Способ определения угрозы функционирования плаценты при снижении пирувата на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для определения угрозы нарушения ферментативной активности в плаценте и развития плода при снижении содержания пирувата на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови беременных измеряют титр антител к цитомегаловирусу, содержание пирувата в гомогенате плаценты, после чего выполняют цитофотометрический анализ выполненных гистологических срезов плаценты после проведения гистохимической реакции с последующим определением содержания пируватдегидрогеназы, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, снижении содержания пирувата в гомогенате плаценты до 0,015±0,002 ммоль/л и пируватдегидрогеназы до 35,0±0,95 усл. ед. создается угроза нарушения ферментативной активности в плаценте и развития плода. Способ позволяет оценить угрозу нарушения функционирования плаценты в целом и развития плода. 2 ил.

 

1. Цель изобретения - разработать способ оценки снижения содержания пирувата в синцитиотрофобласте плаценты при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа, позволяющего выяснить причину снижения в синцитиотрофобласте плаценты содержания пирувата в связи с обострением на третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции.

3. Раскрытие изобретения

Углеводы, жирные кислоты и аминокислоты окисляются через цикл лимонной кислоты до CO2 и H2O. Прежде чем эти вещества вовлекаются в заключительный этап катаболизма, их углеродная цепь превращается в двухуглеродный фрагмент в форме ацетил-КоА [1,5-7]. В этой форме углеводы, жирные кислоты и аминокислоты включаются в цикл лимонной кислоты [7]. Основным источником в этой цепи превращений в сторону образования ацетил-КоА является пировиноградная кислота (пируват), образующаяся в реакциях катаболизма глюкозы и аминокислот [1, 7]. Превращение пирувата в ацетил-КоА происходит при участии набора ферментов, объединенных под названием пируватдегидрогеназного комплекса. Окислительное декарбоксилирование пирувата происходит в матриксе митохондрий синцитиотрофобласта. Окислительное декарбоксилирование пирувата сопровождается образованием NADH+, поставляющим электроны в дыхательную цепь и обеспечивающим синтез 3 молей АТФ на 1 моль пирувата путем окислительного фосфорилирования [4]. Таким образом, пируват в нормальных условиях жизнедеятельности клеток можно рассматривать как основной источник восстановления начального этапа цикла Кребса, поскольку происходит восстановление ацетил-КоА и одновременно формируется основной источник энергии - АТФ. В случае нарушения этого цикла происходит подавление гликолиза и выработка продуктов энергетического обмена, что создает угрозу ферментативной системе в плаценте. Таким образом, оценка характера функционирования пируватной системы приобретает особое значение, поскольку это будет отражаться на функционировании плаценты в целом и создавать угрозу развития плода.

4. Новая техническая задача

Разрабатывается новый способ оценки функционирования плаценты с учетом работы пируватного комплекса в условиях обострения на третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции, что может отражаться на развитии плода.

5. Оценку работы пируватного комплекса проводили в плаценте при обострении во время гестации герпес-вирусной инфекции (Довжикова И.В.) [2]. В отличие от указанного прототипа в данной работе имеются существенные отличия.

1. Активность пируватного комплекса изучалась при обострении цитомегаловирусной инфекции.

2. Изменения активности пирувата изучались не на 5-6 неделях гестации, а на третьем триметре беременности.

3. Контролем, подтверждающим подавление активности пирувата, послужила оценка его Содержания в гомогенате плаценты.

6. Осуществление изобретения

6.1. Обследовано 22 беременных в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на 25-26 неделях гестации и 15 беременных не болевших ЦМВИ. Диагноз обострения ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в РФ, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.2. Статистический анализ и обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ «Statistica v. 6.0» (StatSoft Inc., США). Для определения достоверности различий использовали непарный параметрический критерий Стьюдента. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений - непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни. Критический уровень значимости был принят за 5% (0,05). Данные представлены как среднее арифметическое (M) ± стандартная ошибка среднего арифметического (m).

