Способ моделирования бактериальной инфекции на фоне ожоговой травмы


 


Владельцы патента RU 2530564:

Козлов Леонид Борисович (RU)
Сахаров Сергей Павлович (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения бактериальной инфекции на фоне ожоговой травмы. Способ заключается в том, что в качестве экспериментальной модели используют кроликов, которых в течение месяца содержат при температуре воздуха 24-26°C и кормят пищей, богатой злаками и древесиной. Затем под наркозом кроликам наносят ожог площадью 10-20% площади тела животного. Смесь культурабельных бактерий Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus в концентрации 105-106 микробных клеток в общем объеме 1 мл смешивают с равным количеством 1% раствора фермента β-амилазы при температуре 24-26°C. Через 30 минут полученную взвесь вводят кроликам подкожно в объеме 1 мл смеси, учет развития бактериальной инфекции у экспериментальных животных проводят в течение 21 дня. Способ позволяет моделировать процесс в виде острой генерализованной инфекции, при которой вегетативные формы бактерий наиболее чувствительны к повреждающим воздействиям, что создает условия для разработки эффективных методов лечебно-профилактических мероприятий, направленных на ограничение инфекционных заболеваний. 2 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патогенеза инфекционного процесса на фоне ожоговой травмы с целью разработки эффективных лечебно-профилактических и противоэпидемических мероприятий, направленных на ограничение циркуляции возбудителей инфекционных заболеваний в лечебно-профилактических учреждениях.

Установлено, что при бактериальной инфекции, вызванной культивируемыми бактериями, частота летальных исходов ожоговой болезни зависит от площади пораженной поверхности, так при ожогах площадью до 20% летальность составляет 12%, а при ожогах площадью более 40%-56,6% случаев [Сахаров С.П. Летальные исходы ожоговой болезни у детей / С.П. Сахаров, В.В. Иванов, Н.П. Шень Н.П. и др. // Скорая медицинская помощь. - 2011. - №3. - С 52-57]. Известно, что 80% всех инфекционных заболеваний вызывают микробы, образующие биопленки. Биопленки обеспечивают длительное сохранение бактерий в организме, а под влиянием различных факторов бактерии в макроорганизме могут освобождаться от биопленок и вызывать генерализованный инфекционный процесс. В биопленках бактерии не чувствительны к различным химиотерапевтическим препаратам, могут длительно сохраняться в организме, вызывая латентное или хроническое течение инфекционного заболевания. В различных стадиях инфекционного процесса бактерии вне биопленок более чувствительны к химиотерапевтическим и антибактериальным препаратам и поэтому имеется возможность инактивировать инфекционный агент с помощью известных химиотерапевтических препаратов. Так, Рейд Дэйвид [Патент RU 2478385 от 21.05.2008] разработал способ лечения хронического заболевания - муковисцидоз, вызываемого Pseudomonas aeruginosa, при использовании препаратов, препятствующих образованию биопленок бактериями P. aeruginosa с последующим применением антибиотиков.

Биопленки образуют бактерии семейства Enterobacteriaceae, Staphylococcus spp., Sreptococcus spp., Enterococcus spp., Actinomyces spp., Pseudomonas spp., Haemophilus spp.[Сидоренко С.В. Роль бактериальных биопленок в патологии человека. Инфекции в хирургии. 2004; т.2. - №3. - С.16-19]. Установлено, что среди возбудителей инфекционных заболеваний, вызывающих образование биопленки, наибольшее клиническое значение имеют P. aeruginosa, S. aureus и К. pneumoniae, вызывающие прогредиентное течение инфекционных заболеваний [Воробєй С.С, Воронкова О.С, Вiннiков А.I. Бактерiальнi бiоплiвки. Quorum sensing - «Вiдчуття кворуму» у бактерiй в бioплiвках // Вiсник Днiпропетровського унiверситету. Бiологiя. Екологiя. - 2012. - Вип.20, т.1. - С.13-22].

Поэтому в ряде случаев возникает проблема перевода латентных и хронических бактериальных инфекции в острый инфекционный процесс для разработки эффективных препаратов, предназначенных для этиотропного лечения инфекционных заболеваний.

