию аполипопротеина A1 (апоA1) и аполипротеина В (апоВ) в г/л из решения системы уравнений:

К1·(апоА1)+К2·(апоВ)=Δφt

К3· (апоА1)+К4·(апоВ)=Δξf,

К1 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина А1,

К2 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина В,

К3 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина А1,

К4 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина В,

Δφt - температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови,

Δξf - частотный коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови.

Величины концентрационных коэффициентов в системе уравнений для определения апоА1 и апоВ находят общепринятым образом для каждого конкретного устройства №1 и №2 после выбора температур T1 и T2 (T2>T1) и частот f1 и f2 (f2>f1) с использованием сывороток с известными значениями апоА1 и апоВ (см. Справочник «Медицинские лабораторные технологии», том 2, под редакцией Ф.И. Карпищенко, Санкт-Петербург, 1999 г., стр.59-60), например сывороток крови фирмы Human (Германия): Serodos - сыворотка с паспортными значениями в области нормальных показателей апоА1 апоВ и Serodos plus - сыворотка с паспортными значениями в области патологии апоА1 и апоВ. Результаты измерений передают в компьютер. За 1 минуту получают следующие компоненты сыворотки крови:

Аполипопротеин А1 - 1.26 г/л,

Аполипопротеин В - 1.43 г/л,

что соответствует диагнозу больной Н.

Пример 3

Больной А., 47 лет, диагноз сахарный диабет. Из локтевой вены натощак взята кровь, после 1,5-часового отстаивания и центрифугирования получена сыворотка крови. Сыворотку крови помещают в устройство для ультразвукового контроля биологических жидкостей и измеряют скорость и поглощение ультразвука при различных частотах и температурах. В результате применения акустического метода получены следующие результаты:

Аполипопротеин A1 - 0.98 г/л,

Аполипопротеин В - 1.49 г/л,

что соответствует патологическим значениям апоA1 и апоВ, имеющим место при атеросклерозе коронарных артерий.

Таким образом, предлагаемый способ обладает высокой точностью и информативностью, сокращает время проведения исследования, позволяет в короткие сроки (в течение 1 минуты) одновременно определить оба компонента - аполипопротеин A1 и аполипопротеин В сыворотки крови без применения реагентов, не подвергая компоненты сыворотки крови какому-либо воздействию, что позволяет выявлять факторы риска атеросклероза коронарных артерий при скрининге у населения, оценивать тяжесть заболевания, глубину метаболических нарушений, отслеживать динамику патологического процесса при установленном диагнозе, эффективность проводимой терапии и необходимость своевременной ее коррекции.

Способ определения аполипопротеина А1 и аполипопротеина В сыворотки крови, включающий пропускание ультразвука с изменяющейся частотой через пробы с дистиллированной водой и через пробы с сывороткой крови при двух разных температурах, измерение скоростей прохождения ультразвука через пробы и определение величин относительных скоростей прохождения ультразвука через пробы, отличающийся тем, что используют пару проб с дистиллированной водой и пару проб с сывороткой крови, при этом температуру одной из проб в паре поддерживают ниже, чем другой, но температуру проб в парах поддерживают одинаковой в интервале температур 25-40°C, затем определяют коэффициент поглощения ультразвука в дистиллированной воде и коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови и его зависимость от частоты в диапазоне частот 4-15 МГц, а также зависимость от температуры скорости ультразвука в сыворотке крови, после чего определяют аполипопротеин А1 и аполипопротеин В путем решения системы линейных уравнений относительно двух неизвестных:
К1·(апоА1)+К2·(апоВ)=Δφt
К3·(апоА1)+К4·(апоВ)=Δξf,
где:
(апоА1) - аполипротеин А, в г/л,
(апоВ) - аполипротеин В, в г/л,
К1 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина А1,
К2 - концентрационный коэффициент относительной скорости ультразвука для аполипопротеина В,
К3 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина А1,
К4 - концентрационный коэффициент поглощения ультразвука для аполипопротеина В,
Δφt - температурный коэффициент скорости ультразвука в сыворотке крови,
Δξf - частотный коэффициент поглощения ультразвука в сыворотке крови.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине и касается способа диагностики инфекционных осложнений у больных с острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ). Способ включает определение t° тела, числа лейкоцитов, бластных клеток и количества C-реактивного белка (СРБ), и при уровне СРБ ниже 10 мг/л инфекцию исключают, значения в промежутке от 10 до 16 мг/л расценивают как «серую зону», когда наличие инфекции нельзя исключить, а при его концентрации выше 16 мг/л констатируют наличие инфекции независимо от числа лейкоцитов и бластных клеток.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки активности воспалительного процесса, локализованного в трахеобронхиальном дереве. Сущность способа состоит в том, что в образцах венозной крови определяют количество палочкоядерных лейкоцитов в общем анализе, C-реактивного белка в биохимическом анализе, фибриногена в коагулологическом анализе, в образцах аспирата трахеи определяют количество нейтрофильных лейкоцитов при цитологическом исследовании, наличие изолированных грампозитивных и грамнегативных клинических штаммов микроорганизмов или их комбинации и количественное значение темпа роста микробной биомассы.

Изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням. Проводят тестирование пациента с определением клинических признаков и оценкой каждого в баллах и рассчитывают диагностический показатель.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и анестезиологии и предназначено для профилактики послеоперационных тромбогеморрагических осложнений у пациенток, оперированных по поводу миомы матки, имеющих в предоперационном периоде нарушения системы гемостаза по типу гиперкоагуляции.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения необходимости релапаротомии у больных распространенным перитонитом. Сущность способа состоит в том, что в любые смежные трое суток после операции у больного распространенным перитонитом с явлениями полиорганной недостаточности определяют баллы шкалы SOFA и количество палочкоядерных лейкоцитов в крови на третьи сутки, выбранные для анализа.
Изобретение относится к области медицины, а точнее к способу определения риска развития ишемической болезни сердца путем биохимического исследования сыворотки крови, в которой определяют малоновый диальдегид, оксид азота, фосфолипазу А2 и эндотоксин и при повышении уровня малонового диальдегида до 14,8 мкмоль/л и более, оксида азота до 122,3 мкмоль/л и более, фосфолипазы А2 до 402,5 нг/мл и более и эндотоксина до 3,1 ЕЭ/мл и более определяют высокий риск развития ишемической болезни сердца.

Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и может быть использовано для оценки степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больных острыми заболеваниями брюшной полости.
Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для прогноза эффективности фармакотерапии текущего депрессивного эпизода. Способ осуществляется следующим образом: определяют содержание кортизола, дегидроэпиандростерона (ДГЭА) и серотонина в сыворотке крови пациентов до начала терапии и при концентрации кортизола выше 650 нмоль/л, содержании ДГЭА ниже 7,8 нг/мл и концентрации серотонина выше 115 нг/мл прогнозируют высокую клиническую эффективность фармакотерапии.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования развития анемии у беременных. Способ характеризуется тем, что в забранной периферической крови определяют количество эритроцитов, содержащих не более 5 гранул формазана в одном эритроците по результатам цитохимического определения активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы.

Изобретение относится к области медицины, а именно к определению противосвертывающей активности крови. Сущность способа состоит в том, что проводят низкочастотную пьезотромбоэластографию и измеряют вязкостные характеристики крови: A0 - начальный показатель агрегатного состояния крови, A1 - показатель, характеризующий максимальное изменение агрегатного состояния исследуемой крови на этапе контактной активации, A3 - показатель, характеризующий агрегатное состояние крови на этапе начала процесса полимеризации, t3 - время достижения A3, A4 - показатель, характеризующий агрегатное состояние крови через 10 мин после достижения величины A3, показатель t4, всегда равного 10 минутам, а также интенсивности полимеризации сгустка (ИПС), рассчитывают коэффициент противосвертывающей активности крови (КПА) по формуле.

