Способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа



Способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа
Способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа
Способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа

 


Владельцы патента RU 2584328:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО АГМА Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа. Способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа путем гомогенизации ткани плаценты до однородной массы, экстракции трис-HCl буфером, содержащим бутанол, через сутки указанную смесь центрифугируют с диэтиловым эфиром, собирают водную фазу и далее проводят аффинную хроматографию щелочной фосфатазы плацентарного типа на иммобилизованном лектине бодяги речной, после чего промывают раствором NaCl, забуференным трис-HCl буфером, и элюируют связанную на колонке щелочную фосфатазу плацентарного типа раствором лактозы в боратном буфере при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет упростить и ускорить выделение щелочной фосфатазы плацентарного типа, а также увеличить выход и степень её чистоты. 2 ил., 2 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно биохимии, и может быть использовано, в частности, для выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа.

В практике известен способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа, основанный на бутаноловой экстракции, осаждении ацетоном, тепловой обработке, преципитации сульфатом аммония, ионообменной и гель-проникающей хроматогоафии (Lehman F.G., Lehman W. Regan-Isoenzym: Isolierung der alkalischen Phosphatase aus menschlicher Placenta und Entwicklung. Vern. Dtsch. Ges. Inn. Med. Kongr. Wiesbaden, 1974, Mimchen, 1974, p. 1658-1661).

Недостатками этого способа являются: трудоемкость; длительность проведения; невысокий выход продукта и недостаточная его чистота.

Наиболее близким к предлагаемому является прототип - способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа путем гомогенизации ткани плаценты до однородной массы, экстракции 10 мМ трис-HCl буфером pH 7,0 в соотношении 1:4, содержащим 20% бутанол, в течение 6-8 часов при температуре 0-2°C, основанный на использовании аффинной хроматографии на СоА-сефарозе. Авторами описан усовершенствованный метод выделения щелочной фосфатазы из человеческой плаценты (CHANG Т-С, HUANG S-M., HUANG Т-М. and CHANG G-G. Human placental alkaline phosphatase. An improved purification procedure and kinetic studies. Eur. J. Biochem. 1992, v. 209, pp. 241-247). Очистка фермента проводилась путем последовательных Конка-навалин-A-Sepharose и Q-Sepharose хроматографии. Высокоочищенный фермент был получен с 39% выходом.

Однако данный способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа имеет следующие недостатки:

- трудоемкость;

- необходимость использования дорогостоящих реактивов и оборудования;

- длительность проведения (72-96 часов);

- низкий выход продукта и недостаточная его чистота.

Изобретение направлено на упрощение и ускорение выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа, а также на увеличение выхода и степени ее чистоты.

Указанный технический результат достигается тем, что смесь, полученную после гомогенизации и экстракции из ткани плаценты, через сутки центрифугируют с диэтиловым эфиром в течение 40-45 мин при 10000 об/мин последовательно 2-3 раза в соотношении 1 часть диэтилового эфира и 5 частей гомогената, собирают водную фазу и далее проводят аффинную хроматографию щелочной фосфатазы плацентарного типа на иммобилизованном лектине бодяги речной, после чего промывают 1М раствором NaCl, забуференным трис-HCl буфером и элюируют связанную на колонке щелочную фосфатазу плацентарного типа 0,1 М раствором лактозы в боратном буфере с pH=9,0.

Выделение щелочной фосфатазы плацентарного типа проводят следующим способом. Для приготовления экстракта, содержащего щелочную фосфатазу плацентарного типа, кусочки плаценты взвешивали, мелко нарезали, гомогенизировали до однородной массы, добавляя при этом 10 мМ трис-HCl буфер pH 7,0 в соотношении 1:4, содержащий 20% бутанол, и перемешивали в течение 6-8 часов при температуре 0-2°C.

Через сутки указанную смесь центрифугировали с диэтиловым эфиром в течение 40-45 мин при 10000 об/мин в рефрижераторной центрифуге 2-3 раза в соотношении 1 часть диэтилового эфира и 5 частей гомогената. После центрифугирования водную фазу, содержащую щелочную фосфатазу плацентарного типа, помещали в колбу и на сутки оставляли в холодильнике. Затем еще раз центрифугировали и определяли общий белок и активность щелочной фосфатазы в надосадочной жидкости.