При ожоговой травме нарушается целостность кожных покровов и слизистых оболочек и происходит микробное обсеменение ожоговой поверхности микрофлорой воздуха и микробами, выделяемыми от бактерионосителей. Известно, что отделяемое ожоговой раны является идеальной средой для роста и размножения многих микроорганизмов (Pruitt В.А., 1992, Bayona О.Е., 2001, Wiechman S.A., 2004). На ожоговую поверхность возбудители инфекционных заболеваний могут проникать воздушно-капельным и контактным механизмами передачи. Питательная среда ожоговой раны обеспечивает накопление в ране бактерий, в том числе и биопленкообразующих, в частности P. aeruginosa, концентрация данного микроорганизма на поверхности ожоговой раны достигает 105-107 степени. Наличие церебральных поражений при ожоговой травме свидетельствует о возможном течении инфекционного процесса в головном мозгу. Одним из осложнений ожоговой травмы является гнойный менингит. Патология центральной нервной системы выявлена у 33,7% инвалидов после ожоговой травмы [Хрулев С.Е. Ожоговая травма с церебральными осложнениями у взрослых и детей (клиника, механизмы развития, профилактика). Автореф. Дис. докт. мед. наук. - Нижний Новгород, 2009. - 30 с.]. Освобожденные бактерии от биопленок становятся чувствительными к антибактериальным и химиотерапевтическим препаратам. Поэтому разработка способов предупреждения образования биопленок и их разрушение в микробных популяциях является актуальным в плане разработки эффективных этиотропных и патогенетических препаратов для лечения ожоговой болезни.

Способы моделирования экспериментальной инфекции описаны во многих патентах и в качестве инфицирующего агента авторы используют бактерии, образующие биопленки. Однако при моделировании генерализованного инфекционного процесса авторы не учитывают влияние на инфекционный процесс бактерий, находящихся в биопленках. С поверхности биопленок выделяется планктонная фракция бактерий, вызывая острый инфекционный процесс. Бактерии, находясь в биопленках, могут вызывать латентную и хроническую инфекции в восприимчивом организме, поэтому необходимо предусмотреть дополнительные способы, позволяющие уничтожить бактерии внутри биопленок.

В патенте «Способ моделирования бактериального кератита» [Патент RU 2480845, опубл. 27.04.2013] в качестве инфицирующего агента для развития инфекционного процесса использована суспензия штамма Staphylococcus aureus, образующего биопленку, а способы, предупреждающие образование биопленок, не указаны. Следовательно, не исключена возможность латентного и хронического течения заболевания.

Предложены способы воспроизведения экспериментальных инфекций, максимально приближенных к реальному клиническому течению инфекционного процесса [Патент RU 2431890, опубл. 20.10.2011; Патент RU 2363055, опубл. 27.07.2009], в которых в качестве инфицирующих агентов также использованы биопленкообразующие микроорганизмы (S. aureus, Р. aeruginosa и др.), следовательно, в этих случаях наряду с острым инфекционным процессом у экспериментальных животных будет наблюдаться и прогредиентное течение инфекционного заболевания. Известно, что P. aeruginosa может вызывать хронический инфекционный процесс [Патент RU 2478385, опубл. 10.04.2013].

Описано несколько коммерчески доступных биоцидных химиопрепаратов, например 2,2-дибромо-3-нитрилопропионамид и метилендитиоцианат, противодействующих образованию биопленок in vitro. Однако не изучено действие этих препаратов на организм человека и животных.

Колари М. с соавт. [Патент RU 2385942, опубл. 10.04.2010] предложили способ определения наличия образующих биопленку бактерий для определения необходимости использования агента, противодействующего образованию биопленок. Авторы предусмотрели возможность использования различных препаратов, препятствующих образованию биопленок бактериями. Разработанный способ предназначен и внедрен в процесс производства бумаги и картона и не применим для медицинских целей.

Описан способ предупреждения образования биопленок P. aeruginosa у пациентов с муковисцидозом и лечения хронической инфекции, вызванной P. Aeruginosa, у пациентов путем введения комплекса препаратов, включающих 4-[3,5-бис(2-гидроксифенил)-[1,2,4]триазол-1-ил] бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и антибиотик, выбранный из следующей группы: гентамицин, амикацин, тобрамицин, ципрофлоксацин, левофлоксацин, цефразидим, цефепим, цефпиром, пиперациллин, тикарциллин, меропенем, имипенем, полимиксин В, колистин и азреонам [Патент RU 2478385, опубл. 10.04.2013]. Предложенный патент выбран нами в качестве ближайшего аналога настоящего изобретения («прототипа»).

