Способ определения стабилизации с3-конвертазы классического пути активации комплемента человека


 


Владельцы патента RU 2549468:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт нормальной физиологии имени П.К. Анохина" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИНФ им. П.К. Анохина" РАМН") (RU)

Изобретение относится к лабораторной диагностике, а именно к клинической иммунологии. Cпособ определения стабилизации C3-конвертазы классического пути активации комплемента человека осуществляется путем проведения реакции лизиса эритроцитов барана 0,8% сывороткой крови человека в течение 10 мин. Реакцию останавливают добавлением буфера, содержащего 10 мМ этилендиаминтетрауксусную кислоту, определяют степень лизиса эритроцитов в контрольной пробе. Опытную пробу дополнительно инкубируют в течение 30 мин при 37°C, определяют степень лизиса, рассчитывают активность C3-конвертазы как разность между опытной и контрольной пробами, при разнице более 10% оценивают как аутоиммунное патологическое состояние. Использование простого и быстрого в осуществлении способа позволяет выявлять доклинические состояния иммунодефицита, может служить специфическим маркером для иммуномодулирующей терапии, проводить углубленное исследование патогенеза аутоиммунных заболеваний. 3 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для определения стабилизации C3-конвертазы классического пути активации комплемента человека.

Проблема оценки состояния иммунной системы организма человека остается в настоящее время актуальной в связи с тем, что многие соматические заболевания характеризуются иммунодефицитом, и соответствующая иммунокорригирующая терапия позволит более рационально и эффективно проводить терапию этих состояний.

Система комплемента является частью иммунной системы и состоит из более чем 30 компонентов, которые действуют каскадным механизмом. Эта система играет ключевую роль как в клиренсе ИК, так и в иммунном ответе на инфекционные агенты, чужеродные антигены, опухолевые и вирус-инфицированные клетки [Rittirsch D., Redl Н., and Huber-Lang М. Role of Complement in Multiorgan Failure // Clinical and Developmental Immunology. - 2012; 2012:962927. doi: 10.1155/2012/962927].

Известны три пути активации системы комплемента: классический, альтернативный и лектиновый, отличающиеся способом образования С3-конвертаз. Субстратом C3-конвертаз всех трех путей активации системы комплемента является компонент C3, при расщеплении которого образуются C3a и C3b. Присоединение дополнительных молекул C3b к C3-конвертазам приводит к образованию C5-конвертаз, которые запускают реакцию формирования мембрано-атакующего комплекса (МАК).

Классический путь является Ca2+/Mg2+-зависимым каскадом, который в норме запускается иммунными комплексами, активирующими C1, первый компонент комплемента, содержащий одну молекулу C1q и по две молекулы C1r и C1s. Активация C1 в результате связывания C1q-субкомпонента с Fc-фрагментом иммуноглобулинов иммунного комплекса и образования активных протеиназ C1r и C1s инициирует ферментативный каскад комплемента, приводящий к образованию C3-конвертазы классического пути (C4b, C2a) [Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология: Пер. с англ. М.: Мир, 2000. - 592 с].

Для исследования системы комплемента определяют его гемолитическую активность. Суть метода заключается в следующем: 1) разные разведения исследуемой сыворотки добавляют к эритроцитам барана, сенсибилизированным антителами кролика (EA); 2) степень гемолиза оценивают фотометрически по выходу гемоглобина в раствор. Активность комплемента выражают в гемолитических единицах. За одну гемолитическую единицу комплемента (CH50) принимают такое его количество, которое вызывает гемолиз 50% стандартной суспензии EA. В сыворотке здоровых доноров обычно содержится 20-40 гемолитических единиц комплемента [Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник/ Меньшиков В.В., Делеторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др.: Под ред. В.В. Меньшикова. - М.: Медицина, 1987. - 368 с].

Однако существенным недостатком этого метода является низкая информативность и, как следствие, отсутствие интереса со стороны практического здравоохранения в лабораторной диагностике.

