ДИМЕ ТИЛ-З, 5-ДИЭТОКСИКАРБОНИЛ-1, 4ДИГИДРОПИРИДИН, ОБЛАДАЮЩИЙ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ.. (57) 4-(3 -Метилпиразолил-4;)-2,6I ( диметил-3, 5-диэтоксикарбонкп-1,4дигидропиридин формулы.

Н5С ООС

Н5 н с х

H обладающий гепатопротекторной активностью.

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3652451/23-04 (22) 20.10.83 (46) 23.03.86. Бюл. У 11 (71) Ордена Трудового Красного Знамени институт органического синтеза

АН ЛатвССР (72) Б.С.Чекавичус, А.Г.Одынец, А.Э.Саусинь, Г.Д.Тирзит, Д,А.Берзиня, Г.Я.Дубур и А,А.Кименис (53) 547.822.1.03 (088.8) (56) Майоре А.Я., Зариня Л.А., Дубур Г.Я., Берман Э.С. Действие антиоксиданта этидина на пораженную сернокислым гидразином печень крыс.

Изв. АН ЛатвССР, 1972, К 7, с.107112.

Патент ФРГ N 3022030, С 07 D 417/04, опублик.1981.

U.Risner, J.Kuthan, The Chemistry of Dihydropyridines. Chem.Rev.

1972, vol.72, р.1, М.А.Kira, МЛ.Afoul вЂ” Enein., М.J.Korkor. The Vilsmeier вЂ” Haack

Reaction, П .Reaction of Phosphorus

Oxychloride вЂ” Dimethylformamidå

with SemicarÚasonås. Т.Heter.

Chem,1970, vol.7, р.25-26. (594; С 07 D 211/90, 401/02, А 61 К 31/44 р c, °

1125957 2

Изобретение относится к новым химическим соединениям, конкретно

I / к 4-(3 -метилпиразолил-4 )-2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4дигидропиридину формулы

Н5С200С

2Н

HzC !

Н обладающему гепатопротекторной активностью, Указанное свойство позволяет предполагать возможность применения его в медицине.

Известен 2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин

;(этидин), обладающий гепатопротектор ной активностью.

Наиболее близкими по структуре

К предлагаемому соединению являются

4-имидазолил и 4-тиазолил-3,5-диалкоксикарбонил-),4-дигидропиридины, обладают кардиоваскулярной активностью.

Цель изобретения вЂ” изыскание в ряду 1,4-дигидропиридинов новых веществ, обладающих высокой гепатопротекторной активностью.

Цель достигается описываемым

4-(3 -метилпиразолил-4 )-2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4дигидропиридином приведенной форму" лы 1, обладающим гепатопротекторной активностью. Укаэанное соединение получают по известной методике конденсацией этилового эфира ацетоуксусной кислоты с 3-метил-4-формилпиразолом и аммиаком в подходящем органическом растворителе при . повьппенной температуре.

Исходный 3-метил-4-формилпиразол получают из семикарбазона ацетона.

П Р и м е р. 4-(3 -Метилпиразолил-4 )-2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-!,4-дигидропиридин (1).

3 г (0,03 моль) 3-метил-4-формилпиразола, 7,8 r (0Ä06 моль) этилового эфира ацетоуксусной кислоты и 7,5 г (0,225 моль) 25%-ного водного аммиака растворяют в 20 мл этаиола и кипятят 5 ч. Охлаждают, фильтруют, осадок промывают эфиром и кристаллизуют из. 50% этанола. Получают

2,25 г (25%) бесцветных кристаллов о соединения 1 с т.пл. 214-215 С.

Найдено,%: С 60,9, Н 6,9,N 12,9.

Вычислено,%: С 61,2, Н 7,0, N )2,6.

С 17 H23N504

10 УФ вЂ” спектР (в С Н ОН),Я мах нм (1gE): 245 (4,25), 270 (3,98), 357 (3,90), ИК-спектр (в нуйоле), см (% поглощения): 3355 (84), 3260 (72), 15 1698 (91), 1680 (91), 1630 (83).

Спектр ПМР (в (СН ) BO-d4 ), о, м.д.: l, 15 (6 Н, т, OCH СН э), 2,13 (6 Н, с, 2,6.-СН 1), 2,22 (3 Н, с, 3 -СН ), 4,00 (4Н, кв, 20 ОСН СН5), 4,68 (1 Н, с, 4-Н), 7,04 (1 Н, с, 5 -Н), 7,71 (l Н, с, NH пиридина), 12,0 (1 Н, с, NH пиразола).