Основным недостатком предложенного способа является значительная трудоемкость получения препаратов триазола и сложность применения описанной методики. Очевидно будет высокая стоимость предложенного препарата. Следует отметить, что предложенный способ не является средством того же назначения, а предназначен для лечения конкретного заболевания у людей и не используется для создания экспериментальной модели острой и генерализованной инфекции, на фоне ожоговой травмы с целью выбора эффективных методов лечения инфекционного заболевания.

Предшествующий уровень техники

В инфекционной патологии человека ведущее значение имеют латентные и хронические бактериальные инфекции. В большинстве случаев длительное сохранение возбудителей инфекционных заболеваний в организме зависит от особенностей строения микробных клеток и физиологических форм сохранения микробных популяций в восприимчивом организме. К таким защитным структурам следует отнести капсулы и биопленки микробных клеток.

Капсулы бактерий [Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / Под ред. А.А. Воробьева. - М.: Медицинское информационное агенство, 2004. - 691 с.] и биопленки микробных клеток состоят из нерастворимых полисахаридов [Сидоренко С.В. Роль бактериальных биопленок в патологии человека. Инфекции в хирургии. 2004; т.2. - №3. - С.16-19]. Нерастворимые полисахариды состоят из остатков глюкозы, которые соединены β-1,4-глюкозидными связями [Патент RU 2290440, опубл. 27.12.2006. Бюл. №36]. Фермент β-амилаза разрушает 1,4-глюкозидные связи с образованием глюкозы, необходимой для жизнедеятельности организма. Разрушение этих поверхностных структур микробных клеток, надо полагать, приведет к развитию острой бактериальной инфекции, что позволит разработать эффективное лечение заболеваний и ликвидировать очаг инфекционного заболевания в случае эпидемической вспышки.

Задачей настоящего изобретения является на основании разрушения нерастворимых полисахаридов, входящих в состав капсул и биопленок бактерий, разработать на экспериментальных лабораторных животных способ моделирования бактериальной инфекции на фоне ожоговой травмы с целью оптимизации лечения ожоговых больных и проведения эффективных противоэпидемических мероприятий, направленных на ограничение циркуляции возбудителей инфекционных заболеваний в лечебно-профилактическом учреждении.

Технический результат - простой, не требующий больших материальных затрат и основан на использовании агента, противодействующего образованию и способствующего разрушению поверхностных структур микробных клеток: биопленок и капсул бактерий. В результате этого микробные клетки теряют способность вызывать латентный и хронический инфекционный процесс в восприимчивом организме, а заболевание протекает в виде острой инфекции. В острой и генерализованной инфекции вегетативные формы бактерий наиболее чувствительны к неспецифическим и специфическим факторам защиты макроорганизма, а также к большему спектру антимикробных препаратов.

Предложено использовать фермент β-амилазу по новому назначению, а именно для разрушения капсул и биопленок микробных клеток, что обеспечивает наличие в организме только вегетативных форм бактерий, а в качестве фактора, способствующего развитию острой и генерализованной экспериментальной инфекции, использовали инфицирование экспериментальных животных культурабельными бактериями на фоне ожоговой термической травмы.

Кролики выбраны в качестве экспериментальной модели в связи с тем, что они получают глюкозу из нерастворимых полисахаридов с помощью фермента β-амилазы, питаясь древесиной. Питание кроликов злаками и древесиной обуславливает высокую потребность организма животных в выработке фермента β-амилазы.

Технический результат достигается тем, что согласно изобретению в качестве экспериментальной модели используют кроликов, которых в течение месяца содержат при температуре воздуха 24-26°C и кормят пищей, богатой злаками и древесиной, затем под наркозом кроликам наносят ожог площадью 10-20% площади тела животного, затем смесь культурабельных бактерий Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus в концентрации 105-106 микробных клеток в общем объеме 1 мл смешивают с равным количеством 1% раствора фермента β-амилазы при температуре 24-26°C, а через 30 минут полученную взвесь вводят кроликам подкожно в объеме 1 мл смеси, учет развития бактериальной инфекции у экспериментальных животных проводят в течение 21 дня.