Заключительная стадия выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа представляет собой аффинную хроматографию щелочной фосфатазы на иммобилизованном лектине бодяги речной. Через колонку (1,5×12 см) лектин-сефарозы, уравновешенную трис-HCl буфером, пропускали весь объем полученной на предшествующей стадии фракции. Далее колонку промывали 1М раствором хлорида натрия, забуференного трис-HCl буфером, а затем элюировали связанную на колонке щелочную фосфатазу плацентарного типа 0,1 М раствором лактозы в боратном буфере с pH=9,0. Полученный элюат диализовали и концентрировали до приемлемого объема (17 мл).

Нами обнаружена способность лектина бодяги речной (Ephydatia fluviatilis) преципитировать щелочную фосфатазу плацентарного типа. На рис.1 (преципитация препаратов щелочной фосфатазы плацентарного типа лектином бодяги речной) показана преципитация фракций поэтапного выделения щелочной фосфатазы из плаценты по сравнению со стандартным препаратом плацентарной щелочной фосфатазы в агаровом геле, содержащем лектин бодяги речной (1 - стандартный препарат плацентарной щелочной фосфатазы (Sigma 100 мкг/мл); 2 - бутанольный экстракт плаценты; 3 - водная фаза бутанольного экстракта плаценты; 4 - фракция, после аффинной хроматографии. Агаровый гель содержит полуочищенный лектин бодяги речной в конечной концентрации 1,0 мг на 100 мл агара. Окраска на общий белок амидо-черным В).

Образцы №2, 3, 4 стандартизованы по уровню общего белка и приведены по концентрации его к уровню в коммерческом препарате плацентарной щелочной фосфатазы (Sigma) - 100 мкг/мл.

Снижение диаметра колец преципитации обусловлено повышением степени очистки щелочной фосфатазы плацентарного типа и уменьшением количества балластных белков, способных преципитироваться лектином бодяги речной.

На рис. 2 (электрофорез в полиакриламидном геле), где A - водно-солевой экстракт плаценты; В - бутанольный экстракт; C - фракция щелочной фосфатазы плацентарного типа после аффинной хроматографии, показано, что препарат щелочной фосфатазы плацентарного типа гомогенен при электрофоретическом контроле чистоты.

Предлагаемый способ был успешно апробирован на кафедре общей и биоорганической химии ГБОУ ВПО АГМА, с апреля 2010 года до мая 2013 года на 46 образцах человеческой плаценты, собранных в родильном доме 1 областной клинической Александро-Мариинской больницы г. Астрахани. Ниже приводятся результаты апробации.

Пример №1. 6.04.2010 г. получена плацента от женщины N., родившей здорового мальчика и не страдавшей поздними токсикозами. Для приготовления экстракта, содержащего щелочную фосфатазу плацентарного типа, кусочки плаценты взвешивали, мелко нарезали, гомогенизировали до однородной массы, добавляя при этом 10 мМ трис-HCl буфер pH 7,0 в соотношении 1:4, содержащий 20% бутанол, и перемешивали в течение 6 часов при температуре 0°C. Через сутки указанную смесь центрифугировали с диэтиловым эфиром в течение 40 мин при 10000 об/мин в рефрижераторной центрифуге последовательно 3 раза в соотношении 1 часть эфира и 5 частей гомогената. После центрифугирования водную фазу, содержащую щелочную фосфатазу плацентарного типа, помещали в колбу и на сутки оставляли в холодильнике. Затем еще раз центрифугировали и определяли общий белок и активность щелочной фосфатазы в надосадочной жидкости.

Заключительная стадия выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа представляет собой аффинную хроматографию щелочной фосфатазы на иммобилизованном лектине бодяги речной. Через колонку (1,5×12 см) лектин-сефарозы, уравновешенную трис-HCl буфером, пропускали весь объем полученной на предшествующей стадии фракции. Далее колонку промывали 1М раствором хлорида натрия, забуференного трис-HCl буфером, а затем элюировали связанную на колонке щелочную фосфатазу плацентарного типа 0,1 М раствором лактозы в боратном буфере с рН=9,0. Полученный элюат диализовали и концентрировали до приемлемого объема (23 мл).

