Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии



Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии
Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии

 


Владельцы патента RU 2542457:

государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике во внутренних болезнях. Изобретение представляет способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жирового поражения печени у больных с синдромом дислипидемии, заключающийся в том, что у больного в сыворотке крови определяют активность фермента антиоксидантной системы супероксиддисмутазы (СОД), которую оценивают спектрофотометрическим методом, и при значении СОД менее или равно 23 Ед/мг белка диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации СОД более 23 Ед/мг белка - хронический вирусный гепатит. Изобретение обеспечивает снижение травматичности, повышение доступности и простоты исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности. 4 пр., 1 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике во внутренних болезнях, может быть использовано для дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии.

Известный лабораторный способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени заключается в прижизненном морфологическом исследовании биоптатов печени (Ghany М., Doo Е. Assessment of liver fibrosis: palpate, poke or pulse? Hepatology, 2005, V. 42 (4), P. 759-761; The role of liver biopsy in chronic hepatitis C. Saadeh S., Cammell G., Corey W.D. et al. Hepatology, 2001, V. 33, P. 196-200; Nainon O., Xiq G., Vanghan G. Diagnosis of hepatitis a virus infection: a molecular approach. Clin. Microbiol. Rev., 2006, V. 19 (1), P. 63-79.); Roussele M.C. Sources of variability in histological scoring of chronic viral hepatitis. Hepatology, 2005, V. 41 (2), P. 257-264; Павлов Ч.С., Ивашкин В.Т. Биопсия печени: методология и практика сегодня. Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. 2006, Т. 16. №4, С.65-78; Павлов Ч.С., Золоторевский В.Б., Ивашкин В.Т. Современные методы ранней диагностики фиброза печени. Клиническая медицина, 2005, Т. 83, №12, С.58-60; Ивашкин В.Т., Шульпекова Ю.О. Неалкогольный стеатогепатит. Русский медицинский журнал, 2000, Т.2, С.41-45; Подымова С.Д. Жировой гепатоз, неалкогольный стеатогепатит. Клинико-морфологические особенности. Прогноз. Лечение. Русский медицинский журнал, 2005, №2, С.61-66).

Недостатки способа диагностики: несмотря на высокую информативность, метод пункционной биопсии печени является трудоемким, достаточно травматичным, имеется техническая сложность получения материала и значительная вероятность развития тяжелых осложнений.

Технический результат: снижение травматичности, повышение доступности и простоты исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности.

Способ дифференциальной диагностики заключается в следующем: у больных в сыворотке крови спектрофотометрически определяют активность фермента антиоксидантной системы супероксиддисмутазы (СОД) методом Mistra Н. и Fridovich J. на спектрофотометре КФК-3-«ЗОМЗ» (Россия, г. Сергиев-Посад) с целью оценки наличия и степени окислительного стресса (Mistra Н., Fridovich J.M. J. Biol. Chem., 1983, V. 247 (10), P. 3170-3175).

У пациентов с синдромом дислипидемии при значении СОД менее или равно 23 Ед/мг белка диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации СОД более 23 Ед/мг белка - хронический вирусный гепатит.

Способ забора крови для определения активности СОД осуществляют следующим образом: кровь из локтевой вены в количестве 5 мл забирают в вакуумную пробирку с активатором свертывания и центрифугируют для получения сыворотки 10 мин при 1500 об/мин.

Метод определения активности фермента СОД основан на способности фермента тормозить автоокисление адреналина при pH - 10,2. Экстинция регистрируется при 480 нм. Ввиду нестабильности субстрата за 1 условную единицу активности фермента принимают такое количество СОД, которое необходимо для ингибирования начальной скорости автоокисления адреналина на 50%.

Реагенты.

1. 0,15 М натрий-карбонатный буфер, содержащий 3·10-4 М ЭДТА, pH - 10,2 (производитель ООО «Биотех», г. Пермь).

2. 2,25·10-3 М водного раствора адреналина, pH - 2,5 (производитель ОАО «Фармакон», Россия).

3. 0,005 М раствор калий-фосфатного буфера с добавлением 1·10-5 ЭДТА, pH - 7,8 (производитель ООО «Биотех», г. Пермь).