Предложенный способ осуществляют следующим образом:

Исследования проведены в виварии ФГБОУ ВПО «Государственного аграрного университета Северного Зауралья». Здоровых кроликов массой 2500-3500 грамм содержали в клетках в соответствии с требованиями санитарных правил (Утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73). В виварии поддерживали температуру воздуха 24-26°C в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации. В течение месяца кроликов кормили пищей, богатой злаками и древесиной. Затем кроликов содержали в экспериментальных клетках собственной конструкции [Заявка на полезную модель №2013119320 от 26.04.2013] в течение 3-х дней для адаптации животных к новым клеткам.

Ожоговую термическую травму кроликам наносили после наркоза, проводимого по методике, предложенной А.В. Разиной [Разина А.В. Влияние различных вариантов общей анестезии и операционной травмы на организм кроликов. Автореф. канд. дисс. Троицк. - 2010]. Премедикацию проводили 2% раствором ксилазина гидрохлорида (рометара) в дозе 5,0 мг/кг, а на его фоне внутримышечно вводили 5% раствор золетина в дозе 7,5 мг/кг массы тела кролика соответственно. У кроликов регистрировалось состояние общей анестезии, достаточной по глубине и продолжительности для воспроизведения экспериментальной ожоговой травмы.

Поверхность спины и боковые поверхности туловища кролика погружали в водяную баню на 10 сек при температуре 90°C. На ожоговую поверхность накладывали стерильную асептическую марлевую повязку. Площадь ожоговой поверхности составляла 10-20% площади тела животного.

Для заражения кроликов использовали взвесь культурабельных бактерий P. aeruginosa и S. aureus. С целью развития бактериальной инфекции готовили разведения взвеси бактерий в концентрации 105-106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия. Общий объем микробной взвеси в количестве 1 мл смешивали с равным объемом 1% раствора β-амилазы при температуре 24-26°C для разрушения полисахаридов микробных клеток. Смесь бактерий с β-амилазой выдерживали 30 минут при температуре 24-26°C, а затем вводили кроликам подкожно в объеме 1,0 мл смеси. Учет клинического проявления инфекционного процесса проводили в течение 21 дня.

Примеры использования предлагаемого способа

Пример 1

Исследование проведено в виварии ФГБОУ ВПО «Государственного аграрного университета Северного Зауралья». Здорового кролика массой 2800 грамм содержали в клетке в соответствии с требованиями санитарных правил (Утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73). В виварии поддерживали температуру воздуха 24-26°C в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации. В течение месяца кроликов кормили пищей, богатой злаками и древесиной. Затем кролика содержали в экспериментальной клетке собственной конструкции [Заявка на полезную модель №2013119320 от 26.04.2013] в течение 3-х дней для адаптации животного к новой клетке.

Ожоговую термическую травму кроликам наносили после наркоза, проводимого по методике, предложенной А.В. Разиной [Разина А.В. Влияние различных вариантов общей анестезии и операционной травмы на организм кроликов. Автореф. канд. дисс. Троицк. - 2010]. Премедикацию проводили 2% раствором ксилазина гидрохлорида (рометара) в дозе 5,0 мг/кг, а на его фоне внутримышечно вводили 5% раствор золетина в дозе 7,5 мг/кг массы тела кролика соответственно. У кроликов регистрировалось состояние общей анестезии, достаточной по глубине и продолжительности для воспроизведения экспериментальной ожоговой травмы.

Поверхность спины и боковые поверхности туловища кролика погружали в водяную баню на 10 сек при температуре 90°C. На ожоговую поверхность накладывали стерильную асептическую марлевую повязку.

Для заражения животных использовали взвесь культурабельных бактерий P. aeruginosa и S. aureus в концентрации, обычно определяемой у больных на поверхности ожоговых ран. С целью развития генерализованной бактериальной инфекции готовили разведения взвеси бактерий в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия. Общий объем микробной взвеси в количестве 1 мл смешивали с равным объеме 1% раствора β-амилазы при температуре 24-26°C для разрушения полисахаридов микробных клеток. Смесь бактерий с β-амилазой выдерживали 30 минут при температуре 24-26°C, а затем вводили кролику подкожно в объеме 1,0 мл смеси.

