Способ получения 9-/2-оксиэтоксиметил/-гуанинфосфатов

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (1ц862828 (61) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 240278 (21) 2585300/23-04 (23) Приоритет — (32) 24,02,77 (31) 771778 (33) (США )

Опубликовано 070981. Бюллетень М 33 (511 М. Кп.з

С 07 F 9/09

A 61 К 31/66

Государстаеииый комитет

СССР ио делам иаобретекий и открытий (53) УДК 5 47. 26

118. 07 (088. 8) Дата опубликования описания 0709.81 (71) Заявитель

"Дзе Иелкам Фаундейшн Лимитед" (Великобритания) (54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 9- (2-ОКСИЭТОКСИМЕТИЛ1—

-ГУАНИНФОСФАТОВ

Изобретение относится к области химии фосфорорганических соединений,. а именно к способу получения новых

9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов общей формулы (I) 10

СН ОСН20Н 0 P ОЕ

0 где W 2 — одинаковые или разные и представляют собой водород или фарма- 15 цевтически приемлемый катион, которые обладают противовирусной активностью и могут .быть использованы для лечения вирусных заболеваний у млекопитающих. 20

Способ получения 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов формулы (Т) в литературе не описан.

Йзвестен способ получения фосфатов, например 2-цианэтилфосфата, пу- 25 тем взаимодеиствия хлорокиси фосфора с нитрилом гидракриловой кислоты.

Реакцию проводят в среде эфира в присутствии пиридина при охлаждении.

Промейуточно образующийся продукт раз-: 30 т лагают путем прибавления его эфирного раствора к смеси водного раствора пиридина со льдом. Целевой продукт

12-цианэ тилфосфат — выделяют в виде кристаллической бариевой соли (выход

60Ъ) E13 ..

Известен способ получения гуанозин-5-фосфата путем фосфорилирования гуанозина хлорокисью фосфора в среде пиридина при температуре от (-40) до (-10)оС (21 .

Однако 9- (2-оксиэ токсиметил ) -гуанинфосфаты Формулы (I) указанными способами получены не были.

Целью изобретения является разработка способа получения новых 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов.

Поставленная цель достигается опи"ываемым способом получения 9-(2-оксиэтоксйметил)-гуанинфосфатов формулы (I), эаключакщимся в том, что 2-оксиэтоксиметилгуанин подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в среде триалкнлфосфата при температуре от (-) 30 до. (+) 25ОС с последующим гидролизом полученного эфирохлорангидркда фосфорной кислоты и выделением целевого продукта в виде кислоты или ее соли.

862828

Фармацевтически приемлемые соли

9-(2-окснэтоксиметил)-гуанинфосфата получают нейтрализацией 9- (2-оксиэтоксиметил) — гуанинфосфата эквимольным количеством основания, например гидроокиси, бикарбоната или карбоната, содержащего- катион натрия, калия, аммония, кальция, лития, магния или алюминия. Вышеуказанные сали можно также получать обменными реакциями, в которых соль 9-(2-.оксиэтоксиметил)-гуанинфосфата обрабатывают водным раствором соли, содержащей необхо димый катион.

Предлагаемый способ позволяет получать 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинФосфата .с выходом до 65%, 15

П р и м е .р 1. Получение 9- (2-окси- э токсиметил) -гуанинфосфата.

0,76 мл хлорокиси фосфора добавляап к перемешиваемой смеси 0,225 г

9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанина и 5 мл 2Q триэтилфосфата, охлажценной до (-) 1dC.

Температуру реакционной смеси поднимают до О С в течение 30 мин и поддерживают в течение 2 ч. Затем полученную смесь выливают в смесь воды и льда и рН среды доводят до 7 2н. водным раствором гидроокиси калия. Полученный раствор дважды экстрагируют хлороформом и один раз эфиром, рН оставшегося водного раствора доводят до 7,1 2н ° водным раствором гидроокиси калия, затем фильтруют. Полученное белое твердое вещество растворяют в 7 мл воды и добавляют 7 мл метанола для осаждения неорганических солей, которые затем отделяют фильтрова.

35 нием. К Фильтрату добавляют 70 мл ацетона, при этом выпадает в осадок белая смола. Ее растворяют в 7 мл воды, добавляют 7 мл этансла и смесь фильтруют. К фильтрату добавляют большой 40 избыток ацетона до 70 мл, и снова смола выпадает в осадок. Эту смолу растворяют в 20 мл этанопа, растворитель .отгоняют и.получают 2,6 г белого порошка, представлякщего собой 45 смесь неорганических солей и целевого продукта. Твердый осадок растворяют в 10 мл воды, обрабатывают на

:колонке с био-. гелем Р-2 (200-4ОО меш, 2,7х90 см) и элюируют водой. Данные . 5р тонкослойной хроматографии на целлюлозе "Истмен Хромаграм" в смеси пропанола и воды (70л30 по объему) )

Rf=0,26 для 9- (2-оксиэтоКсиметил)-гуанинфосфата и RF О 11 для 9- (2У

-оксяэ ток симетил)-гуанинкалийфосфата.

Элюат фильтруют и получают 0,28 г твердого вещества s котором по данным УФ-спектроскопии содержится 0,2г,, целевого продукта. Выход 65%, продукт начинает разлагаться прй 210 С. . Элементарный анализ:

Найдено, В С 31,23; Н, 3,85; .N 23 00 P 10, 09 °

Жючислено, % $ С 31, 49; Н 3,96; и 22,95; P 10, 15., 65

Пример 2. Получение 9- (2-оксиэтоксиметил) -гуанинаиконийфосфата.

