Способ определения инсулинорезистентности



Способ определения инсулинорезистентности
Способ определения инсулинорезистентности

 


Владельцы патента RU 2541102:

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и предназначено для определения инсулинорезистентности у пациентов с нормальной концентрацией глюкозы крови. Сущность способа: у пациента получают сыворотку крови и делят ее на две части: одна пробирка предназначается для определения концентрации уровня глюкозы; другая - для постановки метода клиновидной дегидратации на подложке с наклоном. Сыворотку помещают в количестве 20-30 мкл в форме капли на предметное стекло, расположенное под углом 10-15°. Дегидратируют сыворотку в наклонном положении при температуре 22-25°C, относительной влажности 55-60% в течение 18-24 часов. Проводят микроскопическое исследование полученной фации сыворотки крови. При выявлении пигментированных скоплений связанного с глобулинами инсулина в форме незамкнутого кольца в промежуточной зоне верхней половины фации сыворотки крови определяют инсулинорезистентность. Предлагаемый способ прост, точен, не является дорогостоящим. Использование данного способа в медицинских учреждениях любой мощности, а также в качестве скрининга при профилактических осмотрах населения позволит выявлять пациентов с инсулинорезистентностью, т.е. на ранней стадии метаболического синдрома. 2 пр., 2 ил.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и предназначено для определения инсулинорезистентности у пациентов с нормальной концентрацией глюкозы крови.

Под инсулинорезистентностью понимают нарушение биологического действия инсулина как на рецепторном, так и на пострецепторном уровне, что приводит к существенным нарушениям всех обменных процессов и сопровождается на начальных этапах хронической гиперинсулинемией.

В физиологической регуляции синтеза инсулина доминирующую роль играет концентрация глюкозы крови. Появлению стойкого повышения содержания глюкозы крови предшествует повышение уровня секреции инсулина. Инсулинорезистентность достаточно распространена в общей популяции и приводит к развитию гиперинсулинемии. В свою очередь, хроническая гиперинсулинемия принимает непосредственное участие в возникновении дислипидемии, артериальной гипертензии, атеросклероза и некоторых других заболеваний. На поздних стадиях развиваются нарушения толерантности к глюкозе или сахарный диабет 2 типа. Учитывая, что в настоящее время роль инсулинорезистентности как ключевого звена развития метаболического сердечно-сосудистого синдрома неоспорима, имеется необходимость в разработке способов ее диагностики при проведении скрининговых исследований.

Известны несколько методов определения инсулинорезистентности, которые можно разделить на две группы:

- непрямые методы, которые основаны на оценке эффектов эндогенного инсулина на введение глюкозы в организм: пероральный глюкозотолерантный тест, внутривенный глюкозотолерантный тест, постоянная инфузия глюкозы с модельной оценкой (Теппермен Д. и др., Физиология обмена веществ и эндокринной системы, М., Мир, 1989, с.432);

- прямые методы, которые основаны на инфузии инсулина в организм пациента и оценке его эффекта на метаболизм глюкозы: инсулиновый тест толерантности; инсулиновый супрессивный тест; эугликемический гиперинсулинемический клемп-тест (Теппермен Д. и др., Физиология обмена веществ и эндокринной системы, М., Мир, 1989, с.599).

Непрямые методы считаются наиболее простыми и экономически выгодными. Однако эти методы являются неточными, так как диагностика инсулинорезистентности осуществляется опосредованно, т.е. по динамике показателей концентрации глюкозы крови в течение определенного отрезка времени после «сахарной» нагрузки.

Прямые методы определения инсулинорезистентности включают внутривенное введение экзогенного инсулина короткого действия с последующим определением уровня глюкозы крови в течение определенного времени. Эти методы помимо трудоемкости их исполнения имеют целый ряд недостатков, ограничивающих их применение в практическом здравоохранении за счет высокого риска развития тяжелых осложнений (гипогликемическая кома), особенно для пациентов детского и пожилого возраста.

