Вакцина против ящура и способ её получения и применения



Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения
Вакцина против ящура и способ её получения и применения

 


Владельцы патента RU 2617043:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" (ФГБНУ ВНИТИБП) (RU)

Группа изобретений относится к медицине, а именно к биотехнологии и иммунологии, и может быть использована для получения вакцины против ящура. Вакцина включает вирусный антиген ящура, гидроокись алюминия, сапонин и в качестве адъюванта дополнительно используют натриевую соль сукцината хитозана при следующем соотношении компонентов, мас.%: сапонин 0,25-0,75, натриевая соль сукцината хитозана 05,-1,5, гидроокись алюминия в гликолевом буфере с рН 7,-8,6 15,0-25,0 и вирусный антиген ящура – остальное. Группа изобретений относится также к способу получения вакцины против ящура. Использование данной группы изобретений позволяет повысить иммуногенность целевого продукта при вакцинации животных от ящура. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 9 пр., 1 табл.

 

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано при изготовлении вакцины против ящура.

Известен способ изготовления вакцины против ящура типа О, включающий культивирование вирусного антигена в суспензионной культуре клеток ВНК-21 в течение 10-15 часов при 36-37°C, причем культивирование прекращают при достижении количества мертвых клееток 90-95%, после чего вирус ящура подвергают инактивации, очищают от балластных примесей, концентрируют полученный антиген и соединяют концентрат антигена с адъювантом. Вакцина, полученная данным способом, содержит авирулентный и очищенный антигенный материал в виде иммуногенных компонентов (146S+75S) вируса ящура типа О, гель гидроокиси алюминия, сапонин и поддерживающую среду (патент РФ №2212895, МПК A61K 39/135, C12N 7/00, 27.09.2003).

Недостатком известного способа изготовления вакцины является негарантированный уровень полученного антигенного материала в связи с оценкой его количества методом определения (146S+75S)-компонентов, т.к. капсид вируса 75S, как неполная структура антигена, склонна к разрушению до капсомеров 12S при температурных колебаниях и других физико-химических факторах.

Известны также вакцина и способ изготовления вакцины против ящура, включающий культивирование вирусного антигена в суспензионной культуре клеток ВНК-21 при температуре 36-37°C, очистку вирусной суспензии от балластных примесей, инактивацию, концентрирование полученного антигена вируса ящура и соединение концентрата антигена с адъювантом, причем, начиная с 6-8 часов культивирования вирусного антигена, через каждые 2 часа определяют процент мертвых клеток, и при достижении его уровня 95% и выше осуществляют дальнейшее культивирование в течение 2-8 часов в зависимости от типа вируса (патент РФ №2332233, МПК A61K 39/135, Бюл. №24, 27.08.2008).

Недостатком известного технического решения является не только недостаточная иммуногенность целевого продукта, но и то, что при изготовлении вакцины не учитывается показатель специфического местного иммунитета.

Задачей предлагаемого изобретения является повышение эффективности предложения за счет повышения его иммуногенности и снижения заболеваемости сельскохозяйственных животных.

Поставленная задача решается в вакцине против ящура, включающей вирусный антиген ящура, гидроокись алюминия и адъювант - сапонин тем, что в качестве адъюванта дополнительно используют натриевую соль сукцината хитозана при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Также поставленная задача решается в вакцине против ящура, включающей вирусный антиген ящура, гидроокись алюминия и адъювант - сапонин тем, что в качестве вируса ящура используют вирус ящура типа А штамм А22 №550.

Также поставленная задача решается в вакцине против ящура, включающей вирусный антиген ящура, гидроокись алюминия и адъювант - сапонин тем, что в качестве вируса ящура используют вирус ящура типа О штамм O1 Manisa или штамм O1 №1618.

Также поставленная задача решается в вакцине против ящура, включающей вирусный антиген ящура, гидроокись алюминия и адъювант - сапонин тем, что в качестве вируса ящура используют вирус ящура типа Азия-1 штамм Шамир.

Также поставленная задача решается в способе получения вакцины против ящура, включающем культивирование вирусного антигена в суспензионной культуре клеток, очистку вирусной суспензии от балластных примесей, инактивацию, концентрирование полученного антигена вируса ящура гидроокисью алюминия и соединение концентрата антигена с адъювантом - сапонином, отличающемся тем, что культивирование вирусного антигена проводят в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13, а в качестве адъюванта используют смесь натриевой соли сукцината хитозана и сапонина.