0,28 r 9- (2-оксизтоксиметил)-гуанинфосфата растворяют в 30 мл воды и рН раствора доводят до 6 с помощью б г водного раствора соляной кислоты. Продукт сорбируют 14 мл уплотненного угля (Фишер 5-690В, 50 00 меш, прожитый кислотой и дезактивированный топуолом) . Уголь HpoMHBBIoT водой и элюируют 70 мл 50%-ного водного этанала, содержащего 2% концентрированиого раствора гидроокиси аммония. Растворитель отгоняют при пониженном давлении и получают

0,048 г 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинаммонийфосфата, R@=0,30 на целлюлозе Истмена в смеси пропанола и воды (70:30 по объему), выход 15%; продукт начинает разлагаться при 210 С.

Пример 3. Получают таблетки следующего состава, мг:

9- (2-Оксиметоксиметил)—

-гуаниннатрийфосфат 100

Лактоза 200

Крахмал 50

Поливинилпирропидон,5

Стеарат магния 4

Пример 4. Готовят офтальмологический раствор следующего. состава:

9- (2-Оксиэтоксиметил)— гуаниннатрийфосфат 1,0 г .Хлористый натрий (аналитический) 0,9 г

Тимеросал 0,001 г дистиллированная вода До 100 мл рн 5,5-7,5

Пример 5. Готовят раствор дпя инъекций следующего состава.

9- (2"оксиэтоксиметил)-гуаниннатрийфосфат 0,775 r

Стерильный, не содержащий пирогенов, фосфатный буфер c,рН 7 До 25 мл

Пример б, Получение 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуаниндинатрийфосфата.

54 мл хлорокиси фосфора добавляют в течение 3 ч к. перемешиваемой охлажденной от (-30) С до (-20) С смеси

25 г 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанина и 250 мл триэтилфосфата. Температуру реакционной смеси поднимают до О С в течение 45 мин и смесь поддерживают при этой температуре еще 45 мин, затем рН смеси доводят до 1 2н. водным раствбром гидроокиси натрия. Полученный раствор экстрагируют один . раз хлороформом и один раз эфиром. рН оставшегося водного раствора доводят до 6,8 2н..водным раствором гидроокиси натрия, затем - до 7,3 .10н. водным раствором гидроокиси натрия. Конечный объем смеси 2,5 л .

Нейтрализованный раствор вносят в колонку с 2000 г Довекс 1 х 8, уравновешенной 50 ммоль КНСО . Элюирование ведут при линейном градиенте

862828

Формула изобретения

УФ-спектр:

Среда исцс,.

35 . мин

Составитель М. Красновская

Техред С. Мигунова Корректор М. Коста

Редактор Н.Потапова

Заказ 6659/57 Тираж 397

ВНИИПИ Государственного коьктета СССР по делам изббретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Подписное

Филиап ППП "Патент", Г, Ужгород,. ул. Проектная, 4

30 л 50-500 ммоль КНСО> с последующей прожтвкой 30 л 500 ммоль ÊÍÑÎS.

Фракции, содержащие целевой продукт, объединяют, большую часть КНСОэ удаляют добавлением Довекс 50-Н и удалением СО в вакууме. Объем уменьша.ют до 2 л в вакууме и продукт высаживают при 4 С добавлением 10 л ацетона. Высушенный осадок в количестве

55 r вносят в колонку био-гель Р-2

10х110 см и элюируют водой. Получают

22 r твердого вещества. Вещество перекристаллизовывают при 4 С в виде кислой ссди кз раствора с рН 3. Большую часть вещества получают из маточного раствора кристаллизацией из

20%-ного этанола при рН 3, Кислую соль. растворяют в минимальном объеме воды с рН 8,5 (за счет добавления гидроокиси натрия) н осаждают 2 объемами этанола при 4 С. Полученный осадок растворяют в 100 мл воды, 20 осаждают 9 объемами этанола при 4 С и получают 15,1 r дигидрата 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуаниндинатрийфосфата.

Чистоту продукта подтверждают эле- Q5 ментарным анализом, жидкостной хроматографией под давлением и ультрафиолетовым спектром. Найдено Ъг С 25,20; Н 3 63;

И 18,10- P 7,89. 30

СВН1 К501,Р- Q Na ° 1Н О.

Вычислено, Ъ: С 24,949; Н 3,66;. и 18 19) Р 8 04.

0,1 М НС1 254 129.70 225 272 рН 7 209 14060 219 266

О, 1 М NaOH 255-264 11760 228

По жидкостной хроматографии под давлением чистота 99% . Отношение основания к фосфату 1,00:1,01. Выход

35%, размягчение продукта наблюдают вблизи 175оС с постепенным разложением к потемнением прк температуре выше 250 С.

Способ получения 9- (2-оксиэтокскметил}-гуанинфосфатов общей формулы

Ок о н,т к Юи ОМ2Снао-Р-03 где W и 2 — одинаковые илк разные и представляют собой водород или фармацевтическк приемлемый катион, заключающийся втом, что 2-оксиэтоксиметилгуанин подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в среде триалкилфосфата прк температу е от (-) 30 до (+) 25 С с последующим гидролизом полученного эфирохлорангидрида фосфорной кислоты и выделением целевого продукта в виде кислоты или ее сопи.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Пурдела Д., Вылчану Р. Химия органических соединений фосфора.

"Химия", М., 1972, с. 407.

2. Мiche ison А.М.. Todd.8 R HononucIeotides der1ved from Adenosin, Guanosine, Cyti4ine Ond Uridine .

Chem Soc. 1949, 2476-2ф86.