Пример №2. 13.09.2010 г. Получена плацента от женщины X., родившей здоровую девочку и не страдавшей поздними токсикозами. Для приготовления экстракта, содержащего щелочную фосфатазу плацентарного типа, кусочки плаценты взвешивали, мелко нарезали, гомогенизировали до однородной массы, добавляя при этом 10 мМ трис-HCl буфер pH 7,0 в соотношении 1:4, содержащий 20% бутанол, и перемешивали в течение 8 часов при температуре +2°C. Через сутки указанную смесь центрифугировали с диэтиловым эфиром в течение 45 мин при 10000 об/мин в рефрижераторной центрифуге последовательно 2 раза в соотношении 1 часть эфира и 5 частей гомогената. После центрифугирования водную фазу, содержащую щелочную фосфатазу плацентарного типа, помещали в колбу и на сутки оставляли в холодильнике. Затем еще раз центрифугировали и определяли общий белок и активность щелочной фосфатазы в надосадочной жидкости.

Заключительная стадия выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа представляет собой аффинную хроматографию щелочной фосфатазы на иммобилизованном лектине бодяги речной. Через колонку (1,5×12 см) лектин-сефарозы, уравновешенную трис-HCl буфером, пропускали весь объем полученной на предшествующей стадии фракции. Далее колонку промывали 1М раствором хлорида натрия, забуференного трис-HCl буфером, а затем элюировали связанную на колонке щелочную фосфатазу плацентарного типа 0,1 М раствором лактозы в боратном буфере с рН=9,0. Полученный элюат диализовали и концентрировали до приемлемого объема (23 мл).

В таблице 1 показаны стадии выделения щелочной фосфатазы из плаценты человека. В таблице 2 приведена сравнительная характеристика предлагаемого способа выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа с прототипом.

Предложенный нами способ упрощает (в прототипе выделение состоит из 5 стадий, если учесть, что авторы используют не первичный экстракт плаценты, а препарат фирмы Sigma, полученный бутанольной экстракцией по Fishman, а в предложенном нами способе - из 2 стадий), ускоряет в 2,6 раза выделение щелочной фосфатазы из плаценты человека по сравнению с прототипом и тем самым повышается эффективность способа (повышается выход конечного продукта на 14,4% по сравнению с прототипом).

Главное преимущество предлагаемого способа заключается в применении аффинной хроматографии на малоизученном лектине животного происхождения из бодяги речной. Этот лектин обладает высоким сродством к галактозосодержащим гликопротеинам. По нашим данным константа диссоциации лактозы с этим лектином составляет 1,34×10-4 мМ. Это позволяет однократно повысить степень очистки в 289 раз (по сравнению с предыдущей стадией очистки). Самое главное, в отличие от прототипа, способ позволяет связать всю массу щелочной фосфатазы плацентарного типа, а не повторять многократно операцию хроматографии, выделяя за один сеанс не более 1 мг препарата.

Способ выделения щелочной фосфатазы плацентарного типа путем гомогенизации ткани плаценты до однородной массы, экстракции 10 мМ трис-HGl буфером pH 7,0 в соотношении 1:4, содержащим 20% бутанол, в течение 6-8 часов при температуре 0-2°C с последующей аффинной хроматографией, отличающийся тем, что через сутки указанную смесь центрифугируют с диэтиловым эфиром в течение 40-45 минут при 10000 об/мин, последовательно 2-3 раза в соотношении 1 часть диэтилового эфира и 5 частей гомогената, собирают водную фазу и далее проводят аффинную хроматографию щелочной фосфатазы плацентарного типа на иммобилизованном лектине бодяги речной, после чего промывают 1М раствором NaCl, забуференным трис-HCl буфером, и элюируют связанную на колонке щелочную фосфатазу плацентарного типа 0,1 М раствором лактозы в боратном буфере с рН=9,0.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для диагностики степени тяжести пародонтита у больных бронхиальной астмой. Для чего определяют зрелые (EN-PO) и ранние (DPOH) нейтрофилы в слюне и смыве из полости рта пациентов, не принимающих и принимающих гормональные препараты.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования риска развития профессиональной бронхиальной астмы. Cущность способа прогнозирования риска развития профессиональной бронхиальной астмы состоит в том, что определяют наличие родственников с аллергической реакцией, наличие в анамнезе ринита, крапивницы либо другой аллергической реакции, бытовой, пищевой и лекарственной аллергической реакции, профессиональной вредности, при этом дополнительно определяют концентрацию общего IgE в сыворотке крови, в качестве профессиональной вредности определяют «симптомы элиминации», «экспозиционный тест», «эффект реэкспозиции» каждый признак оценивают в баллах.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики у детей гломерулярного и тубулоинтерстициального заболеваний почек нетоксической природы и ассоциированных с токсическим действием Cd, Pb, Cr и фенола, характеризующийся тем, что при содержании указанных веществ в крови выше референтного значения осуществляют генетическое исследование, при наличии полиморфизма генов CYPOX, RCYT 450, SULTA1 проводят ультразвуковое исследование, при установлении обеднения кровотока в подкапсульной зоне почек, отклонений показателей спектрограммы импульсно-волнового допплера и повышения эхогенности паренхимы почек, осуществляют дополнительные исследования, и при отклонении относительно физиологической возрастной нормы 65% или более из следующих показателей: содержание ОАС, Cu/Zn-СОД, ГлПО; повышение уровня каталазы, гидроперекисей липидов, МДА; и снижении абсолютного фагоцитоза и фагоцитарного числа диагностируют заболевание, ассоциированное с токсическим действием, а при отсутствии таких отклонений - заболевание нетоксической природы.