Также поставленная задача решается в способе применения вакцины против ящура, включающем вакцинацию в вакцинальной дозе антигенного материала, тем, что вакцинирование проводят смесью вакцин, одна из которых содержит антиген, изготовленный на основе вируса ящура, распространенного в регионе применения вакцины, а другая - антиген, изготовленный на основе вируса ящура, распространенного в пограничном районе региона применения ее, взятых в соотношении 1:0,1-0,2 соответственно, в суммарной дозе антигенов - 7-10 мкг, а при ревакцинации через 7-8 суток используют половину вакцинальной дозы.

Культура клеток ВНК-21-13-13 известна (патент №2553552, «ВНК-21/13-13-перевиваемая монослойно-суспензионная сублиния клеток почки новорожденного сирийского хомячка, предназначенная для репродукции вируса ящура и вируса бешенства», МПК C12N 5/071, опубликовано 20.06.2015 Бюл. №17).

Штаммы вируса ящура типа А (штамм А22 №550), типа О (штамм O1 Manisa или штамм O1 №1618) и типа Азия-1 (штамм Шамир) известны (патент РФ №2332233, МПК A61K 39/135, опубликовано 27.08.2008, Бюл. №24).

В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, содержащие признаки, аналогичные заявляемым предложениям, т.е. предложенные технические решения соответствует критерию «новизна» и «изобретательский уровень».

Все режимы способа осуществимы в лабораторных и промышленных условиях, направлены на решение реальной технической задачи, т.е. предложение «промышленно применимо».

Пример 1. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура А22 №550, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 36°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 95% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 2 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура А22 №550 добавляют 12% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 7,4 до конечной концентрации 15%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас. %:

Полученную вакцину 1 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Пример 2. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура А22 №550, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 37°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 98% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 1,5 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура А22 №550 добавляют 15% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 8,6 до конечной концентрации 25%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Полученную вакцину 2 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Пример 3. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура O1 Manisa, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 36°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 95% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 2 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура O1 Manisa добавляют 12% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 7,4 до конечной концентрации 15%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Полученную вакцину 3 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Пример 4. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура O1 Manisa, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 37°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 98% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 1,5 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура O1 Manisa добавляют 15% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 8,6 до конечной концентрации 25%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Полученную вакцину 4 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Пример 5. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура O1 №1618, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 36°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 95% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 2 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура O1 №1618 добавляют 12% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 7,4 до конечной концентрации 15%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Полученную вакцину 5 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Пример 6. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура O1 №1618, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 37°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 98% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 1,5 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура O1 №1618 добавляют 15% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 8,6 до конечной концентрации 25%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Полученную вакцину 6 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Пример 7. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура Шамир, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 36°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 95% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 2 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура Шамир добавляют 12% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 7,4 до конечной концентрации 15%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Полученную вакцину 7 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Пример 8. Для изготовления моновалентной вакцины используют вирус ящура Шамир, который культивируют в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13 при температуре 37°C. Через 6 часов культивирования осуществляют отбор проб через каждые 2 часа и подсчитывают живые и мертвые клетки. При достижении количества мертвых клеток более 98% отбор проб прекращают, а культивирование осуществляют еще в течение 1,5 часов.

После накопления необходимого количества вирусную суспензию подвергают сепарированию. К полученному антигену вируса ящура Шамир добавляют 15% гидроокись алюминия в гликолевом буфере с pH 8,6 до конечной концентрации 25%. Полученную вирусную суспензию с гидроокисью алюминия отправляют на инактивацию. Инактивацию осуществляют путем добавления при перемешивании димера этиленимина до концентрации 0,04% и температуры до 30°C. Далее к реакционной среде добавляют сапонин натриевую соль сукцината хитозана в качестве адъюванта, получая вакцину 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Полученную вакцину 8 расфасовывают и проверяют на стерильность, авирулентность, безвредность, иммуногенную активность.

Результаты исследования иммуногенной активности моновалентных вакцин при исследовании на крупном рогатом скоте представлена в данных таблицы 1.

Пример 9. В 30% хозяйствах региона применения вакцины вакцинируют молодняк крупного рогатого скота прививают с 4-х месяцев, молодняк овец и коз - с 3-х месяцев всех клинически здоровых животных, вакцинирование проводят смесью вакцин, одна из которых содержит антиген, изготовленный на основе вируса ящура типа А, в частности штамм А22 №550, распространенного в регионе применения вакцины, а другая - антиген, изготовленный на основе вируса ящура типа Азия-1, в частности штамм Шамир, распространенного в пограничном районе региона применения ее, в частности, взятых в соотношении 1:0,1, соответственно, в суммарной дозе антигенов - 7 мкг, а при ревакцинации через 7 суток используют половину вакцинальной дозы.