Известен способ определения активности C3-конвертазы (C4b2a) классического пути активации системы комплемента, основанный на гемолизе сенсибилизированных эритроцитов барана (EA) с использованием 2 разных сывороток в качестве источников компонентов комплемента: C4b2a генерируется на EA с использованием компонентов C1, C4 и C2 из первой сыворотки с последующей второй реакцией, приводящей к гемолизу с участием компонентов C3-C9 из второй сыворотки в присутствии этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТУК) [Miller Е.С., Chase N.M., Densen P., et al. Autoantibody stabilization of the classical pathway C3 convertase leading to C3 deficiency and Neisserial sepsis: C4 nephritic factor revisited // Clinical Immunology. - 2012. - V.145. - P.241-250].

Недостатком этого способа является длительность, трудоемкость, недостаточная точность в связи с тем, что используются две разные сыворотки, гетерологичные антитела для сенсибилизации эритроцитов барана.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение чувствительности метода за счет исследования стабилизации C3-конвертазы классического пути активации комплемента человека, сокращение длительности процедуры исследования, упрощение, удешевление.

Указанный результат достигается тем, что лизис эритроцитов барана проводят 0,8% сывороткой крови человека с использованием эндогенных гетерофильных антител при температуре 37,0±0,5°C в течение 10 мин, добавляют в пробы буфер, содержащий 10 мМ ЭДТУК, в контрольные пробы добавляют 0,75 М NaCl, центрифугируют в течение 10 мин при 200 об/мин и определяют степень лизиса спектрофотометрически при длине волны 405 нм в супернатанте. Опытные пробы после добавления буфера, содержащего этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТУК), инкубируют дополнительно в течение 30 мин при 37°C. После инкубации степень лизиса определяют как в контрольных пробах. При разности степени лизиса между опытной и контрольной пробами более 10% оценивают как стабилизацию C3-конвертазы классического пути комплемента в сыворотке крови обследуемого.

Способ осуществляют следующим образом. Проводят забор крови, приготовление сыворотки, проведение гемолитического теста и расчет степени ингибирования лизиса. Гемолитический тест проводят с использованием стандартизованных эритроцитов барана (1,5×108 кл/мл) (ЭБ) в вероналовом солевом буфере (VBS), содержащем 0,5 мМ MgCl2 и 0,15М CaCl2 (VBS2+). Время проведения экспресс-способа 40 мин (в прототипе - 80 мин).

Пример 1. Определение оптимальной концентрации буфера, содержащего 10 мМ ЭДТУК для полного ингибирования активации системы комплемента.

К 200 мкл суспензии эритроцитов барана (ЭБ) (1,5×108 кл/мл) добавляли 40 мкл разведенной 1:9 пулированной сыворотки крови человека от 10 здоровых доноров и 20-100 мкл VBS-E (интервал концентрации 0,4-2,0 ммоль/л ЭДТУК в системе), доводили объем до 500 мкл буфером VBS2+и инкубировали 30 мин при 37°C. Одновременно ставили контроль на спонтанный (200 мкл ЭБ+200 мкл VBS2+) и полный лизис ЭБ (200 мкл ЭБ+200 мкл H2O). После инкубации останавливали реакцию гемолиза добавлением 2,5 мл охлажденного 0,15 М раствора NaCl, центрифугировали 10 мин при 2000 об/мин и определяли степень гемолиза по величине A405 супернатанта. Степень лизиса эритроцитов (У) определяли по формуле:

У(%)=[(X-R)/(H-R)]×100,

где: H, R и X - величины оптической плотности A405 супернатанта в гемолитических системах при полном лизисе, в контроле спонтанного лизиса ЭБ и в опытной пробе, соответственно.

Степень ингибирования (СИ) определяли как разность показателей лизиса в контрольной пробе и в опытных пробах, содержащих возрастающие концентрации VBS-ЭДТУК, по формуле:

СИ(%)=(100-У),

где: 100 - степень лизиса в контрольной пробе, У - степень лизиса в опытных пробах. Полученные данные приведены в таблице 1.