Изобретение относится к медицине и предназначено для уточнения стадии фиброза печени в клинико-лабораторных условиях. В качестве определяемых белковых продуктов используют цитокины CXCL11/ITAC, TNFα и CCL20/MIP-3α.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования тяжести течения гломерулонефрита. Сущность способа состоит в том, что больному с гломерулонефритом проводят иммуноферментный анализ сыворотки крови на содержание тиреотропного гормона (ТТГ).

Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для бесконтактного манипулирования, концентрирования и сортировки бактериальных клеток E.coli и/или диамагнитных микрочастиц в микрофлюидных системах.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу исследования реакции организма человека при трансфузии эритромассы путем анализа кислорода в крови. Сущность способа состоит в том, что предварительно определяют артериовенозные разницы содержания по кислороду до и после трансфузии эритромассы с получением коэффициента Р.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ неинвазивной пренатальной диагностики анеуплоидий плода, включающий выделение внеклеточной ДНК из образца крови беременной женщины, приготовление геномных библиотек и их обогащение регионами генома, секвенирование, картирование полученных чтений на референсный геном, корректировку полученного значения покрытия для каждого региона генома на общее покрытие генома, сравнение скорректированного значения покрытия со значениями покрытий, полученных для обучающей выборки и определение наличия анеуплоидий плода.

Изобретение относится к областям биологии и генетической инженерии. Предложен выделенный пептид для терапевтических целей, содержащий последовательность, по меньшей мере, на 95% идентичную SEQ ID NO:4 (GG00444), или его фрагмент или вариант, способные связываться со слизью кишечника человека, а также содержащая его ворсинчатая структура, пищевой продукт, фармацевтическая композиция, полинуклеотид, экспрессионный вектор, клетка-хозяин, кластер генов, антитело, способ лечения и способ скрининга пробиотических бактериальных штаммов.

Группа изобретений относится к биосенсорам с системой распознавания недостаточного заполнения. Способ оценки объема образца в биосенсоре содержит подачу регулярной последовательности опроса, обнаружение наличия образца, подачу расширенной последовательности опроса и определение того, является ли объем образца достаточным для анализа.