Кролик погиб на 15 день после нанесения термической травмы. Площадь глубокого ожога составила 18% площади тела кролика. Инфекционный процесс протекал в легочной ткани. Концентрация P. aeruginosa в легких составила 4,7×1010 микробных клеток в 1 мл. Бактерии S. aureus в органах животного не выявлены. Следовательно, инфекционный процесс у кролика вызван бактериями P. aeruginosa.

Пример 2

Исследование проведено в виварии ФГБОУ ВПО «Государственного аграрного университета Северного Зауралья». Здорового кролика массой 3200 грамм содержали в клетке в соответствии с требованиями санитарных правил (Утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73). В виварии поддерживали температуру воздуха 24-26°C в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации. В течение месяца кролика кормили пищей, богатой злаками и древесиной. Затем кролика содержали в экспериментальной клетке собственной конструкции [Заявка на полезную модель №2013119320 от 26.04.2013] в течение 3-х дней для адаптации кролика к новой клетке.

Ожоговую термическую травму кролику наносили после наркоза, проводимого по методике, предложенной А.В. Разиной [Разина А.В. Влияние различных вариантов общей анестезии и операционной травмы на организм кроликов. Автореф. канд. дисс. Троицк. - 2010]. Премедикацию проводили 2% раствором ксилазина гидрохлорида (рометара) в дозе 5,0 мг/кг, а на его фоне внутримышечно вводили 5% раствор золетина в дозе 7,5 мг/кг массы тела кролика соответственно. У кролика регистрировалось состояние общей анестезии, достаточной по глубине и продолжительности для воспроизведения экспериментальной ожоговой травмы.

Поверхность спины и боковые поверхности туловища кролика погружали в водяную баню на 10 сек при температуре 90°C. На ожоговую поверхность накладывали стерильную асептическую марлевую повязку.

Для заражения кролика использовали взвесь культурабельных бактерий P. aeruginosa и S. aureus. С целью развития продуктивной бактериальной инфекции готовили разведения взвеси бактерий в концентрации 106 микробных клеток в 1 мл на физиологическом растворе хлорида натрия. Общий объем микробной взвеси в количествен 1 мл смешивали с равным объемом 1% раствора β-амилазы при температуре 24-26°C для разрушения полисахаридов микробных клеток. Смесь бактерий с β-амилазой выдерживали в течение 30 минут при температуре 24-26°C, а затем вводили кролику подкожно 1,0 мл смеси.

Кролик погиб на 14 день после нанесения термической травмы. Площадь глубокого ожога составила 20% площади тела кролика. Инфекционный процесс протекал в тканях печени. Концентрация P. aeruginosa в печени составила 4,2×109 микробных клеток в 1 мл. Бактерии S. aureus в органах животного не выявлены. Следовательно, инфекционный процесс у кролика вызван бактериями P. aeruginosa.

Микробиологические исследования проведены на базе ООО Научно-производственное инновационное предприятие «Тюменский институт микробиологических технологий» (НПИП «ТИМТ»). Под наблюдением находилось 16 кроликов породы шиншилла массой 2500-3500 гр. Летальный исход бактериальной инфекции наблюдался в 75% случаев. Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1. Сравнительная характеристика предложенного способа по сравнению с «прототипом» дана в таблице 2.

Предложенный способ воспроизведения экспериментальной бактериальной инфекции позволяет изучить особенности течения инфекционного процесса на фоне ожоговой травмы в остром периоде с целью разработки эффективных лечебно-профилактических и противоэпидемических мероприятий, направленных на ограничение циркуляции возбудителей инфекционных заболеваний в лечебно-профилактических учреждениях.