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития портальной гипертензионной гастропатии при циррозе печени. Выявляют факторы риска из анамнеза и клинико-лабораторных данных: пол пациента, отсутствие или длительность приема препарата «Пропранолол», определяют уровень гемоглобина, тромбиновое время, размер селезеночной вены, печеночную энцефалопатию, кровотечение из варикозно расширенных вен пищевода, устанавливают их градации и числовые значения. Определяют прогностические коэффициенты, на основании сравнения которых прогнозируют степень риска развития портальной гипертензионной гастропатии у больного циррозом печени. Способ позволяет с высокой точностью прогнозировать клиническое течение данного заболевания, что обеспечивается за счет учета комплекса значимых показателей, и соответственно своевременно проводить лечебно-профилактические мероприятия в группах высокого риска. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано в лечении больных ревматоидным артритом. Осуществляют одновременное комплексное применение лекарственных препаратов и лазерной терапии. В качестве базисного противовоспалительного препарата применяют метотрексат подкожно в дозе 15 мг 1 раз в неделю, а также фолиевую кислоту внутрь по 5 мг в неделю. Дополнительно назначают мовалис внутримышечно в дозе 15 мг 1 раз в сутки. Лазерную терапию назначают дифференцированно в зависимости от степени активности заболевания, степени выраженности эндотелиальной дисфункции, а именно фактора Виллебранда (ФВ), уровня показателей активности системы гемостаза, а именно уровня активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ), протромбинового времени (ПТВ), тромбинового времени (ТВ), антитромбина III (АТ III), протеина C. При I степени активности заболевания, уровне АЧТВ, равного и более 30,6±1,5 сек, ПТВ, равного и более 19,2±0,9 сек, ТВ, равного и более 15,1±0,7 сек, АТ III, равного и более 92,8±7,6%, протеина C, равного и более 0,92±0,02, ФВ, равного и менее 108,9±9,6%, - проводят 6-8 ежедневных процедур внутривенного лазерного облучения крови, в первый день в течение 15 минут длиной волны 0,365 мкм, на следующий день в течение 5 минут длиной волны 0,405 мкм, мощностью излучения на конце световода 1,5-2,0 мВ в непрерывном режиме излучения, процедуры чередуют через день. При II и III степени активности заболевания, уровне АЧТВ, равного и менее 22,2±5,5 сек, ПТВ, равного и менее 12,8±1,7 сек, ТВ, равного и менее 11,2±0,9 сек, АТ III, равного и менее 85,4±1,1%, протеина C, равного и менее 0,84±0,02, ФВ, равного и более 133,5±2,2%, осуществляют 10 ежедневных процедур внутривенного лазерного облучения крови в первый день в течение 15 минут длиной волны 0,365 мкм, на следующий день в течение 5 минут длиной волны 0,405 мкм, мощностью излучения на конце световода 1,5-2,0 мВ в непрерывном режиме излучения, процедуры чередуют через день. Способ позволяет уменьшить клинические проявления болезни, обеспечивает повышение эффективности медикаментозной терапии за счет воздействия на патологические процессы в системе гемостаза. 1 табл., 3 пр.