Наиболее близким к заявляемому способу является способ определения индекса инсулинорезистентности HOMA-IR, который включает определение уровня инсулина и глюкозы сыворотки крови натощак, затем производят расчет индекса HOMA-IR по математической формуле, включающей точно выверенный показатель (22,5) взаимодействия инсулина с глюкозой на основе эугликемического гиперинсулинемического клемп-теста.

Индекс HOMA-IR = глюкоза × инсулин/22,5.

В норме значение HOMA-IR для взрослых составляет менее 2,7; для детей - в интервале 3,0-4,0.

Однако данный способ имеет недостаток, который заключается в обязательном определении уровня инсулина в сыворотке крови, что не позволяет использовать его в качестве скрининга, так как данное исследование проводится только в крупных лечебно-диагностических центрах. Кроме того, данное исследование - определение гормона инсулина крови является дорогостоящим. Вместе с тем, определение уровня глюкозы крови является общедоступным, входит в перечень обязательных исследований при профилактических осмотрах населения.

Задачей настоящего изобретения являлось устранение указанных недостатков и получение объективных признаков гиперинсулинемии, которые в сочетании с определением уровня глюкозы позволяют выявлять пациентов с инсулинорезистентностью, в том числе при проведении скрининговых исследований.

Для этого в способе определения инсулинорезистентности, включающем исследование сыворотки крови натощак, предложено проводить два вида исследований: 1) определение уровня глюкозы в сыворотке крови; 2) оценку системной организации сыворотки крови методом клиновидной дегидратации. При этом у пациента получают сыворотку крови и делят ее на две части: одна пробирка предназначается для определения концентрации уровня глюкозы; другая - для постановки метода клиновидной дегидратации на подложке с наклоном. После проведения процедуры клиновидной дегидратации проводят микроскопическое исследование полученной фации сыворотки крови пациента и в промежуточной зоне верхней половины фации определяют наличие либо отсутствие пигментированных скоплений связанного с глобулинами инсулина в форме незамкнутых колец (ПССГИ ФНК). При нормальном уровне глюкозы крови и наличии ПССГИ ФНК в промежуточной зоне верхней половины фации, определяют инсулинорезистентность. Такая картина свидетельствует о том, что для поддержания нормальной концентрации глюкозы крови уже требуется повышенная концентрация инсулина.

В предварительных исследованиях 26 больных с метаболическим синдромом, у которых в условиях стационара определялась повышенная концентрация инсулина в сыворотке крови, был разработан способ, позволяющий наблюдать особенности морфологической картины фации сыворотки крови при гиперинсулинемии. Исходя из известных положений, что инсулин при метаболическом синдроме действует в комплексе с глобулинами (Березов Т.Т. и др., Биологическая химия. 1998, изд. «Медицина», с.268-269), а также зная, что распределение глобулинов в фации сыворотки крови занимает промежуточную зону (Обухова Л.М., Конторщикова К.Н. Выявление локализации белков в структурном макропортрете сыворотки крови. Вестник Нижегородского гос. университета им. Н.И. Лобачевского, 2008, №3, стр.116-119), мы осуществили дегидратацию капли на подложке с наклоном под углом 10-15°. Данный подход позволил получить в верхней части фации сыворотки крови более четкое проявление аутофереза белков сыворотки крови. У всех 26 больных с гиперинсулинемией в промежуточной зоне верхней части фации сыворотки крови можно было наблюдать ПССГИ ФНК. При нормоинсулинемии (25 человек контрольной группы) такой маркер в фациях сыворотки крови ни в одном случае не определялся.

На Фиг.1 изображен фрагмент фации сыворотки крови, в промежуточной зоне (1) которой видны пигментированные скопления связанного с глобулинами инсулина в форме незамкнутых колец, ПССГИ ФНК (2) - маркер гиперинсулинемии.

На Фиг.2 изображен фрагмент фации сыворотки крови, на которой нет ПССГИ ФНК в промежуточной зоне (1), т.е. концентрация инсулина в сыворотке крови находится в пределах нормы.