Таблица 1
Летальность кроликов породы «шиншилла», инфицированных культурабельными штаммами бактерий S. aureus и P. aeruginosa на фоне ожоговой травмы
№ кролика Масса тела кролика (в граммах) Площадь глубокого ожога (в %) Летальность (в сутках)
1 3000 16,0 12
2 3000 *
3 3000 16.0 15
4 3900 *
5 2900 18,6 14
6 3000 18,0 13
7 3500 *
8 3400 20,0 12
9 2800 17,4 16
10 3200 20,0 13
11 3900 15,6 12
12 4200 16,6 15
13 3800 18,0 14
14 4500 *
15 3300 19,8 13
16 4500 14,6 14
3493,75±120,57 17,55±0,48 13,58±0,36
Примечание: Кролики №2, 4, 7 и 14 прожили свыше 21 дня.
Таблица 2
Сравнительная характеристика предлагаемого способа и ближайшего аналога «прототипа»
п/п №№ Отличительные признаки способа Ближайший аналог Предложенный способ
1 Назначение предложенного способа Для лечения хронического заболевания «Муковисцидоза» Удаление с поверхности микробных клеток капсул и биопленок. В результате этого микробы теряют способность вызывать латентные и хронические заболевания и становятся чувствительными к химиотерапевтическим препаратам
2 Препарат, используемый для перевода бактерий из некультурабельного в культурабельное состояние 4-[3,5-бис(2-гидроксифенил)-[1,2,4]триазол-1-ил] бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль β-амилаза
3 Возможность применения препарата для лечения инфекционных заболеваний у людей Применяется только для лечения «Муковисцидоза» β-амилаза вырабатывается в поджелудочной железе у людей и находится в крови в небольших концентрациях http://medicalplanet.su/xirurgia/122.html
4 Возможности использования препарата Для лечения одного инфекционного заболевания: «Муковисцидоза» Для разработки способов лечения многих инфекционных заболеваний
5 Возможность использования с эпидемиологической целью Не предусмотрено Имеется возможность применения предложенного способа для получения новых лечебных препаратов и для повышения эффективности дезинфекционных средств, применяемых в ЛПУ
6 Стоимость препарата Высокая Низкая
7 Научная новизна изобретения Научная новизна ограничена применением только при одном инфекционном заболевании Предложенный способ моделирования продуктивной бактериальной инфекции открывает новое направление в диагностике, лечении, профилактике и эпидемиологии бактериальных инфекций

Способ моделирования бактериальной инфекции на фоне ожоговой травмы, заключающийся в том, что в качестве экспериментальной модели используют кроликов, которых в течение месяца содержат при температуре воздуха 24-26°C и кормят пищей, богатой злаками и древесиной, затем под наркозом кроликам наносят ожог площадью 10-20% площади тела животного, затем смесь культурабельных бактерий Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus в концентрации 105-106 микробных клеток в общем объеме 1 мл смешивают с равным количеством 1% раствора фермента β-амилазы при температуре 24-26°C, а через 30 минут полученную взвесь вводят кроликам подкожно в объеме 1 мл смеси, учет развития бактериальной инфекции у экспериментальных животных проводят в течение 21 дня.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к космической медицине, в частности к способам моделирования эффектов пониженной гравитации в экспериментальных исследованиях. Способ включает перевод человека на период дневного бодрствования в ортостатическое положение с положительным углом наклона тела относительно горизонтальной оси.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и иммунологии и может быть использовано для оценки эффекта электромагнитных волн миллиметрового диапазона (КВЧ) в условиях трехсоставной модели цитостатического воздействия.

Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедии, биомеханике, оперативной хирургии и топографической анатомии, анатомии, антропологии. На невостребованном трупе выполняют задний доступ к тазобедренному суставу типа Кохера-Лангенбека.
Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к патологической физиологии и гематологии, и касается моделирования гемолитической анемии. Для этого нелинейной белой крысе однократно внутрибрюшинно вводят 0,4%-ный раствор 2-бутоксиэтанола в дозировке 20 мг/кг массы тела животного (4 мг на животное).

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной морфологии, а также к разработке и изучению способов коррекции негативных эффектов низких температур на организм животного в эксперименте.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для предоперационной подготовки деминерализованного костного трансплантата (ДКТ) к пластике в эксперименте.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно - к изучению патофизиологии репродуктивной системы, и может быть использовано для моделирования синдрома хронической ановуляции.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к радиобиологии и комбустиологии, и может быть использовано для изучения механизмов патогенеза сочетанных радиационных поражений (СРП), включая феномен взаимного отягощения, а также для испытания новых способов и средств профилактики и лечения.