Как видно из данных, представленных в таблице 1, лизис эритроцитов барана ингибируется дозозависимо при повышении концентрации ЭДТУК в гемолитической системе. Таким образом, при концентрации ЭДТУК в системе выше 1,4 мМоль/л наблюдается полное ингибирование гемолитической активности системы комплемента за счет хелатирования ионов кальция и магния.

Пример 2. Определение активности C3-конвертазы.

Определение активности C3-конвертазы классического пути основано на том, что после 10 мин инкубации 200 мкл (1,5×108 кл/мл) эритроцитов барана с 4 мкл сыворотки крови человека в конечном объеме 500 мкл, доведенном буфером VBS2+, реакцию активации комплемента останавливают добавлением 100 мкл буфера, содержащего 10 мМ ЭДТУК. В контрольную пробу сразу добавляют 2,4 мл охлажденного раствора 0,15 М NaCl, центрифугируют и определяют степень лизиса [У(контроль),%], как описано выше. Опытную пробу повторно инкубируют в течение 30 мин при 37°C. После инкубации определяют степень лизиса [У(опыт),%]. Активность C3-конвертазы определяют как разность между степенью лизиса в опытной и контрольной пробах. Проведены исследования активности C3-конвертазы в сыворотке крови 20 доноров. Полученные результаты представлены в таблице 2.

Как видно из данных, представленных в таблице 2, в 5 сыворотках активность C3-конвертазы была больше 10% и в среднем составила (13,8±2,0)%. В оставшихся 15 пробах среднее значение активности С3-конвертазы составило в среднем (3,8±1,9)%. Известно, что период полураспада С3-конвертазы составляет несколько минут, и при добавлении буфера, содержащего ЭДТУК, при связывании ионов CA2+ и Mg2+ полностью ингибируется активация комплемента по всем трем путям активации. Активность C3-конвертазы на уровне (3,8±1,9)% согласуется с литературными данными. Повышенная почти в 4 раза активность C3-конвертазы в 5 сыворотках свидетельствует о стабилизации C3-конвертазы классического пути активации системы комплемента. Чаще всего это связано с наличием аутоантител к активированной форме компонента C4, C4b. Данный эффект стабилизации C3-конвертазы может наблюдаться также и при дефиците фактора I, который является естественным ингибитором C3-конвертазы классического пути активации комплемента.

Таким образом, способ определения стабилизации C3-конвертазы позволяет выявлять скрытый аутоиммунный процесс у относительно здоровых людей, который впоследствии может приводить к патологии почек, иммунодефициту по компоненту C3, а при тяжелых случаях - к сепсису.

Пример 3. Определение стабилизации C3-конвертазы классического пути активации комплемента в сыворотках крови беременных женщин.

Предлагаемым способом были тестированы сыворотки крови 18 беременных женщин, пациентов отделения патологии, и общая активность системы комплемента в этих же сыворотках, как описано в работе Шойбонов Б.Б. и др. Коэффициент эффекторной функции антител (КЭФГА) - новый показатель состояния гуморального иммунитета // Патогенез. - 2011. - Т.9, №1, с.с.43-49. Кратко: 200 мкл эритроцитов барана, сенсибилизированных антителами кролика, (ЭБ-АК) (1,5×108 кл/мл) инкубировали с разбавленной сывороткой крови человека в общем объеме 500 мкл, доведенном буфером VBS (концентрация сыворотки 0,4%). Одновременно ставили контроль на спонтанный гемолиз ЭБ-АК (200 мкл ЭБ-АК+300 мкл VBS2+) и контроль на полный лизис (200 мкл ЭБ-АК+300 мкл H2O). Пробирки встряхивали и инкубировали 30 мин при 37°C. После инкубации в пробы добавляли по 2,5 мл холодного раствора 0,15 М NaCl, центрифугировали и определяли степень гемолиза по величине A412 супернатанта. Полученные результаты представлены в таблице 3.