Способ осуществляется следующим образом: у пациента строго натощак производят забор крови из вены или мякоти пальца, получают сыворотку крови путем отстаивания в пробирке или после центрифугирования при 3000 об/мин в течение 15 минут и разливают ее в две пробирки: одна пробирка предназначается для определения концентрации уровня глюкозы; другая - для постановки метода клиновидной дегидратации. Клиновидную дегидратацию осуществляют на предметном стекле, один конец которой опирается на подставку для создания угла в 10-15°. На верхнюю треть предметного стекла наносят сыворотку крови в количестве 20-30 мкл в форме капли (при этом видно, что содержимое капли смещается книзу или она становится стекающей, но на длину не более 1 см), оставляют ее в наклонном положении до полного высушивания в течение 18-24 часов при температуре 22-25°C и относительной влажности 55-60%. По истечении указанного срока проводят микроскопическое исследование полученной фации сыворотки крови пациента и в ее верхней половине определяют - есть ли в промежуточной зоне пигментированные скопления связанного с глобулинами инсулина в форме незамкнутых колец (ПССГИ ФНК). При нормальном уровне глюкозы крови и наличии ПССГИ ФНК в промежуточной зоне фации определяют инсулинорезистентность. Такая картина свидетельствует о том, что для поддержания нормальной концентрации глюкозы крови клетки поджелудочной железы обследуемого пациента должны выработать значительно большее количество инсулина, чем в норме.

Возможность практического осуществления способа подтверждается примерами конкретного исполнения.

Пример 1. Пациент П., 15 лет. Избыточная масса тела (ИМТ). Практически здоров. Концентрация глюкозы в сыворотке крови составила 4,7 г/л (норма). При микроскопии фации сыворотки крови предлагаемым способом обнаружены пигментированные скопления связанного с глобулинами инсулина в форме незамкнутых колец (ПССГИ ФНК) (фиг.1).

Заключение: обнаружены признаки инсулинорезистентности.

При полном клиническом обследовании в условиях стационара индекс HOMA-IR составил 6,6.

Заключение: ИМТ. Инсулинорезистентность.

Пример 2. Пациент Л., 16 лет. Избыточная масса тела (ИМТ). Практически здоров. Концентрация глюкозы в сыворотке крови составила 4,9 г/л (норма). При микроскопии фации сыворотки крови предлагаемым способом ПССГИ ФНК в промежуточной зоне фации не обнаружены (фиг.2).

Заключение: признаки инсулинорезистентности не обнаружены. При дальнейшем обследовании в условиях стационара индекс HOMA-IR составил 2,4, то есть находился в пределах нормальных значений.

Заключение: ИМТ.

В настоящее время метаболический синдром во многих цивилизованных странах мира приобретает характер неинфекционной эпидемии. Недиагностированная инсулинорезистентость приводит к развитию метаболического синдрома, далее - к сахарному диабету 2 типа, неалкогольной жировой болезни печени с исходом в стеатогепатит и цирроз печени. Нарушения метаболизма вызывают ускоренное развитие атеросклероза с явлениями ишемической болезни сердца, артериальную гипертензию, нарушение мозгового кровообращения, инфаркты и инсульты, то есть тогда, когда лечение патологического состояния малоэффективно.

Предлагаемый способ прост, точен, не является дорогостоящим. Использование данного способа в медицинских учреждениях любой мощности, а также в качестве скрининга при профилактических осмотрах населения, позволит выявлять пациентов с инсулинорезистентностью, т.е. на ранней стадии метаболического синдрома, когда проведение своевременных профилактических мероприятий в большинстве случаев способствует полному выздоровлению.