6.3. Гистохимическая реакция на выявление активности пирувата выполнялась согласно рекомендации Kuwahara, Cogan J. [3].

6.4. Определение содержания пирувата в гомогенате плаценты проводилось по методу Умбрайта [8].

7. Полученные данные

Исследования показали, что при обострении ХЦМВИ на третьем триместре гестации до титра антител к ЦМВ 1:1600 у беременной в гомогенате плаценты содержание пирувата снижалось до 0,015±0,002 ммоль/л (контроль - 0,1 ммоль/л). Одновременно на гистологических срезах после проведение гистохимической реакции, изученной под цифровым микроскопом (Япония), соединенным с компьютером по программе Scion (США) автоматически было отмечено, что содержание пируватдегидрогеназы в плаценте при обострении на третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции до титра антител к ЦМВ 1:1600 снижалось до 35,0±0,95 усл. ед. (контроль - 85,0±1,2 усл. ед.) (фигура 1, 2). Снижение в синцитиотрофобласте и гомогенате плаценты пирувата при обострении цитомегаловирусной инфекции создается угроза нарушения ферментативной активности в плаценте и развития плода.

На фигуре 1 изображена гистохимическая реакция на пируватдегидрогеназу в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты роженицы. Отмечается снижение активности реакции на пируватдегидрогеназу до 35,0±0,95 усл. ед. Реакция выполнена по методу Kuwahara, Cogan. Увеличение 10×100.

На фигуре 2 изображена гистохимическая реакция на пируватдегидрогеназу в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты роженицы не болевшей на всем протяжении гестации. Реакция выполнена по методу Kuwahara, Cogan. Увеличение 10×100.

Литература

1. Березов Т.Т., Коровин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина. 1998. 704 с.

2. Довжикова И.В. Активность пируватдегидрогеназы в плаценте при беременности, осложненной обострением герпетической инфекции // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2008. Вып. 28. С. 17-20.

3. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М.: Мир. 1969. 624 с.

4. Мари Р. Биохимия человека. М.: Мир. 1993. Т. 1. 384 с.

5. Пустовалова Л.М. Основы биохимии. Ростов-на-Дону: Феникс. 2004. 448 с.

6. Радзинский В.Е., Смалько П.Я. Биохимия плацентарной недостаточности. М.: РУДН. 2001. 273 с.

7. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э. Основы биохимии. М.: Мир. 1981. Т. 1. 534 с.

8. Умбрайт Медицинские лабораторные технологии. Санкт-Петербург: Интермедика. 1999. С. 83.

Способ определения угрозы нарушения ферментативной активности в плаценте и развития плода при снижении содержания пирувата на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации, включающий измерение в периферической крови беременных титра антител к цитомегаловирусу, содержания пирувата в гомогенате плаценты, а также цитофотометрический анализ выполненных гистологических срезов плаценты после проведения гистохимической реакции с последующим определением содержания пируватдегидрогеназы, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, снижении содержания пирувата в гомогенате плаценты до 0,015±0,002 ммоль/л и пируватдегидрогеназы до 35,0±0,95 усл.ед. создается угроза нарушения ферментативной активности в плаценте и развития плода.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода в период гестации при снижении количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности.

Изобретение относится к медицине и касается способа диагностики тяжести течения бронхиальной астмы. Способ осуществляют путем выявления пероксидазной активности миоглобина гистохимическим методом после фиксации биоптатов слизистой бронхов в 10% растворе формалина в течение 5 дней, замораживания их и приготовления срезов толщиной 5 мк, которые помещают на 1 мин в бензол и окрашивают 5-8 мин при 80°C в растворе, состоящем из 100 мг бензидина в 0,85% NaCl, раствор охлаждают и фильтруют, добавляют к 9 мл раствора 1 мл 40% раствора хлористого аммония и 1 каплю 3% раствора перекиси водорода, после проведенной реакции срезы споласкивают в 0,85% NaCl и заключают в глицерин-желатину для последующего изучения пероксидазной активности миоглобина по программе «Scion».