Как видно из данных, представленных в таблице 3, общая активность системы комплемента была снижена в 6-ти (35%) сыворотках из 17 тестированных, причем в этих же сыворотках выявлена повышенная активность C3-конвертазы классического пути активации комплемента. Только в сыворотке №13 повышенная активность C3-конвертазы не сопровождалась снижением общей гемолитической активности системы комплемента. Возможно, это связано либо с большими компенсаторными возможностями, либо же с более ранним выявлением аутоиммунного процесса в организме данного человека.

Таким образом, разработанная тест-система выявляет в 41% случаев скрытые аутоиммунные нарушения у беременных женщин. Обнаруженный факт стабилизации C3-конвертазы у беременных женщин может служить прогностическим показателем аутоиммунной природы ожирения в послеродовом периоде. Установлено, что при усиленном распаде компонента C3 образуются опсонин (C3b) и анафилотоксин (C3a). При инактивации анафилотоксина под действием карбоксипептидазы N образуется молекула C3adezArg, представляющая собой белок, стимулирующий ацилирование, т.е. стимулируется синтез нейтральных жиров.

Предлагаемый способ по сравнению с известными имеет преимущества, которые заключаются в повышении точности диагностики нарушений иммунного статуса, упрощении, сокращении длительности процедуры исследования до 40 минут, удешевлении, возможности использования в рутинных исследованиях. Реализация изобретения позволит контролировать эффективность проводимого лечения и выявлять доклинические состояния вторичных иммунодефицитов.

Таблица 1
Ингибирование лизиса эритроцитов барана 0,8% пулированной сывороткой крови человека буфером, содержащим 10 мМ ЭДТУК
ЭДТУК в гемсистеме, мМ 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,8 2,0 0
СИ (%) 3 7 14 17 76 100 100 100 0
Таблица 2
Активность C3-конвертазы классического пути активации системы комплемента в сыворотках крови доноров
№ сыворотки У(опыт), % лизиса У(контроль), % лизиса Активность C3-конвертазы, %
1 72 60 12
2 12 10 2
3 49 36 13
4 89 77 12
5 7 3 4
6 12 10 2
7 11 5 6
8 8 4 4
9 13 10 3
10 15 13 2
11 18 15 3
12 90 84 6
13 12 13 1
14 53 37 16
15 16 14 2
16 16 21 5
17 10 3 7
18 81 77 4
19 57 41 16
20 13 7 6
M±m 6,3±4,8
Таблица 3
Активность C3-конвертазы классического пути активации системы комплемента в сыворотках крови беременных женщин
№ сыворотки Активность СК, % лизиса Активность C3-конвертазы, %
1 39 12
2 43 18
3 75 9
4 80 4
5 86 5
6 68 4
7 34 16
8 41 12
9 45 15
10 39 10
11 53 6
12 77 7
13 69 12
14 65 7
15 60 6
16 67 8
17 62 8
M±m 59±16 9,4±4,2