Ход определения. Для измерения активности СОД в кювету спектрофотометра вносят компоненты в следующей последовательности:

1) 1 мл 0,15 М раствора натрий-карбонатного буфера с добавлением 3·10-4 М ЭДТА, pH - 10,2;

2) 0,5 мл исследуемой сыворотки крови, которую необходимо предварительно развести дистиллированной водой в соотношении 1:10;

3) 0,7 мл 0,005 М раствор калий-фосфатного буфера с добавлением 1·10-5 ЭДТА, pH - 7,8;

4) 0,4 мл 2,25·10-3 М водного раствора адреналина, pH - 2,5. Готовят ex tempore в день постановки реакции. Перед постановкой реакции приготовленный раствор адреналина необходимо прогреть 1 час при температуре 37°С;

5) В контрольную пробу вместо сыворотки вносят 0,5 мл дистиллированной воды. Реакцию начинают добавлением адреналина и быстрым перемешиванием содержимого кюветы. Измерение активности СОД проводят в кювете с длиной оптического пути 10 мм на спектрофотометре при длине волны 480 нм против воды. Сначала записывают начальную скорость свободного, не ингибированного автоокислителя адреналина в адренохром (контрольная проба). Затем определяют начальную скорость автоокисления адреналина в присутствии СОД исследуемых проб, при этом исследовании жидкость перед внесением в кювету необходимо разводить в 2,5 раза 0,005 М раствором калий-фосфатным буфером pH - 7,8. Время реакции 1 минута. Активность СОД (в Е/мг белка в крови) определяется по формуле:

((А-(Е/А)*100:(100-(А-Е)*100/А))*(2*N)/С, где

А - скорость автоокисления контрольного раствора адреналина (контрольная проба);

Е - скорость окисления адреналина в присутствии СОД (опытная проба);

N - разведение (N-2,5);

С - концентрация белка крови.

При значении СОД менее или равно 23 Ед/мг белка диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации СОД более 23 Ед/мг белка - хронический вирусный гепатит.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Больная С. 39 лет, рост 168 см, вес 96 кг, индекс массы тела 34. Синдром дислипидемии. Жалобы на слабость, снижение аппетита и тяжесть в правом подреберье. Объективно - печень +1,0 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 44 Ед/л, ACT - 34 Ед/л, общий билирубин - 10,2 мкмоль. По данным УЗИ - диффузные изменения в печени. Показатели липидного обмена в сыворотке крови: триглицериды (ТЕ) - 2,23 ммоль/л, общий холестерин (ОХ) - 6,85 ммоль/л, липопротеиды высокой плотности (ЛПВП) - 1,24 ммоль/л, липопротеиды низкой плотности (ЛПНП) - 4,09 ммоль/л. Уровень СОД в сыворотке крови 49,8 Ед/мг белка. Диагноз хронического вирусного гепатита подтвержден.

Пример 2. Больной П. 50 лет, рост 176 см, вес 85 кг, индекс массы тела 27,5. Синдром дислипидемии. Жалобы на слабость и снижение аппетита. Объективно - печень +2,0 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 40,1 Ед/л, ACT - 38.3 Ед/л, общий билирубин - 23,5 мкмоль/л. По данным УЗИ - незначительные диффузные изменения в печени. Показатели липидного обмена в сыворотке крови: ТГ - 1,71 ммоль/л, ОХ - 5,95 ммоль/л, ЛПВП - 1,05 ммоль/л, ЛПНП - 3.6 ммоль/л. Уровень СОД в сыворотке крови 44 Ед/мг белка. Диагноз хронического вирусного гепатита подтвержден.

Пример 3. Больная М. 55 лет, рост 162 см, вес 90 кг, индекс массы тела 35,5. Синдром дислипидемии. Жалобы на тупые боли в верхних отделах живота, явления диспепсии. Объективно - печень +1,0 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 139 Ед/л, ACT - 53 Ед/л, общий билирубин - 6,05 мкмоль/л. По данным УЗИ - диффузные изменения печени. Параметры липидного обмена сыворотки крови: ТГ - 3,85 ммоль/л, ОХ - 7,4 ммоль/л, ЛПВП - 1,68 ммоль/л. ЛПНП - 4,63 ммоль/л. Уровень СОД в сыворотке крови 10,1 Ед/мг белка. Диагноз жировой болезни печени подтвержден.