Группа изобретений относится к медицине, в частности к онкологии, и касается диагностики рака легкого у человека. Способ заключается в исследовании состава выдыхаемого воздуха. При выявлении в нем циклогексил изотиоцианата устанавливают диагноз рака. Второй вариант способа также связан с исследованием состава выдыхаемого воздуха. Для этого используют метод масс-спектрометрии с предварительным газохроматографическим разделением. При выявлении вещества, хроматографический пик которого характеризует хроматографическую подвижность, соответствующую циклогексил изотиоцианату, также устанавливают рак легкого. Предложенные способы обеспечивают достоверную диагностику вне зависимости от локализации, степени и формы рака, что дает возможность использования неинвазивного способа диагностики рака легкого в режиме скринингового обследования. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 9 пр., 1 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к детской кардиологии, и может быть использовано для диагностики критических врожденных пороков сердца у новорожденных с использованием уровня показателя NT-pro-BNP. Для этого до проведения экспертной ЭХО-КС ребенку определяют показатель уровня N-терминального фрагмента предшественника мозгового натрийуретического пептида в сыворотке, или плазме крови, и при значении показателя свыше 5695 пг/мл устанавливают высокий риск критического ВПС. Изобретение обеспечивает возможность использования NT-pro-BNP в неонатальном скрининге на критические ВПС периода новорожденности. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики асептической нестабильности эндопротеза крупных суставов. Сущность способа состоит в том, что в отдаленные сроки после первичного эндопротезирования определяют число нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ) и, если количество НВЛ будет варьироваться с четырех до семи на 100 нейтрофилов, диагностируют асептическую нестабильность эндопротеза. Использование заявленного способа позволяет эффективно диагностировать асептическую нестабильность эндопротеза крупных суставов. 1 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии, и может быть использовано для лечения пациента с гипертрофической кардиомиопатией. Для этого проводят выделение ДНК, определение полиморфизма гена AGTR1, кодирующего рецептор к ангиотензину II первого типа. Устанавливают полиморфизм гена АСЕ, кодирующего ангиотензин-превращающий фермент, и в случае выявления комбинаций генотипов «AC(AGTR1)/ID(ACE)» или «AA(AGTR1)/DD(ACE)» пациенту в составе комплексной терапии назначаются блокаторы рецепторов к ангиотензину II, в частности лозартан в дозе 50 мг 2 раза в сутки. Изобретение позволяет разработать лечение пациента блокаторами рецепторов к ангиотензину II с учетом его генетических особенностей для повышения эффективности терапии как с необструктивной, так и обструктивной формами гипертрофической кардиомиопатии. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно профилактической медицине, и может быть использовано в диагностике экологически обусловленной хронической патологии верхних дыхательных путей. Для этого выбирают территорию с экологически неблагополучной обстановкой, выявляют сенситивную группу из подростков 14-17 лет, у которых в сыворотке крови определяют относительное содержание аутоантител класса IgG к антигенам основных органов и тканей: LuM-02, KiM-05, GaM-02, ItM-07, HMMP, CoM-02, β-адренорецепторы, TrM-03, ANCA, тиреоглобулин, инсулин и к антигенам, характеризующим состояние нервной: S100, GFAP, и иммунной систем: нативная ДНК, бета2-гликопротеин I и Fc-фрагмент IgG. Рассчитывают среднюю иммунореактивность этих аутоантител, вычисляют отклонение относительного содержания аутоантител к бета2-гликопротеину I от показателя средней иммунореактивности. Определяют уровень альфа-1 антитрипсина в сыворотке крови, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и рассчитывают диагностический коэффициент по формуле: Y=0,521+0,012×A+0,013×B-0,017×C+0,003×D; где Y - диагностический коэффициент, A - средняя иммунореактивность, в %, B - отклонение относительного содержания аутоантител к бета2-гликопротеину I от показателя средней иммунореактивности, в %, D - уровень альфа-1 антитрипсина в сыворотке крови, в мг/дл, C - скорость оседания эритроцитов, в мм/ч. При значении Y больше (-0,6) и меньше 0,23 делают заключение о наличии хронического заболевания верхних дыхательных путей без техногенного воздействия. При значениях Y больше 0,24 и меньше 0,71 делают заключение о наличии хронического заболевания верхних дыхательных путей, где воздействие техногенного фактора не установлено. При значениях Y больше 0,72 и меньше 1,4 делают заключение о том, что хроническое заболевание верхних дыхательных путей сформировано на фоне воздействия техногенного фактора. Использование данного способа позволяет выявить хроническую патологию верхних дыхательных путей путем оценки изменения лабораторных показателей. 2 табл, 2 ил., 4пр.

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования развития поздней отслойки сетчатки у детей с рубцовой ретинопатией недоношенных. В сыворотке крови больного определяют одновременно содержание трансформирующего фактора роста β1 (TGF β1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). При выявлении уровня TGF β1 менее 10000 пкг/мл и VEGF больше 500 пг/мл прогнозируют риск развития отслойки сетчатки. Способ является простым в исполнении и обеспечивает возможность выбора адекватной лечебной тактики. 1 ил., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкоурологии, и может быть использовано при консервативном лечении больных злокачественной опухолью предстательной железы на разных ее стадиях. Способ лечения рака предстательной железы с использованием пролонгированной депо формы октреотида на фоне хирургической или медикаментозной кастрации включает а) определение простатспецифического антигена у больных до лечения; б) определение содержания уровня хромогранина А в плазме крови больных до лечения; в) отбор больных с повышенным содержанием уровня хромогранина А в крови более 3 нмоль/л; г) проведение терапии отобранным больным пролонгированной депо формой октреотида в сочетании с дексаметазоном; д) осуществление ежемесячного контроля за изменением простатспецифического антигена и контроль за его снижением у больных путем определения его в период проведения терапии согласно стадии (г), при этом эффективность проведения терапии согласно стадии (г) определяют по «ответу» на лечение, при котором достигается максимальное снижение уровня простатспецифического антигена. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения больных раком предстательной железы на разных его стадиях. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для неинвазивной лазерной нанодиагностики онкологических заболеваний. Для этого проводят исследование биологической жидкости пациента методом лазерной корреляционной спектроскопии, определяют диагностический показатель и диагностируют заболевание по значению диагностического показателя. При этом в качестве биологической жидкости используют мочу пациента, а диагностический показатель пациента вычисляют как среднеквадратичное отклонение от эталонной частотно-временной флуктуации интенсивности светорассеяния в полосе частот 1-106 Гц. Изобретение обеспечивает раннюю неинвазивную диагностику онкологических заболеваний, особенно онкоурологических. 15 ил.
Наверх