Способ определения стабилизации C3-конвертазы классического пути активации системы комплемента путем проведения в контрольной и опытной пробах реакции лизиса эритроцитов барана сывороткой крови человека при температуре 37,0±0,5°C с последующим выявлением лизиса эритроцитов, отличающийся тем, что лизис эритроцитов барана проводят 0,8% сывороткой крови человека в течение 10 мин, останавливают реакцию добавлением буфера, содержащего 10 мМ ЭДТУК, определяют степень лизиса эритроцитов в контрольной пробе, опытную пробу дополнительно инкубируют в течение 30 мин при 37°C и определяют степень лизиса эритроцитов, а активность C3-конвертазы рассчитывают как разность между степенями лизиса в опытной и контрольной пробах, при этом разность более 10% оценивают как аутоиммунное патологическое состояние.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для определения атерогенности иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности (ИК-ммЛПНП).
Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для экспресс-определения атерогенности иммунных комплексов (ИК) сыворотки крови человека.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения наличия ботулинического нейротоксина типа А (BoNT/A). На парамагнитных частицах, несущих иммобилизованный белок G бактерий семейства Streptococcus, с блокированными раствором Денхардт-ДНК адсорбируют белок BoNT/A при помощи специфических высокоаффинных поликлональных антител.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и терапии, и может быть использовано для определения фактора риска артериальной гипертензии у женщин с абдоминальным ожирением.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для мониторинга эффективности противоопухолевого лечения больных множественной миеломой.
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ донозологической диагностики нарушений здоровья от воздействия вибрации, включающий проведение лабораторных исследований крови, математическую обработку полученных результатов, отличающийся тем, что у пациентов в сыворотке крови определяют уровни фактора некроза опухоли-α и белка S-100β, рассчитывают диагностические коэффициенты F1 и F2 и при F1 меньше F2 диагностируют ранние проявления нарушения здоровья от воздействия локальной вибрации, при F1 больше или равно F2 - делают заключение об отсутствии ранних проявлений нарушения здоровья от воздействия локальной вибрации.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ММР9-1562 C>Т (rs3918242).

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для мониторинга эффективности противоопухолевого лечения больных В-клеточным хроническим лимфолейкозом.
Изобретение относится к области медицины, а именно к фтизиатрии и гинекологии, и может быть использовано для диагностики скрытой активной формы туберкулеза женских гениталий у пациенток с трубно-перитонеальным бесплодием.

Группа изобретений относится к медицине, а именно диагностике глютен-чувствительной энтеропатии у генетически предрасположенных пациентов, и может быть использована для уточнения диагноза аутоиммунного заболевания.

Группа изобретений относится к области медицины. Предложены способы диагностики хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) и проведения различия между стадией I/II и III/IV ХОБЛ у человека, включающие определение количества белков теплового шока 27 (HSP27), 70 (HSP70) и 90 альфа (HSP90 альфа) и определение количества рецептора 4 интерлейкина-1 (ST2) или гистон-связанных-ДНК-фрагментов в образце. ХОБЛ диагностируют, когда количество HSP27, HSP70, HSP90 альфа, ST2 и гистон-связанных-ДНК-фрагментов является увеличенным по сравнению с количеством таковых у здоровых людей. Стадии I/II ХОБЛ диагностируют, когда количество HSP27 в образце указанного субъекта находится в пределах между 2600 и 3300 пг/мл, количество ST2 больше чем 160 пг/мл, а количество HSP70 и HSP90 альфа является по меньшей мере на 40% увеличенным по сравнению с количеством таковых у здоровых людей. Стадии III/IV ХОБЛ диагностируют, когда количество HSP27 в образце находится в пределах между 3400 и 5500 пг/мл, количество HSP70, HSP90 альфа и гистон-связанных-ДНК-фрагментов в образце является по меньшей мере на 40% увеличенным по сравнению с количеством таковых у здоровых людей. Группа изобретений обеспечивает эффективные способы диагностики ХОБЛ и проведения различия между стадией I/II и III/IV ХОБЛ у человека. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 20 ил., 2 табл., 2 пр.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено антитело, способное связываться с амплифицированным рецептором эпидермального фактора роста (EGFR) и с усеченным вариантом EGFR - de2-7 EGFR, и охарактеризованное последовательностями вариабельных доменов. Также рассмотрены основанные на использовании антитела по изобретению набор для диагностирования опухоли, иммуноконъюгат, фармацевтические композиции и способы лечения злокачественной опухоли, а также одноклеточный хозяин для образования антитела по настоящему изобретению. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в диагностике и терапии рака. 8 н. и 35 з.п. ф-лы, 98 ил., 20 табл., 26 пр.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложено устройство для забора нуклеиновой кислоты, применение устройства для забора нуклеиновой кислоты, набор для амплификации нуклеиновой кислоты, а также способ амплификации нуклеиновой кислоты. Устройство включает зонд для удержания образца нуклеиновой кислоты и манипулятор, подсоединенный к зонду с учетом возможности маневрирования зондом. Зонд включает множество элементов зонда, которые способны перемещаться относительно друг друга между сближенной и взаимно удаленной конфигурациями. Каждый элемент зонда имеет наконечник. При перемещении элементов зонда в сближенную конфигурацию каждый наконечник объединяется с другими наконечниками для образования составного наконечника. Составной наконечник способен контактировать с нуклеиновой кислотой с целью доставки ее образца. Способ амплификации нуклеиновой кислоты из высших эукариот включает контакт устройства для забора образцов с источником нуклеиновой кислоты из высших эукариот, введение устройства для забора образцов или его части в реакционный сосуд для проведения реакции амплификации нуклеиновой кислоты без предварительной обработки материала и осуществление реакции амплификации нуклеиновой кислоты. Изобретения обеспечивают портативность, легкость в применении устройства для забора нуклеиновой кислоты, а также проведение анализа в течение короткого периода времени. 6 н. и 37 з.п. ф-лы, 27 ил., 2 табл., 12 пр.