Пример 4. Больной В. 30 лет, рост 170 см, вес 100 кг, индекс массы тела 34,6. Синдром дислипидемии. Жалобы на слабость, снижение аппетита и тяжесть в правом подреберье. Объективно - печень +1,0 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 137 Ед/л, ACT - 23 Ед/л, общий билирубин - 22,4 мкмоль/л. По данным УЗИ - диффузные изменения печени. Показатели липидного спектра в сыворотке крови: ТГ - 1,59 ммоль/л, ОХ - 6,13 ммоль/л, ЛПВП - 1,06 ммоль/л, ЛПНП - 3,85 ммоль/л. Уровень СОД в сыворотке крови 22 Ед/мг белка. Диагноз жировой болезни печени подтвержден.

Данные статистики определения активности фермента СОД в сыворотке крови больных хроническим вирусным гепатитом (ХВГ) и жировой болезнью печени (ЖБП) с синдромом дислипидемии в сравнении с группой практически здоровых лиц представлены в таблице.

Операционные характеристики лабораторного теста определения активности СОД в сыворотке крови больных с синдромом дислипидемии и поражением печени с целью дифференциации хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени по степени окислительного стресса: диагностическая чувствительность (ДЧ) составила 92%, диагностическая специфичность (ДС) - 88%, диагностическая эффективность - 91%. Точка разделения для больных хроническим вирусным гепатитом и жировой болезнью печени с синдромом дислипидемии по активности СОД при построении кумулятивных кривых зарегистрирована на уровне 23 Ед/мг белка. Соответственно при уровне СОД менее или равно 23 Ед/мг белка у больных с синдромом дислипидемии диагностируют жировую болезнь печени, при уровне СОД более 23 Ед/мг белка - хронический вирусный гепатит.

Положительный эффект от использования предлагаемого способа дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени по активности антиоксидантного фермента СОД с целью оценки степени окислительного стресса заключается в его простоте, доступности, нетравматичности, отсутствии осложнений, информативности, чувствительности и специфичности.

Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жирового поражения печени у больных с синдромом дислипидемии, заключающийся в том, что у больного в сыворотке крови определяют активность фермента антиоксидантной системы супероксиддисмутазы (СОД), которую оценивают спектрофотометрическим методом, и при значении СОД менее или равно 23 Ед/мг белка диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации СОД более 23 Ед/мг белка - хронический вирусный гепатит.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине. Сущность способа прогнозирования краевых некрозов в области послеоперационной раны при остеосинтезе переломов костей голени осуществляется путем определения в крови патологических эритроцитарных агрегатов.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике разных патологических состояний человека. Для этого проводится измерение характеристик клеток крови пациента по определению их адгезивности к стеклу.

Изобретение относится медицине, а именно к кардиохирургии, и может быть использовано для прогнозирования степени риска развития гемолитических осложнений после операции коронарного шунтирования в условиях искусственного кровообращения.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для неинвазивной лазерной нанодиагностики онкологических заболеваний. Для этого проводят исследование биологической жидкости пациента методом лазерной корреляционной спектроскопии, определяют диагностический показатель и диагностируют заболевание по значению диагностического показателя.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкоурологии, и может быть использовано при консервативном лечении больных злокачественной опухолью предстательной железы на разных ее стадиях.

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования развития поздней отслойки сетчатки у детей с рубцовой ретинопатией недоношенных. В сыворотке крови больного определяют одновременно содержание трансформирующего фактора роста β1 (TGF β1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF).

Изобретение относится к области медицины, а именно профилактической медицине, и может быть использовано в диагностике экологически обусловленной хронической патологии верхних дыхательных путей.
Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии, и может быть использовано для лечения пациента с гипертрофической кардиомиопатией. Для этого проводят выделение ДНК, определение полиморфизма гена AGTR1, кодирующего рецептор к ангиотензину II первого типа.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики асептической нестабильности эндопротеза крупных суставов. Сущность способа состоит в том, что в отдаленные сроки после первичного эндопротезирования определяют число нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ) и, если количество НВЛ будет варьироваться с четырех до семи на 100 нейтрофилов, диагностируют асептическую нестабильность эндопротеза.
Изобретение относится к медицине, а именно к детской кардиологии, и может быть использовано для диагностики критических врожденных пороков сердца у новорожденных с использованием уровня показателя NT-pro-BNP.

Изобретение относится к медицине, а именно к нефрологии, эндокринологии, биологии, и предназначено для дифференциальной диагностики вторичного и третичного гиперпаратиреоза.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике разных патологических состояний человека. Для этого проводится измерение характеристик клеток крови пациента по определению их адгезивности к стеклу.