Способ определения инсулинорезистентности у пациентов с нормальной концентрацией глюкозы крови, включающий определение уровня глюкозы натощак, отличающийся тем, что у пациента получают сыворотку крови и помещают ее в количестве 20-30 мкл в форме капли на предметное стекло, расположенное под углом 10-15°, дегидратируют ее в наклонном положении при температуре 22-25°C, относительной влажности 55-60% в течение 18-24 часов, проводят микроскопическое исследование полученной фации сыворотки крови, и при выявлении пигментированных скоплений связанного с глобулинами инсулина в форме незамкнутых колец в промежуточной зоне верхней половины фации сыворотки крови определяют инсулинорезистентность.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения степени тяжести симфизиопатии у беременных во II и III триместрах. Сущность способа состоит в том, что у беременных во II и III триместрах определяют диастаз лонного сочленения с помощью УЗИ, определяют в сыворотке крови магний общий в ммоль/л, суточную экскрецию кальция с мочой в ммоль/сутки, а также выявляют жалобы на боли в области лонного сочленения и пояснично-крестцовом отделе позвоночника, парестезии, судорожные подергивания и сведения икроножных мышц, болезненности при пальпации лонного и/или крестцово-подвздошного сочленения и при определенных значениях указанных параметров определяют легкую, среднюю и тяжелую степени симфизиопатии.
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способу отбора биологического материала для диагностики лептоспироза у диких животных. Способ включает сбор мочи после естественного мочеиспускания животного в стерильную емкость.
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для раннего прогнозирования риска прогрессирования периферических витреохориоретинальных дистрофий (ПВХРД) на парном глазу после операций по поводу регматогенной отслойки сетчатки (РОС).
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для раннего прогнозирования риска прогрессирования периферических витреохориоретинальных дистрофий (ПВХРД) на парном глазу после операций по поводу регматогенной отслойки сетчатки (РОС).

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к молекулярной биологии, микробиологии и хирургии, и может быть использовано в диагностических целях для идентификации синегнойной палочки Pseudomonas aeruginosa в клиническом биоматериале.

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования неразвивающейся беременности.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики хронического простатита с помощью выявления дисфункции регионального микрососудистого эндотелия.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к птицеводству. Целью изобретения является разработка способа прогнозирования мясной продуктивности цыплят-бройлеров на основе определения соотношения между активностью белкового и липидного обмена веществ, определяющего скорость роста птицы и уровень мясной продуктивности.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Группа изобретений относится к области лабораторной диагностики. Устройство для автоматического обнаружения аналита в пробе телесной жидкости содержит матрицу адресуемых блоков анализа для проведения химической реакции, которая дает различимый сигнал, несущий информацию о наличии или отсутствии аналита; матрицу адресуемых блоков реагентов, в которой обращаются к индивидуальному адресуемому блоку реагента, соответствующему индивидуальному адресуемому блоку анализа, и в которой индивидуальный блок реагента выполнен с возможностью калибровки по опорному сигналу соответствующего индивидуального блока анализа до сборки матриц на устройстве, причем индивидуальный блок анализа содержит наконечник для количественного анализа, имеющий внутреннюю поверхность, содержащую реагенты, фиксированные на поверхности, для обнаружения аналита.

Изобретение относится к медицине, точнее к хирургии, и может найти применение при трансплантации трупной печени. Изобретение представляет способ оценки донорской печени, включающий выявление в ней наличия и выраженности жировой дистрофии, фиброза, воспалительных явлений и ишемических повреждений, отличающийся тем, что дополнительно осуществляют морфометрию печени, для чего из края нативной печени до ее забора из тела донора и после завершения периода консервации печени и запуска кровотока в ней у реципиента берут биоптаты печени, обрабатывают их CD 31, измеряют удельные площади синусоидов в донорской печени после запуска кровотока по сравнению с удельной площадью синусоидов в нативной донорской печени не менее чем в 2 раза судят о нарушении внутрипеченочной микроциркуляции у реципиента. Изобретение обеспечивает оценку трупной донорской печени у реципиента. 2 пр., 1 ил.