Представленная группа изобретений касается слитых белков, нуклеиновых кислот, кодирующих такие белки, экспрессирующей кассеты, обеспечивающей экспрессию нуклеиновой кислоты, вектора, включающего такую кассету, способа диагностики in vitro-боррелиоза, набора для такой диагностики, в которых используют упомянутые белки, а также вакцинной композиции для профилактики боррелиоза, включающей такие белки. Охарактеризованные слитые белки включают в себя (i) по меньшей мере одну последовательность белка DbpA вида боррелии, выбранного из B. afzelii, B. burgdorferi sensu stricto и B. garinii, и (ii) по меньшей мере одну последовательность белка OspC вида боррелии, выбранного из B. afzelii, B. burgdorferi sensu stricto и B. garinii. Представленная группа изобретений позволяет проводить более чувствительные и специфичные анализы, связанные с присутствием нескольких патогенных видов Borrelia. 7 н. и 4 з.п. ф-лы, 8 табл., 7 пр.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено полностью человеческое моноклональное антитело, которое связывает инсулиноподобный фактор роста-II (IGF-II) и имеет перекрестную реактивность к IGF-I, а также его антигенсвязывающий фрагмент. Рассмотрены молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело по изобретению, вектор и клетка-хозяин для экспрессии антитела по изобретению. Описана фармацевтическая композиция, а также конъюгаты для лечения и диагностики злокачественной опухоли, применение антитела по изобретению в получении лекарственного средства и способ определения уровня IGF-II и IGF-I в пробе пациента. Настоящее изобретение может найти дальнейшее применение в терапии рака. 8 н. и 8 з.п. ф-лы, 27 пр., 18 табл.