Изобретение относится к области медицины, в частности к трансфузиологии, и предназначено для определения качественных показателей эритроцитсодержащих сред, находящихся на хранении в банке крови.

Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и представляет собой способ доклинических исследований кардиотропных антиаритмических средств, включающий определение биоэлектрических параметров в изолированных многоклеточных перфузируемых препаратах и оценку изменения длительности потенциалов действия, отличающийся тем, что в качестве изолированных многоклеточных перфузируемых препаратов используют миокард легочных вен крысы, причем изменения параметров получают в трех режимах работы многоклеточных препаратов, дополнительно оценивают потенциал покоя и по изменениям ДПД 90%, отношения ДПД 50%/ДПД 90%, скорости спонтанного сдвига потенциала покоя, наиболее положительного значения мембранного потенциала в покоящемся препарате, частоты следования пачек спонтанной активности, частоты и вариабельности следования спонтанных ПД в пачке, количества и интенсивности постдеполяризаций, а также по смещению мембранного потенциала, соответствующего началу пачечной активности, оценивают признаки антиаритмического или аритмогенного действия.

Изобретение относится к ортопедии и представляет собой способ диагностики степени тяжести острых послеоперационных гемосиновитов коленного сустава. Согласно изобретению для определения степени тяжести острых послеоперационных гемосиновитов коленного сустава используется микроскопическое исследование гемосиновиальной жидкости с учетом в синовиоцитограмме значения цитоза, содержания нейтрофилов, лимфоцитов и синовиоцитов, что позволяет диагностировать легкую, среднюю или тяжелую степень острого гемосиновита.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии у беременной при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.
Изобретение относится к области медицины, а именно к медицине труда и описывает способ оценки воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц.
Изобретение относится к измерительной технике и представляет собой способ определения нано-микропримесей, включающий использование эмульсии из капель жидкого кристалла, диспергированных в воде, способной изменять конфигурацию капель жидкого кристалла при наличии в составе эмульсии посторонних примесей, измерение изменения интенсивности света, рассеянного эмульсией, по которому судят о наличии и концентрации искомых примесей, отличающийся тем что в качестве жидкого кристалла выбирают соединения, способные к транс-цис-переходу под действием актиничного света, и перед измерением изменения интенсивности света дополнительно освещают эмульсию актиничным светом, обеспечивая тем самым изменение конфигурации в каплях жидкого кристалла за счет транс-цис-перехода в молекулах жидкого кристалла.

Изобретение относится к области измерительной техники и может быть использовано для анализа конкретного компонента, содержащегося в образце, в частности уровня глюкозы в крови.

Изобретение относится к способу идентификации живых и мертвых организмов мезозоопланктона в морских пробах, который включает отбор пробы, крашение организмов соответствующими красителями, визуальную оценку интенсивности окраски особей под микроскопом, которую выполняют одновременно с микрофотосъемкой организмов, используя настройки фотокамеры в ручном режиме, сохраняя эти настройки неизменными на протяжении фотосъемки по крайней мере одной пробы, после чего в полученных изображениях, применяя редактор растровой графики, например программный пакет Adobe Photoshop, измеряют средние для каждой особи цветовые и яркостные характеристики и относят особи к классу живых или мертвых, осуществляя дискриминантный анализ измеренных цифровых величин. .
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки эффективности лечения больных с постгеморрагической анемией. Сущность способа оценки эффективности лечения больных с постгеморрагической анемией состоит в том, что в периферической крови определяют показатель электрофоретической подвижности эритроцитов (ЭФПЭ) периферической крови непосредственно перед трансфузией, через 60 минут после ее окончания и далее ежедневно до стабилизации состояния, и при понижении показателя ЭФПЭ периферической крови реципиента от 1,05±0,01 до 1,17±0,01мкм×см×В-1с-1, то есть до 80-90% от значений нормы, оценивают проведенную гемотрансфузию как эффективную и достаточную, при снижении показателя ЭФПЭ от 0,98±0,01 до 1,02±0,01 мкм×см×В-1с-1 от значения нормы, то есть более чем на 21-25% на фоне показателя гемоглобина ниже 80 г/л на следующие за измерением сутки, оценивают проведенную гемотрансфузию как неэффективную и назначают проведение повторной гемотрансфузии, при норме показателя ЭФПЭ 1,31±0,02 мкм×см×В-1с-1. Использование заявленного способа позволяет повысить точность оценки эффективности лечения больных с постгеморрагической анемией. 2 пр.
Наверх