Изобретение относится к медицине и описывает композицию ферментных чернил, содержащую фермент, способный избирательно распознавать глюкозу в пробе крови, медиатор и первый и второй пирогенный диоксид кремния, в которой первый пирогенный диоксид кремния имеет удельную поверхность по БЭТ в диапазоне от приблизительно 130 до 170 м2/г и содержание углерода от приблизительно 0,8 до приблизительно 1,23% вес., а второй пирогенный диоксид кремния имеет удельную поверхность по БЭТ в диапазоне от приблизительно 270 до 330 м2/г и содержание углерода от приблизительно 1,4 до приблизительно 2,6% вес. Ферментные чернила настоящего изобретения делают возможным использование более совершенного способа производства партий тест-полосок с единым кодом калибровки и высокой эффективностью. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 6 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано получения функционально неактивных макрофагов из перитонеального экссудата мыши. Для этого используют функционально-активные воспалительные макрофаги, полученные при введении в брюшную полость животного воспалительного агента, в качестве которого используют крахмал или протеозо-пептон. Причем суспензию крахмала предварительно доводят до кипения и немедленно замораживают. Перед применением размораживают, гомогенизируют и ресуспендируют для внутрибрюшинного введения. Полученные перитонеальные макрофаги подвергают культивированию в течение 96 часов. Использование данного способа позволяет получить в условиях «in vitro» функционально неактивных или покоящихся (resting) макрофагов, близких по своим свойствам к резидентным, и способ может быть использован в скрининговых работах для выявления иммуномодулирующих свойств у различных по происхождению агентов. 1 табл.
Изобретение относится к области медицины, к клинической лабораторной диагностике и может найти применение в клинико-диагностических лабораториях инфекционных стационаров. Для эффективной терапии и предотвращения развития неврологического дефицита необходима своевременная и как можно более ранняя диагностика заболевания с верификацией его природы. Ранняя дифференциальная диагностика вирусной или бактериальной природы заболевания способствует назначению адекватной стартовой этиотропной терапии, приводит к снижению генерализации процесса, эрадикации возбудителя, санации цереброспинальной жидкости и улучшению исхода болезни. Предложен принципиально новый способ дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных менингитов, обеспечивающий точность и экспрессность за счет определения суммарной концентрации гаптоглобина в цереброспинальной жидкости. Результат достигается тем, что в ликворе, полученном при диагностической люмбальной пункции в остром периоде заболевания, дополнительно в течение 1 часа определяют суммарную концентрацию гаптоглобина методом количественной иммунотурбидиметрии и при концентрации, равной или менее 0,7 мг/дл, диагностируют вирусный менингит, при концентрации свыше 0,7 мг/дл - бактериальный менингит. Данный способ обеспечивает быстрое и точное определение вирусной или бактериальной природы менингита на ранней стадии заболевания и назначение адекватной этиотропной стартовой терапии и может найти широкое применение в клинико-диагностических лабораториях инфекционных стационаров. 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и может быть использовано для прогнозирования течения острого и хронического типов лимфобластного лейкоза. Для этого выделяют лимфоциты крови, определяют поверхностный потенциал и модуль упругости не менее 15 клеток из каждой пробы на атомно-силовом микроскопе и оценивают индекс торможения миграции лимфоцитов с митогеном в сравнении со спонтанной (без митогена) миграцией. При повышении значения поверхностного потенциала клетки от -30,7±0,7 до -28,8±2,1 mV, снижении модуля упругости от 1,9±0,2 до 2,8±0,1 µПа и значении индекса торможения миграции лимфоцитов в интервале от 15 до 95% прогнозируют неблагоприятный исход течения острого типа лимфобластного лейкоза. При повышении значения поверхностного потенциала клетки от -9,5±0,7 до -6,7±0,2 mV, повышении модуля упругости от 7,8±0,5 до 9,6±0,3 µПа и значении индекса торможения миграции лимфоцитов в интервале 38-65% прогнозируют неблагоприятный исход течения хронического типа лимфобластного лейкоза. Использование данного способа позволяет прогнозировать течение заболевания острого и хронического типов лимфобластного лейкоза, развитие их рецидивов во время стадии ремиссии, а также скорректировать длительную терапию у больных хроническим лимфобластным лейкозом. 2 пр., 1 табл.