Изобретение относится к медицине. При осуществлении способа перед обучением проводят интерактивное компьютерное тестирование.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования осложненной стенозом дуоденальной язвы. Способ включает введение крысам в подслизистый слой двенадцатиперстной кишки через прокол боковой стенки живота 3% раствора соляной кислоты.
Изобретение относится к экспериментальной медицине, психологии, психиатрии и касается определения психосоматического статуса животного при моделировании «боевого стресса». Для формирования стрессовой обстановки на двое суток крысам ограничивают прием пищи, сохраняя только питье. Помещают их в устройство, обеспечивающее ограниченное пространство, в котором между животными установлен только визуальный контакт без физического соприкосновения. На третьи сутки производят взрыв бездымного порохового заряда под устройством. Спустя 3 часа после взрыва в крови животного определяют уровень гемоглобина, натрия, мочевой кислоты, аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы, СОЭ, количество лейкоцитов. Оценивают поведение в течение последующих 8 часов. Оценку поведения производят по наличию позитивных реакций: повышенная активность, тревожность, суетливость, невозможность удерживаться на месте, чрезмерная агрессивность, отсутствие акта дефекации и мочеиспускания. Учитывают также негативные реакции: адинамичность, вплоть до полного обездвиживания, бездействие, статическая реакция, отказ от питания, трусость, наличие акта дефекации и мочеиспускания. Через 6 суток после начала эксперимента производят повторный анализ крови. В течение последних 2 суток эксперимента проводят оценку уровня стрессируемости животных по «реакции испуга» и психической работоспособности - по скорости нахождения выхода из двойного T-образного лабиринта. Изобретение повышает достоверность модели за счет воспроизведения реальной боевой обстановки, точности определения психосоматического статуса лабораторного животного, подвергшегося испытанию. 2 з.п. ф-лы, 1 пр.

Изобретение относится к моделированию в медицине и может быть применимо для моделирования экспериментальной кардиопатии. Старым крысам однократно вводят равнодолевую смесь нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно. Способ позволяет расширить возможности моделирования кардиомиопатии. 2 ил.