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано для внутрипортальной озонотерапии при распространенном перитоните. Озонирование проводят посредством медицинского озонатора с концентрацией озона в озонокислородной смеси не менее 1000 мкг/л.
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и предназначено для персонализированного назначения неоадъювантной химиотерапии (НАХТ) больным люминальным В раком молочной железы.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики псориаза. Сущность способа состоит в том, что он включает исследование показателей системы свертывания крови и тромбообразования пациента: скорость роста сгустка крови, и/или задержку роста сгустка, и/или начальную скорость роста сгустка, и/или стационарную скорость роста сгустка, и/или размер сгустка.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки литогенности желчи, включающий определение в желчи у обследуемого (i) показателей холестерина (ХС, ммоль/л) в сравнении со средними значениями, принятыми за норму (k), отличающийся тем, что в желчи определяют комплекс общих липидов (ОЛ, г/л), суммарную антиокислительную активность (АОА) электрохимическим методом (в нА·с), максимум вспышки хемилюминесценции (МВХЛ, в усл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования чувствительности к химиотерапии у больных с лимфопролиферативными заболеваниями. Сущность способа состоит в том, что в сыворотке крови определяют количественные уровни маркеров тимидинкиназы-1 (TK-1) и β2-микроглобулина (β2-МГ), а также после первого курса химиотерапии активность TK-1.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике и гепатологии во внутренних болезнях, и может быть использовано для оценки состояния печени у больных хроническим вирусным гепатитом С.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки индивидуального генетического риска атеросклероза. Осуществляют взятие крови, выделение ДНК и генотипирование митохондриальной ДНК.

Изобретение относится к области медицинской диагностики. Предложен способ прогнозирования характера поражения желчного пузыря у женщин, больных хроническим калькулезным холециститом, русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России.

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способу определения малонового диальдегида в вегетативных органах черешни, винограда, ореха грецкого и проростках озимой пшеницы. Для этого проводят экстракцию биологического материала 96% спиртом и с последующим центрифугированием. Далее супернатант обрабатывают 0,5%-ным водным раствором тиобарбитуровой кислоты и инкубируют 30 мин при 50°C. После охлаждения реакционную смесь центрифугируют. Содержание малонового диальдегида определяют методом капиллярного электрофореза в кварцевом капилляре с внутренним диаметром 75 мкм и эффективной длиной 0,5 м. Анализ проводят при длине волны 254 нм в токе электролита, содержащего 0,33% масс. борной кислоты и 0,05% масс. тетрабората натрия при положительной полярности напряжения. Расчет проводят с учетом того, что на одну молекулу малонового альдегида расходуется две молекулы тиобарбитуровой кислоты. Изобретение позволяет проводить количественное определение концентрации малонового диальдегида, который служит маркером оксидативного стресса растений. 1 табл., 4 ил., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки появления признаков позднего токсикоза. Способ включает определение содержания магния в эритроцитах периферической крови и при снижении его до 0,402±0,002 ммоль/л появляются на 7 месяце гестации признаки позднего токсикоза.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ определения обсемененности полости рта уреазопозитивной микробиотой, отличающийся тем, что проводят определение уреазной активности следующим образом: в одну из лунок микропланшета вносят водный раствор мочевины с фосфатным буфером, в две другие вносят водные растворы мочевины с фосфатным буфером, содержащие уреазу с известной концентрацией 5 и 10 Ед/л соответственно, а в остальные лунки вносят водный раствор мочевины с фосфатным буфером и образцами ротовой жидкости, затем во все лунки вносят фенол/нитропруссидный реагент и гипохлорит, после чего измеряют оптическую плотность на микропланшетном ридере при длине волны 546 нм и рассчитывают концентрацию уреазы в образцах ротовой жидкости в Ед/л, при значении уреазной активности выше 15,85±2,11 Ед/л регистрируют обсемененность полости рта уреазопозитивной микробиотой. Осуществление изобретения позволяет выявить необходимость противомикробной терапии для профилактики образования твердых зубных отложений и воспалительных заболеваний пародонта. 2 пр.

