Способ определения этилортотолуидина в биологических жидкостях

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕШШ ЭТИЛ-ОТОЛУВДИНА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ путем добавления к исследуемой пробе окрашиванпоего реагента с последующим фотометрированием полученного окрашенного продукта, о т л и ч а ю щ-и и с я тем, что, с повьвоения чувствительнос.ти способа; в качестве окрашивающего реагента используют аммонийную cojn бис-

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„Я0„„1054786 A 3@п G 01 и 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3358188/28" 13 (.22) 26.. 11. 81 (46) 15 11 83 Бюль 9 42 (72) A.B.Mèõàéëîâ и Н.B.Çàéöåâà (7 1) Пермский политехнический институт (53) 616.07 (088 . 8) (5 б ) 1. Перегуд E хА., Гернет E ..В.

: Химический анализ воздуха промыаленных предприятий. Л., "Химия", 1970, с. 126-127.

2. Быховская М.С., Гинзбург С,Л., ХалиЗова О.Д. Методы определения вредных веществ в воздухе и в других .средах. М., Медгиэ, 1961 с. 166-167. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭТИЛ-ОТОЛУИДИНА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ путем добавления к исследуемой пробе. окрашивающего реагента с последующим фотометрированием полученного окрашенного продукта, о т л и ч а ю щ -a и с я тем, что, с -целью повьиаения чувствительности способа, в качестве . окрашивающего реагента

;:используют аммонийную соль бис-(4-диметиламинофейол -4 (1 -Ф-сап фофенил-3-метилпиразолон- 5 ил f- карбинол, причем рН реакционной средй доводят до 4,5-5,0 добавлением раст-! вора серной кислоты, насиженного хлористым натрием. Ю

1054786

ЮЮ 4«

Заданная концентрация, мг/л

Ошибка определе "ния, В

Определяемая концентрация (средняя пяти определений) мг/л не обнару. 0,0, .жено (b<>bbPOJib)

0 2 0,19

+5,0

«+ 6,0

1,0

1,06

2,0

2,03

«+1, 5

Тираж 873 Подписное

ЭНИИПИ Заказ 9099/52

Филиал ППП "Патент", г.ужгород,ул.Проектная,4

Изобретение относится к медицинской токсикологии и может быть использовано, в частности, в санитарной токсикологии для количественного определения этил-о-толуидина. .Известен способ ойределения ароматических аминов в воздухе, включающий реакцию азосочетания диазотированного амина в щелочной среде.с . p-Hàôòîëîì и фотометрирование образующегося при этом окрашенного продукта (13.

Известен способ определения в крови первичных аминов, включающий предварительную подготовку отобранного для анализа материала, обработку 3%- 15 ным раствором фенола и гипохлорита натрия, фотометрирование полученного окрашенного продукта (2).

Однако известный способ не обеспечивает высокую чувствительность опре-20 деления этил-о-толуидина.. . Цель изобретения — повышение чувствительности способа.

Поставленная цель достигается тем, что при осУществлении способа определения этил-о-толуидина в биологических жидкостях путем добавления к исследуемой пробе окрашивающего реагента с последующим Фотометрированием полученного окрашенного продукта в качестве окрашивающего реаген-та. используют аммонийную соль бисвЂ(4-диметиламинофенол -4-(1- -сульфоI S фенил-ЗмЬтилпиразолон-5-ил)-карбинол, 1 причем рН реакционной среды доводят до 4,5-5,0 добавлением раствора серной кислоты, насыщенного хлористым натрием.

Способ осуществляют следующим образом.

К 1 мп исследуемой пробы (после 40 предварительной подготовки биологического материала.для анализа ) добавляют 1 мл 0,02%-ного раствора красителя бис-(4-диметиламинофенол)-4 -(у- -сульфофенил-3-метилпиразолон 45

-5-ил )-карбинол (Аминон ) и 1 мя

105-Horo раствора серной кислоты, насыщенного хлористым натрием. Затем прибавляют 3 мл хлороформа и содержимое интенсивно встряхивают в те- 50 чение 5 мин. Смеси дают отстояться до полного расслоения хлороформа..

Слой хлороформа сливают s пробирку.

- Через 20-25 мин измеряют оптическую плотность окрашенного раствора на спектрофотометре при длине волны 475 нм, толщине поглбщающего слоя

1 см.

При концентрациях Зтил-о-толуиДина в.диапазоне- 0,1 - 3,0 мг7Гнаблюдается линейная зависимость оптической плотности от концентрации этил-отолуидина. Минимальная концентра иия. которую можно определять, 0,1 мг/л. и р и м е р. Анализируют пробы крови с содержанием этил-о-, толуидина 0,0, 0,2„ . 1,0, 2,0 мг/л. К 2 мл исследуемой крови добавляют 1 м

10Ъ-ного раствора трихлоруксусной кислоты для осаждения белков.

Полученный раствор центрифугируют и к 1 мл надосадочной жидкости добавляют 1 мл 0,02%-ного раствора красителя Аминов, 1 мл 10%-ного раствора серной кислоты, насыщенного хлористым натрием, до создания оптимальной реакции среды в пределах рН 4,5-5,0. При других величинах рН наблюдается уменьшение чувствительности способа. Смесь тщатель « но перемешивают. Затем добавляют

3 мл хлороформа и содержимое интенсивно встряхивают s течение .5 мин.

Смеси дают отстояться до полного расслоения хлороформа. Слой хлороформа сливают в пробирку. Через

20 мин проводят измерение оптической плотности окрашенного раствора на спектрофотометре при длине волны 475 нм и толщине поглощающего слоя 1 см, Результаты анализов рредставлены в таблице.

Из таблицы видно, что собственные, амины биологического происхождения не влияют на определение этол-о-толу« идина предложенным способом.

Способ позволяет повысить Чувствительность определения этил-отолуидина в. биологических жидкостях

rio сравнению с известным в 10 раз (0 1 против 1.,0 мг/л ).