Изобретение относится к способу идентификации живых и мертвых организмов мезозоопланктона в морских пробах, который включает отбор пробы, крашение организмов соответствующими красителями, визуальную оценку интенсивности окраски особей под микроскопом, которую выполняют одновременно с микрофотосъемкой организмов, используя настройки фотокамеры в ручном режиме, сохраняя эти настройки неизменными на протяжении фотосъемки по крайней мере одной пробы, после чего в полученных изображениях, применяя редактор растровой графики, например программный пакет Adobe Photoshop, измеряют средние для каждой особи цветовые и яркостные характеристики и относят особи к классу живых или мертвых, осуществляя дискриминантный анализ измеренных цифровых величин.

Изобретение относится к области измерительной техники и может быть использовано для анализа конкретного компонента, содержащегося в образце, в частности уровня глюкозы в крови. Заявлено анализирующее устройство или способ анализа, посредством которых могут быть получены достоверные результаты анализа даже в условиях, когда окружающая температура изменяется, при этом избавляя пользователя от неудобств. Анализирующее устройство (1) снабжено средством (13) определения, которое определяет, находится ли окружающая температура, измеренная с помощью средства (6) измерения температуры, в пределах предварительно определенного температурного диапазона. Средство (13) определения выполнено таким образом, чтобы определить, находится ли окружающая температура в пределах предварительно определенного температурного диапазона, даже в условиях, когда информация, относящаяся к намеченному веществу в образце, не может быть получена из анализирующего устройства. Технический результат - повышение точности и достоверности данных анализа. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 14 ил.
Изобретение относится к измерительной технике и представляет собой способ определения нано-микропримесей, включающий использование эмульсии из капель жидкого кристалла, диспергированных в воде, способной изменять конфигурацию капель жидкого кристалла при наличии в составе эмульсии посторонних примесей, измерение изменения интенсивности света, рассеянного эмульсией, по которому судят о наличии и концентрации искомых примесей, отличающийся тем что в качестве жидкого кристалла выбирают соединения, способные к транс-цис-переходу под действием актиничного света, и перед измерением изменения интенсивности света дополнительно освещают эмульсию актиничным светом, обеспечивая тем самым изменение конфигурации в каплях жидкого кристалла за счет транс-цис-перехода в молекулах жидкого кристалла. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности способа определения нано-микропримесей.
Изобретение относится к области медицины, а именно к медицине труда и описывает способ оценки воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц. Способ включает посев мазка со слизистой оболочки носа на мясопептонный агар, инкубацию при 37°С в течение 24 часов, определение общего количества микроорганизмов путем подсчета выросших колоний, определение общей микробной обсемененности исследуемого материала, выраженной в КОЕ/мл. При значении общей микробной обсемененности более 10*3 КОЕ/мл воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как вредное, 10*3 КОЕ/мл и менее - как допустимое. Изобретение может быть использовано для диагностики воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц, не работающих с инфицированным материалом, зараженным материалом или материалом, подозрительным на заражение микроорганизмами 3-4 группы патогенности, и грибами. 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии у беременной при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови беременных измеряют титр антител к цитомегаловирусу, содержание перекисей жирных кислот и снижение активности глутатионредуктазы, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600 определяют нарастание перекисей жирных кислот и снижение активности глутатионредуктазы, после чего вычисляют значение дискриминантной функции по формуле DФ=(+0.143×ПОЛ)+(-2.825×глутатионредуктаза), и при DФ более (+2.60) создается угроза формирования гемической анемии. Способ позволяет оценить угрозу формирования гемической анемии вследствие повреждения клеточных мембран и накопления в них перекисей жирных кислот. 1 табл., 2 ил.
Наверх