Группа изобретений относится к области медицины и иммунологии. В частности, группа изобретений относится к способам иммунологической диагностики, включающим применение как нативной молекулы, так и пептидных последовательностей фрагментов плазминогена, которые могут быть использованы в качестве универсальной системы детекции продуктов протеолиза с образованием на COOH-концах пептидной цепи лизина при проведении анализа для выявления у человека заболеваний, ассоциированных с повышенной активностью протеолитических ферментов. Группа изобретений касается также тест-системы, содержащей в качестве детектора как нативную молекулу, так и указанные пептидные последовательности. Технический результат заключается в достижении необходимой степени диссоциации комплекса антиген-антитело, присутствующего в образце, взятом у субъекта, а также в изменении конформации белков, что, в свою очередь, позволяет существенно повысить чувствительность метода определения уровня протеолитических фрагментов с C-концевым лизином, способных связываться с плазминогеном или его фрагментами. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ). У индивидуумов русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья России, из периферической венозной крови выделяют ДНК, после чего проводят анализ полиморфизмов генов TNFα, Ltα, TNFR1 и TNFR2. Среди индивидуумов без сопутствующей патологии глаз в случае выявления комбинации -308G TNFα и +1663G TNFR2 либо комбинации +36G TNFR1 и +1663G TNFR2 или при наличии сопутствующей патологии глаз как миопия, катаракта или возрастная макулярная дегенерация сетчатки в случае выявления +36A TNFR1 либо комбинации +36AA TNFR1 и +1663A TNFR2 либо +250G Ltα и +36AA TNFR1 прогнозируют повышенный риск развития ПОУГ. У индивидуумов с сопутствующей патологией глаз при выявлении +250A Ltα и +36G TNFR1 либо -308G TNFα и +36G TNFR1 прогнозируют низкий риск развития ПОУГ. Изобретение обеспечивает раннее выявление больных с ПОУГ, что позволит предупредить прогрессирование заболевания. 6 ил., 2 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска неблагоприятного исхода послеоперационного течения перитонита, осложненного абдоминальным сепсисом, заключающийся в определении и оценке активности фактора Виллебранда, отличающийся тем, что дополнительно определяют и оценивают активность факторов свертывания крови VIII и V, уровень фактора Виллебранда, время Хагеман - зависимого лизиса, активность естественных антикоагулянтов - протеина С и антитромбина на 1-е, 3-и и 7-е сутки после хирургического вмешательства и при увеличении значений 5-ти и более из перечисленных факторов системы гемостаза, по сравнению с предыдущими результатами, прогнозируют высокий риск неблагоприятного исхода послеоперационного течения перитонита, осложненного абдоминальным сепсисом, 4-х факторов - умеренный риск, от 1-го до 3-х - низкий риск. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности и чувствительности способа прогнозирования. 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и представляет собой способ прогнозирования риска развития хронического калькулезного холецистита (ХКХ) у мужчин русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья России, включающий забор крови, отличающийся тем, что после выделения ДНК из периферической венозной крови методом фенольно-хлороформной эстракции проводят анализ полиморфизмов генов интерлейкинов IL-1А -889Т>С, IL-1В -511С>Т, IL-4 -584С>Т, IL-5 -703С>Т и прогнозируют повышенный риск развития ХКХ в случае выявления генетических вариантов -511Т IL-1В, -511ТТ IL-1В, либо комбинации аллелей -889T IL-1А, -511T IL-1B и -703С IL-5, либо комбинации аллелей -511Т IL-1В и -703С IL-5, либо комбинации аллелей -889Т IL-1А, -511Т IL-1В и -584Т IL-4, либо комбинации аллелей -889T IL-1А и -511T IL-1B, прогнозируют низкий риск развития данного заболевания у мужчин в случае выявления генетического варианта -511СС IL-1В. Изобретение обеспечивает расширение арсенала способов прогнозирования риска развития ХКХ у пациентов мужского пола. 6 ил., 7 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ) с неэффективным местным гипотензивным лечением. Из периферической венозной крови индивидуумов русской национальности уроженцев Центрального Черноземья выделяют ДНК и проводят анализ полиморфизмов генов VEGF-A с.