Изобретение относится к молекулярной биологии, вирусологии и медицине. Изобретение раскрывает способ выделения нуклеиновых кислот с использованием изопропанола на этапе преципитации и осаждения ДНК, отличающийся тем, что при начальной обработке биологического материала используют гидрохлорид гуанидина и детергент в натрий-ацетатном буфере, а в качестве соосадителя нуклеиновых кислот применяют 0,05% линейный полиакриламид. Выделенная данным способом нуклеиновая кислота может быть использована при постановке полимеразной цепной реакции, также в практической медицине и ветеринарии для диагностики наследственных заболеваний человека и животных, судебной медицине, генной дактилоскопии, диагностике возбудителей инфекционных заболеваний человека и животных, в том числе заболеваний передающихся половым путем. Преимуществом способа является упрощение выделения НК из крови и тканей человека и животных, что весьма актуально при проведении массовых анализов различных образцов в процессе диагностики инфекционных заболеваний. Использование в изобретении линейного полиакриламида ЛПАА в качестве соосадителя позволяет повысить выход НК из образца. 1 ил., 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для диагностики постнагрузочного бронхоспазма у больных бронхиальной астмой (БА). Диагностику проводят у больных БА легкой и средней степени тяжести во внеприступный период. Определяют пиковую объемную скорость форсированного выдоха в процентах от должной величины (ПОС, в %) с помощью спирографии. Определяют уровень насыщения крови кислородом (SaO2, в %) посредством транскутанной пульсоксиметрии. Определяют фракцию изгнания левого желудочка сердца (ФИ, в %) и толщину межжелудочковой перегородки в диастолу (МЖПд, см) с помощью метода эхокардиографии. Определяют процентное содержания эозинофилов в периферической крови (Эоз, в %) с помощью гематологического анализатора (в клиническом анализе крови). Рассчитывают дискриминантную функцию (D) по формуле. Граничное значение D равно 90,40. При D, равной или больше граничного значения, диагностируется отсутствие синдрома постнагрузочного бронхоспазма. При D меньше граничного значения диагностируется наличие синдрома постнагрузочного бронхоспазма. Способ позволяет точно провести диагностику синдрома постнагрузочного бронхоспазма за счет использования результатов наиболее значимых методов обследования больных БА. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологическим методам экспериментального моделирования процессов, протекающих в полости рта человека, в частности образования зубного камня. Для этого предложен способ моделирования процесса образования зубного камня из аналога раствора слюны человека, основанный на синтезе зубного камня в искусственно созданной модельной среде, при котором готовят модельную среду указанного состава: NaCl - 9,00 ммоль/л, K2CO3 - 5,00 ммоль/л, (NH4)2HPO4 - 5,60 ммоль/л, NH4Cl - 29,49 ммоль/л, NH4F - 0,01 ммоль/л, KCl - 25,00 ммоль/л, CaCl2·H2O - 6,90 ммоль/л, MgCl2·6H2O - 3,00 ммоль/л. Синтез проводят при значении pH=6,95±0,05 и температуре 37.0±0.5°C, при этом через 60 дней образуется фаза в виде брушита, а через 90 дней из модельной системы образуется гидроксилапатит, который является основным компонентом зубных камней человека. Изобретение позволяет обнаружить предрасположенность к заболеванию и выработать профилактические меры для предотвращения роста зубного камня. 5 ил., 2 табл.,1 пр.

Настоящее изобретение относится к области биоаналитических исследований и представляет собой способ анализа цитохрома С в интактных митохондриях с помощью спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния (ГКР), включающий подготовку митохондрий и их нанесение на подложку на основе диэлектрического химически инертного материала с наноструктурированным покрытием толщиной 1-10 мкм в виде кольцевых наноструктур серебра, при этом ободки серебряных колец состоят из сообщающихся друг с другом пористых агрегатов серебра, на поверхности которых расположены округлые наночастицы серебра размером 2-90 нм, с последующей иммобилизацией митохондрий на данные наноструктурированные покрытия, детектирование спектров ГКР с последующей расшифровкой характеристических колебаний анализируемой пробы спектров ГКР с использованием стандартного программного обеспечения. Осуществление изобретения позволяет расширить область применимости ГКР и проводить исследования в интактных функционирующих митохондриях. 11 з.п. ф-лы, 4 пр., 1 ил.