Также в 30% хозяйствах региона применения вакцины вакцинируют молодняк крупного рогатого скота прививают с 4-х месяцев, молодняк овец и коз - с 3-х месяцев всех клинически здоровых животных, вакцинирование проводят смесью вакцин, одна из которых содержит антиген, изготовленный на основе вируса ящура типа А, в частности штамм А22 №550, распространенного в регионе применения вакцины, а другая - антиген, изготовленный на основе вируса ящура типа Азия-1, в частности штамм Шамир, распространенного в пограничном районе региона применения ее, в частности, взятых в соотношении 1:0,2, соответственно, в суммарной дозе антигенов - 10 мкг, а при ревакцинации через 8 суток используют половину вакцинальной дозы.

В остальных 40% хозяйствах Дагестана вакцинируют молодняк крупного рогатого скота прививают с 4-х месяцев, молодняк овец и коз - с 3-х месяцев всех клинически здоровых животных. Вакцинирование и ревакцинирование проводят известной вакциной, согласно известной инструкции по применению.

Место инъекции обрабатывают 70%-ным этиловым спиртом или другим дезинфицирующим раствором. Для каждого животного используют отдельную иглу или шприц однократного применения. Каждый флакон перед применением и в процессе вакцинации и ревакцинации необходимо тщательно взбалтывать.

В результате ни в одном из 60% хозяйств, применяющих вакцинирование, согласно заявляемому способу, заболеваний ящура не установлено. В то же время в хозяйствах, использующих известную вакцину, заболевание ящуром установлено.

Таким образом, заявленное предложение позволяет в 1,5-2,3 раз повысить иммуногенность целевого продукта и полностью провести защиту сельскохозяйственных животных от ящура при выявлении в пограничных районах региона применения вакцинирования заболеваний ящуром, вызванных иным штаммом вируса ящура, чем распространенного в регионе применения вакцины.

1. Вакцина против ящура, включающая вирусный антиген ящура, гидроокись алюминия, адъювант – сапонин, отличающаяся тем, что в качестве адъюванта дополнительно используют натриевую соль сукцината хитозана при следующем соотношении компонентов, мас.%:

2. Вакцина по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве вируса ящура используют вирус ящура типа А штамм А22 №550.

3. Вакцина по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве вируса ящура используют вирус ящура типа О штамм O1 Manisa или штамм O1 №1618.

4. Вакцина по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве вируса ящура используют вирус ящура типа Азия-1 штамм Шамир.

5. Способ получения вакцины против ящура по п. 1, включающий культивирование вирусного антигена в суспензионной культуре клеток, очистку вирусной суспензии от балластных примесей, инактивацию, концентрирование полученного антигена вируса ящура гидроокисью алюминия и соединение концентрата антигена с адъювантом - сапонином, отличающийся тем, что культивирование вирусного антигена проводят в суспензионной культуре клеток ВНК-21-13-13, а в качестве адъюванта используют смесь натриевой соли сукцината хитозана и сапонина.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к биохимии. Описан способ выявления контаминации вирусами культуры клеток иммунопероксидазным методом, включающий взаимодействие антигена с мечеными антителами в неинфицированной культуре клеток и учет результатов реакции по интенсивности окрашивания образовавшегося комплекса под микроскопом.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Описан бактериофаг F510/08, имеющий геном, который содержит последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:4.

Изобретение относится к способу получения бактериофага. Способ включает культивирование бактериальных клеток штамма-хозяина при отсутствии посторонней микрофлоры, получение фаголизата, а также очистку фаголизата осаждением и/или фильтрацией.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Описано получение оптимизированных полипептидов HA вируса гриппа H1N1, вызывающих иммунный ответ с широким спектром активности в отношении изолятов вируса гриппа H1N1.

Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования возникновения рецидива вульвы I и II стадии. Предложенный способ заключается в определении в ткани опухоли ДНК вируса папилломы человека методом полимеразной цепной реакции.

Изобретение относится к вирусологии. Предложен аттенуированный штамм «СКА-2015 ВНИИВВиМ» вируса африканской чумы свиней VIII-го серотипа.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения вируса гриппа с моногликозилированным гемагглютинин-антигеном (НА-антиген).

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии. Предложены способы определения биологической активности монокомпонентов в ассоциированных комбинированных ди- и тривакцинах, содержащих вакцинные штаммы вируса кори (Л-16), эпидемического паротита (Л-3) и/или краснухи (Орлов).
Настоящее изобретение относится к способу захвата представляющих интерес вирусоподобных частиц из смеси, включающей разрушенные клетки растений. Способ включает использование расширяющегося слоя адсорбента, содержащего материал смолы, уравновешивание материала смолы при рН 6,0-8,0 и внесение смеси на расширяющийся слой адсорбента для связывания вирусоподобных частиц.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается штамма вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота (ВНД КРС). Описанный штамм выделен от коров, больных нодулярным дерматитом, и депонирован в Коллекции штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером - ВНД КРС/Дагестан/2015 (диагностический).