-958 С>Т (rs833061) и IGFR-1 g.99181663 С>Т (rs4965425). При выявлении аллеля Т IGFR-1 или сочетания аллеля С VEGF-A с аллелем Т IGFR-1 прогнозируют повышенный риск развития ПОУГ с неэффективным местным гипотензивным лечением. Изобретение обеспечивает получение новых критериев оценки риска развития ПОУГ с неэффективным местным гипотензивным лечением у индивидуумов русской национальности уроженцев Центрального Черноземья. 4 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной биологии и онкологии, и предназначено для прогнозирования развития острой почечной недостаточности (ОПН) после кратковременной ишемии почки. Из тканевых проб почки до ишемии выделяют тотальную РНК, получают кДНК, осуществляют амплификацию в режиме реального времени и рассчитывают относительную экспрессию генетических локусов CASP3, CASP8, CASP9 и АСТВ. При уровне относительной экспрессии генов RECASP3=(3,17±0,9)*10-2; RECASP8=(5,87±0,8)*10-2 и RECASP9=(4,34±1,6)*10-2 в ткани почек прогнозируют развитие ОПН в послеоперационный период. При уровне RECASP3=(6,08±1,2)*10-2; RECASP8=(15,87±3,6)*10-2 и RECASP9=(29,26±9,5)*10-2 прогнозируют благоприятный послеоперационный период. Изобретение позволяет осуществить ранний прогноз осложнений развития ОПН у больных, перенесших лапароскопическую резекцию почки в условиях тепловой ишемии. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки микробного спектра эндометрия для этиологической диагностики хронического эндометрита (ХЭ), заключающейся в том, что производят забор фрагмента слизистой оболочки полости матки, далее методом ПЦР в реальном времени количественно оценивают значение контроля взятия материала, при снижении данного показателя ниже 104 ГЭ/образец результат считают недостоверным, общей бактериальной массы, положительный результат при значении более 103 ГЭ/образец, определяют количество геном-эквивалентов микроорганизмов и сравнивают его с пороговым значением (ПЗ), применяя диагностическую панель, включающую Lactobacillus spp., абсолютно- или условно-патогенные микроорганизмы, такие как Eubacterium spp., Enterobacteriaceae, Escherichia coli, Streptococcus spp., Streptococcus agalactiae, Staphylococcus spp., Staphylococcus aureus, Enterococcus spp., Peptostreptococcus spp., Prevotella bivia/Porphyromonas spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae, Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp., Candida spp., Trichomonas vaginalis, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Herpes simplex 1 и 2 типов, Cytomegalovirus; при выявлении абсолютно- или условно-патогенных микроорганизмов в количестве, превышающем пороговое значение, делают заключение о потенциальном значении данного микроорганизма в этиологической диагностике хронического эндометрита. Предложенный способ позволяет в течение 1-2 суток качественно и количественно охарактеризовать микробный спектр в слизистой оболочке полости матки у женщин, что повышает точность этиологической диагностики ХЭ. 4 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для определения угрозы нарушения ферментативной активности в плаценте и развития плода при снижении содержания пирувата на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови беременных измеряют титр антител к цитомегаловирусу, содержание пирувата в гомогенате плаценты, после чего выполняют цитофотометрический анализ выполненных гистологических срезов плаценты после проведения гистохимической реакции с последующим определением содержания пируватдегидрогеназы, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, снижении содержания пирувата в гомогенате плаценты до 0,015±0,002 ммольл и пируватдегидрогеназы до 35,0±0,95 усл. ед. создается угроза нарушения ферментативной активности в плаценте и развития плода. Способ позволяет оценить угрозу нарушения функционирования плаценты в целом и развития плода. 2 ил.

Наверх