Настоящее изобретение относится к области биоаналитических исследований и представляет собой способ анализа цитохрома С в интактных митохондриях с помощью спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния (ГКР), включающий подготовку митохондрий и их нанесение на подложку на основе диэлектрического химически инертного материала с наноструктурированным покрытием толщиной 1-10 мкм в виде кольцевых наноструктур серебра, при этом ободки серебряных колец состоят из сообщающихся друг с другом пористых агрегатов серебра, на поверхности которых расположены округлые наночастицы серебра размером 2-90 нм, с последующей иммобилизацией митохондрий на данные наноструктурированные покрытия, детектирование спектров ГКР с последующей расшифровкой характеристических колебаний анализируемой пробы спектров ГКР с использованием стандартного программного обеспечения. Осуществление изобретения позволяет расширить область применимости ГКР и проводить исследования в интактных функционирующих митохондриях. 11 з.п. ф-лы, 4 пр., 1 ил.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования течения рассеянного склероза (PC) путем исследования крови, отличающийся тем, что из крови, взятой из вены, выделяют лейкоцитарную взвесь, затем из лейкоцитарной взвеси выделяют ДНК и методом ПЦР в режиме реального времени определяют наличие или отсутствие патологических аллелей в полиморфных вариантах генов rs1800629 (TNFα) и rs6074022 (CD40), причем при выявлении аллеля G полиморфного локуса rs1800629 (TNFα) и аллеля С полиморфного локуса rs6074022 (CD40) прогнозируют повышенную среднюю скорость прогрессирования рассеянного склероза. Осуществление изобретения позволяет повысить точность прогнозирования, что способствует выбору соответствующей стратегии лечения. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования метастазов в печени при раке прямой кишки. Сущность способа состоит в том, что после радикального оперативного вмешательства в объеме гемиколэктомии в ткани злокачественной опухоли у больных раком прямой кишки определяют уровень активной формы васкулоэндотелиального фактора роста А (VEGF-A) и растворимого рецептора васкулоэндотелиального фактора роста (VEGF-R), вычисляют их соотношение. При значениях, превышающих показатель в интактной ткани слизистой прямой кишки в 18 и более раз, прогнозируют метастатическое поражение печени в ближайшие 3,5 месяца. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность прогнозирования метастазов в печени при раке прямой кишки. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для лечение бесплодия у женщин с миомой матки. Для этого определяют уровень аутоантител к ХГЧ в сыворотке крови и при их значениях от +11% до +20% и от -21% до -30% назначают профилактическое лечение, при их значениях выше +20% и ниже -30% назначают хирургическое лечение. Способ позволяет выбрать оптимальную тактику лечения бесплодия у женщин с миомой матки при его безопасности и низкой затратности. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к детской хирургии. Для прогнозирования течения язвенно-некротического энтероколита у новорожденных определяют характеристику лейкоцитарной формулы (X1), как: регенераторный сдвиг - 1, нормопения - 2, лейкопения - 3; оценивают наличие или отсутствие признаков поражения дыхательной системы (Х2), как: пневмония - 1, гипоплазия легких - 2, кистозные поражения легких - 3, синдром дыхательных расстройств - 4, сочетанные пороки и заболевания легких - 5, нет признаков поражения дыхательной системы - 6; сывороточный уровень (нг/мл) матричной металлопротеиназы 2 типа (X3); концентрацию кальпротектина (мкг/г) в кале (X4); сывороточный уровень (нг/мл) ингибитора матричных металлопротеиназ 9 типа (X5); значение шкалы оценки тяжести полиорганных нарушений SOFA в баллах (X6). Прогнозируют течение язвенно-некротического энтероколита у новорожденного по формуле: d=-7,148+X1*(0,915)+X2*-0,292+X3*0,005+X4*0,002+X5*0,001+X6*0,201, где X1,2,3,4,5,6 - числовые значения параметров пациента, и при значении d от 0 до -1,258 - прогноз благоприятный, а при d от 0 до 2,124 - высокая вероятность летального исхода. Способ позволяет с высокой точностью прогнозировать течение язвенно-некротического энтероколита у новорожденных, за счет использования корреляционно-регрессионного анализа. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для лечения цервикальных неоплазий II-III степени, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией. Для этого на 1-м этапе лечения в случае выявления анаэробного дисбиоза вводят нео-пенотран по 1 суппозиторию 1 раз в день 7 дней или нео-пенотран форте L по 1 суппозиторию 1 раз в день 7 дней. При выявлении Atopobium vaginae вводят макмирор-комплекс по 1 свече 2 раза в день 7 дней. При аэробном дисбиозе вводят тержинан по 1 вагинальной таблетке 1 раз в день 7 дней. На 2-м этапе проводят коррекцию местного иммунитета путем воздействия на шейку матки кавитированным низкочастотным ультразвуком раствором гексапептида имунофана 5,0, разведенным в 50 мл физиологического раствора, 1 раз в день в течение 5 дней. На 3-м этапе восстанавливают pH среды путем введения фемилекса 2 раза в день в течение 6 дней. На 4-м этапе проводят деструкцию: при цервикальной интраэпителиальной неоплазии II степени - электроэксцизию, при цервикальной интраэпителиальной неоплазии III - электроконизацию. Способ обеспечивает профилактику рака шейки матки, снижение рецидивирования и осложнений при лечении предраковой патологии шейки матки высокой степени в результате проведения патогенетически обоснованной комплексной терапии. 2 табл.
Наверх