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается нового штамма вируса ящура Aphtae epizooticae типа А сем. Picornaviridae, рода Aphtovirus, депонированного в коллекции ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером штамм вируса ящура А №2166/Краснодарский/2013 (производственный, контрольный КРС).

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается нового штамма вируса ящура Aphtae epizooticae типа А сем. Picornaviridae, рода Aphtovirus, депонированного в коллекции ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером штамм вируса ящура А №2155/Забайкальский/2013 (производственный).

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии. Вакцина содержит активное вещество и целевые добавки.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается вакцины, содержащей активное вещество и целевые добавки. В качестве активного вещества вакцина содержит смесь из авирулентных очищенных антигенных материалов из штаммов вируса ящура А №2171/Кабардино-Балкарский/2013, А №2187/Кути/2013, Азия-1 №1946/Шамир 3/89 и О №2123/Южная Осетия/2011, полученных в перевиваемой культуре клеток ВНК-21, представляющих собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается нового штамма вируса ящура Aphtae epizooticae типа О сем. Picornaviridae, рода Aphtovirus, депонированного в коллекции ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером вирус ящура штамм О №2108/Забайкальский/2010.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается вакцины против ящура типа А. Охарактеризованная вакцина является инактивированной сорбированной и содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма вируса ящура, депонированного в коллекции ФГБУ “ВНИИЗЖ” под регистрационным номером ВЯ А №2187/Кути/2013 (производственный), адъюванты гидроокись алюминия с сапонином и поддерживающую среду в эффективных соотношениях.

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к вирусологии и биотехнологии. Вакцина содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма вируса ящура А №2171/Кабардино-Балкарский/2013, полученный в перевиваемой культуре клеток ВНК-21, представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура, адъюванты гидроокись алюминия с сапонином и поддерживающую среду в эффективных соотношениях.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии. Предложен штамм вируса ящура Aphtae epizooticae типа А сем.

Настоящее изобретение раскрывает стабильную вакцинную композицию, включающую по меньшей мере один иммуноген, выбранный из инактивированного цирковируса свиней типа 2 (PCV-2), вируса ящура (FMDV) и бактерий; сапонин, гидроксид алюминия, неионные поверхностно-активные вещества с конечным ГЛБ эмульсии от около 9 до около 12.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается штамма вируса ящура Aphtae epizooticae типа А сем. Picomaviridae, рода Aphtovirus.

Изобретение относится к медицине, а именно к биотехнологии и иммунологии, и может быть использовано для получения микрокапсулированной формы живой гриппозной культуральной вакцины против гриппа для интраназального применения. Способ включает получение субстанции вируса гриппа, одновременное введение в вируссодержащую субстанцию отвердителя и водорастворимого заряженного полиэлектролита до конечной концентрации полиэлектролита и отвердителя, не вызывающей разделение фаз в растворе препарата. Дальнейшее получение микрокапсул проводят в результате сложной коацервации заряженного полиэлектролита и отвердителя с образованием комплекса путем замораживания раствора со скоростью 0,1-3,0°C в минуту до температуры ниже температуры стеклования аморфной фазы, оставшейся после кристаллизации льда, и сушки готовых микрокапсул лиофилизацией. Субстанцию вируса гриппа получают со специфической активностью не менее 7,0 lg ЭИД50/0,5 мл в бессывороточной питательной среде, содержащей протеолитический фермент в количестве 0,25-50,0 мкг/мл и стабилизатор пептон из сои в концентрации (0,5-4,0) мас. %. В очищенную субстанцию вместе с полиэлектролитом и отвердителем вводят стабилизирующие добавки пептон из сои и сахарозу, в качестве полиэлектролита используют карбопол, а в качестве отвердителя - желатозу, при следующем количественном содержании компонентов в полученной жидкой субстанции перед началом микрокапсулирования: пептон из сои - (0,007-0,015) г/0,5 мл; сахароза - (0,007-0,015) г/0,5 мл; желатоза - (0,007-0,015) г/0,5 мл; карбопол - (0,00005-0,0001) г/0,5 мл; жидкая питательная среда, содержащая вирус гриппа с титром не менее 107,0 ЭИД50, остальное до 0,5 мл. Использование данного способа получения живой культуральной гриппозной вакцины в микрокапсулах обеспечивает более высокую иммуногенность при интраназальном применении за счет повышения адгезии микрокапсул к слизистой оболочке носа. 2 з.п. ф-лы, 6 пр., 1 табл., 1 ил.
Наверх