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии производства иммунопероксидазных конъюгатов, используемых для выявления антигенов возбудителей инфекционных болезней в твердофазном иммуноферментном анализе. Изобретение заключается в разработке способа консервации иммунопероксидазного конъюгата с применением в качестве стабилизирующей среды высушивания раствора белкового стабилизатора на основе водной эмульсии белка куриного яйца при лиофилизации и после растворения препарата с сохранением стабильности физических и иммунохимических показателей. Изобретение позволяет сохранять стабильность физических и иммунохимических показателей иммунопероксидазных конъюгатов в течение длительного срока. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования внутрибольничного инфицирования ребенка возбудителями кишечных инфекций. Для этого количественно определяют содержание sIgA в копрофильтрате при поступлении ребенка в стационар. При уровне sIgA ниже нормы 23.2-63.5 мг/л прогнозируют возможное присоединение внутрибольничной ОКИ. Использование данного способа позволяет выявить детей с изменениями в системе местного иммунитета кишечника при поступлении их в стационар и проводить адекватную терапию с включением средств иммунокоррекции с целью предотвращения возникновения внутрибольничной ОКИ. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для снижения заболеваемости респираторными инфекциями детей младшего школьного возраста. Для этого детей делят на 4 группы, в первую попадают дети с признаками: недостаточная продолжительность грудного вскармливания в анамнезе, наличие часто болеющих членов семьи, отсутствие осложнений респираторных инфекций, уровни IgA от 0.7 до 1,1 мг/мл, IgG от 10,6 до 16,2 мг/мл; во вторую: гестоз у матери ребенка во время беременности, угроза прерывания беременности в анамнезе, частые осложнения респираторных заболеваний - синуситы, отиты; уровни альфа2-глобулинов от 9.4 до 11.8 г/л, гамма-глобулинов от 17.8 до 22.6 г/л, TNF-α от 8.7 до 10.1 пг/мл, IgG от 16,7 до 23,7 мг/мл, CD3+ от 51 до 56.2%, CD4+ от 27.2 до 29.4%, CD16+CD56+ от 6.5 до 8.5%, НСТ теста индуцированного от 25 до 32.8%; в третью группу: анемия у матери ребенка во время беременности, отягощенная по эндокринным заболеваниям наследственность ребенка, респираторные заболевания часто осложняются бронхитами, в мазках из зева высеваются грибы рода Candida, уровни гамма-глобулинов от 12.1 до 14.9 г/л, IgG от 10.9 до 15.5 мг/мл, CD19+ от 7.6 до 9.6%, НСТ теста индуцированного от 25.5 до 31.7%; в четвертую группу: аллергические реакции в анамнезе у ребенка, отягощенная по аллергическим заболеваниям наследственность, респираторные заболевания часто осложняются обструктивными бронхитами, уровни гамма-глобулинов от 18.1 до 23.1 г/л, IgE от 67 до 261 Ме/мл. При этом профилактику частых респираторных заболеваний осуществляют витаминно-минеральным комплексом препарат мультитабс и одним из иммунокорригирующих препаратов: в первой группе препаратом лизаты бактерий ИРС-19, во второй группе препаратом глюкозаминилмурамилдипептид (ликопид), в третьей группе препаратом азоксимера бромид (полиоксидоний), в четвертой группе иммунокоррекция не рекомендуется. Использование данного способа позволяет выбирать вариант иммунокоррекции в зависимости от наличия или отсутствия диагностических признаков. 2 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и описывает способ определения функциональной активности фактора B комплемента человека по его действию на клетки-мишени в бескальциевой среде, содержащей ионы магния, в присутствии реагента RB, являющегося сывороткой крови человека, избирательно лишенной активности фактора B, причем в качестве клеток-мишеней выбраны инфузории Tetrahymena pyriformis, суспензию которых вместе с испытуемым образцом, содержащим определяемый фактор B, и реагентом RB вносят в измерительные ячейки прибора для автоматизированного подсчета числа живых инфузорий с последующим определением числа живых клеток в каждую минуту, при этом совпадение динамики изменения числа живых клеток во времени для испытуемого образца и контрольного, представляющего пул 10 сывороток здоровых доноров, предполагает равенство активностей фактора B комплемента в этих образцах. Изобретение обеспечивает более доступную мишень для действия комплемента, каковой являются инфузории Tetrahymena pyriformis. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к терапии, кардиологии, и касается способа прогнозирования риска развития критического стеноза в коронарных артериях у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС). Сущность способа: в сыворотке крови пациента определяют концентрацию матриксной металлопротеиназы - 9 (ММП-9) и/или С-терминального пропептида проколлагена 1 типа (PICP). При значении ММП-9 более 101,8 нг/мл и/или PICP 195,6 нг/мл прогнозируют неблагоприятное течение ИБС, менее этих значений - благоприятное течение без формирования в коронарных артериях критических стенозов. Применение способа обеспечивает повышение точности и специфичности способа. 4 пр.
Наверх