Гепатопротекторная активность

25 соединения 1 изучена в опытах in

vitro u in vivo на модели поражения печени крыс, вызванного четыреххлористым углеродом. В качестве пре. . паратов сравнения в опытах in vitro использовали глутатион, витамин Е, цистеамин и этндин> в опытах 1п

vivo вЂ” витамин Е и этидин, Опыты проводили на белых беспородных крысах вЂ” самцах массой 180-220 r.

В опытах in vitro гомогенизирова35 ли печень крыс, полученный гомогенат центрифугировали и супернатант в количестве, содержащем 3,0 мг белка, вносили в инкубационные сосуды. Во

40 все пробы добавляли 0,2 мкМ НАДФН.

В отдельные пробы вносили СС14 (10 мкм ) и одно из исследуемых веществ: .глутатион вЂ” 0,4 мкМ, витамин Е, цистеамин, этидин и соединение 1 10 MKM. Пробы инкубировали

45 при 37 С в течение 40 мин при пере

О мешивании. Оценку перекисного окисления липидов (ПОЛ) проводили путем определения малонового диаль50 дегида (МДА) . При добавлении в инкубационную среду CC) наблюдалось резкое усиление процессов ПОЛ вЂ” количество МДА увеличивалось в 3 раза.

Внесение в инкубационную среду, содержащую СС1,, исследуемых соеди55 кении предотвращало усиление ПОЛ (табл.)).

В скобках указано число экспериментов.

Т а б л и ц а 1

Действие исследуемых соединений на прооксидантный эффект четыреххлористого

r углерода в опытах, in virroСхема эксперимента

М + tn, нМ/мг белка мин о

100

Контроль

6,0 0,6 (30)

18,9+1,0 (30)

4,4+0,5 (8)

4,1+0,7 (5) 4,7+0,3 (5)

4,4 0,4 (20) CCI

314

CCl + глутатион

CC1 + витамин Е

ССI + цистеамин

СС1! + этидин

CCl + соединение

5,510 р 6 (5) 91 х) Достоверно по отношению к контролю. хх1 Достоверно по отношению к CCI< .

В скобках указано число экспериментов, В опытах in vivo СС1 инъециро вали внутрибрюшинно в дозе 0,5 мл/кг в виде IOX раствора в оливковом масле. Исследуемые соединения вводили перорально в виде водной суспензии с добавлением твина-80 в дозе

200 мг/кг дважды вЂ” за 1 и 24 ч до инъекции CCIg . Контрольным животным вводили 4,5 мл/кг оливкового масла и водный раствор твина-80. Животных забивали декапитацией через 24 ч после введения ССI ..

Через 24 ч после введения СС1 в сыворотке крови наблюдается резкое усиление активности аланинами- нотрансфераэы (АлАТ) и аспартатаминотрансфераэы (АсАТ) (табл.2), что указывает на серьезные повреждения печени, связанные с деградацией мембран гепатоцитов. Значительно уменьшается величина коэффициента де Ритиса, отражающего соотношенйя активности АсАТ и АлАТ. В печени наблюдается уменьшение количества белка и цитохрома P-450 (табл.3).

/ °

Применение витамина Е, этидина соединения 1 предотвращает существенное изменение биохимических показателей сыворотки крови. Соедине ".

125957 4 ние 1 достоверно снижает уровень активности АлАТ и АсАТ, улучшает коэффициент де Ритиса, а также досто" ,верно препятствует снижению количества цитохрома P-450 в печени.

Соединение 1 улучшает большинство биохимических показателей сыворотки крови и печени при поражении четыреххлористым углеродом в боль1О шей степени, чем витамин E.и этидин..

Острая токсичность исследована при внутрибрюшинном введении белым мышам-самцам. ЛД, для соединения

1 составляет 1350 (1000-1822) мг/кг. ц Таким образом, выявлено положительное действие соединения I на структурно-функциональные нарушения в печени, вызванные..четыреххлориотым углеродом. По гепатопротектор" ур ному действию соединение l значительно превосходит этидин-соединение того же химического класса.

Низкая токсичность и высокая ге.

В патопротекторная активность 4- (3! \

25 метилпиразолил-4 ) -2,6-диметил"

3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропнридина указывают на возможность его практического применения в медицине для лечения и профилактики заболеваний печени.

1125957

Таолица2 Активность сывороточных алайин" и аспартатамннотрансферазм через 24 ч после. введения СС1 и предварительного введения нсследуеьанс соединений ч»

Схема зкспери- Колнчестмнта во иивотнълс

АлАТ АсАТ

Коз!Ьфициент де Ритиса щ, ед. Х М +in, ед

АсАТ/АпАТ

100 1,45310,099

I76 0,851+0,025.

14I 0,908+0,110

167 0,870+0,023

14 I.64 0,Il

4 е67+Ое07

100 1,25g0.07

285 3,96 0,10