Изобретение относится к экспериментальной биологии, медицине и может быть использовано для изучения вопросов профилактики кардиопатии. Для этого в первый день эксперимента моделируют кардиопатию однократным подкожным введением крысам равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда. Введение осуществляют из расчета по 0,2 мл смеси в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа. Профилактику кардиопатии проводят путем ежедневного введения животным в течение 60 дней через зонд в желудок янтарной кислоты в дозе 1,5 ммоль/кг. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при моделировании переломо-дефекта длинной трубчатой кости. Наносят Z-образный распил длиной 2 мм вдоль оси кости для создания перелома. Формируют два дефекта, выполняя остеотомию проксимального и дистального отломков и отсекая диафизарную костную ткань. Фиксируют переломо-дефект билатеральным аппаратом внешней фиксации. Способ обеспечивает создание условий высокоэнергетической травмы, исключает травматичность за счет формирования протяженного продольно-поперечного перелома с наличием двух дефектов костной ткани, а также улучшает процессы трофики и консолидации отломков за счет стабильной внешней фиксации билатеральным аппаратом. 3 ил.,1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии и нейрохирургии, и может быть использовано для изучения механизмов развития и течения послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита, а также разработки методов профилактики и лечения этого заболевания у человека. Моделирование эпидурита включает доступ к остистым отросткам позвоночника крыс самцов линии Вистар на поясничном уровне путем рассечения фасции, раздвижения параспинальных мышц, а также последующее выполнение расширенной ламинэктомии. Перед выполнением доступа к остистым отросткам позвоночника отделяют хвост крысы, отступив от его основания не менее 2 см и накладывая на культю хвоста швы. Из отсеченной части хвоста выделяют межпозвонковый диск, который фрагментируют, и помещают полученный гомогенизат в стерильный физиологический раствор. Расширенную ламинэктомию на уровне Lv осуществляют путем резекции остистого отростка и выпиливания части позвоночной пластинки размером 3×3 мм, резецируют желтую связку и обнажают твердую мозговую оболочку спинного мозга. На поверхности оболочки размещают полученный гомогенизат аутологичного межпозвонкового диска и ушивают рану. Гистологические признаки эпидурита устанавливают на 15 сутки эксперимента. Способ обеспечивает получение в короткий срок качественной, длительно сохраняющейся модели эпидурита за счет выбора уровня позвоночника и создания условий для хронического аутоиммунного воспаления. 2 пр., 1 табл., 5 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальному акушерству и нефрологии, и может быть использовано при моделировании гестационного пиелонефрита. Для этого в эксперименте используют беременную крысу линии Vistar в возрасте 5 месяцев. Начиная с 3-го и по 11 день беременности крысу кормят в 8 часов утра смесью, содержащей 0,55 мг порошка синтетического глюкокортикоидного препарата «Преднизолон» и 10 г манной крупы. Способ обеспечивает упрощение моделирования, исключение септического шока, инфицирования и травматизации животных. 2 ил., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается создания модели болезни Альцгеймера. Для этого используют трансгенных мышей линии B6C3-Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo/J. В кровеносную систему этих животных вводят препарат, содержащий в своем составе синтетический аналог изомеризованного по аминокислотному остатку аспарагиновой кислоты в положении 7 человеческого бета-амилоида при аминокислотной последовательности DAEFRH[isoD]SGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA) и/или его фрагментов, включающих остаток изомеризованной аспарагиновой кислоты в положении 7 [isoD]. Препараты вводят в дозе 100 мкг, в объеме раствора 200 мкл/гол один раз в месяц. Способ обеспечивает возможность произвольного изменения скорости развития патологических процессов у подопытных животных в зависимости от целей конкретного исследования за счет варьирования числа инъекций и/или количества синтетического пептида в одной инъекционной дозе. 1 ил.,1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для изучения функциональных и патоморфологических изменений, возникающих при повышенном внутрибрюшном давлении (ВБД). Для моделирования ВБД животным под наркозом производят пункцию и последующую катетеризация брюшной полости катетером с эластичной манжетой на конце. Катетер фиксируют на коже, на спине животного. На область живота надевают корсет таким образом, чтобы животное могло свободно передвигаться. После этого через катетер в манжету нагнетают среду до получения необходимого уровня ВБД. Способ, являясь простым и надежным в работе, позволяет осуществлять наблюдение за животным в условиях опыта и упрощать изучение синдрома внутрибрюшной гипертензии. 4 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к моделированию в медицине и может быть применимо для моделирования заболеваний женских половых органов в эксперименте. Для моделирования эндометриоза для аутотрансплантации берут прямоугольные участки эндометрия размером 2×3 мм и подшивают их микрохирургическими инструментами атравматическим синтетическим нерассасывающимся монофиламентным шовным материалом 9/0 четырьмя швами по углам участка эндометрия двумя двойными узлами в каждом шве. Для моделирования хронического эндометрита фиксацию участков эндометрия осуществляют общехирургическими инструментами синтетическим нерассасывающимся шовным материалом 4/0 четырьмя швами по углам участка эндометрия тремя узлами в каждом шве; проводят пред- и послеоперационную эстрогенизацию животного по следующей схеме: введение через день по 1,0 мл 0,1% синестрола внутримышечно один раз в день, начиная за 7 дней до аутотрансплантации - в 7-й день, в 5-й день, в 3-й день, в день перед операцией и в день операции, после операции синестрол вводят в той же дозе однократно на 2-й, 4-й и 6-й день. Способ позволяет уменьшить время получения модели. 2 ил.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения сахарного диабета, а также при разработке новых методов лечения изменений, вызванных сахарным диабетом I типа. Для этого моделируют аллоксановый диабет белым беспородным крысам. Для развития сахарного диабета в субкомпенсированной форме крысам вводят раствор аллоксана дробно внутрибрюшинно натощак, поочередно в дозе 5 мг/100 г, 7 мг/100 г и 5 мг/100 г веса животных с интервалом в 7 дней, а для развития сахарного диабета в декомпенсированной форме раствор аллоксана вводят также троекратно в дозе по 10 мг/100 г через день. Способ обеспечивает повышение вероятности удачной повторяемости и предсказуемости результатов воспроизведения данного заболевания путем модификации модели, соответствующей его субкомпенсированной и декомпенсированной формам. 1 табл.
Наверх